全 文 ： 万方数据
44· 生物加工过程
皮炎、杀虫蝇、灭蛆。除西部沙漠区外，广布内蒙古
各地⋯，尤以退化草场严重，不能作为青饲料，牛羊
误食后有致死的可能性。长期以来，是草地牧民们
深恶痛绝的一种有害柿物。为r挖掘药物资源，变
废为震，我们从瑞香狼毒根中提取其有效成分，并进
行理化和药理学性质分析，为l临床研究和应用提供
理论依据。
1实验材料和方法
1．1瑞香狼毒
采集自内蒙古四子王旗一带草原，物种鉴定人
马毓泉教授；昆明小鼠22g左右(本校实验动物中
心提供)；菌种(本实验室保存)；LKB层析仪；岛津
uv一250紫外分光光度汁；标准化学试剂(分析纯，购
自内蒙占化学试剂商店)
1．2狼毒素的粗提
采集的狼毒根洗净、切片凉干。碱浸泡、过滤、
滤液酸化至pH2～3，有褐色沉淀、沉淀研成粉末，
用乙醚提取2次，合并二次提取液，水浴中同收乙
醚。膏状物加尤水吡啶，震荡混匀，加少量醋酸酐水
浴回流lomin，放入20倍冰水中，放置过夜，有褐色
沉淀。沉淀用盐酸和冷水洗涤、碱溶解、过滤酸化至
pH2～3，有褐色沉淀，即为瑞香狼毒有效成分粗品。
1．3狼毒成分的纯化
DEAB纤维素处理、装柱，平衡。洗脱液为A
(乙酸乙酯：甲醇：水，50：3：10，体积比)，B(乙酸乙酯
：甲醇：丙酮：水，50：3：1：10，体积比)。上样量为柱
床体积的1／50(彤，y)，连接层析检测仪进行梯度洗
脱，收集峰值洗脱液。浓缩干燥得成品。
1 4狼毒有效成分检测
1)酚类化台物和鞣质检测”o
2)糖、多糖和配糖体的检测o】
3)氨基酸、肽和蛋白质检测。21
4)有机酸检测”1
5)蒽醌类榆测2
6)黄酮体的检测”。：①纸层析；②三氯化铝水
溶液喷洒显色；③盐酸镁粉反应
1．5紫外扫描检测
在200～30011111处扫描。
1 6薄层层析鉴定
将样品点样于配制好的硅胶薄板L，以氯仿：甲
第l卷第2期
醇(95：5，体积比)作为展开剂，层析，然后紫外线一氨
熏，看是否有荧光，同时喷三氯化铁水溶液，看是否
显色。
1．7狼毒有效成分药理性质检测
1)抑菌试验：取层析后的狼毒素01 mg，庆人霉
素10倍稀释液、无菌蒸馏水各1mI．，采用滤纸片法
做抑菌试验。菌种为大肠杆菌、沙门氏菌和克氏肺
炎杆菌，选出抑菌效果好的层析纯品进行动物试骑。
2)小白鼠毒性试验：取昆明小白鼠20只，均分
两组：实验组和对照组。实验前先称体重，尾部采
血，做白细胞计数。将层析提取的狼毒提取成分A
用灭菌蒸馏水溶解。给小鼠肌肉注射，每只0．1nlg，
每口2次，连续注射3d。每次注射后，立即观察小
鼠的生活力状况，记录异常反应，并以体重增长为观
察指标，衡量小鼠用药后的生长变化。
3)注射狼毒素后3d，小鼠腹腔注射环磷酰胺
(cP)，每只2r雌，注射前后小鼠尾巴采血做白细胞
计数。cP攻击后，接着再注射狼毒成分A，剂量同
上，治疗2d后，再进行白细胞计数。2d后进行第2
次cP攻击，剂量为每只4mg。第2天处步匕实验小
鼠，解剖观察淋巴结、肝脏、脾脏有无肿大、充m等症
状，并取胸腺和脾称重计算胸腺指数和脾指数：
胸腺指数：罐舢脾指数：耀棚
2实验结果
2 1狼毒提取物的纯化
狼毒根粉碎，经稀氢氧化钠碱化后得到褐色粗
产物，以己醚充分萃取蒸除溶剂后剩留物与乙酐、吡
啶混合加热、析出狼毒素粗品(褐色)粗晶通过
DEAE柱层析得到A(由洗脱液A得到)和H(由洗脱
液B得到)的两种成分，浓缩干燥后得成品为白色
粉末。
2．2狼毒提取物成分A和B的检测
1％(形／P)三氯化铁试剂检测阴性，证明非酚类
和鞣质”萘酚试剂检测阴性，非糖体物质；茚三酮
试剂检测阴性，非有机酸；1％(Ⅳ，v)硼酸溶液检测
阴性，非蒽醌类物质。在黄酮体检测试验中，纸层析
样品用紫外线一氨熏有明显荧光斑点；三氯化铝试
验，也出现明显黄色荧光；盐酸一镁粉反应呈紫红色。
证明样品成分主要是黄酮类化合物。薄层层析后的
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