全 文 ：NOV．2007
·70·
生物加工过程
ChineseJournalofBioprocessEngineering
第5卷第4期
2007年11月
虫草多糖治疗家犬夹闭肾动脉引起的急性肾衰
尹鸿萍1，吕小波2，陈希2
(1．中国药科大学生命科学与技术学院，南京2100091；
2．南京中医药大学药学院，南京210046)
摘要：探计了虫草多糖时謇犬夹闭肾动脉造成的急性肾衰的治疗作用。将实验动物家犬分为假手术组、阴性模
型组、阳一胜组、虫草多糖高、中、低三个荆量组，观察治疗后犬的肾功能、血液生化指标、尿常规、肾脏病理的变化。
发现虫草多糖组肾功能受损程度明显轻于阴性模型组(P<001)．肾脏病理损伤明显减轻。实验证明虫草多糖能
够治疗肾缺血谤发的惠性肾功能衰竭，其机理可能与改善肾功能、增加肾血流量、纠正代谢紊乱、促进肾小管的修
复与再生等作用有关。
关键词：虫草多糖；肾缺血；急性肾衰
中图分类号：Q539；R965．1文献标识码：A 文章编号：1672—3678(2007)04—0070—06
ThetherapeuticffectsofCordycepspolysaccharideonoccluding
renalrtery-inducedacutekidneyinjuryindog
YINHong—pin91，LVXiao—be2，CHENXi2
(1．SchoolofLifeScienceandTechnology，ChinaPharmaceufieMUniv rsity，Naming210009．China；
2．SchoolfPharmacy，N删ingUniversityofChineseMedicine，Nanjing210046，China)
Abstract：TheherapeuticffectsofCordycepspolysacchafidefCP)onoccludingrenalrtery-induced且-
cutekidneyinjuryindogwerestudied，36adultdogswererandomlydividedintosixgroups，shamopera-
tiongroup，modelgroup，CordycepspolysaccharldegroupCP160ms／kg，CP80mg／kgandCP40mg／kg。
andDexamethasonegroup．Themodelsofacuter nalfailurewereestablishedbyoccludingre alartery．
Aftermanagement，renalfunction，biochemicalindicator，urineroutineandrenalpathologicchangesw re
observed．Comparedwiththemodelgroup，thedegreeofinjuryofrenalfunctioninCordycepspolysaccha-
ridegroupdogswe”paHiatedsignificantly(P<0．01)，renalpathologicchangesw repalliatedsigniti—
cantly．Cordycepspolysaccharideasaremarkableeffectonrenalischemia—inducedacutekidneyinjury．
Themechanismscouldberelevanttoimprovingrenalfunction，increasingrenalb oodflow，correctingmet-
aboliedisorder，andpromotingregenerationofrenaltubule．
Keywords：Cordycepspolysaceharide；renalschemi ；acuterenalfailure
虫草多糖(Cordycepspolysaechafide，CP)是虫草
中含量最高的生物活性物质⋯。虫草多糖的来源
途径主要有以下3种：(1)从天然虫草子实体中提
取；(2)从人工培养虫草子实体中提取；(3)从发酵
培养的苗丝体和发酵液中提取。本实验所采用的
是第三种。虫草多糖的生理活性广泛，具有抗疲
收稿日期：20074)34)9
基金项目：国掌自然科学基金童助项目(30500458)
作者简介：尹鸿萍(1963一)，女，江苏南京人，刮教授．研究方向：多糖药物aE—mail：yinhongpin963@hommil．∞m
万方数据
2007年11月 尹鸿萍等：虫草多糖治疗家犬夹闭肾动脉引起的急性肾衰 ·7l
劳、抗压力、降低血胆固醇的功效m31；此外，虫草多
糖对多种原因引起的肾损伤具有保护作用，能明显
改善肾功能、促进肾小管的修复与再生、纠正代谢
紊乱卜“。本文研究虫草多糖对家犬夹闭肾动脉引
起的急性肾衰的治疗作用。
l材料
1．1实验动物
家犬，雄性，体质量10一15kg，购自无锡市惠山
江南实验动物场，动物置于温度23—25℃，隔音的
动物室内，动物自由摄食、饮水。
1．2药物
虫草多糖(Cordycepspolysaceharide．CP)由中国
药科大学微生物实验室提供，质量分数72．4％；地
塞米松磷酸钠(Dexamethasone，DM)注射液，天津药
业焦作有限公司。戊巴比妥钠，国药集团化学试剂
有限公司。
1．3仪器
LXJ2I型离心机，上海医用分析仪器厂；三用电
热恒温水浴箱，北京长安科学仪器厂；漩涡混合器，
浙江乐城电器厂；13立7020型全自动生化分析仪；
MA4210尿分析仪，日本KtoToDA22CGI公司。
2方法
2．1 急性肾衰动物模型的制备
按文献[7—8]方法造模：取lO一15k异的雄性
家犬，以戊巴比妥钠30m∥kg(给药体积为每kg1
mL)静脉注射麻醉。麻醉后手术暴露左侧肾动脉夹
闭1h后放松，使血流再通，从该侧输尿管导管收集
尿液。
2．2实验方法
取家犬36只，按体质量随机分为6组，每组6
只，分别为：假手术组，阴性模型组，阳性对照组，虫
草多糖高、中、低剂量组。阳性组静脉滴注地塞米
松磷酸钠0．1ms／kg(给药体积为10mL／kg)；虫草
多糖高剂量组十二指肠给予虫草多糖50mg／kg；虫
草多糖中剂量组十二指肠给予虫草多糖25mr,／kg；
虫草多糖低剂量组十二指肠给予虫草多糖12．5
ms／kg；假手术组及阴性模型组十二指肠给予等量
生理盐水，2mL／kg。
除假手术组外，各组动物均按上述方法造模，
用戊巴比妥钠30mg／kg静脉麻醉后，固定，打开腹
腔，暴露膀胱，进行左输尿管插管，以收集尿液；手
术暴露左侧肾动脉，夹闭1h后放松，使血流再通。
并暴露十二指肠给予受试药物。假手术组进行同
样操作，但不夹闭肾动脉。分别于肾衰前1h、肾衰
后(给药前)1h及给药后1h、2h、4h收集动脉血
及左肾尿液，测定血液生化指标及尿量、尿常规在
各时问点的变化；并取左侧肾脏做病理切片检查。
2．3检测指标
血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿Na+、尿
K+、尿cl一采用日立7020全自动生化分析仪检测；
尿蛋白(Upr)采用MA4210尿分析仪检测；尿量
(UPD)：直接测量法；同时进行肾脏病理切片检查：
将肾脏用10％甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，切片，
H·E染色，光学显微镜下进行组织病理学检查。
2．4统计学方法
数据以(x±s)表示，采用SPsSll．5统计软件，
进行Independent-SamplesTte t，单因素方差分析统
计处理。
3结果与讨论
3．1 虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬
血液生化指标的影响
夹闭肾动脉后，各组犬的血液生化指标(包括
BUN、SCr)与夹闭前有显著差异(P<0．01)，说明急
性肾衰模型造模成功；而假手术组犬的血液生化指
标在手术前后各时间段没有显著差异(P>0．05)，
说明手术操作不会引起急性肾衰，急性肾衰是由于
夹闭肾动脉所造成。给药后，虫草多糖3个剂量组
能明显降低急性肾衰犬的BUN、SCr，与肾衰后相比
有显著差异(P<0．01)，其作用以给药后1h、2h较
强；与肾衰后相比，地塞米松组上述指标有显著差
异(P<0．05)。结果见表1—2。
3．2虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬
尿常规殛尿量的影响
夹闭肾动脉后，各组犬的尿液指标(包括尿
Na+、尿K+、尿cl一、Upr、尿量)与夹闭前有显著差
异(P<0．01)，说明急性肾衰模型造模成功；而假手
术组犬的尿液指标在手术前后各时间段没有显著
差异(P>o．05)，说明手术操作不会引起急性肾衰。
急性肾衰是由于夹闭肾动脉所造成。给药后，虫草
多糖三个剂量组能明显增加急性肾衰犬的尿Na+、
万方数据
：三三二——一 兰堑竺兰兰塑 董!查兰!塑
尿K+、尿Cl一、尿量，能明显降低急性肾衰犬的
Upr，与肾衰后相比有显著差异(P<0．01)，其作用
以给药后1h,2h较强；与肾衰后相比，地塞米松组
上述指标有显著差异(p
TableEffectsofCPoRSCrofoccludingmaald．ery-inducedacut；renalfailLLreindo￡
n 6 ¨,molL(=．x±s) ·叫
组别 肾衰前1h 肾衰后Ih 给药后1h 给药后2h 给药后4h
假手术组 56，17±14．5853．17±10．855316±6．43 5483±496 63．83±8．84
阴性模型组
阳性对照组
CP高剂量组
CP中剂量组
43·50±8．89178．17S83．66“ 1967±104．65槲187．16±78．42”156．67±97．19N
52·33±4-18109．(30±1218“ 73．33±3．32‘‘72．17±4．62’’9233±12．03·
63·83±11．99106．83±1975“ 7450±lO．17’‘59．16±7．63‘’74．33±5．0I··
48·00±6-57121．16±39．87_55，83±11，43‘’6t67±3Ol‘’ 83．66±5．43·
注：与肾衰前比较+P<0．05．_P<0|01；与肾衰后比较‘P<0．05．’’P<0．Ol
表2虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰犬BUN影响
Table2 EffectsofCPonBUNofoccludingrenalrtery．induced虬uterenalfallureindog
(Ⅱ=6。；±51mmol·L。1
组别 肾衰前1h 肾衰后1h 给药后1h 给药后2h 给药后4h
假手术组 2，42±o』38 2．30±o45 2．43±0．54 2．88±0．25 2．32±n50
阴性模型组
阳性对照组
CP高剂量组
CP中剂量组
3·07s0．68 7．97±2．72特 7．62±2．13材 7．57±3．64。 6．28±35l”
317s0·44 443±010抖 3．97±0．39‘ 3．40±1．43 3．10±105·
1·48S1·07 7．55±2．90#333±O．43‘‘ 3．10±059‘‘ 3．03±0．29··
1-92s026 8．32±4．21“ 3．00±0．79‘’ 267±0．86‘‘ 2．70±0．34··
注：与肾衰前比较‘P(0．05，”P<001；与肾衰后比较‘P(O．05，‘‘P‘o．01
表3 虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬尿Na+的影响
Table3 EffectsofCPONurineNa十ofceeludingrenalrtery—induced∽uteIerlal血lumindog
阴性模型组 101．33±6·77111．83±42．8943．67±1995” 21．83±2．14“29．50±9．7l“
阳性对照组 92·00±52·1533．17±744。 38．00±23．9321．83±1．72—36．50±4．85
CP高剂量组 72．33±7481 15，67±矗09。 95．50±77．96’5417±58．32 61．67±68，56
CP中剂量组 37·17±1001 15．50±6．47”24．33±561’ 27．67±4．41—3950±6．16··
注：与肾衰前比较’P<0．05，“P<0．01；与肾衰后比较‘P(0．05，··P<0．叭
万方数据
2007年11月 尹鸿萍等：虫草多糖治疗家犬夹闭肾动脉引起的急性肾衰 ．73．
表4虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬屎K+的影响
Table4 Effee协0fCPonurineK+0f0ccludingTenaln。q—inducedacuter 朋lf缸lureindogIn=6，；±5)rnInol·L一1
组别 肾衰前1h 肾衰后1h 给药后1h 给药后2h 给药后4h
假手术组
阴性模型组
阳性对照组
CP高剂量组
CP中剂量组
113．94±980
103．52±5．39
105．16±41．16
115．73±44．54
157．89±12．97
123．17±16．11
118．53±46．98
42．94±26．明‘
54．84±14．95槲
4656±2335”
121．67±8．58
61．50±30．77N
92．57±40．86’
91．83±11．47¨
73．41±3．51’
118．02±5．09
45．17±5．17H
51．31±7．64
126．54±24．93—
91．52±12．27¨
116．45±1043
舳．15±17．9矿
25．87±1t．28
84．16±13．34—
12497±22．68¨
竺堡型量望 !!!：塑!!!：翌!!：!!!!!：!!：!：!!!三兰：塑：： 堑：塑!!!：堕： !：：至!!!：竺
注：与肾衰前比较。P<0．05，斜P
Table5 Effec协ofCPonurinea一0f0cdudi“grenalnery．induced扯-nlteMnalfailureindogIn26．；±5)mm01．L一1
组别 肾衰前Ih 肾衰后1h 给药后lh 给药后2h 给药后4h
假手术组 99．70±22．1185．70±24．2875．37±15．2573．65±12．6491．48±2906
阴性模型组 102．55±6．409n20±17．16 21．78±9．24“ 14．38±1．35“19．9"／±3．97柑
阳性对照组
CP高剂量组
CP中剂量组
50．78±42．4724．47±614‘ 27．02±9．31 14．30±1．74 27．22±3．97
61．63±72，1311衄±1．73’ 85．47±75．帅’ 40．68±60，1556．17±66．20
15．27±2．34 11．03±2．23” 16．95±4．96’19．18±3．18’’24．30±192··
竺!!型量望 竺：!!!!!：!! 竺：!!!!!：塑 !翌：!!!!!：墅： !!：!!!竺：!!竺：竺!堑：!!
洼：与肾衰前比较。P
T止Ie6 EffectsofCP∞Upr。foceluding陀朋l毗e丌·induced且cuterenalbilu陀indog
fn=6-；±5)g·L一1
组别 肾衰前lh 肾衰后1h 给药后1h 给药后2h 给药后4h
假手术组0．58±1．200．12±n19 0．03±0．05 0．07±0．12 0．03±0．05
阴性模型组 1 33±0_82 6．50±3．83“ 8．85±2．87辅4．67±4．22‘
阳性对照组 1．33±08l 7．33±4．18抖0．98±1．04—2．27±3．80
cP高剂量组 1，58±11 883±2．86群 1．32±1．33— 1．33±0．82‘’
cP中剂量组 1，67±1．03 5．33±3．61’ 1．22±O，92‘ 1．33±0．82‘
5．00±3．94。
2．12±308’
0．83±1，10一
l_55±0．97’
!!堡型量望 !：堑!!：坚 !：竺：!：!￡ !：!!!!：!!：： 坚翌!!：堑：： !：竺!!：墨
注：与肾衰前比较。P<0．05，“P<0Ol；与肾衰后比较’P
ToNe7 Effects0fCP叩UPD。f0ccluding唧1a1ewtefy—induced丑cu把I蜘al缸】“陀jndog
(n=6。；±j)mL
组别 肾衰前1h 肾衰后1h 给药后1h 给药后2h 给药后4h
假手术组 7．23±068 7．70±083 8．58±1．27 7．52±1．19 7．97±1．20
阴性模型组 6．80±0．“ 343±O．35“ 2．27±0．31“ 2．77±045“ 3．23±n30_
阳性对照组 7．07±0，38 3，30±o．24“ 527±o|21一矗07±n38‘‘ 3．87±n77
cP高剂量组 6．92±0．24 342±0．26“ 548±0．23— 617±0．42‘’ 5．48±0．35‘’
cP中剂量组 7．00±0，32 3．37±0．30删478±0．58— 552±0．37—435±n31‘’
CP低剂量组 708±0．31 333±0．22抖4．0s±0．44—4．47±0．24—3．45±019
注：与肾衰前比较。P<0．05，”P<0．01；与肾衰后比较’P<005，¨P<0．01
万方数据
·74· 生物加工过程 第5卷第4期
3．3虫草多糖对夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬
肾脏病理学的影响
由病理切片可见与假手术组相比阴性模型组
的肾小球体积明显缩小，细胞数减少，毛细血管管
腔闭塞，系膜基质增多，肾小管上皮细胞部分可见
管型，肾间质无明显充血、水肿，可见炎细胞浸润；
而阳性对照组肾小球细胞数未增多，毛细血管管腔
无扩张，肾小管上皮细胞未见管型，肾问质内无明
显充血、水肿，可见少量炎细胞浸润。
高剂量组肾小球体积缩小程度明显改善，细胞
4结论
数未增多，毛细血管管腔充盈，肾小管未见管型，肾
间质内无明显充血、水肿及炎细胞浸润；中剂量组
肾小球体积缩小程度有所改善，细胞数未增多，部
分毛细血管管腔闭塞，部分肾小球系膜基质增多．
肾小管部分可见管型，肾间质内无明显充血、水肿
及炎细胞浸润；低剂量组肾小球体积缩小，细胞数
减少，毛细血管管腔闭塞，部分肾小球系膜基质增
多，肾小管部分可见管型，肾间质内无明显充血、水
肿，可见少量炎细胞浸润，形态较模型组有所改善
(图1)。
A假手术组；&模型组；cDM01 mg·kg～；ncP50哪·kg～；E．cP25mg·kg～；LCPl2．5mg·ks
图1夹闭肾动脉诱发的急性肾衰家犬肾脏病理切片(HE×200)
Fig．1Renaipathdo舀cMsoctionofoccludingrenalrLery—inducedac trenal蜥lureindog
急性肾功能衰竭是各种原发或继发的肾实质
急性损伤，。肾小球滤过功能迅速下降，出现少尿或
无尿，血尿素氮及血肌酐迅速增高并引起水、电解
质紊乱和酸碱平衡失调’。1⋯。从实验所测的各项
生化指标包括血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿
Na+、尿K+、尿cl’、尿蛋白(Upr)、尿量(UPD)的统
计结果和肾脏病理切片检查可以看出夹闭肾动脉
使肾小球滤过率减少，原尿由坏死的肾小管漏回间
质，由于肾小球滤过功能障碍血中总蛋白及白蛋白
浓度下降；同时，体内蛋白质代谢产物不能由肾脏
充分排出，而且蛋白质分解代谢往往增强，故血中
尿素氮、肌酐等非蛋白含氮物质的含量大幅度的增
高，导致肾缺血再灌注损伤，对于这种急性肾缺血
再灌注损伤，虫草多精具有明显保护作用，其机理
与改善肾功能、增加肾血流量、纠正代谢紊乱、促进
肾小管的修复与再生有关。
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2C03．6(6)：371-372
万方数据
2007年11月 尹鸿萍等：虫草多糖治疗家犬夹闭肾动脉引起的急性肾衰 ·75
CNl01012389：一种固体碱催化制备生物柴油的方法
发明涉及一种固体碱催化制备生物柴油的方法，尤其涉及利用碱土金属醇盐化合物催化酯交换反应制
备生物柴油的方法，属于生物柴油化学工程技术领域。将醇类物质加入到反应器中；加入固体碱催化剂
Mg(OCH，)：、Ca(OCH，)：、Sr(OCH，)：等的一种或几种，也可以用氧化铝、氧化硅、蜂窝陶瓷等作为载体后得
到的固体碱催化剂；或直接使用催化剂的前躯体与相应的醇反应后生成催化剂；或将共溶剂和醇类物质加
入到反应器中；加入油脂原料到反应器中；升温，催化反应开始；减压蒸馏、过滤，过滤后的滤液分层，得到生
物柴油和粗甘油。本发明环境更加友好，生产成本降低，生物柴油的总产率能够达到95％一98％以上，市场
前景好。
CNl01014562：制造生物柴油的方法
制造生物柴油的酯交换方法、酯化方法和酯化一酯交换方法(即包括一步法也包括两步法)。通过下述
一步或多步可以强化这些方法：(1)施用微波或RF能量；(2)使反应物以足够高的速度通过非均相催化荆
以达到高剪切情形；(3)用均相催化剂使反应物乳化；或(4)保持反应压力处于或高于内生压力。通过上述
一步或多步的强化，可使该方法的处理速度更快、转化水平更高。
CNl01016466：一种用植物沥青制取生物柴油的方法
本发明涉及一种用植物沥青制取生物柴油的方法。当前还没有采用植物沥青制取生物柴油，造成植物
沥青脚料中的有效成分极大浪费。本发明采用丰富的植物沥青作原料，在经过蒸馏后得到的精甲酯中加入
一定数量添加剂后，再压滤束制取生物柴油。本发明具有原料丰富、成本低、产品纯度高等优点。
(张春鹏)
万方数据