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 Purification and properties of laccase from Ganoderma EIM-40

灵芝EIM-40漆酶的分离纯化及酶学性质



全 文 :!10
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2012
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[2009]958
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:1672-3678(2012)02-0034-06
PurificationandpropertiesoflaccasefromGanodermaEIM40
HEGuobin,CAIShaoli,KEChongrong,HUANGPing,ZHANGMingliang,HUANGJianzhong
(KeylabofIndustrialMicrobiologyoftheMinistryofEducation,EngineeringResearchCenterofFujian
ModernFermentationTechnology,ColegeofLifeScience,FujianNormalUniversity,Fuzhou350108,China)
Abstract:AfterthecrudelaccasefromGanodermasp.EIM40waspurifiedusinglyophilization,fraction
alammoniumsulfateprecipitation,HiTrapphenyl(FF)hydrophobicchromatographyandQSepharose
FastFlowIonexchangechromatography,afinalyieldof53% andaspecificactivityof146foldwere
achieved.SDSPAGEanalysisbysilverstainingrevealedasinglebandwithmolecularweightof
653×104.TheoptimalreactionconditionsofthelaccasetowardGuaiacolandABTSassubstratein
clude55℃ and50℃ ofreactiontemperatureandpH48andpH45.Whenthetemperaturewasbelow
50℃ andthepHwasintherangeof40to50,thelaccaseexhibitedexcelentstabilityinthetwosub
strates.TheKmforoxidizingguaiacolandABTSwere6450and222μmol/L,respectively.Laccase
couldbeenhancedbyCu2+andinhibitedbyFe2+,Ca2+,andBa2+.
Keywords:laccase;Ganoderma;purification;enzymologicalproperties
  
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(laccase)
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HiTrapphenyl(FF) 280 677 00627 10793 120 105
QSepharoseFastFlow 378 299 00198 15115 53 146
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Fe2+ 31±50 EDTA 74±16
Cu2+ 114±25 Tris 73±07
Ca2+ 36±10 SDS 63±02
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