全 文 ：第 !" 卷第 #$ 期
!$$" 年 #$ 月
生 态 学 报
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基金项目：国家自然科学基金资助项目（5$6"#6#6）；河北农业大学科学研究基金
收稿日期：!$$78$98!$；修订日期：!$$"8$:8#;
作者简介：孟庆瑞（#;"7 <），女，河北沧州人，博士生，主要从事果树抗寒生理研究2 (8=>?1：=@AB?C #!72 30=
"通讯作者 &0AADEF0GH?GI >B4J0A2 (8=>?1：K>GIL=5"$7C E?G>2 30=
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防除杏树（!"#$#% &"’($)&*& 9&）冰核细菌
药剂筛选及花期防霜效果
孟庆瑞#，李彦慧#，李帅英#，张Y 倩#，陈少坤#，温林柱!，杨建民#，"
（#2河北农业大学，保定Y $"#$$#；!2张家口市蔚县科学技术局，河北张家口Y $":"$$）
摘要：采用 S>1?结冻法和含菌平板培养法，从 ; 种供试药剂中筛选出 # 号、! 号、5 号、: 号、" 号 : 种对 ,.%细菌触杀及破坏冰蛋
白作用的药剂。将 : 种筛选的药剂于日光温室和田间进行药剂防霜试验研究，结果表明，日光温室霜冻温度为 Z 6[时，: 种药
剂中 5 号、" 号防霜效果显著，分别为 6"2 $:\ <7"2 "6\和 6;2 66\ <7;2 55\。5 号、" 号分别提高座果率 #!2 !:\ < #62 95\和
62 7;\ <##2 57\，与对照相比差异达显著水平。大田温度为 Z 72 :[时，: 种药剂中 5 号的防霜效果为 !#2 9$\，提高座果率
;] #"\，与对照相比达显著水平。
关键词：杏（!"#$#% &"’($)&*& *2）；冰核活性细菌；防霜药剂；防霜效果；座果率
文章编号：#$$$8$;55（!$$"）#$86#;#8$7Y 中图分类号：V#6!，V;69，-77!2 !，-"#9Y 文献标识码：%
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杏（!"#$#% &"’($)&*& L&）是春季开花较早的树种之一，花期一旦遇到晚霜危害，轻者出现减产，重者造成
绝产。因此，霜冻已成为杏树生产和发展的限制因子［0，1］。近年来研究证明，自然界存在冰核活性细菌（9(’
.=(*’-",). -(",?’ ;-("’6,-，简称 9/:细菌），能诱发植物细胞水在 A 1 M A 3C结冰而发生霜冻［2 M H］。课题组首
次从仁用杏上分离到 9/:细菌，确认为 1 个属中的 1 个种（!%(#+,’,$&% %-")$.&( #?& %-")$.&( N-. O-** 0I1F，
/"0)$& #"(+,1,"& P<’ 0IH2）［5］，并证明 9/:细菌能提高杏花器官结冰温度约 1C左右，是诱发和加重霜冻的重
要因素［3，J］。这一研究结果为防御杏花期霜冻提供了一条新途径。目前关于防除杏树上 9/: 细菌药剂的筛
选及药剂防御杏花霜冻效果的研究尚属空白。
基于此背景，课题组 1FF3 M1FFH年开展了防除 9/:细菌药剂筛选及防霜效果试验，其目的是筛选出防除杏
树上 9/:细菌的有效药剂，通过田间药剂防霜效果的试验，为制定有效防御杏花期霜冻害的措施提供依据。
)* 材料与方法
)& )* 材料
)& )& )* 供试冰核细菌
试验采用自杏树上分离的冰核活性较强的菌种［5］：丁香假单胞菌（!%(#+,’,$&% %-")$.&( #?& %-")$.&(）。
)& )& +* 供试药剂
0 号 BFFF 倍溶液、1 号 JFF 倍溶液、2 号 0FFF 倍溶液、B 号 BFF 倍溶液、3 号 JFF 倍溶液、H 号 0FFF 倍溶液、
5 号 0FFF 倍溶液、J 号 F& 0G、I 号 BFFF 倍溶液。以下简称 0 号 M I 号。
)& )& ,* 供试品种
防霜试验在河北保定和张家口进行，供试杏树为保定满城县日光温室栽培的 B- 生凯特、金寿星、美特 2
个品种，和张家口蔚县长宁乡大田栽培的 J-生龙王帽品种。各试验地管理条件一致，杏树长势良好。
)& +* 防霜药剂筛选方法［I］
)& +& )* 破坏 9/:细菌冰核活性的药剂筛选
将供试菌株配成 3 Q 0FJRST $ >*菌悬液，用菌悬液将供试药剂稀释成所需浓度，即菌药混合液，室温放置
3!后，采用 N-*,小滴冻结法，用定量加样器吸取药菌混合液，滴在平底船型铝箔纸上，每滴 0F!*，每处理 0F
滴，重复 2 次，以 3 Q 0FJRST $ >*菌悬液（未加药剂）作对照。将铝箔纸分别浮于 A 2C和 A 3C低温水浴槽内，
1>,.后记录各温度处理的冻滴数，换算成冻滴率（G）：
破坏率（G）U 对照冻滴率 A处理冻滴率
)& +& +* 触杀 9/:细菌的药剂筛选
用 3 Q 0FJRST $ >*的 9/:细菌菌悬液，将供试药剂配成所需浓度的菌药混合液，室温下放置 3!、0F!、1F!
后，分别取 F& 0>*菌药混合液涂抹于 VW平板培养基上，设 2 次重复，并以 9/:细菌菌液（未加药剂）作对照，
11C培养 BJ!，观查 9/: 细菌是否生长及生长差异，以此判定供试药剂对 9/: 细菌有无触杀效果或其强弱
程度。
1I0B X 生X 态X 学X 报X X X 15 卷X
!""#：$ $ %%%& ’()*)+,(-& (.
/01细菌生长分级调查标准：
全部细菌不生长，杀菌作用 2334 5 6
2 $ 7 以内细菌生长，杀菌作用 894 5 :
2 $ ; 以内细菌生长，杀菌作用 934 5 : :
< $ 7 以内细菌有生长，杀菌作用 ;94 5 : : :
细菌全部生长，药剂无触杀作用5 : : : :
!& "# 试验设计
!& "& !# 日光温室杏树药剂防霜试验
日光温室栽培杏达初花期（; 月 ;7 日），用 9 = 23> ?@A $ B* /01 细菌菌液喷接杏花，菌液自然风干后，分
别喷施筛选的药剂，隔 8C再喷 2 次，以喷接菌液为对照（?D），单株小区，< 次重复。日光温室内安放最低温
温度计记载温度。从盛花期（< 月 2 日）2>：33 时（7& 3E）开始，通过采取打开日光温室通风口、逐步揭开草帘
及棚膜等措施使日光温室内温度逐渐下降，至次日凌晨 F：33 时使日光温室内温度达到 6 < G 6 7E，使日光温
室内杏花处于发生霜冻状态，持续 <3B,.后，通过封闭通风口、覆盖棚膜等措施使日光温室内温度逐步上升。
;7!后调查药剂的防霜效果。
于每个品种树冠外围东、西、南、北 7 个方位距地面 2& 9B 处各选一中果枝加以标记并统计花朵数，盛花
后 < 周统计座果数，计算平均座果率。
!& "& $# 田间杏树药剂防霜试验
于张家口蔚县长宁乡仁用杏生产园选择树龄、长势相同的龙王帽作为供试植株，并在每个供试植株东、
南、西、北 7 个方向距地面 2& 9B处各选 2 个调查枝，各枝条之间生长势和营养状况相一致。于杏树花蕾期喷
第 2 次药，之后隔 8C再喷 2 次，直至发生霜冻为止，以喷清水为对照（?D），每处理 < 次重复，单株小区。在试
验区地面 2& 9B处放置最低温温度计，每天观察记载温度。
统计选定调查枝上的花朵数，盛花后 < 周统计座果数，计算平均座果率。
!& %# 防霜效果调查方法［H G 22］
!& %& !# 霜冻程度分级
依据花药或柱头受冻面积占调查花朵花药或柱头面积的比例大小，分为 9 级：
3 级5 花药或柱头没有受害；
2 级5 花药或柱头受害面积小于 2 $ 7；
; 级5 受害面积 2 $ 7 G 2 $ ;；
< 级5 受害面积 2 $ ; G < $ 7；
7 级5 受害面积大于 < $ 7。
!& %& $# 防霜效果计算
霜冻指数（4）I#（级数 =本级样本数）
样本总数 = 7 = 2334
霜冻指数（4）I对照霜冻指数J处理霜冻指数
对照霜冻指数
= 2334
!& &# 数据统计分析
数据采用邓肯氏多重比较法进行差异显著分析。
$# 结果与分析
$& !# 防除 /01细菌药剂的筛选
冰核菌体上的冰蛋白是诱发霜冻的关键物质，依据冻滴率高低，可判明药剂对 /01 细菌冰核活性物质
（冰蛋白）的破坏作用。从表 2 可见，所选的 H 种药剂中 ; 号、< 号、9 号、8 号与供试菌株混合液在 6
由表 / 触杀灭菌效果可知，/ 号、0 号、1 号、2 号、3 号对 456 细菌具有灭杀作用，能迅速杀死 456 细菌，2! 后
均无细菌存活。
以上结果表明，0 号、1 号、2 号、3 号药剂具备两种功能：一是触杀 456细菌，二是破坏冰核活性物质即冰
蛋白，而 / 号药剂仅具备触杀 456细菌的功能。筛选出 / 号、0 号、1 号、2 号、3 号药剂用于防霜试验。
表 !" 药剂对 #$%细菌冰核活性破坏、触杀效果的测定
&’()* !" +,,*-. /, (’-.*01-12*3 /4 *0’21-’.145 #$% (’-.*01’ ’42 2*3.0/6145 1-* 47-)*’.145 80/.*14
供试药剂
7-("’8,(,9’:
菌药混合液冻滴率（;）
<8’’=,.+ 8-"’ )> ?,@"A8’ 98)#*’"
B 1C B2C
触杀灭菌效果（;）
D8-9,(-",). ’>>,(-(E
2! /F! 0F!
/ 号 5)& / /FF- /FF- B B B
0 号 5)& 0 FG FG B B B
1 号 5)& 1 FG FG B B B
H 号 5)& H /FF- /FF- I I I I I I I I I I I
2 号 5)& 2 FG FG B B B
J 号 5)& J /FF- /FF- I I I I I I I I I I I
3 号 5)& 3 FG FG B B B
K 号 5)& K /FF- /FF- I I I I I I I I I I I
L 号 5)& L /FF- /FF- I I I I I I I I I I I
MN（456） /FF- /FF-
O O 表中数据为 1 次测定的平均值；-、G代表 2;显著水平下的差异O P-"- -8’ "!’ ?’-.: )> "!8’’ 8’#*,(-"’:；-，G ,.9,(-"’: "!’ :,+.,>,(-." 9,>>’8’." -"
2; *’Q’*
9& 9" 药剂防霜效果
9& 9& !" 日光温室防霜效果
1 月 0 日凌晨控制日光温室内温度 B HC，维持 F& 2!，1 月 1 日调查防霜效果。试验结果如表 0 所示，供试
表 9" 温室药剂防霜效果
&’()* 9" :0/3.;-/4.0/))145 *,,1-’-6 /, (’-.*01-12*3 14 3/)’0 50**4供试药剂
7-("’8,(,9’:
调查花朵数
5)& )> >*)%’8
平均霜冻指数 6Q’8-+’ >8):" ,.RA8E ,.9’@（;）
凯特 N-"E 金寿星 S,.:!)A@,.+ 美特 T’,"’
/ 号 5)& / /FF H1& 3F U /& F1 ( H1& 21 U /& KF G( 2F& /0 U /& /F (
0 号 5)& 0 LF HF& JL U /& 2K ( 1K& L3 U F& HL ( 20& L/ U /& FK (
1 号 5)& 1 LF 11& 3K U F& HK 9 02& L1 U /& 3/ ’ 13& /0 U F& 2J 9
2 号 5)& 2 /FF 22& /L U /& /0 G HK& 0L U /& 01 G J1& L0 U /& 3F G
3 号 5)& 3 /FF /L& 23 U F& HL ’ 1F& J2 U 0& /F 9 HF& /2 U F& J/ 9
MN（456） /FF J1& KF U 0& KJ - 31& 21 U F& J3 - 3L& H/ U /& HH -
供试药剂
7-("’8,(,9’:
调查花朵数
5)& )> >*)%’8
防霜效果 <8):"V()."8)**,.+ ’>>,(-(E （;）
凯特 N-"E 金寿星 S,.:!)A@,.+ 美特 T’,"’
/ 号 5)& / /FF 1/& 2/ U 0& /F ( HF& KF U /& 1/ (9 1J& KL U /& // G
0 号 5)& 0 LF 1J& 01 U /& HF ( H3& FF U /& 3F G( 11& 13 U /& 01 G
1 号 5)& 1 LF H3& F2 U /& F0 G JH& 3H U F& 33 - 21& 0J U F& 21 -
2 号 5)& 2 /FF /1& 2F U F& 3/ 9 1H& 11 U /& 2K 9 /L& 2/ U /& /K (
3 号 5)& 3 /FF JL& 11 U /& 01 - 2K& 10 U 0& FH - HL& HH U /& 0/ -
MN（456） /FF B B B
供试药剂
7-("’8,(,9’:
调查花朵数
5)& )> >*)%’8
座果率 #’8(’."-+’ )> >8A," :’" （;）
凯特 N-"E 金寿星 S,.:!)A@,.+ 美特 T’,"’
/ 号 5)& / /FF 3& 20 U 0& 1F G( 3& 21 U 0& 3F ( 1& 2J U 1& 1J G
0 号 5)& 0 LF J& 2F U 0& 20 G( J& HH U /& 2F ( 0& 00 U /& FJ G
1 号 5)& 1 LF /L& 1L U /& 2J - /K& 10 U 3& 3F - /H& /0 U 3& FH -
2 号 5)& 2 /FF J& 11 U 1& 1F ( L& 1L U 1& 2J G( 1& 1K U 0& /J G
3 号 5)& 3 /FF //& 2H U J& FL G /2& 3J U H& F0 -G J& 2J U /& 2F G
MN（456） /FF H& 2J U F& L1 ( H& HF U F& L2 ( /& K3 U F& /1 G
O O 表中数据为 1 次测定的平均值 U标准差；-，G，(表示2;显著水平下的差异O P-"- -8’ "!’ ?’-.: )> "!8’’ 8’#*,(-"’: U WD；-，G，( ,.9,(-"’: "!’
:,+.,>,(-." 9,>>’8’." -" 2; *’Q’*
HL/H O 生O 态O 学O 报O O O 03 卷O
!""#：$ $ %%%& ’()*)+,(-& (.
药剂对 / 个杏品种均取得一定防霜效果，其中 / 号、0 号防霜效果较高，对凯特、金寿星、美特防霜效果分别达
10& 234、51& 014、3/& 654和 57& //4、38& /64、17& 114，与 9 号、6 号、1 号、3 号相比，差异达显著水平。3 种
药剂对不同品种的防霜效果略有不同，除 6 号、0 号药剂外，防霜效果均表现为金寿星 :美特 :凯特，这可能
与品种抗寒性有关。由座果率可看出，各处理座果率均高于对照，而不同药剂对座果率的影响因品种而异，其
中对于凯特和金寿星，/ 号和 0 号处理座果率显著高于对照，而对于美特，仅 / 号处理的座果率与对照差异
显著。
!& !& !" 田间防霜效果
试验于张家口蔚县进行。6225 年 1 月 1 日蕾期喷药，1 月 99 日发生霜冻，温度为 ; 5& 3<，持续 /! 左右，
1 月 96 日调查防霜效果。从表 / 可知，此次霜冻危害严重，对照平均霜冻指数达 7/& 04，但药剂仍具有一定
防霜效果，防霜效果表现为 / 号 : 0 号 : 3 号 : 9 号 : 6 号，其中 / 号药剂防霜效果为 69& 84，达显著水平，表
明 / 号能防除杏树上 =>?细菌，减轻或控制霜冻危害。由座果率可知，; 5& 3<低温造成对照杏树绝收，而 3
种药剂均显著提高其座果率，其中 / 号处理座果率显著高于另 1 种药剂处理，提高座果率 7& 904。
表 #" 田间药剂防霜效果
$%&’( #" )*+,-./+0-*+’’102 (331/%/4 +3 &%/-(*1/15(, 10 31(’5
供试药剂
@-("’A,(,B’C
调查花朵数
>)& )D D*)%’A
霜冻指数（4）
?E’A-+’ DA)C" ,.FGAH ,.B’I
防霜效果（4）
JA)C" ; ()."A)**,.+ ’DD,(-(H
座果率（4）
#’A(’."-+’ )D DAG," C’"
9 号 >)& 9 522 82& 52 K 9& 6/ L 91& 22 K 2& 37 L 9& 30 K 2& 63 L
6 号 >)& 6 522 89& 62 K 9& 51 L 9/& /2 K 9& 6/ L 9& /2 K 2& 62 L
/ 号 >)& / 522 0/& /2 K 9& 06 ( 69& 82 K 9& 28 - 7& 90 K 9& 21 -
3 号 >)& 3 522 07& 12 K 9& 53 L 93& /2 K 2& 00 L 9& 32 K 2& 12 L
0 号 >)& 0 522 08& 32 K 9& 38 L 95& /2 K 9& 26 L 9& 72 K 2& 92 L
MN 522 7/& 02 K 6& /9 - ; 2& 22 K 2& 22 (
O O 表中数据为 / 次测定的平均值 K标准差；-，L，(表示34显著水平下的差异O P-"- -A’ "!’ Q’-.C )D "!A’’ A’#*,(-"’C K RS；-，L，( ,.B,(-"’C "!’
C,+.,D,(-." B,DD’A’." -" 34 *’E’*
#" 结论与讨论
从 7 种药剂中筛选出的 6 号、/ 号、3 号、0 号既可触杀 =>?细菌又可破坏冰核活性物质，9 号药剂仅具备
触杀 =>?细菌的功能。将筛选出的 3 种药剂应用于杏花期防除 =>?细菌的防霜试验，均取得一定防霜效果。
日光温室中，9 号、6 号、/ 号、3 号、0 号药剂对凯特、金寿星、美特 / 个品种的平均防霜效果分别为 /5& //4、
/8& 804、33& 264、66& 134、37& 2/4，其中 / 号、0 号防霜效果显著，与对照相比明显提高了座果率。田间自
然霜冻温度为 ; 5T 3<时，/ 号防霜效果达显著水平，与对照相比，提高座果率 7& 904。/ 号是一种安全、低残
留、无公害、与环境相容、杀菌谱广（真菌、细菌）的新型化学杀菌剂，0 号为铜制剂，触杀 =>?细菌和破坏冰核
活性物质效果明显，但 / 号、0 号处理的防霜效果和座果率因杏树品种不同而异，可能与品种抗寒性不同
有关。
霜冻因形成的天气条件不同而分为不同类型［96］，本研究依据当地天气预报，在晴朗无风的夜晚，模拟或
利用自然霜冻低温进行药剂防霜试验，所发生的霜冻为辐射霜冻。试验中记录的霜冻发生温度为最低空气温
度，晴夜杏花辐射降温，花温总是低于最低气温［9/］，而课题组研究表明杏花发生霜冻的临界温度可达 ; 1 U
; 3<［3］，依据此结果设定日光温室温度在 ; 1<，而最低气温与最低花温之间对应的关系尚待进一步的研究。
霜冻的发生及危害程度受天气、地形、杏树品种、植株长势、=>? 细菌数量及活性等因素影响［91 U 90］，而本
文仅是在 6 个试验地、1 个杏树品种上进行的防霜试验初步研究，今后尚需进一步在多点（地区）、多品种、多
种生态环境条件下深入、系统地进行田间杏花霜冻效果试验，以科学、准确的评估防霜药剂应用前景。
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3791O 92期 O O O 孟庆瑞O 等：防除杏树（!"#$#% &"’($)&*& ^&）冰核细菌药剂筛选及花期防霜效果 O
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