全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊缘冤院园愿猿园 耀 园愿猿缘
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园愿鄄员怨摇 接受日期院圆园员源鄄员圆鄄圆员
基金项目院国家自然科学基金渊猿员圆远园员猿怨冤袁海南省自然科学基金渊猿员猿园缘园冤袁三亚市院地科技合作项目渊圆园员圆再阅猿苑冤袁琼州学院博士科研启动基金
项目渊匝再载月圆园员圆园猿冤袁圆园员圆 国家级大学生创新创业计划项目
作者简介院张来军袁女袁副教授袁主要从事细胞生物学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院造凿曾赠扎澡造躁岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院同第一作者遥
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园缘鄄园愿猿园鄄园远
褪黑素对秦艽原生质体抗 哉灾鄄月环境胁迫的作用
张来军员 摇 贾敬芬圆 摇 梅摇 康员 摇 林德丽员
渊员琼州学院生物科学与技术学院袁海南 三亚摇 缘苑圆园圆圆曰圆西北大学生命科学学院袁陕西 西安摇 苑员园园远怨冤
摘摇 要院为探讨褪黑素对 哉灾鄄月辐射后的秦艽原生质体的影响袁本研究采用单细胞凝胶电泳技术检测秦
艽原生质体 阅晕粤损伤程度袁选取尾部 阅晕粤含量渊栽葬蚤造阅晕粤豫 冤作为 阅晕粤损伤程度的分析指标遥 酝耘蕴以
园尧员尧员园 滋皂燥造窑蕴 原员的终浓度加入原生质体悬液中袁哉灾鄄月辐射处理的辐照度为 园郾 缘 宰窑皂 原圆遥 试验分 圆 组院
员冤原生质体分别用 哉灾鄄月辐射处理不同的时间渊园尧缘尧员园尧猿园尧远园尧员圆园 泽冤袁暗培养 远园 皂蚤灶 后电泳遥 圆冤原生
质体被 哉灾鄄月照射 源园 泽后袁分别暗培养不同时间渊园尧员尧圆尧猿尧源尧远 澡冤袁再电泳遥 结果显示在 缘 耀 猿园 泽的时间
内袁辐射时间越长袁栽葬蚤造 阅晕粤豫越高袁相同的辐射时间下袁酝耘蕴浓度越高袁栽葬蚤造阅晕粤豫越低曰在 员 耀 远 澡 培养
时间内袁酝耘蕴处理的样品袁栽葬蚤造阅晕粤豫值均低于阳性对照组袁并且 栽葬蚤造阅晕粤豫值的大小与所处理的 酝耘蕴
的浓度呈反比关系遥 由此可见褪黑素降低了 哉灾鄄月辐射诱导的植物原生质体 阅晕粤损伤程度袁促进 阅晕粤
损伤的修复遥 本试验应用 杂悦郧耘技术袁进一步揭示了 酝耘蕴在植物抗环境胁迫中所起到的促进作用遥
关键词院褪黑素曰单细胞凝胶电泳曰原生质体曰秦艽曰哉灾鄄月
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园缘援 园愿猿园
摇 摇 褪黑素 渊 晕鄄葬糟藻贼赠造鄄缘鄄皂藻贼澡燥曾赠贼则赠责贼葬皂蚤灶藻袁皂藻造葬贼燥灶蚤灶袁
酝耘蕴冤袁是由松果腺合成的广泛存在于动物界的激素袁
具有调节昼夜节律袁促进睡眠袁抗氧化尧清除自由基等
作用遥 员怨怨缘 年发现 酝耘蕴 也同样存在植物中咱员暂 袁植物
体内褪黑素的功能成为人们关注的热点遥 大量研究表
明多种植物及植物的不同器官存在 酝耘蕴咱圆 原 源暂 遥 酝耘蕴
在植物中的生理功能也成为学者们关注和研究的热
点遥 由于褪黑素属于吲哚类化合物袁因此推测 酝耘蕴可
能以相似于 陨粤粤的作用方式促进植物的生长袁一些试
验发现 酝耘蕴 对植物生长确实有促进作用咱缘 原 苑暂 曰另外袁
一些研究还揭示 酝耘蕴 可能作为一种抗氧化剂广泛存
在于细菌尧真菌尧植物中咱愿 原 员员暂 袁在植物防御非生物胁迫
中起到重要作用遥 粤枣则藻藻灶 等咱员圆暂 用 哉灾鄄月 辐射甘草
渊郧造赠糟赠则则澡蚤扎葬 怎则葬造藻灶泽蚤泽冤后袁检测甘草根中 酝耘蕴 含量袁发
现高剂量 哉灾鄄月 辐射下甘草根中 酝耘蕴 的含量比低剂
量 哉灾鄄月辐射下高 圆 倍袁由此推测植物体内 酝耘蕴 含量
提高是保护自身免受由于紫外辐射引起的自由基和其
他分子氧化损伤的一种措施遥 植物种子胡桃渊 允怎早造葬灶泽
则藻早蚤葬 蕴援 冤中检测到高含量的 酝耘蕴袁推测可能是植物保
护胚免受紫外辐射尧环境胁迫所导致的氧化损伤的一
种适应咱员猿暂 遥 重金属铜对豌豆渊孕蚤泽怎皂 泽葬贼蚤增怎皂 蕴援 冤生长
是致命的袁然而袁土壤中补充 酝耘蕴时袁豌豆对铜离子的
耐受性显著增强袁存活率也提高了咱员源暂 遥 用 员 滋皂燥造窑蕴 原员
和 员园 滋皂燥造窑蕴 原员酝耘蕴溶液附加于铜离子处理过的红色
卷心菜种苗袁铜离子诱导的细胞损伤受到抑制咱员缘暂 遥
蕴藻蚤等咱员远暂以胡萝卜悬浮细胞为材料袁揭示了培养基加
入外源 酝耘蕴后降低了低温胁迫下细胞的凋亡遥 在澡葬燥
等咱员苑暂以大花红景天渊砸澡燥凿蚤燥造葬 糟则藻灶怎造葬贼葬冤愈伤组织为材
料揭示了 酝耘蕴可提高低温胁迫下愈伤组织的存活率遥
王英利等咱员愿暂对水培的绿豆进行 哉灾鄄月 胁迫试验时袁揭
示了 哉灾鄄月 辐射会产生氧化胁迫袁可引起叶片内的丙
二醛含量升高袁抗氧化酶酶活提高曰而外源 酝耘蕴 和
哉灾鄄月辐射复合处理显著降低绿豆叶片内的丙二醛含
量袁以及过氧化物酶尧过氧化氢酶和抗坏血酸酶酶
活遥 摇 摇
近年来植物中 酝耘蕴 的功能研究虽然取得了很大
园猿愿
摇 缘 期 褪黑素对秦艽原生质体抗 哉灾鄄月环境胁迫的作用
进展袁但是对于阐明植物 酝耘蕴 的功能还较欠缺袁需要
提供更多的科学试验证据遥 应用单细胞凝胶电泳技术
渊 泽蚤灶早造藻 糟藻造造 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 葬泽泽葬赠 或 糟燥皂藻贼 葬泽泽葬赠袁
杂悦郧 或 杂悦郧耘冤检测动物细胞 阅晕粤损伤的研究已经极
为广泛遥 由于植物细胞具有牢固的细胞壁袁造成细胞
核的分离困难袁限制了这一技术在植物领域的应用遥
采用机械分离细胞核方法咱员怨 原 圆员暂或酶解法分离原生质
体咱圆圆 原 圆猿暂 袁 将 杂悦郧耘 运用于检测植物细胞 阅晕粤 损伤袁
近年来国内已有不少相关报道遥 本试验应用 杂悦郧耘 技
术袁结合植物原生质体的结构和生理特点袁旨在揭示
酝耘蕴对植物抗环境胁迫所起到的作用遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 植物材料
秦艽渊郧藻灶贼蚤葬灶葬 皂葬糟则燥责澡赠造造葬 孕葬造造援 冤是龙胆科龙胆
属多年生草本植物袁主要分布在我国西北地区袁秦艽的
主要次生代谢物是龙胆苦甙袁能够治疗风湿疼痛等症
状咱圆源暂 遥 本试验用秦艽的原生质体作为试验材料遥 秦
艽种子采集于西北大学生物医药省级重点实验室秦艽
种植基地渊陕西陇县冤遥
员郾 圆摇 仪器与试剂
仪 器院 电 泳 仪 渊 粤皂藻则泽澡葬皂鄄藻责泽远园员 型袁 美 国
粤皂藻则泽澡葬皂 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻泽 公司冤尧电泳槽 渊 栽葬灶燥灶 匀耘员圆园
型袁上海袁天能公司冤尧荧光显微镜渊蕴藻蚤糟葬 阅酝蕴月 圆 型袁
蕴藻蚤糟葬公司袁德国冤袁数码相机渊粤远缘园蚤泽 型袁佳能公司袁日
本冤遥
试剂院低熔点琼脂糖渊粤皂则藻泽糟燥 分装冤袁常熔点琼脂
糖渊杂责葬灶蚤泽澡原装冤袁栽则蚤贼燥灶 载 原 员园园渊砸燥贼澡冤袁二甲基亚砜
渊阅酝杂韵袁粤皂则藻泽糟燥原装冤袁肌苷酸钠渊杂蚤早皂葬分装冤遥
员郾 猿摇 秦艽愈伤组织的诱导
秦艽种子经 圆 个星期 源益处理袁用自来水连续冲
洗 圆 澡袁接着于 苑缘豫 酒精中浸泡 员 皂蚤灶曰取出后放在
园郾 员豫升汞溶液中浸泡 员园 皂蚤灶遥 再用灭菌蒸馏水换洗
缘 次遥 将灭菌后的种子置于添加 猿豫 渊憎 辕 增冤蔗糖和 缘园园
皂早窑蕴 原员 郧粤猿 的 酝杂培养基上袁在 圆远益尧每天 员远 澡 条件
下进行光照培养遥
将 猿园 凿 的幼苗叶片切段袁外植体置于 酝杂 垣 员郾 园
皂燥造窑蕴 原员圆袁源 原 阅 垣 员郾 园 皂燥造窑蕴 原员月粤 培养基上诱导愈伤
组织袁于 圆缘 依 圆益进行暗培养遥 用镊子将外植体周围
形成的愈伤组织取下转移到附加相同浓度 圆袁源 原 阅 和
月粤及 缘园园 皂早窑蕴 原员蕴匀 的 酝杂 培养基上进行继代培养遥
连续继代培养多次袁每 猿 周转移 员 次遥 待愈伤组织成
为松软状态便可用于分离原生质体遥
员郾 源摇 秦艽愈伤组织原生质体的分离和纯化
取传代培养 员 耀 圆 周袁处于旺盛增殖期的愈伤组
织袁直接放在酶液渊员豫纤维素酶袁园郾 缘豫离析酶袁园郾 缘豫
半纤维素酶袁圆豫果胶酶袁园郾 源 皂燥造窑蕴 原员甘露醇袁责匀 值
缘郾 愿 耀 远郾 圆冤中袁每 员园 皂蕴酶液放 圆 早左右遥 在室温下保
温过夜袁或 圆远益下保温 远 澡以上袁直到产生足够量的原
生质体遥 将酶解后的原生质体悬液用不锈钢网筛渊缘远
滋皂冤过滤袁除去未完全消化的组织遥 向过滤液中加入
等体积的 园郾 员远 皂早窑蕴 原员 悦葬悦造圆窑圆匀圆韵溶液袁混合之后转
移到带盖离心管中遥 在 愿园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 耀 员缘 皂蚤灶袁
使原生质体充分沉淀遥 吸去上清液袁将沉淀的原生质
体悬浮在 圆 皂蕴 园郾 员远 皂早窑蕴 原员 悦葬悦造圆窑圆匀圆韵 溶液中遥 用
注射器向离心管底部缓缓注入 员愿豫蔗糖溶液 远 皂蕴袁然
后 远园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶遥 两相溶液界面间出现纯
净原生质体带袁管底出现杂质沉淀遥 将注射器插入管
底袁吸出沉淀的杂质袁并吸出下部蔗糖液及上部
悦葬悦造圆窑圆匀圆韵溶液遥 离心管中留下的纯净原生质体用 愿
皂蕴 园郾 员远 皂早窑蕴 原员 悦葬悦造圆窑圆匀圆韵 洗涤遥 离心 缘 皂蚤灶袁吸去
上清液遥 收集的原生质体悬浮在适量 阅孕阅 垣 员郾 园 皂早窑
蕴 原员 圆袁源 原 阅 垣园郾 缘 皂早窑蕴 原员 月粤 垣 园郾 源 皂燥造窑蕴 原员甘露醇的
培养基中袁将其密度调整到 缘 伊 员园源 个 辕 皂蕴 左右渊可用
血细胞计数板统计原生质体的密度冤遥 苔盼兰染色观
察成活率遥
员郾 缘摇 试验分组及 哉灾鄄月处理
紫外线照射装置院紫外灯管接在 杂宰鄄悦允鄄员阅 型超
净工作台渊上海苏静实业有限公司冤内袁紫外光源经过
悦藻造造怎造燥泽藻 凿蚤葬糟藻贼葬贼藻滤膜渊截止型长通滤光片袁圆怨圆 灶皂以
下被滤除冤获得 哉灾鄄月光源渊秦牌袁猿园 宰袁波长峰值 猿园缘
灶皂袁宝鸡光源研究所生产冤袁哉灾鄄月 辐射处理的辐照度
为 园郾 缘 宰窑皂 原圆遥
员冤原生质体悬液中袁酝耘蕴 以 园尧员尧员园 滋皂燥造窑蕴 原员的
终浓度分别加到培养基中遥 用微量加样器将细胞悬液
等量分装于细胞培养板上渊劓 越 圆园 皂皂袁缘园园 滋蕴 辕孔冤袁
进行 哉灾鄄月照射遥 试验以不经紫外线照射为对照袁远 个
处理的照射时间分别为 园尧缘尧员园尧猿园尧远园尧员圆园 泽遥 暗培养
员 澡后离心收集原生质体袁进行电泳遥
圆冤用微量加样器将原生质体悬液分装在细胞培
养板中渊劓 越 圆园 皂皂袁缘园园 滋蕴 辕孔冤袁进行紫外线照射遥
照射时间为 源园 泽遥 照射处理后袁用 园郾 员远 皂燥造窑蕴 原员 悦葬悦造圆
溶液洗涤原生质体袁并离心收集袁重新悬浮于 阅孕阅 垣
员郾 园 皂早窑蕴 原员 圆袁源 原 阅 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 月粤 垣 园郾 源 皂燥造窑蕴 原员
甘露醇培养基中袁酝耘蕴 仍然以 园尧员尧员园 滋皂燥造窑蕴 原员的终
浓度加到相同的培养基中袁置 圆远益左右条件下进行暗
培养 园尧员尧圆尧猿尧源尧远 澡遥 离心收集原生质体袁进行电泳遥
员猿愿
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
员郾 远摇 单细胞凝胶电泳
单细胞凝胶电泳按 在澡葬灶早 等咱圆缘暂改良方法进行遥
将洁净的载玻片在 园郾 远豫的常熔点琼脂糖中浸没后取
出袁置 猿苑 益烘箱烘烤过夜曰将原生质体悬液和 员豫低
熔点胶等体积混合均匀袁铺在预处理后的载玻片上袁放
入新鲜配制的裂解液中袁源 益下放 员 澡遥 蒸馏水冲洗
后袁将载玻片放电泳缓冲液中袁于 源 益下放 员缘 皂蚤灶 变
性解旋遥 电泳 员缘 皂蚤灶渊圆远 灾袁猿园园 皂粤冤遥 源园园 皂皂燥造窑蕴 原员
栽则蚤泽缓冲液渊责匀 值 苑郾 缘冤中和 猿 次曰将载玻片置于冰冷
的无水乙醇中袁脱水 员园 皂蚤灶袁室温晾干遥 耘月渊圆园 滋早窑
皂蕴 原员冤染色袁镜检袁照相遥
每个处理随机取 员园园 个细胞袁用 悦粤杂孕 分析软件
进行分析遥 试验重复 猿 次遥
员郾 苑摇 彗星图像分析和数据的统计分析
选取尾部 阅晕粤 含量渊栽葬蚤造阅晕粤豫 冤作为 阅晕粤 损伤
程度的分析指标遥 用 杂孕杂杂 员猿郾 园 统计软件进行单因素
方差分析和组间两两对比遥
圆摇 结果与分析
游离出的原生质体经苔盼兰染色袁成活率在 怨园豫
以上渊图 员冤遥 不同时间 哉灾鄄月 辐射处理大叶秦艽原生
质体的彗星图像如图 圆 所示遥 随着 哉灾鄄月 辐射时间增
加袁彗星尾部逐渐增长袁表明 阅晕粤迁移量增加袁且尾部
中 阅晕粤的含量随之增加袁以 悦粤杂孕 统计后袁得到 阅晕粤
损伤程度的各种参数袁选择 栽葬蚤造阅晕粤豫作为 阅晕粤 损伤
程度的分析指标遥
注院 哉灾鄄月辐射时间 粤为 园 泽曰月为 员园 泽曰悦为 猿园 泽遥 下同遥
晕燥贼藻院 栽蚤皂藻 燥枣 哉灾鄄月 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶袁 粤 泽贼葬灶凿泽 枣燥则 园 泽袁 月 枣燥则 员园 泽袁 悦 枣燥则 猿园 泽援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
图 圆摇 不同时间 哉灾鄄月辐射引起的秦艽原生质体的 阅晕粤 受损形态渊 伊源园园冤
云蚤早援 圆摇 悦燥皂藻贼 责蚤糟贼怎则藻泽 燥枣 阅晕粤 凿葬皂葬早藻 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 哉灾鄄月 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 藻曾责燥泽怎则藻 贼蚤皂藻 渊 伊源园园冤
圆郾 员摇 酝耘蕴对不同剂量哉灾鄄月辐射下的原生质体的影响
用不同辐射时间 哉灾鄄月 结合不同浓度 酝耘蕴 处理
原生质体袁结果如图 猿 所示遥 用 哉灾鄄月 辐射原生质体袁
在 缘 耀 猿园 泽的时间内袁随辐射时间的延长袁在几个处理
组中袁栽葬蚤造阅晕粤豫值均呈正比增加袁即辐射时间越长袁
图 员摇 秦艽原生质体渊 伊源园园冤
云蚤早援 员摇 郧援 皂葬糟则燥责澡赠造造葬 责则燥贼燥责造葬泽贼泽渊 伊源园园冤
栽葬蚤造豫 阅晕粤 越高遥 但是相同的辐射时间下袁 哉灾鄄月 垣
酝耘蕴渊员 滋皂燥造窑蕴 原员冤和 哉灾鄄月 垣 酝耘蕴渊员园 滋皂燥造窑蕴 原员冤组的
栽葬蚤造阅晕粤豫值总是低于不加 酝耘蕴 的单独 哉灾鄄月 处理
组袁酝耘蕴浓度越高袁栽葬蚤造阅晕粤豫越低曰当 哉灾鄄月辐射剂量
超过 猿园 泽袁单独 哉灾鄄月处理组中的 栽葬蚤造阅晕粤豫的值出现
下降的趋势袁可能是大剂量 哉灾鄄月 辐射使细胞内产生
的 阅晕粤光合物减缓其在电泳的过程中移动的速度遥
但是袁本试验中同样的辐射剂量下袁哉灾鄄月 垣 酝耘蕴渊员
滋皂燥造窑蕴 原员冤和 哉灾鄄月 垣 酝耘蕴渊员园 滋皂燥造窑蕴 原员冤组都未出现
这种现象遥 可能是培养基中存在的 酝耘蕴 降低了细胞
阅晕粤损伤的程度袁增强了 阅晕粤 修复的能力袁而且这种
修复能力与 酝耘蕴 的浓度呈正相关曰哉灾鄄月 辐射处理时
间未超过 缘 泽时袁短暂的 哉灾鄄月辐射使细胞内丙二醛活
性增高袁抗氧化系统如超氧化物歧化酶尧过氧化氢酶袁
及时清除了紫外胁迫产生的有害物质咱员愿暂 袁此时各组的
栽葬蚤造阅晕粤豫值均有降低遥
圆郾 圆摇 酝耘蕴对 哉灾鄄月辐射后不同培养时间原生质体的
影响
原生质体被 哉灾鄄月 辐射 源园 泽 后袁在添加不同终浓
度 酝耘蕴的培养液中暗培养 员 耀 远 澡袁分别于不同的培养
圆猿愿
摇 缘 期 褪黑素对秦艽原生质体抗 哉灾鄄月环境胁迫的作用
注院鄢 孕 约 园郾 园缘曰 鄢鄢孕 约 园郾 园员遥 下同遥
晕燥贼藻院鄢 孕 约 园郾 园缘曰 鄢鄢孕 约 园郾 园员援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早
图 猿摇 酝耘蕴对不同剂量 哉灾鄄月辐射下的秦艽
原生质体的 栽葬蚤造阅晕粤豫值的影响
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 皂藻造葬贼燥灶蚤灶 燥灶 皂藻凿蚤葬灶
栽葬蚤造阅晕粤豫 增葬造怎藻泽 燥枣 郧援 皂葬糟则燥责澡赠造造葬
责则燥贼燥责造葬泽贼泽 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 哉灾鄄月
则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 枣燥则 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 凿怎则葬贼蚤燥灶援
时间收集细胞用于彗星电泳袁结果如图 源 所示遥 在分
离后培养的 员 耀 远 澡 内袁阴性对照组渊未用 哉灾鄄月 和
酝耘蕴处理冤栽葬蚤造阅晕粤豫值由高逐渐降低袁这可能是由于
原生质体在分离和纯化时因纤维素酶等的作用受到一
定程度的损伤袁又在培养的过程中逐渐修复的原因遥
与阴性对照组相比袁阳性对照组渊仅用 哉灾鄄月 处理冤和
哉灾鄄月 垣 酝耘蕴渊员 滋皂燥造窑蕴 原员冤组的 栽葬蚤造阅晕粤豫在培养 圆 澡
和 猿 澡时明显上升袁然后下降袁表明原生质体在 哉灾鄄月
辐射后培养 圆 耀 猿 澡 的时间段内袁细胞内 阅晕粤 修复机
制被激活遥 在 员 耀 远 澡 培养时间内袁酝耘蕴 处理的样品袁
栽葬蚤造阅晕粤豫值均低于阳性对照组袁并且 栽葬蚤造阅晕粤豫值的
大小与所处理的 酝耘蕴 的浓度呈反比关系袁哉灾鄄月 垣
酝耘蕴渊员园 滋皂燥造窑蕴 原员 冤组的 栽葬蚤造阅晕粤豫值与阴性对照组
之间无显著差异遥 结果表明 酝耘蕴能够提高 阅晕粤修复
能力袁降低 阅晕粤损伤的程度袁且与其浓度呈正相关性遥
猿摇 讨论
细胞 阅晕粤受到 哉灾鄄月 或 哉灾鄄悦 辐射后袁会产生大
量的 阅晕粤光产物袁主要是环丁烷嘧啶二聚体和嘧啶渊远
原 源冤嘧啶酮二聚体渊远 原 源 光产物冤袁二聚体的数量随紫
外照射剂量增加而直线上升咱圆远暂 遥 这些二聚体若没有
得到及时修复袁单细胞凝胶电泳时 栽葬蚤造阅晕粤豫值会呈
现下降的趋势袁与本试验中当 哉灾鄄月 辐射剂量超过 猿园
泽袁单独 哉灾鄄月处理组中所出现的结果一样遥 该现象在
图 源摇 酝耘蕴对 哉灾鄄月辐射后不同培养时间下的
秦艽原生质体 栽葬蚤造阅晕粤豫的影响
云蚤早援 源摇 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 皂藻造葬贼燥灶蚤灶 燥灶 皂藻凿蚤葬灶 栽葬蚤造阅晕粤豫
增葬造怎藻泽 燥枣 郧援 皂葬糟则燥责澡赠造造葬 责则燥贼燥责造葬泽贼泽 贼则藻葬贼藻凿
憎蚤贼澡 哉灾鄄月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤灶糟怎遭葬贼藻凿 枣燥则 员 耀 远 澡
其它类似报道中也出现过咱圆苑 原 圆怨暂 遥 砸怎糟蚤俳泽噪葬 等咱猿园暂用单
细胞凝胶电泳的方法检测 孕遭圆 垣对羽扇豆根细胞的毒
性袁孕遭圆 垣浓度为 猿缘园 皂早窑蕴 原员时得到的彗星尾面积渊 贼葬蚤造
葬则藻葬冤尧尾长渊贼葬蚤造 造藻灶早贼澡冤和尾矩渊贼葬蚤造 皂燥皂藻灶贼冤反而小于
浓度为 员缘园 皂早窑蕴 原员时的值袁这可能是由于高剂量的
孕遭圆 垣胁迫使 阅晕粤链形成了大量交联抑制了 阅晕粤在电
泳过程中的迁移造成的遥 这些 阅晕粤 二聚体在暗培养
的情况下以切除修复为主咱圆远暂 袁修复程度与辐射后细胞
培养时间有关袁培养时间越长袁修复程度越高遥 在特定
的时间段内对辐射处理后的细胞进行单细胞凝胶电
泳袁栽葬蚤造阅晕粤豫会出现先上升随后下降的现象遥 本试验
中袁仅用 哉灾鄄月处理 源园 泽 的阳性对照组细胞在暗培养
员 耀 远 澡 阶段内袁单细胞凝胶电泳所获得的 栽葬蚤造阅晕粤豫
变化趋势与 粤遭葬泽 等咱圆远暂用同种方法揭示 哉灾鄄悦 辐射后
晕蚤糟燥贼蚤葬灶葬 责造怎皂遭葬早蚤灶蚤枣燥造蚤葬原生质体的 阅晕粤修复机制所
得出的结果一致遥
关于植物体内 酝耘蕴抗氧化作用的报道很多袁研究
的方法也各异咱员猿 原 员苑暂 遥 粤枣则藻藻灶等 咱员圆暂用 哉灾鄄月辐射甘草袁
检测其根中 酝耘蕴 含量袁推测出植物体内 酝耘蕴 具有保
护自身免受自由基和其他分子氧化损伤的作用遥 徐向
东等咱猿员暂对黄瓜幼苗喷施外源 酝耘蕴袁高温处理后再测其
净光合速率及气孔导度等值袁揭示了外施 酝耘蕴可减轻
高温对植株造成的伤害遥 王英利等咱员愿暂用外源 酝耘蕴 结
合 哉灾鄄月 辐射处理水培的绿豆袁再测其体内丙二醛以
及抗氧化系统包括过氧化物酶尧超氧化物歧化酶尧过氧
化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶酶活袁以确定 酝耘蕴在植
猿猿愿
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
物受 哉灾鄄月 辐射引起氧化胁迫中起到防护作用袁这也
是近年来最常用于某些物质氧化或抗氧化能力检测的
方法咱猿圆 原 猿猿暂 遥 而本试验用外源 酝耘蕴 和 哉灾鄄月 复合处理
原生质体袁用单细胞凝胶电泳检测 阅晕粤 受损情况袁这
是首次借助这一技术揭示了 酝耘蕴 作为抗氧化剂在植
物抗紫外胁迫中所起到的作用遥
源摇 结论
为了探讨 酝耘蕴可能在植物防御非生物胁迫中所
起到的重要作用袁本研究用单细胞凝胶电泳技术检测
了 酝耘蕴对 哉灾鄄月辐射后的秦艽原生质体的影响袁 选取
栽葬蚤造阅晕粤豫作为 阅晕粤损伤程度的分析指标遥 本试验证
实了 哉灾鄄月 辐射剂量在一定的范围内袁 其所诱导的
阅晕粤损伤具有剂量 原 效应关系袁随着处理时间的延
长袁 阅晕粤的损伤量增大曰在培养基中存在 酝耘蕴的条件
下袁辐射时间相同袁酝耘蕴浓度越高袁栽葬蚤造阅晕粤豫越低袁 表
明 酝耘蕴降低了 阅晕粤 损伤的程度遥 哉灾鄄月 辐射处理后
的细胞培养 员 耀 远 澡袁酝耘蕴 处理过的样品袁栽葬蚤造阅晕粤豫值
均低于阳性对照组袁降低的程度与原生质体悬液中所
加的 酝耘蕴的浓度呈正相关袁表明 酝耘蕴 的存在提高了
阅晕粤修复的能力遥 由此可见 酝耘蕴 能降低 哉灾鄄月 辐射
诱导的植物原生质体损伤的程度袁对植物原生质体具
有明显的保护作用遥
参考文献院
咱 员 暂摇 阅怎遭遭藻造泽 砸袁 砸藻蚤贼藻则 砸 允袁 运造藻灶噪藻 耘袁 郧燥藻遭藻造 粤袁 杂糟澡灶葬噪藻灶遭藻则早 耘袁
耘澡造藻则泽 悦袁 杂糟澡蚤憎葬则葬 匀 宰袁 杂糟澡造燥燥贼 宰援 酝藻造葬贼燥灶蚤灶 蚤灶 藻凿蚤遭造藻 责造葬灶贼泽
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 则葬凿蚤燥蚤皂皂怎灶燥葬泽泽葬赠 葬灶凿 遭赠 澡蚤早澡 责藻则枣燥则皂葬灶糟藻 造蚤择怎蚤凿
糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠鄄皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥皂藻贼则赠咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕蚤灶藻葬造 砸藻泽藻葬则糟澡袁
员怨怨缘袁员愿渊员冤院圆愿 原 猿员
咱 圆 暂摇 酝葬灶糟澡藻泽贼藻则 蕴 悦袁 栽葬灶 阅 载袁 砸藻蚤贼藻则 砸 允袁 孕葬则噪 宰袁 酝燥灶蚤泽 运袁 匝蚤 宰援
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咱员怨暂摇 林爱军袁张旭红袁朱永官袁镉对小麦叶片 阅晕粤伤害的彗星试验研
究咱允暂 援环境科学学报袁圆园园缘袁圆渊圆缘冤院猿圆怨 原 猿猿猿
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