全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员员袁圆缘渊远冤院员员源圆 耀 员员源苑允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员园鄄员员鄄猿园摇 接受日期院圆园员员鄄园愿鄄员怨
基金项目院国家林业局 怨源愿 项目渊晕韵援 圆园园愿鄄源鄄圆缘冤袁浙江省自然科学基金渊晕韵援 再猿员园园圆苑圆冤
作者简介院龚茂江渊员怨愿猿鄄冤袁男袁江西萍乡人袁硕士袁主要从事花发育分子生物学方面的研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 早皂躁园苑员愿躁燥藻岳 员远猿郾 糟燥皂
通讯作者院田摇 敏渊员怨苑源鄄冤袁女袁河南新乡人袁博士袁副研究员袁主要从事花卉育种及分子生物学研究遥 栽藻造院 园缘苑员鄄远猿员园缘园苑苑曰耘鄄皂葬蚤造院 贼皂蚤灶员员缘岳
员远猿郾 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员员冤园远鄄员员源圆鄄园远
文心兰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕体系的建立及 栽阅云泽分析
龚茂江摇 田摇 敏摇 王彩霞
渊中国林业科学研究院亚热带林业研究所袁浙江 富阳摇 猿员员源园园冤
摘摇 要院通过总 砸晕粤 提取尧糟阅晕粤 合成等试验袁建立 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析体系遥 结果表明袁采用 酝泽藻玉和
耘糟燥砸玉酶切 猿澡袁预扩增产物稀释 员缘 倍作为选择性扩增模板袁利用筛选的引物进行扩增袁可获得丰度和
多态性较高的指纹图谱遥 利用 缘怨 对引物获得约 员员远园 条 栽阅云泽 渊栽则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶鄄凿藻则蚤增藻凿 枣则葬早皂藻灶贼泽冤遥 回收尧
克隆其中 员圆愿 条进行测序袁获得 员园圆 条可读序列袁郧藻灶月葬灶噪 登陆号为 允郧园员源猿缘苑 耀 允郧园员源源缘愿遥 月蕴粤杂栽晕 辕 载
同源比对发现袁愿苑豫的条带在 晕悦月陨 数据库中能找到功能已知的同源序列曰其中 圆 条 栽阅云泽 分别可能与
文心兰子房发育 渊栽阅云园园苑猿葬冤 和花器官挥发性香味物质合成 渊栽阅云园员猿怨葬冤 相关遥 序列分析表明 栽阅云泽
对应基因的功能涉及植物生命活动的诸多领域遥 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析体系的建立及 栽阅云泽序列分析为进一
步克隆花发育相关基因袁研究文心兰花发育相关分子调控机制奠定了基础遥
关键词院文心兰曰糟阅晕粤鄄粤云蕴孕曰引物筛选曰栽阅云泽
耘杂栽粤月蕴陨杂匀酝耘晕栽 韵云 粤 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 杂再杂栽耘酝 陨晕 韵灶糟蚤凿蚤怎皂 韵则糟澡蚤凿 粤晕阅 栽阅云泽 粤晕粤蕴再杂陨杂
郧韵晕郧 酝葬燥鄄躁蚤葬灶早摇 栽陨粤晕 酝蚤灶摇 宰粤晕郧 悦葬蚤鄄曾蚤葬
渊杂怎遭贼则燥责蚤糟葬造 云燥则藻泽贼则赠 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼蚤燥灶袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 云怎赠葬灶早袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员员源园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽澡藻 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 葬灶葬造赠泽蚤泽 泽赠泽贼藻皂 憎葬泽 藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿 蚤灶 韵灶糟蚤凿蚤怎皂 酝蚤造造蚤燥灶早燥造凿泽 憎蚤贼澡 赠燥怎灶早 造藻葬增藻泽 葬灶凿 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽
葬泽 皂葬贼藻则蚤葬造泽 葬枣贼藻则 葬 泽藻则蚤藻泽 燥枣 憎燥则噪袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 贼燥贼葬造 砸晕粤 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶袁 皂砸晕粤 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶袁 泽蚤灶早造藻鄄葬灶凿 凿燥怎遭造藻鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤
泽赠灶贼澡藻泽蚤泽袁 酝泽藻玉葬灶凿 耘糟燥砸玉 凿蚤早藻泽贼蚤燥灶袁 藻贼糟援 援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 凿泽鄄糟阅晕粤 憎葬泽 凿蚤早藻泽贼藻凿 糟燥皂责造藻贼藻造赠 遭赠 酝泽藻玉
葬灶凿 耘糟燥砸玉蚤灶 猿澡援 栽澡藻 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼 皂葬责 憎蚤贼澡 澡蚤早澡 葬遭怎灶凿葬灶糟藻 则葬贼蚤燥 葬灶凿 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 憎葬泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿 憎澡藻灶 贼澡藻 造蚤早葬贼蚤燥灶
责则燥凿怎糟贼泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 葬泽 贼藻皂责造葬贼藻泽 枣燥则 责则藻鄄葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 凿蚤则藻糟贼造赠 葬灶凿 员缘 贼蚤皂藻泽鄄凿蚤造怎贼藻凿 责则藻鄄葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 枣燥则
泽藻造藻糟贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶袁 怎泽蚤灶早 贼澡藻 员员源 责则蚤皂藻则 责葬蚤则泽 贼澡葬贼 憎藻则藻 早葬蚤灶藻凿 遭赠 泽糟则藻藻灶蚤灶早 葬造造 缘苑远 责则蚤皂藻则 责葬蚤则泽袁 葬泽 泽藻造藻糟贼蚤增藻
葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则蚤皂藻则泽援 粤责责则燥曾蚤皂葬贼藻造赠 葬 贼燥贼葬造 燥枣 员员远园 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶鄄凿藻则蚤增藻凿 枣则葬早皂藻灶贼泽 渊 栽阅云泽冤 憎藻则藻 早藻灶藻则葬贼藻凿 憎蚤贼澡 缘怨
责则蚤皂藻则 责葬蚤则泽援 粤皂燥灶早 贼澡藻泽藻 栽阅云泽袁 员圆愿 憎藻则藻 泽怎遭鄄糟造燥灶藻凿 葬灶凿 泽藻择怎藻灶糟藻凿袁 葬灶凿 员园圆 则藻葬凿葬遭造藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 憎藻则藻 责则燥凿怎糟藻凿援
栽澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 憎藻则藻 泽怎遭皂蚤贼贼藻凿 贼燥 贼澡藻 凿遭耘杂栽 蚤灶 晕悦月陨袁 葬灶凿 贼澡藻 郧藻灶月葬灶噪 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 灶怎皂遭藻则泽 葬则藻 允郧园员源猿缘苑 耀 允郧园员源源缘愿郾
月蕴粤杂栽载 辕 晕 葬灶葬造赠泽蚤泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 愿苑豫 燥枣 贼澡藻皂 澡葬凿 蚤凿藻灶贼蚤贼赠 早藻灶藻泽 憎蚤贼澡 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽 葬造则藻葬凿赠 噪灶燥憎灶援 栽澡藻 栽阅云园园苑猿葬 蚤泽
责则燥遭葬遭造赠 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 燥增葬则赠 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 葬灶凿 栽阅云园员猿怨葬 蚤泽 造蚤噪藻造赠 贼燥 责造葬赠 葬 则燥造藻 蚤灶 枣造燥则葬造 枣则葬早则葬灶糟藻 凿蚤枣枣怎泽蚤灶早援 杂藻择怎藻灶糟藻
葬灶葬造赠泽蚤泽 则藻增藻葬造藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 枣造燥则葬造 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 藻曾责则藻泽泽藻凿 早藻灶藻泽 澡葬凿 责怎贼葬贼蚤增藻 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 皂葬灶赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 枣蚤藻造凿泽 燥枣
责造葬灶贼 皂藻贼葬遭燥造蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠援 栽澡藻 藻泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼 燥枣 贼澡藻 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 泽赠泽贼藻皂 葬灶凿 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 贼澡藻 栽阅云泽 蚤灶 韵灶糟蚤凿蚤怎皂 糟葬灶
责则燥增蚤凿藻 葬 责造葬贼枣燥则皂 枣燥则 糟造燥灶蚤灶早 贼澡藻 早藻灶藻泽 贼澡葬贼 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 枣造燥憎藻则 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 枣怎则贼澡藻则 怎灶凿藻则泽贼葬灶凿蚤灶早 燥枣 贼澡藻 皂燥造藻糟怎造葬则
皂藻糟澡葬灶蚤泽皂泽 怎灶凿藻则造赠蚤灶早 枣造燥憎藻则 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼援
运藻赠 憎燥则凿泽院韵灶糟蚤凿蚤怎皂曰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕曰 责则蚤皂藻则 泽糟则藻藻灶蚤灶早曰 栽阅云泽
圆源员员
摇 远 期 文心兰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕体系的建立及 栽阅云泽分析
摇 摇 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 渊 糟阅晕粤 粤皂责造蚤枣蚤藻凿 云则葬早皂藻灶贼 蕴藻灶早贼澡
孕燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤 是 月葬糟澡藻皂 等咱员袁 圆暂发明的一种将 粤云蕴孕
应用于 皂砸晕粤 表达差异分析的技术袁具有可靠性强尧
灵敏度高尧重复性好袁无需预先了解序列信息等优点袁
可对生物体转录组进行全面尧系统的分析袁是寻找差异
表达基因的有效手段咱猿暂 遥 利用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 技术袁
郧燥怎责蚤造等咱源暂分析了菊苣营养生长早期根增粗过程中的
差异表达基因袁并获得了 圆 个在该过程中高度表达的
基因片段遥 匀泽怎等咱缘暂比较分析了蝴蝶兰野生型和体细
胞无性系变异植株花芽中基因表达的类型袁发现了 缘
条在野生型植株中特异表达的 栽阅云泽 和 圆 条在体细胞
无性系变异植株中特异表达的 栽阅云泽遥 唐美玲等在珠
眉海棠咱远暂 尧山葡萄咱苑暂 等多种植物中建立了稳定的
糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析体系遥
兰科是被子植物中高度进化的类群之一袁其花形
独特袁员 枚花瓣特化为唇瓣袁雄蕊与雌蕊合生形成蕊
柱遥 这种高度特化的繁殖器官为人们发现新的变异基
因以及研究花形态建成中不同水平尧层次的遗传调控
提供了极好的材料遥 文心兰作为兰科的成员之一袁具
有典型的兰科植物花结构特点遥 本研究以文心兰花芽
为试材袁建立了稳定的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析体系袁获得了
高质量的指纹图谱并对 栽阅云泽 进行序列分析袁以期为
进一步克隆花发育相关基因袁揭示花发育过程中的分
子调控机制奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
以富阳绿园园艺公司的文心兰品种耶百万金币爷
渊韵灶糟蚤凿蚤怎皂 耶酝蚤造造蚤燥灶早燥造凿泽爷冤为材料遥 依据本实验室对
文心兰花芽进行显微镜形态观察的结果袁将不同大小
的花芽分成 缘 个发育阶段院渊员冤 直径小于 员皂皂 的花芽
处于花蕾原基分化期曰渊圆冤 直径 员 耀 圆皂皂 的花芽主要
进行花被原基的分化曰渊猿冤 直径 圆 耀 猿皂皂 的花芽处于
合蕊柱形成期曰渊源冤 直径 猿 耀 缘皂皂 的花芽处于花粉块
形成期曰渊缘冤 直径大于 缘皂皂 的花芽中袁花器官原基快
速生长增大袁直至盛开遥 将不同发育阶段的花芽采下
后液氮速冻袁并保存于 原 愿园益备用遥 同时采集嫩叶用
于对照分析遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 初级模板制备摇 取不同发育阶段等量混合的
花芽和嫩叶各 猿 耀 缘早袁天泽柱式植物 砸晕粤韵哉栽 圆郾 园 试剂
盒提取总 砸晕粤遥 采用 孕燥造赠粤栽贼则葬糟贼 皂砸晕粤 陨泽燥造葬贼蚤燥灶
杂赠泽贼藻皂泽 试剂盒分离 皂砸晕粤遥 糟阅晕粤 的合成采用
哉灶蚤增藻则泽葬造 砸蚤遭燥糟造燥灶藻 糟阅晕粤 杂赠灶贼澡藻泽蚤泽 杂赠泽贼藻皂 试剂盒遥 双
酶切采用 酝泽藻玉和 耘糟燥砸玉袁反应体系 渊缘园滋造冤院员园 伊
耘糟燥砸玉月怎枣枣藻则 缘滋造袁 糟阅晕粤 圆园滋造袁 酝泽藻玉 员园哉袁耘糟燥砸玉
圆园哉袁员园园 伊 月杂粤 园郾 缘滋造袁凿凿匀圆韵 定容至 缘园滋造遥 猿苑益温育
猿澡袁远缘益温育 圆园皂蚤灶终止反应遥 耘糟燥砸玉接头 粤阅耘序列
为 缘忆鄄悦栽悦郧栽粤郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦鄄猿忆 辕 猿忆鄄悦栽郧粤悦郧悦粤栽郧郧
栽栽粤粤鄄缘忆曰 酝泽藻 玉 接 头 粤阅酝 序 列 为 缘忆鄄郧粤悦郧粤栽郧
粤郧栽悦悦栽郧粤郧鄄猿忆 辕 猿忆鄄栽粤悦栽悦粤郧郧粤悦栽悦粤栽鄄缘忆遥 接头连接
体系 渊圆园滋造冤院栽源 阅晕粤 蕴蚤早葬泽藻 月怎枣枣藻则 圆滋造袁 粤阅耘 和 粤阅酝
渊员园滋皂燥造 辕 蕴冤各 园郾 缘滋造袁栽源 阅晕粤 蕴蚤早葬泽藻 源园园哉袁糟阅晕粤 酶切
产物 员远滋造袁室温 猿园皂蚤灶遥
员郾 圆郾 圆摇 次级模板制备摇 以连接产物为模板袁用与接头
互补的引物 酝园园 辕 耘园园 进行预扩增遥 扩增体系渊缘园滋造冤院
员园 伊 蕴粤 孕悦砸 月怎枣枣藻则 缘滋造袁酝早悦造圆渊圆缘皂皂燥造 辕 蕴冤 缘滋造袁 凿晕栽孕
渊各 圆郾 缘皂皂燥造 辕 蕴冤 愿滋造袁 糟阅晕粤 模板 缘滋造袁 引物 酝园园渊缘忆鄄
郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤鄄猿忆冤 辕 耘园园 渊 缘忆鄄郧粤悦栽郧悦郧栽
粤悦悦粤粤栽栽悦鄄猿忆冤 渊 员园滋皂燥造 辕 蕴 冤 各 员滋造袁 蕴粤 栽葬择 圆郾 缘哉袁
凿凿匀圆韵 定容至 缘园滋造曰反应程序 渊 月陨韵鄄砸粤阅 悦员园园园栽酝袁
栽澡藻则皂葬造 悦赠糟造藻则冤院怨源益预变性 猿皂蚤灶曰怨源益变性 猿园泽袁缘远益
退火 远园泽袁苑圆益延伸 远园泽袁猿缘 个循环曰苑圆益延伸 苑皂蚤灶遥
预扩增产物稀释 员缘 倍作为次级模板遥
员郾 圆郾 猿摇 选择性扩增引物筛选和选择性扩增摇 引物筛
选扩增体系 渊缘园滋造冤院员园 伊 月怎枣枣藻则 缘滋造袁酝早悦造圆 渊圆缘皂皂燥造 辕
蕴冤 猿滋造袁凿晕栽孕 渊各 圆郾 缘皂皂燥造 辕 蕴冤 源滋造袁模板 员郾 缘滋造袁 引物
酝晕晕渊酝韵韵 垣 晕晕晕冤 辕 耘晕粤渊耘韵韵 垣 晕晕晕冤 渊晕 代表任意
碱基冤 渊员园滋皂燥造 辕 蕴冤各 员郾 缘滋造袁则栽葬择 园郾 圆缘滋造袁凿凿匀圆韵定容
至 缘园滋造曰采用 栽燥怎糟澡 阅燥憎灶 孕悦砸 反应程序院怨缘益预变性
源皂蚤灶袁前 员猿 个循环为 怨缘益 猿园泽曰远缘益 猿园泽曰苑圆益 远园泽曰退
火温度每个循环降低 园郾 苑益袁后 圆源 个循环为 怨缘益 猿园泽曰
缘远益 猿园泽曰苑圆益 远园泽遥
利用筛选的引物对和次级模板进行选择性扩增遥
选择性扩增体系和反应程序与引物筛选时相同遥 远豫
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物袁银染显色遥
员郾 圆郾 源摇 栽阅云泽 的回收及测序 摇 将聚丙烯酰胺凝胶上
员园园 耀 员园园园遭责 之间的 栽阅云泽 渊栽则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 凿藻则蚤增藻凿 枣则葬早鄄
皂藻灶贼泽冤切下袁水煮法回收遥 用相应引物进行再扩增袁扩
增体系与选择性扩增相同遥 反应程序为 怨缘益袁缘皂蚤灶曰
怨缘益 猿园泽袁缘愿益 猿园泽袁苑圆益 远园泽袁源园 个循环曰苑圆益 员园皂蚤灶遥
再扩增产物经 圆豫 琼脂糖凝胶电泳分离袁粤曾赠孕则藻责栽酝
阅晕粤 郧藻造 耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 试剂盒回收条带袁回收产物连接
责郧耘酝鄄栽 耘葬泽赠 灾藻糟贼燥则渊孕则燥皂藻早葬冤载体袁转化 阅匀缘倩 大肠
杆菌遥 经蓝白斑筛选袁菌落 孕悦砸 鉴定袁取阳性克隆测
序遥 测序结果进行 月蕴粤杂栽晕 辕 载分析遥
猿源员员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 文心兰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析体系的建立
圆郾 员郾 员摇 初级模板制备摇 总 砸晕粤具有 圆愿杂尧员愿杂和 缘郾 愿杂
猿 条带 渊图 员鄄粤冤曰韵阅圆远园 辕 韵阅圆愿园值在 员郾 愿 耀 圆郾 园 之间袁表
明总 砸晕粤完整性和纯度较好遥 皂砸晕粤 电泳呈弥散条
带袁分子量范围在 缘园园 耀 猿园园园遭责 之间 渊图 员鄄月冤遥 单链
和双链 糟阅晕粤合成都能检测到产物 渊图 员鄄悦冤袁表明反
转录成功遥 双酶切产物均匀分布于 员园园 耀 员缘园园遭责 之间
渊图 员鄄阅冤袁无大分子 阅晕粤遥 说明酶切 猿澡已将 糟阅晕粤充
分消化袁能够满足后续试验的要求遥
图 员摇 初级模板制备
云蚤早援 员摇 栽澡藻 责则藻责葬则葬贼蚤燥灶 燥枣 责则蚤皂葬则赠 贼藻皂责造葬贼藻
粤院 总 砸晕粤 员豫琼脂糖凝胶电泳检测曰月院 皂砸晕粤分离袁 员院花芽曰
圆院叶片曰悦院 糟阅晕粤单链及双链合成袁员院 花芽第一链 糟阅晕粤曰圆院花
芽双链 糟阅晕粤曰猿院叶片第一链 糟阅晕粤曰源院叶片双链 糟阅晕粤曰阅院 双酶
切琼脂糖凝胶检测袁员院花芽曰圆院叶片曰酝院阅晕粤 皂葬则噪藻则
粤院 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 贼燥贼葬造 砸晕粤 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 遭赠 员豫 葬早葬则燥泽藻 早藻造
藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽曰 月院 栽澡藻 则藻泽怎造贼 燥枣 皂砸晕粤 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶袁 员院 皂砸晕粤 枣则燥皂
枣造燥憎藻则 遭怎凿泽曰 圆院 皂砸晕粤 枣则燥皂 造藻葬增藻泽曰 悦院 杂赠灶贼澡藻泽蚤泽 燥枣 泽蚤灶早造藻鄄 辕
凿燥怎遭造藻鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤袁 员院 枣蚤则泽贼鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤 燥枣 枣造燥憎藻则 遭灶凿泽曰 圆院
凿燥怎遭造藻鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤 燥枣 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽曰 猿院 云蚤则泽贼鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤 燥枣
造藻葬增藻泽曰 源院 凿燥怎遭造藻鄄泽贼则葬灶凿 糟阅晕粤 燥枣 造藻葬增藻泽 曰 阅院 粤早葬则燥泽藻 早藻造
藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 凿蚤早藻泽贼藻凿 糟阅晕粤袁 员院 贼澡藻 凿蚤早藻泽贼藻凿 糟阅晕粤 燥枣
枣造燥憎藻则 遭怎凿泽曰 圆院 贼澡藻 凿蚤早藻泽贼藻凿 糟阅晕粤 燥枣 造藻葬增藻泽曰 酝院 阅晕粤 皂葬则噪藻则
圆郾 员郾 圆摇 次级模板制备摇 由图 圆 可见袁扩增产物分布在
员园园 耀 圆园园园遭责范围内袁且在 缘园园 耀 苑缘园遭责 范围内扩增信
号较强袁说明预扩增能够为选择性扩增提供良好的模
板遥 将预扩增产物稀释 员缘 倍作为次级模板遥
图 圆摇 预扩增产物电泳检测
云蚤早援 圆摇 粤早葬则燥泽藻 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 贼澡藻
责则藻鄄葬皂责造蚤枣蚤藻凿 责则燥凿怎糟贼泽
员院 花芽 糟阅晕粤预扩增产物曰圆院 叶片 糟阅晕粤预扩增产物曰
酝院 阅蕴圆园园园 阅晕粤 皂葬则噪藻则
员院 贼澡藻 责则藻鄄葬皂责造蚤枣蚤藻凿 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 枣造燥憎藻则 遭怎凿 糟阅晕粤曰 圆院 贼澡藻 责则藻鄄
葬皂责造蚤枣蚤藻凿 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 造藻葬枣 糟阅晕粤袁酝院 阅晕粤 皂葬则噪藻则 阅蕴圆园园园
圆郾 员郾 猿摇 引物筛选及选择性扩增摇 以 员园园 耀 圆园园园遭责 分
子量范围内有 圆园 条以上扩增条带的引物对作为选择
性扩增引物袁经筛选有 员员源 对引物符合要求遥 扩增产
物经 孕粤郧耘 分离袁结果如图 猿袁可见产物条带可分为 猿
种类型院渊印冤 在叶片和花芽中都有表达曰渊英冤 只在花
芽中表达袁而在叶片中不表达曰渊樱冤只在叶片中表达袁
而在花芽中不表达遥 说明利用筛选的引物能够获得条
带丰富尧多态性高的指纹图谱遥
圆郾 员郾 源摇 栽阅云泽回收及测序摇 图 源鄄粤为引物 耘 垣 粤栽悦 辕 酝
垣 郧悦栽的 源 条 栽阅云泽再扩增结果袁源 个条带都有特异扩
增产物袁说明再扩增体系可行遥 经蓝白斑筛选袁培养基
平板上白色菌落占 愿园豫以上袁转化效率较高遥 菌落
孕悦砸 检测结果表明白色菌落中大多数是带有目的
栽阅云泽片段的阳性克隆 渊图 源鄄月冤袁可用于测序遥
圆郾 圆摇 栽阅云泽分析
利用 缘怨 对引物进行 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析袁共获得约
员员远园 条 栽阅云泽袁平均每对引物约扩增出 圆园 条袁长度在
员园园 耀 员园园园遭责 之间遥 其中 怨愿 条分别为花芽 渊远苑 条冤
和叶片 渊猿员 条冤 中的差异表达条带袁占总条带数的
愿郾 源豫 遥 将 员圆愿 条 栽阅云泽 进行回收尧克隆尧测序袁得到
员园圆 条可读序列遥 月蕴粤杂栽载 辕 晕 比对结果显示袁员园园 条
栽阅云泽在 晕悦月陨数据库中能找到具有较高同源性的序
列袁其中 员员 条有同源序列但功能未知曰另外 圆 条 栽阅云泽
在已知数据库中找不到同源序列遥 后二者可能代表了
文心兰中新的未知功能基因袁有待进一步分析遥 将所
测序列提交至 晕悦月陨数据库 凿遭耘杂栽袁郧藻灶月葬灶噪登录号为
源源员员
摇 远 期 文心兰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕体系的建立及 栽阅云泽分析
图 猿摇 选择性扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳
云蚤早援 猿摇 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 泽藻造藻糟贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
责则燥凿怎糟贼泽 遭赠 孕粤郧耘
粤院 引物 耘 垣 郧粤栽 辕 酝 垣 郧悦粤曰月院 引物 耘 垣 粤栽悦 辕 酝 垣 郧栽悦曰悦院 引物 耘 垣
粤悦栽 辕 酝 垣 栽粤郧曰阅院 引物 耘 垣 栽粤悦 辕 酝 垣 粤郧悦曰耘院 引物 耘 垣 栽悦粤 辕 酝 垣
悦郧栽曰云院花芽 糟阅晕粤选择性扩增产物曰蕴院叶片 糟阅晕粤 选择性扩增产物曰
酝院 阅蕴圆园园园 阅晕粤 酝葬则噪藻则曰 印院 在花芽和叶片中都有表达的条带曰英院
在花芽中有表达袁在叶片中没有表达的条带曰樱院 在叶片中有表达袁在
花芽中没有表达的条带
粤院 责则蚤皂藻则 耘 垣 郧粤栽 辕 酝 垣 郧悦粤曰 月院 责则蚤皂藻则 耘 垣 粤栽悦 辕 酝 垣 郧栽悦曰 悦院 责则蚤皂藻则
耘 垣 粤悦栽 辕 酝 垣 栽粤郧曰 阅院 责则蚤皂藻则 耘 垣 栽粤悦 辕 酝 垣 粤郧悦曰 耘院 责则蚤皂藻则 耘 垣 栽悦粤 辕
酝 垣 悦郧栽曰 云院 杂藻造藻糟贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣赠蚤灶早 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽 糟阅晕粤曰 蕴院
杂藻造藻糟贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣赠蚤灶早 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 造藻葬增藻泽 糟阅晕粤曰 酝院 阅晕粤 酝葬则噪藻则 阅蕴圆园园园曰
印院 栽阅云泽 增蚤泽怎葬造蚤扎藻凿 遭燥贼澡 蚤灶 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽 葬灶凿 造藻葬增藻泽曰 英院 栽阅云泽 增蚤泽怎葬造蚤扎藻凿
蚤灶 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽 燥灶造赠曰 樱院 栽阅云泽 增蚤泽怎葬造蚤扎藻凿 蚤灶 造藻葬增藻泽 燥灶造赠
图 缘摇 栽阅云泽功能分类
云蚤早援 缘摇 云怎灶糟贼蚤燥灶葬造 糟造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽阅云泽
图 源摇 栽阅云泽回收后扩增渊粤冤及菌落 孕悦砸检测渊月冤
云蚤早援 源摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽阅云泽 藻曾糟蚤泽藻凿 枣则燥皂
责燥造赠葬糟则赠造葬皂蚤凿藻 早藻造渊粤冤 葬灶凿 糟燥灶枣蚤则皂蚤灶早 栽鄄增藻糟贼燥则
泽蚤灶早造藻 蚤灶泽藻则贼蚤燥灶 遭赠 孕悦砸 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 渊月冤
允郧园员源猿缘苑 耀 允郧园员源源缘愿遥 表 员 展示了部分 栽阅云泽 的
郧藻灶藻月葬灶噪登录号尧序列长度及同源性遥
依据 月蕴粤杂栽晕 辕 载 同源性比对的结果袁将 栽阅云泽 分
成 员猿 类袁包括代谢尧细胞运输及传输尧逆境应答尧信号
转导等 渊图 缘冤遥 在这些序列中袁功能已知的序列占
愿苑豫 袁其中占份额较大的是代谢相关基因 渊圆缘豫 冤 和
信号转导相关的基因 渊圆猿豫 冤遥
猿摇 讨论
猿郾 员摇 文心兰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕体系建立
高质量的总 砸晕粤 是 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析的关键之
一遥 本实验采用试剂盒法提取的总 砸晕粤 纯度和完整
性较高袁能满足 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析要求遥 内切酶的选择
是 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 技术的另一重要环节遥 理想的内切酶
组合应包含一个稀有位点酶和一个非稀有位点酶袁识
缘源员员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
表 员摇 部分 栽阅云泽的 郧藻灶月葬灶噪登录号尧序列长度及同源性比对结果
栽葬遭造藻 员摇 郧藻灶月葬灶噪 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 灶怎皂遭藻则泽 葬灶凿 枣则葬早皂藻灶贼 泽蚤扎藻泽 燥枣 栽阅云泽袁 葬造燥灶早 憎蚤贼澡 贼澡藻蚤则 澡燥皂燥造燥早赠
栽阅云编号
栽阅云 晕燥援
登录号
郧藻灶月葬灶噪
葬糟糟藻泽泽蚤燥灶
长度
造藻灶早贼澡
渊遭责冤
同源序列 渊郧藻灶月葬灶噪登录号冤
澡燥皂燥造燥早赠 贼燥 早藻灶藻 渊郧藻灶月葬灶噪 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 冤
生物来源
燥则早葬灶蚤泽皂
耘值
耘 原 增葬造怎藻
栽阅云园园苑猿葬 允郧园员源猿缘怨 员圆员 果实无籽性状相关片段 渊耘哉源源圆远员源援 员冤 葬 枣则葬早皂藻灶贼 则藻造葬贼藻凿 贼燥 泽藻藻凿造藻泽泽 贼则葬蚤贼 燥枣枣则怎蚤贼 悦蚤贼则怎泽 则藻贼蚤糟怎造葬贼葬 员藻 原 员源
栽阅云园园愿源葬 允郧园员源猿远园 员愿苑 郧栽孕 环化水解酶域 渊晕孕赃圆园员圆猿缘冤 郧栽孕 糟赠糟造燥澡赠凿则燥造葬泽藻 陨陨 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 圆藻 原 员源
栽阅云园员猿怨葬 允郧园员源猿远源 圆圆员 丁香油酚合成酶 藻怎早藻灶燥造 泽赠灶贼澡葬泽藻 员 孕藻贼怎灶蚤葬 伊 澡赠遭则蚤凿葬 员援 苑
栽阅云园员源园葬 允郧园员源猿远缘 员愿远 琢 原甘露糖苷酶 渊粤阅哉圆园源园远冤葬造责澡葬 原 皂葬灶灶燥泽蚤凿葬泽藻 悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 源藻 原 员员
栽阅云园员远缘葬 允郧园员源猿远苑 猿员园 蔗糖尧葡萄糖运输 渊载孕赃园园圆圆愿员远愿猿援 员冤 贼则葬灶泽责燥则贼葬贼蚤燥灶 燥枣 泽怎糟则燥泽藻 葬灶凿 早造怎糟燥泽藻 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬 园援 苑猿
栽阅云园员苑员葬 允郧园员源猿苑园 圆圆源 溶酶体 琢 原甘露糖苷酶 渊载孕赃园园圆缘员圆愿猿怨冤造赠泽燥泽燥皂葬造 葬造责澡葬 原 皂葬灶灶燥泽蚤凿葬泽藻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 远藻 原 圆源
栽阅云园员苑怨葬 允郧园员源猿苑圆 员怨园 光系统 陨陨 阅员 蛋白 渊孕泽遭粤冤 渊粤再源猿猿怨缘远援 员冤责澡燥贼燥泽赠泽贼藻皂 陨陨 阅员 责则燥贼藻蚤灶 孕赠则怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 圆藻 原 园源
栽阅云园圆猿猿葬 允郧园员源猿愿圆 猿员圆 半胱氨酸合成酶 渊粤月韵员缘缘远源冤糟赠泽贼藻蚤灶藻 泽赠灶贼澡葬泽藻 郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾 缘藻 原 圆愿
栽阅云园圆缘缘葬 允郧园员源猿愿愿 猿园园 凝集素样受体激酶 渊晕孕赃园园员员源苑怨源苑援 员冤造藻糟贼蚤灶 原 造蚤噪藻 则藻糟藻责贼燥则 噪蚤灶葬泽藻 在藻葬 皂葬赠泽 员藻 原 圆远
栽阅云园圆缘苑葬 允郧园员源猿愿怨 员远园 延伸因子 员 原 茁 渊载孕赃园园圆缘圆猿圆员园援 员冤藻造燥灶早葬贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则 员 原 遭藻贼葬 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 圆藻 原 员圆
栽阅云园圆远缘葬 允郧园员源猿怨圆 员园缘 杂韵砸月陨阅砸粤云栽 假 拟 蛋 白 渊 载孕 赃 园园圆源远猿源圆怨援 员 冤 澡赠责燥贼澡藻贼蚤糟葬造 责则燥贼藻蚤灶杂韵砸月陨阅砸粤云栽 杂燥则早澡怎皂 遭蚤糟燥造燥则 源藻 原 园缘
栽阅云园圆愿怨圆葬 允郧园员源源园愿 圆源远 粤砸云 原 郧栽孕酶激活蛋白 渊载孕赃园园圆缘圆猿员怨园援 员冤粤砸云 郧栽孕葬泽藻 葬糟贼蚤增葬贼燥则 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 员藻 原 圆圆
栽阅云园猿园源圆葬 允郧园员源源员缘 圆园猿 杂藻则 辕 栽澡则蛋白激酶 孕孕运员愿 渊 月粤月园圆苑园愿援 员 冤 泽藻则蚤灶藻 辕 贼澡则藻燥灶蚤灶藻 原 责则燥贼藻蚤灶 噪蚤灶葬泽藻孕孕运员愿 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 源藻 原 园缘
栽阅云园猿园源源葬 允郧园员源源员苑 猿源圆 郧栽孕结合蛋白 渊月粤阅猿缘圆圆园援 员冤郧栽孕 原 遭蚤灶凿蚤灶早 责则燥贼藻蚤灶 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 远藻 原 员圆
栽阅云园猿员员葬 允郧园员源源员怨 员缘猿 无同源序列 灶燥 澡蚤贼 原 原
栽阅云园猿缘猿葬 允郧园员源源圆圆 圆猿怨 琢 原衔接蛋白 渊粤月云怨猿远员园援 员冤葬造责澡葬 原 葬凿葬责贼蚤灶 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 圆藻 原 圆苑
栽阅云园猿缘源葬 允郧园员源源圆猿 圆员苑 果糖 原 员袁 远 原 二磷酸醛缩酶 皂砸晕粤 渊 耘哉怨苑缘缘缘员援 员 冤 云则怎糟贼燥泽藻 原 员袁 远 原遭蚤泽责澡燥泽责澡葬贼藻 葬造凿燥造葬泽藻 在藻葬 皂葬赠泽 圆藻 原 圆源
栽阅云园猿远怨葬 允郧园员源源猿员 圆源苑 热激蛋白 苑园 渊粤悦韵苑员圆愿苑援 员冤澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂 圆藻 原 圆愿
栽阅云园猿苑园葬 允郧园员源源猿圆 员缘员 晕粤阅孕 垣还原酶类似蛋白 渊匝源员园员源援 圆冤 枣藻则则燥凿燥曾蚤灶 晕粤阅孕 燥曾蚤凿燥则藻凿怎糟贼葬泽藻 孕蚤泽怎皂 泽葬贼蚤增怎皂渊孕藻葬冤 愿藻 原 园远
栽阅云园猿愿猿葬 允郧园员源源猿愿 员苑源 转录因子 渊粤阅郧缘愿园苑愿援 员冤 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则 蕴赠糟燥则蚤泽 造燥灶早蚤贼怎遭葬 源藻 原 员猿
栽阅云园猿怨圆葬 允郧园员源源源员 猿源猿 动员蛋白 酝燥遭杂 渊孕圆园园愿远援 员冤酝燥遭蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 责则燥贼藻蚤灶 皂燥遭杂 粤糟蚤凿蚤贼澡蚤燥遭葬糟蚤造造怎泽枣藻则则燥燥曾蚤凿葬灶泽 猿藻 原 员猿
栽阅云园猿怨愿葬 允郧园员源源源源 圆远怨 茁 原微管蛋白 渊粤悦陨园猿猿怨怨援 员冤遭藻贼葬 原 贼怎遭怎造蚤灶 孕则怎灶怎泽 泽葬造蚤糟蚤灶葬 增葬则援糟燥则凿葬贼葬 猿藻 原 猿愿
栽阅云园源园缘葬 允郧园员源源源远 圆猿缘 栽酝杂膜蛋白 渊粤月云怨苑园圆园援 员冤栽酝杂 皂藻皂遭则葬灶藻 枣葬皂蚤造赠 责则燥贼藻蚤灶 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 猿藻 原 员员
栽阅云园源员员葬 允郧园员源源缘园 员远愿 悦怎 辕 在灶 超氧化物歧化酶 渊粤月陨猿源远园苑援 员冤糟燥责责藻则 辕 扎蚤灶糟 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 酝怎泽葬 枣燥则皂燥泽葬灶葬 源藻 原 员源
栽阅云园源远圆葬 允郧园员源源缘苑 圆圆怨 酝藻贼合成酶 渊载孕赃园园圆猿猿愿怨缘源援 员冤 皂藻贼澡蚤燥灶蚤灶藻 泽赠灶贼澡葬泽藻 孕燥责怎造怎泽 贼则蚤糟澡燥糟葬则责葬 源藻 原 园缘
别位点分别由 远 个和 源 个碱基组成曰稀有位点酶应在
每个 糟阅晕粤分子上有 员 个识别位点袁非稀有位点酶在
稀有位点酶识别位点附近有 员 个识别位点袁内切酶应
最大限度地覆盖 皂砸晕粤 池遥 月葬糟澡藻皂 等咱圆暂将 耘糟燥砸 陨尧
月葬皂匀 陨 和 孕泽贼 陨与 栽葬择 陨和 酝泽藻 陨随机组合袁以马铃薯
块茎 糟阅晕粤为底物比较不同组合的酶切效果袁发现各
组合在识别差异表达基因方面具有相同的潜力遥 本试
验采用 耘糟燥砸玉辕酝泽藻玉消化 猿澡袁结果表明 糟阅晕粤酶切充
分袁利用该初级模板能够获得理想的指纹图谱遥 引物
的选择直接影响指纹图谱质量袁为保证指纹图谱条带
的丰富性和多态性袁提高识别差异表达基因的灵敏度袁
本研究从 缘苑远 对引物中筛选了 员员源 对适用于文心兰的
引物遥
栽阅云泽回收尧测序过程中常遇到的问题是回收条带
扩增后可能出现 圆 条或多条产物条带遥 月葬糟澡藻皂 等咱员暂
提出通过在选择性扩增引物 猿忆鄄端添加一个碱基来避
免这种现象遥 本研究通过分别回收各产物条带尧克隆
并测序袁结果发现较短条带包含于较长条带中遥 这说
明目的 栽阅云泽 内部含有 员 至多个与上游或下游引物互
补的序列袁非特异性扩增导致产生多条产物条带袁因
此袁应取扩增产物中较长的序列进行测序遥
猿郾 圆摇 栽阅云泽序列分析
本研 究 获 得 的 栽阅云泽 序 列 中袁 栽阅云园园苑猿葬 和
栽阅云园员猿怨葬为 圆 个花特异表达片段袁其中 栽阅云园园苑猿葬
渊表 员冤 与柑橘 渊悦蚤贼则怎泽 则藻贼蚤糟怎造葬贼葬冤 果实无籽性状相关
的 耘杂栽序列具有 怨源豫同源性遥 果实无籽性状的形成
主要是由于在花未受精情况下子房自行发育膨大袁或
受精后胚的败育导致的咱愿暂 遥 由此推测该 栽阅云 对应的
远源员员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员员袁圆缘渊远冤院员员源圆 耀 员员源苑
基因可能与文心兰子房发育有关遥 栽阅云园员猿怨葬 渊表 员冤
与山字草 渊悦造葬则噪蚤葬 遭则藻憎藻则蚤冤 丁香油酚合成酶具有 苑愿豫
同源性遥 丁香油酚是一种无色或浅黄色油状液体袁有
香味袁存在于植物的花蕾或其他组织中咱怨袁 员园暂 袁被广泛
用于牙科止痛剂咱员员暂和香水制作中遥 推测文心兰丁香
油酚合成酶基因可能与其花中挥发性香味物质的合成
相关遥 栽阅云园员源园葬尧栽阅云园员远缘葬 及 栽阅云园猿缘源葬 等 渊表 员冤
都是与植物体内糖代谢相关基因片段袁可能参与开花
过程中的物质和能量代谢遥 有报道指出袁糖类除作为
能量代谢底物外还可作为信号分子调节植物基因的表
达咱员圆 耀 员源暂 遥 因此推测袁此类糖代谢相关基因还可能参与
花发育过程中糖信号的转移或产生遥 此外袁栽阅云园圆缘缘葬
编码凝集素样受体激酶袁栽阅云园猿园源源葬 编码 郧栽孕 结合蛋
白尧栽阅云园猿缘猿葬编码 琢鄄衔接蛋白袁都是植物信号转导途
径中的成分袁这类基因的大量表达说明花发育涉及大
量的信号转导过程遥 部分 栽阅云泽 编码转录因子和翻译
起始因子尧延伸因子等袁说明花发育过程涉及大量基因
的转录和翻译调控遥
部分 栽阅云泽 与微生物蛋白质片段具有较高同源
性袁如 栽阅云园猿怨圆葬 渊表 员 冤袁 与 氧 化 亚 铁 硫 杆 菌
渊粤糟蚤凿蚤贼澡蚤燥遭葬糟蚤造造怎泽 枣藻则则燥燥曾蚤凿葬灶泽冤 酝燥遭泽 蛋白具有较高同
源性遥 类似现象在其他植物中也有发现袁如 酝燥灶凿藻早燥
等咱员缘暂利用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕技术在拟南芥花芽中发现了 员
个细菌移位酶玉类似基因 渊栽则葬灶泽造燥糟葬泽藻 玉皂则葬 再冤 并
探索了其在拟南芥中的功能遥 推测此类基因可能是文
心兰中的新功能基因遥
源摇 结论
建立了稳定的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析体系院用试剂盒进
行总 砸晕粤 提取尧皂砸晕粤 分离及 糟阅晕粤 双链合成后袁以
耘糟燥砸玉辕酝泽藻玉消化 糟阅晕粤 猿澡袁消化产物加接头后直接
用作预扩增模板袁预扩增产物稀释 员缘 倍作为选择性扩
增模板袁经引物筛选获得了 员员源 对选择性扩增引物袁选
择性扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离袁回收条带
连接 栽鄄载体袁经蓝白筛选挑取阳性克隆进行测序遥
利用 缘怨 对引物进行选择性扩增袁共获得约 员员远园
条 栽阅云泽袁其中 怨愿 条为花芽 渊远苑 条冤 和叶片 渊猿员 条冤
的差异表达条带袁占总条带数的 愿郾 源豫 遥 回收尧克隆
员圆愿 条 栽阅云泽袁测序得到 员园圆 条可读序列遥 序列分析表
明花芽特异表达基因的功能涉及植物生命活动的诸多
领域遥 本研究结果可为进一步研究植物花器官发育相
关基因奠定基础遥
参考文献院
咱 员 暂摇 月葬糟澡藻皂 悦 宰 月袁 增葬灶鄄凿藻则鄄匀燥藻增藻灶 砸 杂袁 凿藻鄄月则怎蚤躁灶 杂 酝袁 灾则藻怎早凿藻灶澡蚤造
阅袁 在葬遭藻葬怎 酝袁 灾蚤泽泽藻则 砸 郧 云援 灾蚤泽怎葬造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 早藻灶藻
藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 怎泽蚤灶早 葬 灶燥增藻造 皂藻贼澡燥凿 燥枣 砸晕粤 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼蚤灶早 遭葬泽藻凿 燥灶
粤云蕴孕咱允暂 援 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 员怨怨远袁 怨渊远冤院苑源缘 原 苑缘猿
咱 圆 暂摇 月葬糟澡藻皂 悦 宰 月袁 韵燥皂藻灶 砸 允 云 允袁 灾蚤泽泽藻则 砸 郧 云援 栽则葬灶泽糟则蚤责贼 陨皂葬早蚤灶早
憎蚤贼澡 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕院 粤 杂贼藻责鄄遭赠鄄杂贼藻责 孕则燥贼燥糟燥造 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则
月蚤燥造燥早赠 砸藻责燥则贼藻则袁 员怨怨愿袁 员远院员缘苑 原 员苑猿
咱 猿 暂摇 允燥灶藻泽 允 栽袁 匀葬则则燥憎藻则 月 耘援 粤 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡藻 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 凿蚤泽责造葬赠 葬灶凿 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕泽 葬泽 贼燥燥造泽 枣燥则 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 藻曾责则藻泽泽藻凿 责葬则葬泽蚤贼藻 早藻灶藻泽咱允暂 援 云怎灶凿葬皂藻灶贼葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿
晕藻皂葬贼燥造燥早赠袁 员怨怨愿袁 圆员渊员冤院愿员 原 愿愿
咱 源 暂摇 郧燥怎责蚤造 孕袁 酝葬澡葬皂燥怎凿 再 杂袁 孕燥怎造葬蚤灶 允袁 宰蚤灶凿藻造泽 阅袁 悦则佴贼佴 孕袁 匀怎泽泽
月袁 砸葬皂遭燥怎则 杂援 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 凿蚤泽责造葬赠 枣燥则 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠
藻曾责则藻泽泽藻凿 早藻灶藻泽 凿怎则蚤灶早 糟澡蚤糟燥则赠 则燥燥贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣
孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园猿袁 员远园院猿园猿 原 猿园怨
咱 缘 暂摇 匀泽怎 栽 宰袁 栽泽葬蚤 宰 悦袁 宰葬灶早 阅 孕袁 蕴蚤灶 杂袁 匀泽蚤葬燥 再 再袁 悦澡藻灶 宰 匀袁
悦澡藻灶 匀 匀援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 遭赠 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕
遭藻贼憎藻藻灶 枣造燥憎藻则 遭怎凿泽 燥枣 孕澡葬造葬藻灶燥责泽蚤泽 匀泽蚤葬灶早 云藻蚤 糟增援 匀援 云援 葬灶凿 蚤贼泽
泽燥皂葬糟造燥灶葬造 增葬则蚤葬灶贼咱允暂 援 孕造葬灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园愿袁 员苑缘院源员缘 原 源圆圆
咱 远 暂摇 李志红袁 唐美玲袁 刘摇 佳援 珠眉海棠 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析体系的建
立咱允暂 援 核农学报袁 圆园园愿袁 圆圆渊缘冤院远园苑 原 远员园
咱 苑 暂摇 唐美玲袁 孔摇 瑾袁 徐维华袁 韩振海援 山葡萄 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 体系的
建立及引物的筛选咱允暂 援 华北农学报袁 圆园园怨袁 圆源渊圆冤院苑怨 原 愿猿
咱 愿 暂摇 祝海燕袁郎德山袁默书霞袁刘艳梅援 植物无籽果实发生机理研究
综述咱允暂 援 河北林果研究袁 圆园园苑袁 圆圆渊猿冤院圆缘怨 原 圆远员
咱 怨 暂摇 赵摇 超袁 杨再波袁 肖利强袁 周摇 欣袁 陈华国袁 胡哓娜援 固相微萃
取技术 辕气相色谱 辕质谱分析水菖蒲挥发性化学成分咱 允暂 援 中华
中医药杂志袁 圆园园怨袁 圆源渊源冤院源远源 原 源远苑
咱员园暂摇 徐夙侠袁黄青云袁 刘鸿洲袁林春松援 三角梅属四个品种花挥发性
组分的 郧悦鄄酝杂分析咱允暂 援 亚热带植物科学袁 圆园员园袁 圆源渊源冤院源远源 原
源远苑
咱员员暂摇 杨振城援 灾蚤贼葬责藻曾 糊粉剂和氧化锌丁香油糊粉剂作为根管充填材
料治疗乳牙根尖周炎的比较研究咱允暂 援 中外医疗袁 圆园员园袁 猿猿院怨缘
咱员圆暂摇 运燥糟澡 运 耘援 悦葬则遭燥澡赠凿则葬贼藻鄄皂燥凿怎造葬贼藻凿 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼泽咱 允暂 援
粤灶灶怎葬造 砸藻增蚤藻憎 燥枣 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠 葬灶凿 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
员怨怨远袁 源苑院怨 原 源园
咱员猿暂摇 杂皂藻藻噪藻灶泽 杂袁 砸燥燥噪 云援 杂怎早葬则 泽藻灶泽蚤灶早 葬灶凿 泽怎早葬则鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 泽蚤早灶葬造
贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 责澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 员怨怨苑袁 员员缘院苑 原 员猿
咱员源暂摇 杂皂藻藻噪藻灶泽 杂援 杂怎早葬则 则藻早怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼泽 咱 允暂 援
悦怎则则藻灶贼 韵责蚤灶蚤燥灶 蚤灶 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 员怨怨愿袁 员院圆猿园 原 圆猿源
咱员缘暂摇 酝燥灶凿藻早燥 允 酝 悦袁 杂蚤皂觛藻泽鄄粤则葬俨躁燥 允 蕴袁 凿藻鄄韵造蚤增藻蚤则葬 阅 耘袁 粤造增藻泽鄄
云藻则则藻蚤则葬 酝援 粤 早藻灶藻 泽蚤皂蚤造葬则 贼燥 遭葬糟贼藻则蚤葬造 贼则葬灶泽造燥糟葬泽藻 玉 渊 皂则葬 再冤
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 蚤泽 藻曾责则藻泽泽藻凿 凿怎则蚤灶早 枣造燥憎藻则 遭怎凿
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬咱允暂 援 孕造葬灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园猿袁 员远源院
猿圆猿 原 猿猿员
渊责任编辑摇 王媛媛冤
苑源员员