为优化辣椒花药培养体系,以13个不同基因型辣椒材料为试材,对影响花药培养的因子:外源激素、碳源(蔗糖、麦芽糖、葡萄糖)、低温预处理、外源有机添加物、活性炭及植株开花时期进行研究。结果表明,所有供试材料均可诱导出胚状体,其中有8个供试材料可获得健壮的再生植株,基因型是限制辣椒花药培养诱导胚状体的关键因素,不同基因型间出胚率不同,其中G201出胚率最高,达到31.76%;在不同外源激素处理中,NAA比IAA更适合辣椒的花药培养,且NAA与KT浓度配比以0.5:1.0效果最佳;不同碳源处理中,30 g ·L-1的蔗糖浓度最适合辣椒花药培养。4)不同预处理中,4℃低温预处理1-3d有利于胚状体的诱导,其中以处理2d时的出胚率最高;有利于胚状体发生的外源添加物为50 μmol ·L-1AgNO3 和 4 g ·L-1活性炭;处于初花期和盛花期的花蕾均可诱导成胚,其中初花期花蕾更适合辣椒花药培养。研究为加快辣椒新品种选育奠定了基础。
全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员源苑员 耀 员源苑愿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园源鄄圆员摇 接受日期院圆园员源鄄员园鄄圆员
基金项目院国家计划支撑计划项目渊圆园员圆月粤阅园圆月园圆冤袁江苏省农业科技自主创新基金项目渊悦载渊员圆冤员园园源冤袁现代农业产业技术体系建设专项资金
渊悦粤砸杂 原 圆缘冤
作者简介院王仲慧袁女袁主要从事辣椒遗传育种研究遥 耘皂葬蚤造院 苑远愿圆源圆员远愿岳 择择援 糟燥皂
通讯作者院刘金兵袁男袁研究员袁主要从事辣椒遗传育种研究遥 耘皂葬蚤造院 员圆苑缘远怨远圆愿园岳 择择援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园愿鄄员源苑员鄄园愿
辣椒花药培养胚状体发生途径影响因子研究
王仲慧员袁圆 摇 刘金兵圆 摇 刁卫平圆 摇 王述彬圆 摇 潘宝贵圆 摇 戈摇 伟圆
渊员 南京农业大学园艺学院袁江苏 南京摇 圆员园园怨缘曰 圆江苏省农业科学院蔬菜研究所 辕
江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室袁江苏 南京摇 圆员园园员源冤
摘摇 要院为优化辣椒花药培养体系袁以 员猿 个不同基因型辣椒材料为试材袁对影响花药培养的因子院外源激
素尧碳源渊蔗糖尧麦芽糖尧葡萄糖冤尧低温预处理尧外源有机添加物尧活性炭及植株开花时期进行研究遥 结
果表明袁所有供试材料均可诱导出胚状体袁其中有 愿 个供试材料可获得健壮的再生植株袁基因型是限制
辣椒花药培养诱导胚状体的关键因素袁不同基因型间出胚率不同袁其中 郧圆园员 出胚率最高袁达到
猿员郾 苑远豫 曰在不同外源激素处理中袁晕粤粤比 陨粤粤更适合辣椒的花药培养袁且 晕粤粤 与 运栽 浓度配比以 园郾 缘颐
员郾 园 效果最佳曰不同碳源处理中袁猿园 早窑蕴 原员的蔗糖浓度最适合辣椒花药培养遥 源冤不同预处理中袁源益低温
预处理 员 原 猿凿有利于胚状体的诱导袁其中以处理 圆凿时的出胚率最高曰有利于胚状体发生的外源添加物
为 缘园 滋皂燥造窑蕴 原员粤早晕韵猿和 源 早窑蕴 原员活性炭曰处于初花期和盛花期的花蕾均可诱导成胚袁其中初花期花蕾更
适合辣椒花药培养遥 研究为加快辣椒新品种选育奠定了基础遥
关键词院辣椒渊悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 蕴冤曰花药培养曰胚状体曰激素曰基因型
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园愿援 员源苑员
摇 摇 辣椒渊悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 蕴援 冤是一种重要的经济作
物袁也是世界上普遍栽培的一种蔬菜作物遥 利用传统
常规育种方法选育稳定自交系袁继而培育优良新品种袁
至少需要花费 缘 耀 远 年的时间遥 相比较常规育种周期
长尧费时费力的缺点袁花药培养可以在短时间内获得纯
系袁进而大大缩短育种周期尧提高育种效率袁节省大量
人力尧物力咱员 原 圆暂 遥
王玉英等咱猿暂和 郧藻燥则早藻等咱源暂于 员怨苑猿 年首次报道了
通过花药培养获得辣椒单倍体植株遥 随后 晕燥增葬噪咱缘暂成
功地通过花药培养获得再生植株遥 之后不少学者在培
养条件尧培养基尧培养技术等方面进行了大量研究袁并
取得了一定的进展咱远 原 员源暂 遥 然而袁目前辣椒花药培养中
还存在愈伤化尧褐化严重袁花药胚状体诱导率低袁再生
植株分化率低等问题袁要想建立一套系统性尧规模化尧
实用化和高效率的培养体系尚有许多问题需要继续深
入研究咱员缘 原 员远暂 遥
本试验在前人研究的基础上袁通过一系列对辣椒
花药培养胚状体诱导的因素以及胚状体诱导成苗技术
的摸索和探讨袁以进一步优化辣椒花药培养体系袁旨在
建立简单尧高效的辣椒花药培养体系遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
供试材料是由江苏省农业科学院蔬菜研究所辣椒
课题组培育的 员猿 个辣椒品系袁其中品系 郧圆园员尧郧圆园圆尧
郧圆园猿尧郧圆园远尧郧圆园苑尧郧圆园愿尧郧圆园怨尧郧圆员园 和 郧圆员员 为牛角
椒袁郧圆园源尧郧圆园缘尧郧圆员圆 和 郧圆员猿 为羊角椒遥 定期去掉植
株上已开放的花和果袁使植株始终处于开花状态遥 采
用常规田间管理遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 培养基摇 激素处理院以 酝杂 为基本培养基袁添
加 猿园 早窑蕴 原员蔗糖袁愿 早窑蕴 原员琼脂袁源 早窑蕴 原员活性炭袁以及不
同浓度的外源激素 远 原 月粤尧晕粤粤尧陨粤粤尧运栽袁责匀 值调至
缘郾 愿遥 激素处理见表 员遥
员苑源员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
表 员摇 外源激素处理
摇 摇 摇 摇 栽葬遭造藻 员摇 耘曾燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 辕 渊皂早窑蕴 原员冤
试验编号
栽藻泽贼 晕燥援
激素 匀燥则灶葬皂藻灶贼
晕粤粤 陨粤粤 运栽 远 原 月粤
晕员 园郾 圆 园郾 园 园郾 缘 园
晕圆 园郾 缘 园郾 园 员郾 园 园郾 园
晕猿 园郾 愿 园郾 园 员郾 缘 园郾 园
陨员 园郾 园 园郾 圆 园郾 缘 园郾 园
陨圆 园郾 园 园郾 缘 员郾 园 园郾 园
陨猿 园郾 园 员郾 园 员郾 缘 园郾 园
月员 园郾 圆 园郾 园 园郾 园 园郾 缘
月圆 园郾 缘 园郾 园 园郾 园 员郾 园
摇 摇 注院培养基为 酝杂 垣蔗糖渊猿园 早窑蕴 原员 冤 垣琼脂渊愿 早窑蕴 原员 冤 垣活性炭渊源
早窑蕴 原员 冤遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 皂藻凿蚤怎皂 蚤泽 酝杂 垣 杂怎糟则燥泽藻渊猿园 早窑蕴 原员 冤 垣 粤早葬则渊愿 早窑蕴 原员 冤 垣
粤糟贼蚤增葬贼藻凿 悦葬则遭燥灶渊源 早窑蕴 原员 冤 援
摇 摇 碳源处理院以 酝杂 为基本培养基袁添加 园郾 缘
皂早窑蕴 原员晕粤粤袁员郾 园 皂早窑蕴 原员运栽袁愿 早窑蕴 原员琼脂袁源 早窑蕴 原员活
性炭袁以及不同浓度的蔗糖尧麦芽糖尧葡萄糖袁责匀 值调
至 缘郾 愿遥 碳源处理见表 圆遥
表 圆摇 碳源处理
栽葬遭造藻 圆摇 栽澡藻 糟葬则遭燥灶 泽燥怎则糟藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼
试验编号 栽藻泽贼 晕燥援 处理浓度 悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊早窑蕴 原员 冤
郧员 员缘
郧圆 猿园
郧猿 源缘
酝员 员园
酝圆 圆园
酝猿 猿园
孕员 员缘
孕圆 猿园
孕猿 源缘
摇 摇 注院培养基为 酝杂 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园 皂早窑蕴 原员 运栽 垣 琼脂 渊愿
早窑蕴 原员 冤 垣活性炭渊源 早窑蕴 原员 冤遥 郧院蔗糖袁酝院麦芽糖袁孕院葡萄糖遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 皂藻凿蚤怎皂 蚤泽 酝杂 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员晕粤粤 垣员郾 园 皂早窑蕴 原员运栽 垣 粤早葬则
渊愿 早窑蕴 原员 冤 垣 粤糟贼蚤增葬贼藻凿 悦葬则遭燥灶渊源 早窑蕴 原员 冤 援 郧院 杂怎糟则燥泽藻袁 酝院 酝葬造贼燥泽藻袁 孕院
郧造怎糟燥泽藻援
摇 摇 外源有机添加物处理院以 酝杂 为基本培养基袁添加
园郾 缘 皂早窑蕴 原员晕粤粤袁员郾 园 皂早窑蕴 原员运栽袁猿园 早窑蕴 原员蔗糖袁愿 早窑
蕴 原员琼脂袁源 早窑蕴 原员活性炭袁以及不同浓度的 灾悦尧粤早晕韵猿袁责匀值调至 缘郾 愿遥 外源物质处理见表 猿遥
摇 摇 活性炭处理院以 酝杂 为基本培养基袁添加 园郾 缘 皂早窑
蕴 原员晕粤粤袁员郾 园 皂早窑蕴 原员运栽袁猿园 早窑蕴 原员蔗糖袁愿 早窑蕴 原员琼脂袁以
及 源尧愿 早窑蕴 原员活性炭袁责匀值调至 缘郾 愿渊表 源冤遥
表 猿摇 外源有机添加物处理
栽葬遭造藻 猿摇 耘曾燥早藻灶燥怎泽 燥则早葬灶蚤糟 葬凿凿蚤贼蚤增藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼
试验编号 栽藻泽贼 晕燥援 处理浓度 悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊滋皂燥造窑蕴 原员 冤
灾员 缘园
灾圆 员园园
粤员 缘园
粤圆 员园园
摇 摇 注院培养基为 酝杂 垣 园郾 缘皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园皂早窑蕴 原员 运栽 垣蔗糖渊猿园早窑
蕴 原员 冤 垣琼脂渊愿早窑蕴 原员 冤 垣活性炭渊源早窑蕴 原员 冤遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 皂藻凿蚤怎皂 蚤泽 酝杂 垣 园郾 缘皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园皂早窑蕴 原员 运栽 垣
杂怎糟则燥泽藻 渊猿园早窑蕴 原员 冤 垣 粤早葬则 渊愿早窑蕴 原员 冤 垣 粤糟贼蚤增葬贼藻凿 悦葬则遭燥灶渊源早窑蕴 原员 冤 援 灾颐
灾糟 援 粤院 粤早晕韵猿 援
表 源摇 活性炭处理
栽葬遭造藻 源摇 粤糟贼蚤增葬贼藻凿 糟葬则遭燥灶 贼则藻葬贼皂藻灶贼
试验编号 栽藻泽贼 晕燥援 处理浓度 悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊早窑蕴 原员 冤
匀员 源
匀圆 愿
摇 摇 注院培养基为 酝杂 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园 皂早窑蕴 原员 运栽 垣 蔗糖渊猿园
早窑蕴 原员 冤 垣琼脂渊愿 早窑蕴 原员 冤遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 皂藻凿蚤怎皂 蚤泽 酝杂 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园 皂早窑蕴 原员 运栽 垣
杂怎糟则燥泽藻 渊猿园 早窑蕴 原员 冤 垣 粤早葬则 渊愿 早窑蕴 原员 冤 援
摇 摇 以上培养基均在 员郾 员噪早窑糟皂 原圆袁员圆员益的蒸汽条件
下高压灭菌 圆园皂蚤灶遥
员郾 圆郾 圆摇 试验设计摇 试验根据以下因素来探究辣椒花
药培养的影响遥 基因型院上述 员猿 份材料在培养基 晕圆渊表 员冤上培养遥 低温预处理院以 郧圆园员尧郧圆员园 为材料袁
在培养基 晕圆渊表 员冤上培养遥 接种前将花蕾放在 源益条
件下预处理 员尧圆尧猿尧源尧缘凿遥 激素处理院以 郧圆园员尧郧圆园猿尧
郧圆员员 为材料袁源益低温预处理 圆凿后在培养基渊表 员冤上
培养遥 碳源处理院以 郧圆园员尧郧圆园源 为材料袁在培养基渊表
圆冤上培养遥 外源添加物处理院以 郧圆员猿尧郧圆园愿尧郧圆园苑 为
材料袁在培养基渊表 猿冤上培养遥 远冤活性炭处理院郧圆园员尧
郧圆园猿 为材料袁接种在培养基渊表 源冤上培养遥 以上处理
均以未处理作为空白对照遥 且每个处理均接种 员缘园 个
花药遥
员郾 圆郾 猿摇 取材尧材料处理及培养方法摇 每天上午 愿院园园 以
前或下午 缘院园园以后从田间摘取生长健壮无病虫害的花
蕾袁花蕾的形态以花瓣与花萼等长或微露出花萼的花蕾
为标准渊此时花药中的小孢子大部分处于单核靠边期冤袁
装入冰盒带回实验室袁放在 源益冰箱中低温预处理 园 耀 缘
凿遥 将经过预处理的花蕾在超净工作台上先用流水冲洗
圆苑源员
摇 愿 期 辣椒花药培养胚状体发生途径影响因子研究
猿园皂蚤灶袁再用 苑缘豫酒精消毒 员园泽袁无菌水冲洗 源次袁然后再
用 缘豫次氯酸钠消毒 愿 皂蚤灶袁最后再用无菌水冲洗 源 次遥
置于无菌滤纸上用消毒后的镊子和解剖刀剥开花蕾袁取
出花药袁注意避免损伤尧损坏花药袁并把花丝去除干净遥
将取出的花药接种于已灭菌的 员园园 皂蕴 的三角瓶中袁每
瓶接种 员缘个遥 接种后随即放入 猿缘益的恒温培养箱中暗
培养 苑凿后袁置于 圆缘益尧光照强度 圆 园园园 造曾尧光照时间 员源 澡
窑凿 原员的培养室进行培养遥
员郾 猿摇 数据统计分析
自花药接种后 员 周观察其污染情况袁及时清除污
染的培养瓶遥 猿园凿 后开始袁每隔 员园凿 调查一次胚状体
发生数遥 出胚率 越出胚数 辕接种花药数渊去除污染的冤
伊 员园园豫 曰出苗率 越出苗数 辕接种花药数渊去除污染的冤
伊 员园园豫 遥
注院粤援 膨大的花药曰 月援 子叶形胚曰 悦援 变绿的幼苗曰 阅援 具有根茎叶的小苗曰 耘尧云援 一个花药长出多个幼苗曰 郧援 胚状体愈伤化曰
匀援 花药先萌发出根曰 陨援萌发出的胚状体子叶肥大遥
晕燥贼藻院粤院 耘曾责藻灶凿藻凿 葬灶贼澡藻则泽援 月院 悦燥贼赠造藻凿燥灶葬则赠 藻皂遭则赠燥蚤凿援 悦院 郧则藻藻灶 泽藻藻凿造蚤灶早泽援 阅院 责造葬灶贼造藻贼泽 憎蚤贼澡 则燥燥贼泽袁 泽贼藻皂 葬灶凿 造藻葬增藻泽援 耘袁云院 酝怎造贼蚤责造藻 泽藻藻凿造蚤灶早泽 摇 摇
藻皂藻则早蚤灶早 枣则燥皂 燥灶藻 葬灶贼澡藻则援 郧院耘皂遭则赠燥蚤凿 糟葬造造怎泽援 匀院粤灶贼澡藻则 枣蚤则泽贼 泽责则燥怎贼 则燥燥贼泽援 陨院 栽澡藻 藻皂遭则赠燥蚤凿 早藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 糟燥贼赠造藻凿燥灶泽 澡赠责藻则贼则燥责澡赠援
图 员摇 胚状体形成和植株再生
云蚤早援 员摇 耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责造葬灶贼造藻贼泽 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 胚状体诱导和植株再生
将处于单核靠边期的花药接种于培养基上袁猿缘益
暗培养 苑凿袁观察到反应的花药体积明显膨大袁大小增
到原来体积的 员 倍 耀 圆 倍袁晶莹剔透中透着淡淡的绿
色渊图 员 原 粤冤遥 而其他花药褐化为黑色袁失去膨大能
力遥 然后将花药置于 圆缘益尧光照强度 圆 园园园 造曾尧光照时
间 员源 澡窑凿 原员的培养室进行培养袁大约 猿 周后袁可观察到
花药开裂处露出白色伸长的结构即胚状体遥 猿 耀 源凿 后
胚状体进一步发育上端露出两片白色子叶袁下端发育
出白色毛状体即胚根渊图 员 原 月冤遥 见光后白色胚状体
逐渐变绿袁进一步发育袁下胚轴伸长袁显现两片子叶
猿苑源员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
渊图 员 原 悦冤遥 之后根系发育袁形成具有根茎叶的再生植
株渊图 员 原 阅冤袁再生植株生长健壮袁根系发达遥 有的在
一个花药上产生多个胚状体袁且一个花药能够不断产
生胚状体袁一直到 远园凿 以后还可以观察到在同一花药
中产生胚状体渊图 员 原 耘尧云冤遥
此外袁有的花粉胚不能正常发育袁逐渐枯萎失去活
力袁有的愈伤组织化渊图 员 原 郧冤袁还有的胚先萌发生根
渊图 员 原 匀冤袁始终未分化出芽袁最后变褐死亡袁有的萌
发出畸形的胚状体如叶片肥大袁最终停止生长渊图 员 原
陨冤遥
圆郾 圆摇 基因型对辣椒花药培养的影响
以 员猿 个辣椒品种为试材袁研究基因型对辣椒花药
培养的影响遥 研究结果表明袁辣椒花药培养胚状体的
诱导与供体植株基因型有密切关系遥 表 圆 表明院供体
基因型不同袁胚状体诱导率相差很大遥 供试的 员猿 个基
因型均有胚状体产生袁但只有 愿 个基因型获得了健壮
幼苗袁且各基因型之间诱导率差异较大遥 其中袁郧圆园员
胚状体平均诱导率最高袁达 猿员郾 苑远豫 袁而 郧圆园怨 仅为
园郾 远苑豫 袁两者差异甚远遥 同时袁观察到基因型 郧圆园员 单
瓶诱导率高达 远远郾 远苑豫 袁成苗率达 远园豫 曰郧圆园猿 单瓶诱
导率达 源园豫 袁出苗率为 圆园豫 曰郧圆园缘 的单瓶诱导率为
猿猿郾 猿猿豫 袁出苗率仅 远郾 远苑豫 遥 表明基因型是影响辣椒
花药胚状体培养的重要因素之一遥
圆郾 猿摇 不同激素处理对辣椒花药培养的影响
以 猿 个不同基因型辣椒为材料袁在 愿 个培养基中
胚状体诱导率和出苗率的影响见表 猿袁表中数据显示
接种在不同激素浓度组合的培养基中同一品种辣椒的
胚状体诱导率不同袁且不同基因型在相同激素浓度培
养基中出胚率也有差异遥 如 郧圆园员 在 晕圆 中的诱导率
为本组试验的最高值袁达到 猿员郾 苑远豫 袁在激素浓度较高
的 晕猿 上诱导率显著降低仅为 苑郾 远源豫 袁而在 陨猿尧月员尧月圆
培养基中诱导率为 园曰郧圆员员 同样在 愿 种培养中 晕圆 上
胚状体诱导率最高为 员圆郾 愿源豫 袁在 月员尧月圆 上诱导率为园曰只有 郧圆园猿 在 愿 种培养基上均可以诱导出胚遥
说明在辣椒花药培养中袁植物生长调节剂种类及
浓度对胚状体诱导有着显著影响袁且与辣椒基因型之
间存在相互关系遥 综上所述袁高浓度的 晕粤粤尧陨粤粤 降
低了胚状体的形成袁生长素中低浓度的 晕粤粤 比 陨粤粤
效果更好袁且 园郾 缘 皂早窑蕴 原员更有利于胚状体的形成曰细
胞分裂素中 运栽的效果比 远 原 月粤 好袁且 员郾 园 皂早窑蕴 原员为
最适浓度遥 因此袁筛选出适合辣椒花药培养胚状体诱
导的最佳激素组合为 晕粤粤颐 运栽 越 园郾 缘颐 员郾 园遥
表 圆摇 基因型对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 早藻灶燥贼赠责藻 燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 燥枣 责藻责责藻则
基因型
郧藻灶燥贼赠责藻
接种花药数
晕燥援 燥枣 葬灶贼澡藻则泽
蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 辕个
出胚数
晕燥援 燥枣 藻皂遭则赠燥蚤凿泽 辕个
出苗数
晕燥援 燥枣 杂藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕个
岀胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
成苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 员缘园 源苑 猿园 猿员郾 苑远葬 圆园郾 圆苑葬
郧圆园圆 员缘园 员怨 园 员圆郾 怨猿遭糟凿 园郾 园园凿
郧圆园猿 员缘园 圆远 怨 员苑郾 缘苑遭 远郾 园愿遭
郧圆园源 员缘园 源 园 圆郾 远苑枣早 园郾 园园 凿
郧圆园缘 员缘园 员愿 缘 员圆郾 园园遭糟凿 猿郾 猿猿遭糟凿
郧圆园远 员缘园 圆 园 员郾 猿源枣早 园郾 园园凿
郧圆园苑 员缘园 苑 园 源郾 远苑藻枣早 园郾 园园凿
郧圆园愿 员缘园 员员 猿 苑郾 猿愿凿藻枣 圆郾 园员糟凿
郧圆园怨 员缘园 员 园 园郾 远苑早 园郾 园园凿
郧圆员园 员缘园 圆员 缘 员源郾 猿愿遭糟 猿郾 源圆遭糟凿
郧圆员员 员缘园 员怨 愿 员圆郾 愿源遭糟凿 缘郾 源员遭
郧圆员圆 员缘园 员园 圆 远郾 怨源凿藻枣早 员郾 猿怨糟凿
郧圆员猿 员缘园 员源 远 怨郾 缘圆糟凿藻 源郾 园愿遭糟
摇 摇 注院 不同小写字母为差异达显著水平渊孕 约 园郾 园缘冤遥 下同遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽皂葬造造 造藻贼贼藻则 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
源苑源员
摇 愿 期 辣椒花药培养胚状体发生途径影响因子研究
表 猿摇 不同激素处理对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 澡燥则皂燥灶藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 责藻责责藻则
试验编号
栽藻泽贼 晕燥援
接种花药数 辕出胚数 辕出苗
晕燥援 燥枣 葬灶贼澡藻则泽 蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 辕 晕燥援 燥枣
耘皂遭则赠燥蚤凿泽 辕 晕燥援 燥枣 杂藻藻凿蚤灶早 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 郧圆园猿 郧圆员员 郧圆园员 郧圆园猿 郧圆员员 郧圆园员 郧圆园猿 郧圆员员
晕员 员缘园 辕 圆猿 辕 源 员源远 辕 愿 辕 员 员源怨 辕 苑 辕 圆 员缘郾 猿猿遭 圆郾 远苑遭糟凿 源郾 苑园遭糟 员郾 猿猿遭糟 园郾 远愿糟 员郾 猿源遭
晕圆 员源愿 辕 源苑 辕 猿园 员源愿 辕 圆远 辕 怨 员源愿 辕 员怨 辕 愿 猿员郾 苑远葬 员苑郾 缘苑葬 员圆郾 愿源葬 圆园郾 圆苑葬 远郾 园愿葬 缘郾 源员葬
晕猿 员源源 辕 员员 辕 园 员源怨 辕 怨 辕 园 员源苑 辕 怨 辕 园 苑郾 远源糟 远郾 园源遭糟 远郾 员圆遭 园郾 园园糟 园郾 园园糟 园郾 园园遭
陨员 员源愿 辕 源 辕 员 员缘园 辕 远 辕 园 员源愿 辕 猿 辕 园 圆郾 苑园凿藻 源郾 园园遭糟凿 圆郾 园猿遭糟凿 园郾 远愿遭糟 园郾 园园糟 园郾 园园遭
陨圆 员缘园 辕 怨 辕 源 员缘园 辕 员猿 辕 圆 员源苑 辕 远 辕 园 远郾 园园糟凿 愿郾 远苑遭 源郾 园愿遭糟凿 圆郾 远苑遭糟 员郾 猿猿糟 园郾 园园遭
陨猿 员源怨 辕 远 辕 园 员源远 辕 员 辕 园 员缘园 辕 圆 辕 园 园郾 园园藻 园郾 远愿凿 员郾 猿猿糟凿 园郾 园园糟 园郾 园园糟 园郾 园园遭
月员 员源苑 辕 员 辕 园 员源苑 辕 缘 辕 员员 员源远 辕 园 辕 园 园郾 远愿藻 猿郾 源园糟凿 园郾 园园凿 园郾 园园糟 园郾 远愿糟 园郾 园园遭
月圆 员缘园 辕 园 辕 园 缘园 辕 圆员 辕 缘 员源怨 辕 园 辕 园 园郾 园园藻 员源郾 园园葬 园郾 园园凿 园郾 园园糟 猿郾 猿猿遭 园郾 园园遭
圆郾 源摇 不同碳源处理对辣椒花药培养的影响
本试验通过对 圆 个不同辣椒品种在 怨 种不同蔗
糖尧麦芽糖尧葡萄糖的配比的培养基上进行胚状体诱
导率研究袁结果表明袁不同碳源以及不同浓度对辣椒
花药胚状体诱导率有明显的影响渊表 源冤遥 猿 种碳源
处理中 郧圆园员尧郧圆园源 在蔗糖和麦芽糖处理中均能诱导
出胚状体袁但在麦芽糖中两者出苗率却远不如蔗糖袁
且胚状体后期愈伤化较为严重曰圆 种基因型在葡萄糖
处理中出胚率均较低袁郧圆园源 诱导率为 园遥 而且 圆 种
基因型均在蔗糖处理中表现最好袁且当蔗糖为 猿园 早窑
蕴 原员时袁形成胚状体的频率最高袁各为 猿员郾 苑远豫 尧
圆郾 远苑豫 遥 由此可见袁猿园 早窑蕴 原员的蔗糖为辣椒花药培养
胚状体诱导的最佳碳源遥
表 源摇 不同碳源处理对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 源摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟葬则遭燥灶 泽燥怎则糟藻泽
贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 责藻责责藻则
试验编号
栽藻泽贼 晕燥援
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 郧圆园源 郧圆园员 郧圆园源
郧员 员圆郾 远苑遭 园郾 远愿遭 圆郾 园园遭 园郾 远愿葬遭
郧圆 猿员郾 苑远葬 圆郾 远苑葬 怨郾 源远葬 园郾 园园遭
郧猿 愿郾 园缘遭糟 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
酝员 苑郾 猿猿糟 园郾 远苑遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
酝圆 员猿郾 猿猿遭 员郾 猿猿遭 园郾 远苑遭 园郾 园园遭
酝猿 源郾 园猿凿 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
孕员 园郾 远愿凿藻 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
孕圆 猿郾 猿远凿藻 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
孕猿 园郾 园园藻 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
圆郾 缘摇 低温预处理对辣椒花药培养的影响
由表 缘 可见袁在接种前对花蕾进行 源益低温预处
理可以提高辣椒花药培养胚状体的诱导率袁且胚状体
诱导率随处理时间的增加呈先上升后下降的变化趋
势遥 郧圆园员尧郧圆员园 在 源益低温预处理 员尧圆 和 猿凿 时获得
了胚状体袁都比未经处理对照组的诱导率高遥 其中以
源益低温预处理 圆凿效果最好袁出胚率最高袁处理 猿凿 后
的出胚率显著下降袁未能获得胚状体遥 由此说明对花
蕾进行一定时间的低温预处理是必要的袁且以处理 圆凿
效果最佳遥
表 缘摇 低温预处理对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 缘摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻
责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 责藻责责藻则
处理时间
栽蚤皂藻 辕 凿
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 郧圆员园 郧圆园员 郧圆员园
园 园郾 远愿糟 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
员 缘郾 猿猿遭 员郾 猿缘葬 园郾 远苑遭 园郾 园园遭
圆 猿员郾 苑远葬 员源郾 猿愿遭 怨郾 源远葬 猿郾 源圆葬
猿 员郾 猿源遭糟 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
源 园郾 园园糟 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
缘 园郾 园园糟 园郾 园园遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
圆郾 远摇 不同外源添加物对花药培养的影响
在辣椒花药培养中添加 粤早晕韵猿尧灾悦能有效减轻花
药培养中组织的褐化程度袁从而提高胚状体诱导率遥
由表 远 可见袁郧圆园愿尧郧圆园苑 在添加外源物 粤早晕韵猿尧灾悦的
处理中均可获得胚状体袁且胚状体诱导率随着外源添
缘苑源员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
加物浓度的增加而提高袁在 粤早晕韵猿尧灾悦浓度达到 缘园
滋皂燥造窑蕴 原员时袁诱导率达到最大曰此后袁随着浓度的增
加袁诱导率则呈下降趋势遥 此外袁在添加 灾悦的处理中
无论高浓度还是低浓度袁圆 种基因型出胚率都不如对
照组袁而在添加 粤早晕韵猿 的处理中袁两者在 缘园 滋皂燥造窑蕴 原员
处理中的出胚率均明显高于对照组遥 所以袁最适合辣
椒花药培养的外源添加物为 粤早晕韵猿袁且最适浓度为 缘园
滋皂燥造窑蕴 原员遥
表 远摇 不同外源添加物对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 远摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 藻曾燥早藻灶燥怎泽 葬凿凿蚤贼蚤增藻泽
燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 责藻责责藻则
试验编号
栽藻泽贼 晕燥援
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园愿 郧圆园苑 郧圆园愿 郧圆园苑
悦运 苑郾 猿愿葬遭 源郾 远苑葬遭 圆郾 园员葬遭 园郾 园园遭
灾员 缘郾 源源遭糟 源郾 园园遭 园郾 远愿葬遭 园郾 园园遭
灾圆 圆郾 园员糟 圆郾 园员遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
粤员 员园郾 园园葬 远郾 愿园葬 猿郾 猿猿葬 员郾 猿远葬
粤圆 源郾 苑园遭糟 圆郾 苑园遭 园郾 远苑遭 园郾 园园遭
圆郾 苑摇 活性炭对辣椒花药培养的影响
活性炭有较强的吸附作用袁可以吸附组织培养中
的有害物质袁且抑制培养中愈伤组织的发生袁有利于胚
状体的发生袁从而提高胚状体诱导率遥 活性炭对
郧圆园员尧郧圆园猿 圆 个材料花药培养的影响结果见表 苑遥 在
添加低浓度渊源 早窑蕴 原员 冤的活性炭培养基 匀员 中袁郧圆园员尧郧圆园猿 均明显优于对照组袁但是较高浓度的活性炭并不
能提高或者很大程度提高胚状体的诱导率袁在活性炭
浓度为 愿 早窑蕴 原员的 匀圆 培养基中袁郧圆园猿 甚至没有胚状体
产生遥 可见袁低浓度的活性炭渊源 早窑蕴 原员冤对提高辣椒胚
状体诱导率有较好的促进作用袁但高浓度的诱导率反
而下降遥
表 苑摇 活性炭对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 苑摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 葬糟贼蚤增葬贼藻凿 糟澡葬则糟燥葬造 燥灶
葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 燥枣 责藻责责藻则
试验编号
栽藻泽贼 晕燥援
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 郧圆园猿 郧圆园员 郧圆园猿
悦运 苑郾 源愿遭 源郾 苑远遭 员郾 猿远遭 园郾 远愿遭
匀员 猿员郾 苑远葬 员苑郾 缘苑葬 圆园郾 圆苑葬 远郾 园愿葬
匀圆 苑郾 猿猿遭 源郾 园缘遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
圆郾 愿摇 植物开花时期对辣椒花药培养的影响
分别取初花期 渊源郾 圆园 耀 缘郾 圆园冤尧盛花期 渊缘郾 圆园 耀
远郾 圆园冤尧末花期渊远郾 圆园 耀 苑郾 圆园冤猿 个时期的花蕾接种在
晕圆 培养基中袁胚状体诱导率见表 愿遥 结果表明袁圆 份供
试材料在各个时期均能诱导出胚状体袁但两者均在初
花期的出胚率最高袁而盛花期和末花期的诱导率显著
降低且末花期时的胚状体均为畸形胚不能继续生长遥
可见袁最适合做辣椒花药培养的时期为初花期遥
表 愿摇 植物开花时期对辣椒花药培养的影响
栽葬遭造藻 愿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 责造葬灶贼泽 枣造燥憎藻则蚤灶早 责藻则蚤燥凿
燥灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 燥枣 责藻责责藻则
开花时期
云造燥憎藻则蚤灶早 责藻则蚤燥凿
出胚率
耘皂遭则赠燥蚤凿 枣燥则皂葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 豫
出苗率
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻藻凿蚤灶早
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 辕 豫
郧圆园员 郧圆员猿 郧圆园员 郧圆员猿
初花期
耘葬则造赠鄄遭造燥燥皂 泽贼葬早藻
猿员郾 苑远葬 怨郾 缘圆葬 圆园郾 圆苑葬 源郾 园愿葬
盛花期
云怎造造鄄遭造燥燥皂 泽贼葬早藻
愿郾 远苑遭 源郾 园缘遭 圆郾 园园遭 园郾 远愿遭
末花期
蕴葬泽贼鄄遭造燥燥皂 泽贼葬早藻
园郾 苑员遭 员郾 源圆遭 园郾 园园遭 园郾 园园遭
猿摇 讨论
前人研究认为袁基因型决定了出胚率咱员园 原 员员暂 遥 本试
验中相同培养条件下袁不同辣椒基因型出胚率差别很
大袁如 郧圆园员 的出胚率为 猿员郾 苑远豫 袁而 郧圆园怨 出胚率仅为
园郾 远苑豫 袁此结果与前人研究一致遥
激素是花药培养中显著影响花药胚状体发生的因
素袁培养基中加入激素可以提高胚状体的诱导率遥 王
玉英等咱员苑暂研究表明高浓度的 圆袁源 原 阅尧晕粤粤 促进了愈
伤组织的形成而降低了胚状体的形成袁生长素中袁低浓
度的 圆袁源 原 阅效果不佳袁而只有低浓度 晕粤粤尧陨粤粤 的条
件下袁才有利于胚状体的形成袁采用 园郾 缘 皂早窑蕴 原员晕粤粤尧
员 皂早窑蕴 原员的 运栽尧员 皂早窑蕴 原员的 远 原 月粤 可提高花药的成
胚率遥 张子君等咱远暂报道袁园郾 缘 皂早窑蕴 原员为 圆袁源 原 阅袁运栽和
远 原 月粤的最适浓度袁在与 圆袁源 原 阅 的组合中袁运栽 的效
果优于 远 原 月粤遥 孙少霞等咱员愿暂和戈伟等咱员怨暂研究均表明
园郾 缘 皂早窑蕴 原员晕粤粤和 员 皂早窑蕴 原员的 运栽最适合辣椒花药培
养遥 而本试验证实院低浓度的外源激素有利于胚状体
发生袁且生长素 晕粤粤效果优于 陨粤粤袁细胞分裂素 运栽优
于 远 原 月粤袁且 园郾 缘 皂早窑蕴 原员晕粤粤 垣员郾 园 皂早窑蕴 原员运栽的效果
最佳遥
远苑源员
摇 愿 期 辣椒花药培养胚状体发生途径影响因子研究
糖是植物组织培养必不可少的碳源袁主要起到提
供细胞生长能量尧维持培养基渗透压和构成细胞骨架
的作用遥 在花药组织培养中最早使用的碳源是蔗糖袁
至今其仍被广泛使用遥 阅怎皂葬泽等咱苑暂在辣椒花药培养时
采用了 猿豫的蔗糖浓度遥 同样袁李春玲等咱员员暂也采用
猿豫的蔗糖浓度袁并发现随蔗糖浓度递增袁胚状体发生
率递减遥 本试验对麦芽糖尧蔗糖尧葡萄糖不同浓度使用
进行分析袁得出 猿园 早窑蕴 原员蔗糖的效果优于麦芽糖和葡
萄糖遥 本研究结果与 阅怎皂葬泽 等咱苑暂和李春玲等咱员员暂等研
究结果一致遥
多数学者为了提高花药出胚率袁往往需对花药进
行预处理遥 刘广霞等咱圆园暂 尧庄军平等咱愿暂和 杂怎责藻灶葬 等咱圆员暂
分别采用 源益预处理花蕾袁都不同程度促进了胚状体
的诱导率遥 杨博智等咱圆圆暂认为低温处理 圆 耀 源凿 效果最
好袁处理时间并不是越久越好袁其原因是因为花蕾被采
摘下来时间过长袁导致一些酶类失活袁细胞中所需物质
减少袁不利于生长发育遥 本试验在 源益低温下进行 员 耀
缘凿的处理袁发现 源益处理 圆凿 效果最佳袁这与前人研究
结果相似遥
向培养基中加入 粤早晕韵猿 和 灾糟 都能减轻花药褐
化袁提高花药培养胚状体诱导率遥 王立浩等咱圆猿暂报道指
出袁在辣椒的花药培养中袁粤早晕韵猿尧灾糟 同样能够有效地
减轻褐化袁促进愈伤组织的生成袁提高胚状体的发生
率袁粤早晕韵猿 浓度为 缘园尧员园园 滋皂燥造窑蕴 原员时都是适合的曰灾悦
最适浓度为 缘园 滋皂燥造窑蕴 原员袁高于此浓度袁胚的诱导率反
而有所下降遥 本试验中发现 灾悦对出胚率的影响不如
粤早晕韵猿袁但两者的最适浓度均为 缘园 滋皂燥造窑蕴 原员遥
大多数研究者都认为活性炭的添加对于提高胚状
体诱导率是有益的遥 李春玲等咱员员暂认为在培养基中加
入 缘 早窑蕴 原员的活性炭能明显提高辣椒胚状体的诱导率
和成苗率袁且加入活性炭有极明显地抑制体细胞形成
愈伤组织的作用遥 陈晓等咱圆源暂认为仅添加 圆郾 缘 早窑蕴 原员浓
度的活性炭对于辣椒胚状体的诱导已经足够遥 砸葬皂燥灶
等咱员远暂认为添加活性炭虽然提高了胚的发生率袁但是不
正常胚的数目增多遥 本试验结果认为活性炭含量为 源
早窑蕴 原员时胚状体诱导的效果最好袁与前人研究相似遥 这
一现象的产生可能是由于使用的活性炭颗粒大小不
同袁其吸附能力也相应发生改变曰也有可能是由于对于
基因型不同的辣椒品种袁添加活性炭后的效果不
同咱圆缘暂 遥
目前为止袁尽管辣椒花药培养研究已有大量的报
道袁但依然存在许多问题袁如胚状体诱导率以及出苗率
低袁混倍现象严重尧白化苗和污染率高等遥 因此今后的
研究内容应集中在开发新的花药培养方案袁优化花药
培养条件等方面袁最大程度的提高花药培养的诱导率遥
源摇 结论
综上所述袁本试验筛选出辣椒花药培养胚状体诱
导的最佳培养基为 酝杂 垣 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 晕粤粤 垣 员郾 园
皂早窑蕴 原员 运栽 垣 猿园 早窑蕴 原员蔗糖 垣 源 早窑蕴 原员活性炭 垣 缘园
滋皂燥造窑蕴 原员粤早晕韵猿 垣 愿 早窑蕴 原员琼脂袁在此培养基上培养可
以显著提高胚状体诱导率并促进植株再生遥
参考文献院
咱 员 暂摇 王延玲袁 丰震袁 赵兰勇援 植物花药培养研究进展咱 允暂 援 山东农业
大学学报院自然科学版袁 圆园园远袁 猿苑渊员冤院 员源怨 原 员缘员
咱 圆 暂摇 成研袁 马蓉丽袁 焦彦生袁 吴海涛援 辣椒花药培养研究进展咱 允暂 援
中国农学通报袁 圆园员圆袁 圆愿渊圆圆冤院 员员猿 原 员员愿
咱 猿 暂摇 王玉英袁 孙敬三袁 王敬驹袁 钱南芬援 小黑麦渊栽则蚤贼蚤糟葬造藻冤和辣椒
渊悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 蕴冤花粉植株的诱导咱允暂 援 中国科学袁 员怨苑猿袁 员院
员园源 原 员园苑
咱 源 暂摇 郧藻燥则早藻 蕴袁 晕葬则葬赠葬灶葬泽憎葬皂赠 杂援 匀葬责造燥蚤凿 悦葬责泽蚤糟怎皂 贼澡则燥怎早澡 藻曾责藻则蚤鄄
皂藻灶贼葬造 葬灶凿则燥早藻灶藻泽蚤泽咱允暂 援 孕则燥贼燥责造葬泽皂葬袁 员怨苑猿袁 苑愿院 源远苑 原 源苑园
咱 缘 暂摇 晕燥增葬噪 云 允援 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 葬 澡葬责造燥蚤凿 糟葬造造怎泽 蚤灶 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻泽 燥枣
悦葬责泽糟蚤糟怎皂 泽责责咱允暂 援 在藻蚤贼泽糟澡则蚤枣贼 枣怎则 孕枣造葬灶扎藻灶怎糟澡贼早袁 员怨苑源袁 苑圆渊员冤院 源远
原 缘源
咱 远 暂摇 张子君袁徐矿红袁田云袁吴振红援 辣椒花药培养诱导胚状体成苗
咱允暂 援 辽宁农业科学袁 圆园园园袁渊源冤院 源猿 原 源缘
咱 苑 暂摇 阅怎皂葬泽 凿藻 灾 砸袁 悦澡葬皂遭燥灶灶藻贼 阅袁 孕燥糟澡葬则凿 耘援 陨灶 增蚤贼则燥 糟怎造贼怎则藻 燥枣
责藻责责藻则 渊悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 蕴援 冤 葬灶贼澡藻则泽院 澡蚤早澡 则葬贼藻 责造葬灶贼 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶
枣则燥皂 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 早藻灶燥贼赠责藻泽 遭赠 垣 猿缘益 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 咱 允暂 援 粤早则燥灶燥皂蚤藻袁
员怨愿员袁 员渊员园冤院 愿缘怨 原 愿远源
咱 愿 暂摇 庄军平袁 巩振辉袁 苏菁援 温度对辣椒花药愈伤组织形成的影响
咱允暂 援 西北农业学报袁 圆园园员袁 员园渊圆冤院 源怨 原 缘员
咱 怨 暂摇 运葬则泽葬蚤 陨袁 月藻凿燥 在袁 匀葬赠藻泽 孕 酝援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 责匀 葬灶凿
皂葬造贼燥泽藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥灶 蚤灶 增蚤贼则燥 葬灶凿则燥早藻灶藻泽蚤泽 燥枣 澡藻曾葬责造燥蚤凿 憎蚤灶贼藻则
贼则蚤贼蚤糟葬造藻 葬灶凿 憎澡藻葬贼咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 栽蚤泽泽怎藻 葬灶凿 韵则早葬灶 悦怎造贼怎则藻袁 员怨怨源袁
猿怨渊员冤院 源怨 原 缘猿
咱员园暂摇 张菊平袁 巩振辉袁 刘珂珂袁 黄炜袁 李大伟援 辣椒小孢子发育时期
与花器形态的相关性咱 允暂 援 西北农林科技大学学报院自然科学
版袁 圆园园苑袁 猿缘渊猿冤院 员缘猿 原 员缘愿
咱员员暂摇 李春玲袁 蒋仲仁援 对甜椒花药培养中一些影响因素的研究咱 允暂 援
中国蔬菜袁 员怨愿猿袁渊圆冤院 猿缘 原 猿苑
咱员圆暂摇 龚明霞袁 何铁光袁 董文斌袁 赵坤袁 王益奎袁 王日升袁 康德贤援 辣
椒花药培养影响因素的研究咱 允暂 援 长江蔬菜袁 圆园员猿袁渊圆圆冤院 员怨 原
圆圆
咱员猿暂摇 黄亚杰袁李素文袁肖瑜袁高素燕袁张斌援 辣椒花药培养的初步研究
咱允暂 援 河南农业科学袁 圆园员源袁 源猿渊苑冤院 员员圆 原 员员缘
咱员源暂摇 付文婷袁 韩世玉袁 邢丹袁 廖芳芳袁 苏丹袁 张爱民袁 蓬桂华袁 何建
文援 不同培养基及采花期对辣椒花药培养的影响咱允暂 援 河南农业
科学袁 圆园员源袁 源猿渊员园冤院 愿猿 原 愿远
咱员缘暂摇 酝蚤贼赠噪燥 允袁 粤灶凿则葬泽枣葬造增赠 粤袁 悦泽蚤造造藻则赠 郧袁 云葬则蚤 酝援 粤灶贼澡藻则鄄糟怎造贼怎则藻
则藻泽责燥灶泽藻 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 早藻灶燥贼赠责藻泽 葬灶凿 云员 澡赠遭则蚤凿泽 燥枣 责藻责责藻则 渊悦葬责泽蚤糟怎皂
苑苑源员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员源苑员 耀 员源苑愿
葬灶灶怎怎皂 蕴援 冤咱允暂 援 孕造葬灶贼 月则藻藻凿蚤灶早袁 员怨怨缘袁 员员源渊员冤院 苑愿 原 愿园
咱员远暂摇 砸葬皂燥灶 阅 杂袁 耘造蚤泽葬遭藻贼 悦袁 粤早怎泽贼蚤灶 匀援 粤灶凿则燥早藻灶藻泽蚤泽 蚤灶 悦葬责泽蚤糟怎皂
葬灶灶怎怎皂 蕴援 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 糟葬则遭燥澡赠凿则葬贼藻 葬灶凿 糟葬则遭燥灶 凿蚤燥曾蚤凿藻 藻灶则蚤糟澡皂藻灶贼
咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 贼澡藻 粤皂藻则蚤糟葬灶 杂燥糟蚤藻贼赠 枣燥则 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁
员怨怨苑袁 员圆圆渊源冤院 源远愿 原 源苑缘
咱员苑暂摇 王玉英袁 李春玲袁蒋钟仁援 辣椒和甜椒花药培养的新进展援 园艺
学报咱允暂袁 员怨愿员袁 愿渊圆冤院 源员 原 源缘
咱员愿暂摇 孙少霞袁 戈伟袁 王述彬袁 刘金兵袁 潘宝贵袁 刁卫平援 甜渊辣冤椒花
药培养胚状体诱导与植株再生咱 允暂 援 江苏农业学报袁 圆园园怨袁 圆缘
渊远冤院 员猿猿园 原 员猿猿源
咱员怨暂摇 戈伟袁 王述彬袁 刘金兵袁 潘宝贵袁 刁卫平援 辣椒花药培养中关键
影响因子的研究咱允暂 援 江苏农业科学袁 圆园员员袁 猿怨渊缘冤院 圆苑 原 圆愿
咱圆园暂摇 刘广霞袁 张晓伟袁 蒋武生袁 原玉香袁 姚秋菊援 温度及培养基中添
加物对辣椒花药培养胚状体诱导的影响咱 允暂 援 河南农业科学袁
圆园园渊缘冤院 怨苑 原 员园园
咱圆员暂摇 杂怎责藻灶葬 耘 阅袁 杂怎澡葬则泽燥灶燥 杂袁 允葬糟燥遭泽藻灶 耘袁 悦怎泽贼藻则泽 允 月援 杂怎糟糟藻泽泽枣怎造
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 葬 泽澡藻凿 皂蚤糟则燥泽责燥则藻 糟怎造贼怎则藻 责则燥贼燥糟燥造 枣燥则 凿燥怎遭造藻凿
澡葬责造燥蚤凿 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 蚤灶 陨灶凿燥灶藻泽蚤葬灶 澡燥贼 责藻责责藻则 渊 悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂
蕴援 冤 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责燥则贼泽袁 圆园园远袁 圆缘渊员冤院 员 原 员园
咱圆圆暂摇 杨博智袁 周书栋袁 张竹青袁 戴雄泽袁 李立恒袁 谢达平援 不同培养
基和激素对辣椒花药培养的影响咱允暂 援 湖南农业大学学报院自然
科学版袁 圆园园怨袁 猿缘渊员冤院 远员 原 远源
咱圆猿暂摇 王立浩袁 张宝玺袁 郭家珍袁 杨桂梅袁 堵玫珍援 辣椒花药培养中若
干影响因素的研究咱允暂 援 园艺学报袁 圆园园源袁 猿员渊圆冤院 员怨怨 原 圆园源
咱圆源暂摇 陈晓袁 詹玉丝袁 齐卫强援 建立辣椒 阅匀 纯系中花药培养的研究
咱允暂 援 辣椒杂志袁 圆园园猿袁渊圆冤院 员猿 原 员缘
咱圆缘暂摇 卜学贤袁 陈维伦援 活性炭对培养基中植物生长调节物质的吸附
作用咱允暂 援 植物生理学报袁 员怨愿愿袁 员源渊源冤院 源园员 原 源园缘
砸藻泽藻葬则糟澡 燥枣 云葬糟贼燥则泽 粤枣枣葬糟贼蚤灶早 耘皂遭则燥蚤凿早藻灶藻泽蚤泽 蚤灶
孕藻责责藻则 遭赠 粤灶贼澡藻则 悦怎造贼怎则藻
宰粤晕郧 在澡燥灶早澡怎蚤员袁圆 摇 蕴陨哉 允蚤灶遭蚤灶早圆 摇 阅陨粤韵 宰藻蚤责蚤灶早圆 摇 宰粤晕郧 杂澡怎遭蚤灶圆 摇 孕粤晕 月葬燥早怎蚤圆 摇 郧耘 宰藻蚤圆
渊员悦燥造造藻早藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁晕葬灶躁蚤灶早袁 允蚤灶早泽怎摇 圆员园园怨缘曰
圆 允蚤葬灶早泽怎 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 枣燥则 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 悦则燥责 郧藻灶藻贼蚤糟 陨皂责则燥则藻皂藻灶贼 辕
陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 灾藻早藻贼葬遭造藻 悦则燥责泽袁允蚤葬灶早泽怎 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁晕葬灶躁蚤灶早袁 允蚤葬灶早泽怎摇 圆员园园员源冤
粤遭泽贼则葬糟贼院陨灶 燥则凿藻则 贼燥 藻泽贼葬遭造蚤泽澡 贼澡藻 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 泽赠泽贼藻皂袁 贼蚤则贼藻藻灶 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥枣 责藻责责藻则 憎藻则藻 怎泽藻凿 贼燥 泽贼怎凿赠 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣
藻曾燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽袁 糟葬则遭燥灶 渊泽怎糟则燥泽藻袁 皂葬造贼燥泽藻袁 早造怎糟燥泽藻冤袁 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼袁 藻曾燥早藻灶燥怎泽 燥则早葬灶蚤糟 葬凿凿蚤贼蚤增藻泽袁
葬糟贼蚤增葬贼藻凿 糟葬则遭燥灶 葬灶凿 责造葬灶贼泽 枣造燥憎藻则蚤灶早 责藻则蚤燥凿 藻贼糟援 燥灶 贼澡藻 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 悦葬责泽蚤糟怎皂 葬灶灶怎怎皂 蕴援 栽澡藻 泽贼怎凿蚤藻泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼院
粤造造 贼藻泽贼 皂葬贼藻则蚤葬造 糟葬灶 蚤灶凿怎糟藻 泽燥皂葬贼蚤糟 藻皂遭则赠燥泽袁 葬灶凿 增蚤早燥则燥怎泽 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 责造葬灶贼造藻贼泽 憎藻则藻 燥遭贼葬蚤灶藻凿 枣则燥皂 藻蚤早澡贼 贼藻泽贼 皂葬贼藻则蚤葬造泽援
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则葬贼藻泽袁 憎澡蚤糟澡 耶郧圆园员爷 燥枣 贼澡藻 藻皂遭则赠燥泽 憎葬泽 澡蚤早澡藻泽贼 则葬贼藻袁 则藻葬糟澡藻凿 猿员郾 苑远豫 援 栽澡藻 增葬则蚤燥怎泽 藻曾燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼
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