全 文 ：　 核 农 学 报　 ２０１３，２７（１１）：１７０９ ～ １７１６
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
收稿日期：２０１２⁃１２⁃１１　 接受日期：２０１３⁃０４⁃０９
基金项目：河北省自然科学基金资助项目（Ｃ２０１０００１５２３），河北省重点基础研究项目（０９９６０９１２ Ｄ），河北省科技支撑计划项目（０９２３１００５ Ｄ）
作者简介：曹会凯，男，主要从事天然产物化学研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｃｈｋｔｘｚｈｅ＠ １６３． ｃｏｍ
通讯作者：杨越冬，女，教授，主要从事天然产物化学研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｔｒｕｅｙｅｏｍａｎ＠ １６３． ｃｏｍ
文章编号：１０００⁃８５５１（２０１３）１１⁃１７０９⁃０８
加压溶剂萃取法提取山楂中黄酮物质的工艺研究
曹会凯　 杜　 彬　 王同坤　 杨越冬
（河北科技师范学院，河北省板栗工程技术研究中心， 河北 秦皇岛　 ０６６００４）
摘　 要：为优化加压溶剂萃取方法提取山楂总黄酮的工艺，采用单因素和正交试验，考察了提取温度，提
取时间，循环次数，乙醇浓度对山楂中黄酮提取效果的影响。 研究表明：加压溶剂萃取方法提取山楂黄
酮的最佳工艺条件为提取温度 ８０℃，提取时间 ５ｍｉｎ，循环 ３ 次，乙醇浓度 ５０％ 。 在该条件下山楂黄酮最
高提取率为 ４􀆰 ９９％ ，相对标准偏差为 １􀆰 ０１％ 。 加压溶剂萃取方法提取率明显高于超临界提取法和微波
提取法，该方法所用试剂少，提取时间短，提取率高，用于黄酮等天然产物提取的前景广阔。
关键词：山楂；加压溶剂萃取；总黄酮；正交试验
　 　 山 楂 （ Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄｅ Ｂｇｅ ） 为 蔷 薇 科
（Ｒｏｓａｃｅａｅ）山楂属植物山里红的成熟果实，可药食两
用，在我国资源丰富。 《本草纲目》记载本品“酸甘微
温，消食积，补脾”。 山楂性温、味酸，具有消食化积、
活血化瘀之功效，临床主要将其干燥果实用于食积、妇
女产后瘀阻腹痛、疝气、小儿痘疹等。 对山楂化学成分
的研究始于 １９２１ 年，２０ 世纪 ５０ 年代以前的研究，多
集中在其所含的纤维素、鞣质、三萜类等成分，５０ 年代
以后随着黄酮类化合物的迅速发展，发现黄酮类成分
对心血管系统有明显的药理作用［１ － ７］，更有研究表明
山楂黄酮对辐射肉糜脂肪有抗氧化作用［８］，研究重点
转向黄酮类成分。 到目前为止，从山楂（果肉、核及
叶）中发现且分离得到的物质有 １５０ 多种，其中主要
有黄酮类、低聚黄烷类、有机酸类，另外还含有三萜类、
甾体类和有机胺类等［９］。
目前，常用的提取植物黄酮的方法主要有水煎煮、
乙醇回流、超声提取［１０］、索氏提取、微波提取［１１］、超临
界提取［１２ － １３］、酶辅助提取［１４］。 这些方法存在着提取
时间长、提取率低、能耗高等缺点。 加压溶剂萃取技术
是新兴的天然药物有效成分提取技术［１５ － １７］，有萃取效
率高、自动化程度高、溶剂消耗量小等优点，已进入美
国环保署（ＥＰＡ）标准方法，标准方法编号 ３５４５［１８］，受
到科研工作者的极大关注，在环境监测、药物分析、食
品和聚合物工业等领域得到广泛应用。 本试验采用加
压溶剂萃取方法，进行山楂黄酮的提取，并与超临界提
取和微波提取方法进行了比较，建立了一种山楂中黄
酮类化合物提取的新工艺。
１　 材料与方法
１􀆰 １　 材料
山楂果实采自河北科技师范学院园艺试验站基
地，采摘后去核，进行低温干燥，用粉碎机粉碎。 装入
密封袋，放入干燥器中备用。 对照品芦丁 （ ＵＶ≥
９９％ ），购于中国药品生物制品检定所。 其它试剂均
为分析纯。
１􀆰 ２　 设备
ＡＰＬＥ －３０００ 全自动加压溶剂萃取仪（北京吉天
仪器有限公司），ＳＦ － ２ 型超临界 ＣＯ２ 流体萃取仪（美
国应用分离公司），Ｊｓｐ － ２００ 金穗高速多功能粉碎机
（浙江省永康市金穗机制造厂），ＪＡ２００３Ｎ 电子天平
（上海精密科学有限公司），Ｇ８０Ｗ２３ＹＣＳＬ⁃Ｑ３ 格兰仕
微波炉（广东格兰仕集团有限公司），Ｎ － １１００ 旋转蒸
发仪（东京理化器械株式会社），７２２Ｓ可见分光光度计
（上海精密科学仪器有限公司），ＹＬＡ － ２０００ 电热恒温
鼓风干燥箱（黄山市恒丰医疗器械有限公司）。
１􀆰 ３　 试验方法
１􀆰 ３􀆰 １　 加压溶剂萃取法提取山楂黄酮的操作要点　
９０７１
核　 农　 学　 报 ２７ 卷
精确称取 １０ ｇ 山楂粉与等量硅藻土混合均匀，装入
１００ｍＬ萃取池中，再取适量硅藻土填充萃取池空隙，密
封萃取池。 将萃取池和收集瓶放入萃取仪，调节参数
开始萃取，萃取完成后，取收集瓶中提取液定容，测定
黄酮提取率。
１􀆰 ３􀆰 ２　 分析测试方法 　 （１）标准溶液的配制。 精密
称取干燥至恒重的芦丁标准品 １０ ｍｇ，置 ５０ｍＬ容量瓶
中，加无水乙醇 ３０ｍＬ，轻摇使之充分溶解，定容，摇匀，
得 ０􀆰 ２ｍｇ·ｍＬ － １芦丁标准液。 （２）标准曲线的绘制。
根据中国药典委员会规定的紫外分光光度法，以芦丁
为标准品进行测量［１９］。 精密吸取标准溶液 ０、１、２、３、
４、５ 和 ６ｍＬ 分别置入 ７ 个 ２５ｍＬ 容量瓶中，加水至
６ｍＬ，加 ５％亚硝酸钠溶液 １ｍＬ 后摇匀，静置 ６ｍｉｎ；加
１０％硝酸铝溶液 １ｍＬ，摇匀，静置 ６ｍｉｎ；加入 ４％氢氧
化钠溶液 １０ｍＬ，摇匀后加水至刻度，摇匀，放置
１５ｍｉｎ，立即在 ５１０ ｎｍ波长处测定吸光度（Ａ）值，以吸
光度为横坐标，浓度（Ｃ，ｍ ／ ｖ）为纵坐标绘制曲线，计算
标准曲线的回归方程。
表 １　 加压溶剂萃取法单因素试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ １　 Ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｉｎｇｌｅ⁃ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
提取温度
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ／ ℃
提取时间
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ／ ｍｉｎ
循环次数
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ
乙醇浓度
Ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ／ ％
１ ４０ ３ １ １０
２ ６０ ５ ２ ３０
３ ８０ ７ ３ ５０
４ １００ ９ － ７０
５ １２０ １１ － ９０
表 ２　 加压溶剂萃取法正交试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
提取温度
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ／ ℃
提取时间
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ／ ｍｉｎ
循环次数
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ
乙醇浓度
Ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ／ ％
１ ６０ ５ １ ３０
２ ８０ ７ ２ ５０
３ １００ ９ ３ ７０
１􀆰 ３􀆰 ３　 单因素试验
１􀆰 ３􀆰 ３􀆰 １　 提取温度对黄酮提取率的影响　 取山楂粉
５ 份，每份 １０ ｇ，分别填装到 ５ 个萃取池中，提取溶剂
均为 ５０％乙醇，提取时间为 ３ｍｉｎ，循环 １ 次。 提取温
度对提取率的影响如图 １ 所示。
１􀆰 ３􀆰 ３􀆰 ２　 提取时间对黄酮提取率的影响　 取山楂粉
５ 份，每份 １０ ｇ，分别填装到 ５ 个萃取池中，提取溶剂
均为 ５０％乙醇，提取温度为 ６０℃，循环 １ 次。
１􀆰 ３􀆰 ３􀆰 ３　 循环次数对黄酮提取率的影响　 取山楂粉
５ 份，每份 １０ ｇ，分别填装到 ５ 个萃取池中，提取溶剂
均为 ５０％乙醇，提取温度为 ６０℃，提取时间为 ３ｍｉｎ。
１􀆰 ３􀆰 ３􀆰 ４　 乙醇浓度对黄酮提取率的影响　 取山楂粉
５ 份，每份 １０ ｇ，分别填装到 ５ 个萃取池中，提取温度
为 ６０℃，提取时间为 ３ｍｉｎ，循环 １ 次。
单因素试验因素水平见表 １。
１􀆰 ３􀆰 ４　 正交试验因素水平选择　 根据单因素试验结
果，选择四因素三水平进行正交试验，正交试验因素水
平见表 ２。
１􀆰 ３􀆰 ５　 数据分析 　 应用 ＳＰＳＳ １６􀆰 ０ 软件对试验数据
进行分析。
１􀆰 ３􀆰 ６　 比较试验　 本试验同时采用正交试验法考察
了超临界提取法的提取温度、压强、夹带剂体积和提取
时间对山楂黄酮提取率的影响。 正交试验因素水平表
见表 ３。
０１７１
　 １１ 期 加压溶剂萃取法提取山楂中黄酮物质的工艺研究
表 ３　 超临界提取法正交试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ ３　 Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
提取温度
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ／ ℃
提取压强
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ／ ＭＰａ
夹带剂
Ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ ／ （ｍＬ·ｇ － １）
提取时间
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ／ ｍｉｎ
１ ３５ ２５ １０ ６０
２ ４５ ３０ １５ ９０
３ ５５ ３５ ２０ １２０
表 ４　 微波提取法正交试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ ４　 Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
料液比
Ｓｏｌｉｄ：ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ ／ （ｇ·ｍＬ － １）
乙醇浓度
Ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ／ ％
提取时间
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ／ ｍｉｎ
微波功率
Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｐｏｗｅｒ ／ Ｗ
１ １∶ ２０ ４０％ １ ３２０
２ １∶ ３０ ５０％ １􀆰 ５ ４８０
３ １∶ ４０ ６０％ ２ ６４０
　 　 本试验同时对微波提取山楂黄酮的最优条件进行
了探索，考察了其料液比、乙醇浓度、提取时间、微波功
率对黄酮提取率的影响。 正交试验因素水平表见表 ４。
１􀆰 ３􀆰 ７　 提取率的计算　 山楂黄酮的提取率计算公式为：
Ｙ ＝ ［（０􀆰 ０４０Ａ －０􀆰 ００２） × Ｖ ／ Ｖ１］ × Ｖ２ ／ ｍ × １００％
式中：Ａ为吸光值；Ｖ为测量时定容体积；Ｖ１ 为检测时
所取提取液体积；Ｖ２ 为提取后定容体积；ｍ 为山楂果
样品质量。
２　 结果与分析
２􀆰 １　 芦丁标准曲线的回归方程
经试验测定得芦丁标准曲线的回归方程为：
Ｃ ＝ ０􀆰 ０４０Ａ －０􀆰 ００２，Ｒ２ ＝ ０􀆰 ９９９
式中：Ｃ———芦丁浓度（ｍｇ·ｍＬ － １ ）；Ａ———在波长 ５１０
ｎｍ处测定的芦丁吸光度值。
２􀆰 ２　 单因素试验
２􀆰 ２􀆰 １　 提取温度对黄酮提取率的影响　 如图 １ 可知，
提取温度在 ４０ ～ ８０℃随着温度的升高，提取率增加；
温度大于 ８０℃后，随着温度升高，提取率下降。 因为
高温条件下，黄酮成分被破坏，因此正交试验所用温
度，选择在 ６０ ～ １００℃之间。
２􀆰 ２􀆰 ２　 提取时间对黄酮提取率的影响　 由图 ２ 可知，
图 １　 提取温度对提取率的影响
Ｆｉｇ． １　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｙｉｅｌｄ
提取时间在 ３ ～ ７ｍｉｎ 随着萃取时间的延长，提取率增
加；提取时间大于 ７ｍｉｎ后，随着时间的延长，提取率呈
下降趋势。 其原因为长期处于高温状态，黄酮类物质
被破坏，故提取时间选择在 ５ ～ ９ｍｉｎ进行正交试验。
２􀆰 ２􀆰 ３　 循环次数对黄酮提取率的影响　 由图 ３ 可知，
循环次数为 ２ 次时，提取率较 １ 次有显著提高，高于 ２
次，提取率变化不大，说明黄酮在循环两次后已经提取
充分。
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核　 农　 学　 报 ２７ 卷
图 ２　 提取时间对提取率的影响
Ｆｉｇ． ２　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｙｉｅｌｄ
图 ３　 循环次数对提取率的影响图
Ｆｉｇ． ３　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄ
２􀆰 ２􀆰 ４　 　 乙醇浓度对黄酮提取率的影响　 由图 ４ 可
知，随着乙醇浓度的增加，提取率有下降趋势，猜测是
因为山楂黄酮中水溶性的苷类成分较多。 乙醇浓度在
５０％左右，提取率趋于稳定。 为使提取物成分全面，选
择正交试验乙醇浓度为 ３０ ～ ７０％ 。
２􀆰 ３　 正交试验设计
在单因素试验的基础上，选择提取温度（Ａ）、提取
时间（Ｂ）、循环次数（Ｃ）、乙醇浓度（Ｄ）为影响山楂黄
酮化合物提取效果的因素。
选用 Ｌ９（３４）正交表对试验结果进行数据分析，结
果见表 ５。 从表 ５ 可以看出：在正交试验所选条件范
围内，４ 个因素对黄酮提取效果影响的顺序为：Ｃ（循环
次数） ＞ Ｄ（乙醇浓度） ＞ Ａ（提取温度） ＝ Ｂ（提取时
间）。 最佳工艺条件为：Ａ２Ｂ１Ｃ３Ｄ２，即提取温度 ８０℃，
提取时间 ５ｍｉｎ，循环次数 ３ 次，乙醇浓度 ５０％ 。 以最
图 ４　 乙醇浓度对提取率的影响
Ｆｉｇ． ４　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎ ｙｉｅｌｄ
优工艺条件进行 ３ 次验证试验，提取率最高为
４􀆰 ９９％ ，相对标准偏差为 １􀆰 ０１％ 。
２􀆰 ４　 几种提取方法的比较
超临界提取山楂黄酮的正交试验结果见表 ６。 由
表 ６ 得出超临界提取法提取山楂黄酮的最优工艺条件
为：提取温度 ４５℃，提取压强 ２５ ＭＰａ，夹带剂采用
５０％乙醇，体积为 ２ｍＬ·ｇ － １，提取时间 ９０ｍｉｎ。 在最优
条件下进行山楂黄酮的提取并测定提取率，与加压溶
剂萃取法进行比较。
微波提取山楂黄酮的正交试验结果见表 ７。 由表
７ 得出微波提取法提取山楂黄酮的最优工艺条件为：
料液比 １∶ ３０，乙醇浓度 ６０％ ，提取时间 １ｍｉｎ，微波功
率 ３２０Ｗ。 在最优条件下测定山楂黄酮的提取率，并
将试验结果与加压溶剂萃取法进行比较。
由表 ８ 可知，加压溶剂萃取法的山楂黄酮提取率
比超临界提取法高 ３１􀆰 ３％ ，而且所需时间短，循环 ３
次的时间仅为 １５ｍｉｎ，所用压力低，其中加压溶剂萃取
所需压强为 １０ ＭＰａ，超临界提取所需压强为 ２５ＭＰａ，
压强的降低极大减小了能耗；加压溶剂萃取法提取率
比微波提取法高 ３７􀆰 １％ ，１０ｇ 样品所需有机溶剂仅为
微波提取法的 ５ ～ １５％ ，虽然微波提取方法所用时间
较短，但是反应剧烈，易爆沸，难控制。
３　 讨论
加压溶剂萃取技术应用于植物黄酮类化合物分离
提取，具有简单、快速、溶剂用量少等特点［１５ － １７］，但由
于植物的差异和器官的不同，需要根据实际情况设置
萃取参数，以便获得有实用价值的最佳萃取条件。 唐
２１７１
　 １１ 期 加压溶剂萃取法提取山楂中黄酮物质的工艺研究
　 　 　 　 表 ５　 加压溶剂萃取法正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ５　 Ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
序号
Ｎｏ．
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ ／ ℃ Ｂ ／ ｍｉｎ Ｃ Ｄ ／ ％
提取率
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
１ １ １ １ １ ３􀆰 ７０
２ １ ２ ２ ２ ３􀆰 ６３
３ １ ３ ３ ３ ３􀆰 ８６
４ ２ １ ２ ３ ３􀆰 ７０
５ ２ ２ ３ １ ４􀆰 ２９
６ ２ ３ １ ２ ３􀆰 ７６
７ ３ １ ３ ２ ４􀆰 ３３
８ ３ ２ １ ３ ２􀆰 ８４
９ ３ ３ ２ １ ３􀆰 ６４
Ｋ１ １１􀆰 １９ １１􀆰 ７３ １０􀆰 ３０ １１􀆰 ６３
Ｋ２ １１􀆰 ７５ １０􀆰 ７６ １０􀆰 ９７ １１􀆰 ７２
Ｋ３ １０􀆰 ８１ １１􀆰 ２６ １２􀆰 ４８ １０􀆰 ４０
ｋ１ ３􀆰 ７３ ３􀆰 ９１ ３􀆰 ４３ ３􀆰 ８８
ｋ２ ３􀆰 ９２ ３􀆰 ５９ ３􀆰 ６６ ３􀆰 ９１
ｋ３ ３􀆰 ６０ ３􀆰 ７５ ４􀆰 １６ ３􀆰 ４７
Ｒ ０􀆰 ３２ ０􀆰 ３２ ０􀆰 ７３ ０􀆰 ４４
最优水平 Ｏｐｔｉｍｕｍ ｌｅｖｅｌ Ａ２Ｂ１Ｃ３Ｄ２
主次顺序 Ｐｒｉｏｒｉｔｙ Ｃ ＞ Ｄ ＞ Ａ ＝ Ｂ
表 ６　 超临界提取法正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ６　 Ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
序号
Ｎｏ．
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ ／ ℃ Ｂ ／ ＭＰａ Ｃ ／ （ｍＬ·ｇ － １） Ｄ ／ ｍｉｎ
提取率
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
１ １ １ １ １ １􀆰 ７７
２ １ ２ ２ ２ １􀆰 ７４
３ １ ３ ３ ３ ２􀆰 ４７
４ ２ １ ２ ３ ２􀆰 １３
５ ２ ２ ３ １ ２􀆰 ６７
６ ２ ３ １ ２ ３􀆰 ０１
７ ３ １ ３ ２ ３􀆰 ４１
８ ３ ２ １ ３ ２􀆰 ７７
９ ３ ３ ２ １ １􀆰 ０３
Ｋ１ ５􀆰 ９８ ７􀆰 ３１ ７􀆰 ５５ ５􀆰 ４７
Ｋ２ ７􀆰 ８２ ７􀆰 １８ ４􀆰 ９０ ８􀆰 １６
Ｋ３ ７􀆰 ２１ ６􀆰 ５１ ８􀆰 ５５ ７􀆰 ３７
ｋ１ １􀆰 ９９ ２􀆰 ４４ ２􀆰 ５２ １􀆰 ８２
ｋ２ ２􀆰 ６０ ２􀆰 ３９ １􀆰 ６３ ２􀆰 ７２
ｋ３ ２􀆰 ４０ ２􀆰 １７ ２􀆰 ８５ ２􀆰 ４６
Ｒ ０􀆰 ６１ ０􀆰 ２７ １􀆰 ２２ ０􀆰 ９０
最优水平 Ｏｐｔｉｍｕｍ ｌｅｖｅｌ Ａ２Ｂ１Ｃ３Ｄ２
主次顺序 Ｐｒｉｏｒｉｔｙ Ｃ ＞ Ｄ ＞ Ａ ＞ Ｂ
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核　 农　 学　 报 ２７ 卷
表 ７　 微波提取法正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ７　 Ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
序号
Ｎｏ．
因素 Ｆａｃｔｏｒ
Ａ ／ （ｇ·ｍＬ － １） Ｂ ／ ％ Ｃ ／ ｍｉｎ Ｄ ／ Ｗ
提取率
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
１ １ １ １ １ ３􀆰 ２５
２ １ ２ ２ ２ ３􀆰 ０８
３ １ ３ ３ ３ ３􀆰 ３７
４ ２ １ ２ ３ ３􀆰 ３１
５ ２ ２ ３ １ ３􀆰 ６４
６ ２ ３ １ ２ ３􀆰 ５９
７ ３ １ ３ ２ ３􀆰 ３１
８ ３ ２ １ ３ ３􀆰 ５６
９ ３ ３ ２ １ ３􀆰 ５０
Ｋ１ ９􀆰 ７０ ９􀆰 ８７ １０􀆰 ４０ １０􀆰 ３９
Ｋ２ １０􀆰 ５４ １０􀆰 ２８ ９􀆰 ８９ ９􀆰 ９８
Ｋ３ １０􀆰 ３７ １０􀆰 ４６ １０􀆰 ３２ １０􀆰 ２４
ｋ１ ３􀆰 ２３ ３􀆰 ２９ ３􀆰 ４７ ３􀆰 ４６
ｋ２ ３􀆰 ５１ ３􀆰 ４３ ３􀆰 ３０ ３􀆰 ３３
ｋ３ ３􀆰 ４６ ３􀆰 ４９ ３􀆰 ４４ ３􀆰 ４１
Ｒ ０􀆰 ２８ ０􀆰 ２０ ０􀆰 １７ ０􀆰 １３
最优水平
Ｏｐｔｉｍｕｍ ｌｅｖｅｌ
Ａ２Ｂ３Ｃ１Ｄ１
主次顺序
Ｐｒｉｏｒｉｔｙ
Ａ ＞ Ｂ ＞ Ｃ ＞ Ｄ
表 ８　 加压溶剂萃取法最优黄酮萃取条件与其他提取黄酮方法对比
Ｔａｂｌｅ ８　 Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓ
技术名称
Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｎａｍｅ
提取压强
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ／ ＭＰａ
平均提取时间
Ａｖｅｒａｇｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ ／ ｍｉｎ
平均溶剂用量（取 １０ ｇ样品）
Ａｖｅｒａｇｅ ｕｓａｇｅｓ ｏｆ ｓｏｌｖｅｎｔ
（１０ ｇ ｓａｍｐｌｅ） ／ ｍＬ
提取率
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
超临界萃取
Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ２５ ９０ １０ ３􀆰 ８０
微波提取
Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ 常压 １ ３００ ３􀆰 ６４
加压溶剂萃取
Ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ Ｌｉｑｕｉｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ １０ １５ １５ ～ ４５ ４􀆰 ９９
巧玉等［１５］报道，提取水芹黄酮类物质，最佳工艺条件
为乙醇体积分数 ６０％ 、提取温度 １００℃、提取时间
５ｍｉｎ、循环次数为 ３ 次。 王志丹等［１６］报道从柚皮中提
取黄酮类化合物的最佳条件是：提取温度 ６０℃，萃取
剂为 ９０％甲醇、萃取时间 ３ｍｉｎ，循环次数为 ３ 次。 张
玉等［１７］报道，提取柑橘皮中黄酮类物时，以 ８０％的乙
醇为萃取剂，压强 １０􀆰 ３ ＭＰａ 下，温度为 ７０℃，萃取
１０ｍｉｎ，循环 １ 次，即可获得目标物的最大提取率。 因
此，在针对不同原料品种、不同器官应用加压溶剂萃取
技术时，均应研究其最佳的萃取条件。
采用超临界提取法和微波提取法提取山楂黄酮单
因素试验中，当达到一定提取时间，继续延长，黄酮的
提取率会逐渐下降，其原因可能是在较高温度条件下
随着时间延长而导致黄酮成分被破坏，且影响黄酮的
品质。 而加压溶剂萃取法最佳萃取温度为 ８０℃，完成
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　 １１ 期 加压溶剂萃取法提取山楂中黄酮物质的工艺研究
一次提取时间为 ５ｍｉｎ，因萃取时间短，可保证萃取物
热降解减少，从而提高萃取率，降低对黄酮结构和活性
的影响。
４　 结论
本研究采用正交试验法优化加压溶剂萃取技术提
取山楂中黄酮类物质，得到最佳工艺条件为：萃取温度
８０℃，萃取时间 ５ｍｉｎ，循环次数 ３ 次，乙醇浓度 ５０％ 。
此条件下 ３ 次验证试验得山楂黄酮的最高提取率为
４􀆰 ９９％ ，相对标准偏差为 １􀆰 ０１％ ，准确度高。 加压溶
剂萃取提取率明显高于超临界提取法和微波提取法，
该方法所用试剂少，提取时间短，提取率高，准确度高，
能够成为天然产物提取的一个新途径。
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Ｂｇｅ ｗｉｔｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ Ｌｉｑｕｉｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ＣＡＯ Ｈｕｉ⁃ｋａｉ　 ＤＵ Ｂｉｎ　 ＷＡＮＧ Ｔｏｎｇ⁃ｋｕｎ　 ＹＡＮＧ Ｙｕｅ⁃ｄｏｎｇ
（Ｈｅｂｅｉ Ｃｈｅｓｔｎｕｔ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ， Ｈｅｂｅｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
Ｑｉｎｈｕａｎｇｄａｏ， Ｈｅｂｅｉ　 ０６６００４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｃｒａｔａｅｇｕｓ Ｐｒｉｎｎａｔｉｆｉｄｅ ｂｇｅ，
ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ⁃ｆａｃｔｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｓｔｓ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗｅｒｅ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，
ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ
ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ： ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ８０℃，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｆ ３ｍｉｎ，ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ
ｏｆ ３ ｔｉｍｅｓ ａｎｄ ｓｏｌｖｅｎｔ ｏｆ ５０％ ｅｔｈａｎｏｌ． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｃｒａｔａｅｇｕｓ
Ｐｒｉｎｎａｔｉｆｉｄｅ ｂｇｅ ｗａｓ ４􀆰 ９９％ ． Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｗａｓ １􀆰 ０１％ ． Ｔｈｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ｈｉｇｈ． Ｔｈｅ
ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｅｘｔｒａｃｔ ｍｏｒｅ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ Ｂｇｅ ｉｎ ｓｈｏｒｔｅｒ ｔｉｍｅ ｗｉｔｈ ｌｅｓｓ ｓｏｌｖｅｎｔ． Ｉｔ
ａｌｓｏ ｓｈｏｗｓ ａ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｐｒｏｓｐｅｃｔ ｆｏｒ ｌｅａｃｈｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｎａｔｕｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｌｉｑｕｉｄ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄｅ Ｂｇｅ； Ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ Ｌｉｑｕｉｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； Ｆｌａｖｏｎｅｓ； Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
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