全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 2期，2009年 2月 159
收稿 2008-12-22 修定 2009-01-15
资助 浙江省科技厅重点项目(2006C22076)和浙江林学院开放
实验项目(KF0 70 8-2 -0 42 )。
* 通讯作者(E-ma i l : ghxia @zj fc .edu . cn ; T el : 0 5 7 1 -
6 3 7 3 2 7 6 1 )。
秀丽野海棠的组织培养与快速繁殖
林骏烈, 雷蓓, 陈玉琳, 夏国华 *
浙江林学院林学基础实验教学中心, 浙江临安 311300
Tissue Culture and Rapid Propagation of Bredia amoena Diels
LIN Jun-Lie, LEI Bei, CHEN Yu-Lin, XIA Guo-Hua*
Basic Experiment Teaching Center of Forestry, Zhejiang Forestry College, Lin’ an, Zhejiang 311300, China
1 植物名称 秀丽野海棠(Bredia amoena Diels)。
2 材料类别 叶片。
3 培养条件 MS为基本培养基。不定芽诱导培养
基: (1) MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+2,4-D 0.5;
(2) MS+6-BA 1.0+2,4-D 0.5。芽增殖壮苗培养基:
(3) MS+6-BA 1.0+IBA 1.0; (4) MS+6-BA 1.0+IBA 0.5。
生根培养基: (5) MS+IBA 0.5。以上培养基均含
30 g·L-1蔗糖和 5.8 g·L-1琼脂, pH 5.8。培养温度
(22±2) ℃; 光照强度约为 30 µmol·m-2·s-1, 光照时间
为16 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 取材与消毒 取秀丽野海棠幼嫩叶片, 用洗涤剂
漂洗 30 min, 流水冲洗 10 min, 然后在超净工作台
上用 70%酒精浸泡10 s, 0.1% HgCl2灭菌6 min, 无
菌水冲洗 5次, 用无菌滤纸吸干材料上的水分, 切
割叶片为 0.5 cm×0.5 cm的小片, 接种在培养基
( 1 )、( 2 )上。
4.2 不定芽的诱导 将秀丽野海棠叶片正面向上接
种在不定芽诱导培养基上, 经过 15 d的生长, 在叶
片边缘产生愈伤组织(图1-a), 然后在愈伤组织上直
接产生绿色芽点(图 1-b), 培养 25 d左右, 叶片诱导
出大量不定芽(图 1-c)。培养基(1)诱导愈伤组织的
效果比培养基(2)好。
4.3 增殖和壮苗培养 将不定芽分离成小丛后接到
图 1 秀丽野海棠愈伤组织诱导及不定芽分化
a: 愈伤组织诱导; b: 芽的分化; c: 大量丛生芽发生。
培养基(3)和(4)中, 经过约 20 d的培养, 培养基(3)
和(4)对不定芽的增殖倍数相近, 为 10~12。通过
反复切割转接, 在较短时间里可得到大量丛生芽(图
2- a )。
4.4 生根与移栽 丛生芽长至 3~5 cm后, 对丛生芽
进行切割后接到生根培养基(5)中, 培养约15 d开始
出现新根, 继续培养 10~15 d, 根长 2~3 cm, 生根率
超过 95%, 具有小叶 4~6片, 苗高 4~6 cm (图 2-b)。
此时, 将培养瓶放到全天自然光照、温度 25 ℃的
通风房间里炼苗 10 d, 然后打开瓶盖, 用镊子将试
管苗从培养瓶中取出, 洗净根部培养基, 移栽入已
灭过菌的营养土(泥炭:珍珠岩:蛭石=1:2:1), 移栽后
10 d内保持营养土的湿润, 并用塑料薄膜保湿, 空
气湿度 85%以上, 此后慢慢降低空气湿度, 每天喷
水1次, 10 d后有新根长出, 移栽成活率达90%以上。
5 意义与进展 秀丽野海棠属野牡丹科野海棠属,
常绿小灌木, 分布于浙江、安徽、江西、福建、
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图 2 秀丽野海棠的增殖培养和壮苗
a: 增殖培养; b: 壮苗培养。
湖南等省, 花为粉红色至紫红色, 艳丽, 花开于夏秋
季节, 是点缀夏秋景色的优良花境植物, 适合片植。
适栽于阴湿沟谷边或密林下, 已逐渐成为园林绿化
新宠, 发展前景看好。全株可药用, 具有驱风利
湿、活血调经的功效。秀丽野海棠的野生植株移
栽困难, 播种繁殖的种子细小, 幼苗管理困难。组织
培养技术可以提高繁殖速度, 有较高的潜在应用前景。
秀丽野海棠的组织培养与快速繁殖尚未见报道。