全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月 1189
收稿 2010-10-18 修定 　2010-10-22
资助 云南省高端科技人才引进计划(2008A003)和云南地方特
色花卉发展基金(云花办发[20 08 ]53 号)。
* 通讯作者(E-mail: l ishifeng1970@foxmail.com; Tel:
08 71 -5 89 26 02 )。
滇海水仙花的组织培养和快速繁殖
解玮佳, 李世峰 *, 王国金, 蒋亚莲
云南省农业科学院花卉研究所, 云南省花卉育种重点实验室, 昆明 650205
Tissue Culture and Rapid Propagation of Primula pseudodenticulata Pax
XIE Wei-Jia, LI Shi-Feng*, WANG Guo-Jin, JIANG Ya-Lian
Flower Research Institute of Yunnan Academy of Agriculture Sciences, Yunnan Flower Breeding Key Laboratory, Kunming 650205,
China
1 植物名称 滇海水仙花(Primula pseudodenticulata
Pa x)。
2 材料类别 匍匐茎。
3 培养条件 不定芽诱导和增殖培养基: (1) MS+
NAA 0.2 mg·L-1 (单位下同)+6-BA 0.5, (2) MS+ NAA
0.2+6-BA 1.0, (3) MS+NAA 0.2+6-BA 2.0, (4) MS+
NAA 0.5+6-BA 0.5, (5) MS+ NAA 0.5+6-BA 1.0, (6)
MS+ NAA 0.5+6-BA 2.0, (7) MS+ NAA 0.8+6-BA 0.5,
(8) MS+ NAA 0.8+6-BA 1.0, (9) MS+ NAA 0.8+6-BA
2.0; 生根培养基: (10) MS+NAA 0.2+IBA 0.2, (11)
MS+NAA 0.2+IBA 1.0。上述培养基均含 3%蔗糖
和0.6%琼脂粉, pH 5.8, 在121 ℃高压灭菌20 min。
培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为 30 μmol·m-2·s-1,
光照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的处理 选取健康植株的匍匐茎作为
外植体, 用含洗衣粉的溶液清洗去除污物, 再用自
来水冲洗30 min, 然后放到超净工作台上进行消毒
处理。在超净工作台上将外植体切成 1 cm长的茎
段, 用 0.1%升汞灭菌30 min, 取出后用无菌水冲洗
4次, 每次冲洗时浸泡 5 min, 接种于培养基(1)~(9)
中, 每瓶接种 1个外植体。
4.2 不定芽的诱导和增殖 匍匐茎接种后约15 d出
现愈伤组织, 20~25 d愈伤组织形成多个不定芽, 以
培养基(1)诱导生长效果最好(图 1), 诱导率达到
73.3%。培养基(4)和(8)的芽诱导效果最差, 基本没
有不定芽。将丛生芽分割后接入培养基(1)~(9)中
进行增殖继代培养, 每个增殖培养基中移入 5个
芽。接种培养 30 d后观察增殖情况。培养基(6)
和(7)的增殖效果要好于其他组合, 但培养基(6)中的
叶片有畸形现象, 而培养基(7)的植株生长效果较好,
增殖系数高达 5.1 (图 2)。
4.3 生根 当生长健壮的丛生芽长到 3 cm以上时,
将其分割成单株, 然后转入培养基(10)~(11)中。继
代苗在培养基(11)中生根效果较好, 生根率达 90%
以上。培养 5 d后幼苗基部愈伤组织膨大, 有白色
根长出。培养 20 d后, 幼苗高达 4~5 cm, 根数均
达 10条以上 (图 3)。
图 1 滇海水仙花的不定芽诱导
图 2 滇海水仙花的不定芽增殖
植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月1190
图 3 滇海水仙花的生根苗
4.4 移栽 当根长到 5 cm以上且根数达到 5条以上
时进行炼苗和移栽。先将培养瓶瓶口半开 5 d, 然
后将瓶口全部打开后放置于有遮阳网覆盖的大棚
中。3 d后取出组培苗, 用清水洗净根系附着的培
养基, 移栽到经高压灭菌的基质中(腐殖土:土=1:1)
中; 用无菌水一次浇透, 放在人工气候培养箱中, 温
度为 24 ℃, 湿度为 85%。7 d后, 幼苗叶片颜色绿
色, 正常直立生长。15 d后, 可进行换盆移栽, 移
栽成活率达 85%以上(图 4)。
科学院昆明植物研究所2003)。滇海水仙花的花序
为淡蓝紫色头状花序, 开花时花球繁多, 观赏性很
强(图 5)。其花期一般为 12月至翌年 2月, 是我国
野生报春花资源中难得的冬季开花种类, 其植株生
长旺盛且周年常绿, 是一种极具开发潜力的的园林
植物材料(解玮佳等 2009)。在滇海水仙花的实生
引种驯化中, 笔者发现其实生苗中有白花变异植株
出现。而通过分株繁殖的速度过于缓慢, 无法达到
尽快稳定其优良性状进而实现该种新品种选育的目
的。为此, 为能尽快实现滇海水仙花优良单株的稳
定快繁, 有必要对其组织培养快繁技术进行研究。
球花报春组植物的组培已有报道(解玮佳等 2010),
滇海水仙花的组织培养和快速繁殖目前尚未见报
道。
图 4 滇海水仙花的移栽苗
参考文献
郝培尧(2007). 我国新花卉作物资源及其开发利用初探. 内蒙古
林业科技. 33 (3): 49~52
解玮佳, 李世峰, 李涵, 蒋亚莲, 蔡艳飞, 李树发(2010). 滇北球花报
春的组织培养. 亚热带植物科学, 39 (1): 81
解玮佳, 李兆光, 蔡艳飞, 李涵, 李树发, 张兴春, 李世峰(2009). 两
种球花报春的生长特性研究初报. 江西农业学报, 21 (5): 56~
5 8
张启翔, 潘会堂(2009). 中国新花卉作物与城市园林绿化建设. 中
国园林, 1: 71~74
中国科学院昆明植物研究所(2003). 云南植物志(第 15卷). 北京:
科学出版社, 500
5 意义与进展 新花卉作物(new floral crops)对一个
国家的花卉产业发展至关重要。开发利用我国现
有野生花卉资源, 是培育我国具有自主知识产权新
花卉品种的重要途径(张启翔和潘会堂 2009; 郝培
尧 2007)。滇海水仙花为报春花科(Primulaceae)报
春花属球花报春组植物, 常分布于我国云南的大
理、丽江等海拔 1 500~2 300 m的湿草地中(中国
图 5 野生的滇海水仙花