全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月 847
收稿 2010-05-11 修定 　2010-05-21
资助 云南省科技计划项目(2 008 CA006 )。
* 通讯作者(E-mail: lp2148@swfc.edu.cn; Tel: 0871-3863023)。
水葫芦苗的组织培养与快速繁殖
孙成江 1, 普晓兰 2, 林萍 3,*, 戚文波 1
1文山学院后勤处, 云南文山 663000; 西南林学院 2资源学院, 3园林学院, 昆明 650224
Tissue Culture and Rapid Propagation of Halerpesets sarmentosa (Adams) Kom.
SUN Cheng-Jiang1, PU Xiao-Lan2, LIN Ping3,*, QI Wen-Bo1
1Logistic Department, Wenshan University, Wenshan, Yunnan 663000, China; 2Faculty of Natural Resources, 3College of Land-
scape Architecture, Southwest Forestry University, Kunming 650224, China
1 植物名称 水葫芦苗[Halerpestes sarmentosa
(Adams) Kom.] (傅立国等 2000)。
2 材料类别 顶芽和带腋芽茎段。
3 培养条件 基本培养基为加入0.05%内生菌型抑
菌剂 “ 山农一号 ”的MS培养基。(1)初代培养基:
MS+KT 0.1 mg·L-1 (单位下同)+6-BA 0.05+NAA 1.0;
(2)增殖培养基: MS+KT 0.05+6-BA 0.5; (3)生根培
养基: 1/2MS+IBA 0.5+AC 0.5 g·L-1。以上培养基
均附加 30 g·L-1蔗糖和 5.5 g·L-1卡拉胶、pH 6.4。
光照强度约为 40 μmol·m-2·s-1, 光照时间为 10~12
h·d-1, 培养温度为(20±2) ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料获得 从水葫芦苗母株上剪取幼嫩茎
段, 用家用洗洁精水浸泡10~15 min, 用小毛刷仔细
刷洗材料表面附着的灰尘泥土等, 然后在自来水下
冲洗 30~60 min, 用蒸馏水清洗外植体后放入 70%
酒精中浸蘸 10 s, 立即取出放入加有1~2滴吐温80
的 0.1% HgCl2溶液中先灭菌 4 min, 用无菌水清洗
3~5次后再放入 0.1% HgCl2溶液中灭菌 3 min, 最
后用无菌水清洗 4~5次, 用滤纸吸干水后切成 1~2
cm长的小段, 接种到培养基(1)上。
4.2 芽诱导与增殖 接种到培养基(1)上的顶芽或带
腋芽茎段 5 d就开始萌发, 同时原芽位上长出许多
新叶, 部分外植体茎段基部出现少量愈伤组织, 并
分化成丛芽(图1), 芽萌发处长出少量的根, 经过30
d培养, 苗可达 2.5 cm左右。初代培养 15 d左右,
苗高约 1.5 cm。切取幼苗, 剪除发白叶片(水葫芦
苗小苗生长过程中, 先生长的叶片容易发白枯萎, 但
不断有新叶生长)转接入培养基(2)中。经过 2~3周
培养可形成大量丛芽(图 2)。每 2周转接一次, 月
增殖系数 4.89。
4.3 生根与移栽 水葫芦苗试管苗在整个培养过程
中容易产生愈伤组织, 从而影响增殖和生根, 生根
阶段添加 0.5 g·L-1活性炭能明显抑制愈伤组织的
形成(图 3)。在(3)号培养基中, 转接的小苗 4 d左
右就开始生根, 生根率达 100%。组培苗平均根长
2.5 cm时, 直接移栽到有底泥的小方盆中, 注入清
图 1 水葫芦苗初代培养
图 2 水葫芦苗增殖培养
植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月848
水浸没幼苗并注意遮荫, 待苗长出1~2片新叶后逐
渐降低水位, 最后保持完全浸没根系的常水位(图
4), 成活率高达 98.77%。
图 3 水葫芦苗生根培养
图 4 移栽 10 d后的水葫芦苗组培苗
5 意义与进展 水葫芦苗为毛茛科(Ranunculaceae)
碱毛茛属多年生湿生草本, 主要分布于海拔2 200~
3 900 m的林下、林缘湿地、河漫滩、河边、沼
泽草甸和阴坡的潮湿地中, 多生于盐碱性沼泽地或
湖边(郭本兆 1987)。分布于青海、西藏、甘肃、
四川、陕西、河北、内蒙古、新疆、山东、
黑龙江、吉林、辽宁等省或自治区; 蒙古、俄罗
斯西伯利亚、印度也有生长; 亚洲和北美洲的温带
地区分布较广(刘尚武 1997)。它是一种高寒湿地
内典型的游击型克隆植物, 结实率相对较低, 在自
然生境中, 多由无性繁殖形成单种群落(周华坤和周
立 2004)。叶色油绿奇特, 金黄色小花蜡质(图 5),
观赏价值较高。可以入药, 具有利水、消肿、祛
风除湿、治疗关节炎及水肿等功效, 是青海高寒湿
地中重要的经济及盐碱地指示性湿地植物(郭本兆
1987)。该植物具高耐盐碱特性, 在滇池生态污染
治理中用量较大, 具有较高的开发利用价值, 但目
前种苗供不应求, 且结实率低, 组培是其扩繁首选
方法之一。水葫芦苗组培快繁尚未见报道。
参考文献
傅立国, 陈潭清, 郎楷永, 洪涛主编(2000). 中国高等植物(第 3
卷). 青岛: 青岛出版社, 579
郭本兆(1987). 青海经济植物志(第 2卷). 西宁: 青海人民出版社,
142
刘尚武(1997). 青海植物志(第 1卷). 西宁: 青海人民出版社, 67~
6 9
周华坤, 周立(2004). 水葫芦苗的生长特征研究. 西北植物学报,
24 (10): 1798~1804
图 5 水葫芦苗的花