免费文献传递   相关文献

大花杓兰的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 2期,2009年 2月 155
大花杓兰的组织培养与快速繁殖
王艳丽, 林昊, 赵洪颜, 朴仁哲 *
延边大学农学院农学系, 吉林延吉 133400
Tissue Culture and Rapid Propagation of Cypripedium macranthum SW.
WANG Yan-Li, LIN Hao, ZHAO Hong-Yan, PIAO Ren-Zhe*
Department of Agronomy, Agricultural College, Yanbian University, Yanji, Jilin 133400, China
收稿 2008-12-01 修定 2008-12-15
* 通讯作者(E-mail: piaorz@yahoo.com.cn; Tel: 0433-
3 2 6 1 7 9 4 )。
1 植物名称 大花杓兰(Cypripedium macranthum
S W . )。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发与生长培养基: (1) Harvais
(Harvais 1982)+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同); (2) VWD
(Van Waes和Debergh 1986)+6-BA 1.0。原球茎分
化培养基: (3) Harvais+6-BA 0.5; (4) VWD+6-BA 0.5。
以上培养基中均含 2%葡萄糖、9%琼脂粉、2%
马铃薯块, pH 5.5~5.8。培养温度(25±2) ℃; 光照时间
12 h·d-1, 光照强度约 15 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 种子的预处理 供试种子来源于移栽 2年的野
生杓兰的黄绿色未开裂的蒴果。首先在超净工作
台内将蒴果用 75%的酒精处理 30 s, 无菌水冲洗
3~5次, 将种子取出, 用0.5%的NaClO溶液浸泡10
min, 无菌水冲洗3~5次, 用无菌滤纸吸干种子表面
水分。
4.2 原球茎的诱导与分化 将预处理的种子接种于
培养基(1)、(2)上暗培养, 60 d后, 种子萌发为颗粒
状的白色原球茎(图 1)。再经 20 d左右的培养, 原
球茎分化出芽, 芽约 1 mm。分别将其转入培养基
(3)、(4)中继续培养, 15 d左右芽长约 5 mm, 并分
化出根。此时转到光下培养, 再经 1个月后, 每个
原球茎都分化出绿色的芽, 芽高约1.5 cm, 根长2~5
cm, 根粗壮, 每株生根数 4~15条(图 2)。
4.3 移栽 将高度 1.5 cm以上、生长旺盛、根系
发达的幼苗从培养瓶中取出(图3), 小心洗去附着在
根上的培养基, 移入由珍珠岩、蛭石、草炭土和
树叶(1:1:1:1)混合而成的移栽基质中, 并浇透水, 喷
300倍稀释的花宝一号营养液。育苗期间注意保
持湿度, 每天喷水 1次, 光照 12 h, 每周喷花宝一号
营养液 1次, 1个月后成活率可达 70%以上。
图 1 大花杓兰的原球茎
图 2 大花杓兰的生根培养
图 3 大花杓兰的移栽苗
5 意义与进展 大花杓兰为兰科杓兰属多年生草本
植物生理学通讯 第 45卷 第 2期,2009年 2月156
植物。花常单生, 紫红色, 呈囊状, 花大而美丽, 具
有很高的观赏价值。现今其野生种群数量呈明显
下降趋势, 已被列为国家重点保护植物。大花杓兰
主要靠有性繁殖和无性繁殖两种方式繁衍种群, 种
子自然繁殖非常困难, 自然增殖率低, 通过种子组
织培养可以解决这个问题。同属的黄花杓兰和紫
点杓兰的组织培养已有报道(黄家林和胡虹 2001,
2002), 但大花杓兰组织培养的报道未见。
参考文献
黄家林, 胡虹(2001). 黄花杓兰种子无菌萌发的培养条件研究. 云
南植物研究, 23 (1): 105~108
黄家林, 胡虹(2002). 紫点杓兰的离体繁殖. 植物生理学通讯, 38
(1): 42
Harvais G (1982). An improved culture medium for growing the
orchid Cypripedium reginae anemically. Can J Bot, 60:
2547~2555
Van Waes JM, Debergh PC (1986). In vitro germination of some
Western European orchids. Physiol Plant, 67: 253~261