全 文 ：植物生理学报 Plant Physiology Journal 2015, 51 (9): 1433~1439　　doi: 10.13592/j.cnki.ppj.2015.0342 1433
收稿 2015-06-19　　修定 2015-08-03
资助 “十二五”国家“863”项目(2011AA10A103和2012AA-
101202-4)。
* 共同第一作者。
** 通讯作者(E-mail: caomj@sicau.edu.cn; Tel: 13882439529)。
玉米淀粉合成酶基因GBSS启动子的克隆与鉴定
曾礼华1,*, 汪瀚宇2,*, 谢程程2, 曹墨菊2,**
1四川师范大学生命科学学院, 成都610101; 2四川农业大学玉米研究所, 农业部西南玉米生物学与遗传育种重点实验室, 成
都611130
摘要: 以玉米自交系‘18红’的基因组DNA为模板采用PCR技术对玉米淀粉合成酶基因GBSS (ZmGBSS)的启动子进行克隆,
获得了1 884 bp的扩增片段(PZmGBSS), 应用启动子分析软件PlantCARE进行分析, 发现该片段含有多个不同的调控元件。通
过半定量RT-PCR分析表明, 在授粉15 d的胚乳中ZmGBSS的表达量最高, 其次为胚, 在根和叶中的表达量较低。通过不同诱
导培养基对胚乳进行培养, 发现脱落酸(ABA)诱导后ZmGBSS的表达量明显提高, 葡萄糖和赤霉素(GA)诱导后的表达量有
所降低。通过构建启动子PZmGBSS瞬时表达载体, 并利用基因枪对不同受体进行转化分析, 结果发现胚乳中PZmGBSS的启动活
性最高, 其次为胚, 根和叶中最弱。对转化后的胚乳进行诱导培养, 发现ABA诱导可使报告基因LUC的表达明显增强。以
上结果表明, 启动子PZmGBSS为胚乳特异启动子且能够被ABA正向调控。
关键词: 玉米; GBSS基因; 启动子; 克隆
Clone and Identification of Granule-Bound Starch Synthase Gene Promoter in
Maize
ZENG Li-Hua1,*, WANG Han-Yu2,*, XIE Cheng-Cheng2, CAO Mo-Ju2,**
1College of Life Sciences of Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China; 2Key Laboratory of Maize Biology and Genetic
Breeding on Southwest, Ministry of Agriculture, Maize Research Institute of Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China
Abstract: The genome DNA of maize inbred line ‘18 Hong’ was used as template for the promoter isolation of
maize GBSS gene and a fragment with length of 1 844 bp was obtained. Based on the analysis with the Plant-
CARE software, several cis-regulation elements were found within the sequence of PZmGBSS. The semi-quantita-
tive RT-PCR for ZmGBSS showed that 15 day endosperm after pollination with the highest expression, the em-
bryo second, both root and leaf with relatively low expression. Detached maize 15 day endosperms after
pollination were incubated in different treatments, it suggested the expression of GBSS gene was up-regulated
significantly with abscisic acid (ABA) induction, the expression was little down-regulated with glucose and
gibberellin (GA). Transcriptional analysis revealed that it is mainly expressed in endosperm and is induced by
ABA. The 1 884 bp promoter region of the GBSS gene (PZmGBSS) was fused with the LUC reporter gene to get
the transient expression vector. Bombardment transformations were conducted with different receptors, such as
leaf, root, endosperm and embryo. Transient expression assay showed that PZmGBSS could drive the LUC gene
and it was highly expressed in the endosperm relative to the embryo, the leaf and root with lowest expression.
The activity of 1 884 bp promoter PZmGBSS was relative low compared with ubiquitin promoter. The PZmGBSS may
be a promoter specific to endosperm. These results suggested that the LUC activity drove by PZmGBSS increased
significantly when treated with ABA. So it was concluded that the promoter PZmGBSS is an endosperm specific
promoter and can be activated by ABA induction.
Key words: maize; GBSS gene; promoter; clone
随着转基因技术研究的不断深入及应用范围
的不断扩大, 利用转基因技术将外源基因导入植
物受体以实现作物抗性的增加、品质的改良或产
量的提高等育种目标, 已成为作物品种改良的重
要手段。然而, 目前转基因植物中外源基因的表
达量普遍较低, 严重制约着转基因技术的推广应
用。启动子作为基因表达调控重要元件, 在植物
植物生理学报1434
转基因表达的时、空、量三维调控系统中扮演重
要的角色。对基因表达强度、基因表达的时空特
异性等具有决定性的作用(路静等2004; 王颖等
2003; 张春晓等2004)。组成型启动子是植物基因
工程中应用最早、最为广泛的一类启动子, 尽管
它能高效、非特异地启动外源基因表达, 但这种
外源基因的组成型表达往往会造成资源的非必要
浪费, 同时大量异源蛋白的积累也会打破植物原
有的代谢平衡, 阻碍植物的正常生长。为了使外
源基因在植物体内高效发挥作用, 同时又减少对
植物的不利影响, 在特定组织器官或特定发育时
期表达的特异性启动子的研究和应用越来越受到
广泛重视(刘晓娜等2007; 马三梅和王永飞2007; 李
永春等2002; 魏艳丽等2013; Hu等2011; Russell和
Fromm 1997)。
种子作为粮食作物的主要贮藏器官, 含有丰
富的碳水化合物, 特别是淀粉、蛋白质和脂肪, 已
成为品质改良的主要目标。目前在水稻、小麦和
玉米等作物已有大量的种子特异性启动子被克隆
研究, 如玉米醇溶蛋白(Zein)基因、淀粉合成酶基
因(zsS3a)、小麦谷蛋白(glutenin)基因、颗粒淀粉
合成酶基因 (GBSS )、水稻的淀粉分支酶基因
(SBE1)、AGP小亚基基因等(李永春等2002; 魏艳
丽等2013; Gu等2006; Joshi等2015; Kluth等2002;
Hu等2011; Russell和Fromm 1997)。随着大量种子
特异性启动子的克隆研究, 一些与种子特异性基
因表达相关的调控元件被发现(Higo等1999; Wu等
2000), 如GCN4基序、RY基序和脱落酸应答元件
(ABRE)等。这些调控元件在不同的发育时期、不
同的植物类型分别发挥着不同的调控作用, 调控
元件的作用有正向、负向和多向之分, 不同调控
元件之间又存在着相互作用, 调控元件还受到调
节因子和外界环境的影响(Chen等2006; Ezcurra等
1999; Lu等1998; Reidt等2000), 因此调控机制十分
复杂。有研究表明, 玉米淀粉合成相关基因启动
子PzsS3a和ZmSSI均受到ABA的诱导(Hu等2011,
2012)。水稻的α-淀粉合成酶基因的启动子受蔗糖
诱导(Lu等1998)。迄今有关玉米淀粉合成关键酶
基因启动子的克隆已有报道, 但所克隆启动子的
活性偏低, 种类偏少, 难以应用。目前在玉米转基
因研究中所用的胚乳特异启动子多采用水稻胚乳
特异启动子如gt1 (乔光明等2007)等。而有关玉米
淀粉合成酶基因GBSS的启动子克隆及研究尚未见
报道。
因此, 本研究拟通过PCR技术对玉米淀粉合
成酶基因GBSS的启动子进行克隆, 利用瞬时表
达、荧光测定、实时定量PCR等方法对启动子活
性进行定性和定量分析, 旨在了解其表达特异性,
并根据启动子序列所含的调控元件, 对可能影响
该启动子活性的调控因子进行分析, 为玉米基因
工程育种中启动子选择及利用提供重要参考。
材料与方法
1 材料
玉米(Zea mays L.)自交系‘18红’。克隆载体为
pEasy-B-Z Vector (全式金公司)。植物表达载体为
35S启动子驱动的表达质粒载体pBI221。
2 方法
2.1 启动子的克隆及序列分析
采用改良的2×CTAB法提取玉米自交系‘18
红’叶片的基因组DNA。基于已发表的玉米GBSS
基因的mRNA序列(Bao等2012) (GenBank登录号
HQ423252.1), 利用Primer 5软件对ZmGBSS起始密
码子ATG上游的2 000 bp区域设计引物, 为了便于
后续目的片段克隆及连接, 特在每对引物上加装
酶切位点, 引物序列为PZmGBSS-F: 5′-CCCAAGCTTC-
CGAAATTCAATGGGCATGG-3 ′和PZmGBSS-R:
5′-CGCGGATCCCATGCCGATTAATCCACTG-
CAT-3′。以‘18红’的基因组DNA为模板, 利用梯度
PCR扩增目的启动子。梯度PCR反应条件为: 94
℃预变性8 min; 94 ℃变性1 min, 57~62 ℃退火1
min, 72 ℃延伸 1 min 50 s, 32个循环; 72 ℃延伸 5
min。采用1%的琼脂糖凝胶电泳进行检测, 回收目
的DNA片段并进行测序分析。利用软件Plant-
CARE对克隆的启动子序列进行结构预测分析。
2.2 ZmGBSS基因表达的组织特异性分析
以‘18红’种子萌发10 d后的根和叶, 以及‘18红’
授粉15 d的胚和胚乳为材料, RNA的提取及cDNA
第一链的合成分别按照天根试剂盒的操作说明进
行。利用Actin基因对cDNA的质量进行检测。
基于玉米GBSS基因的mRNA序列设计半定量
引物GBSSQP-F: 5′-AACAACAACCCATACTTC-3′
曾礼华等: 玉米淀粉合成酶基因GBSS启动子的克隆与鉴定 1435
和GBSSQP-R: 5′-TAGTTGCTCTTGAGGTAG-3′。
以18S rRNA作为内参对定量模板进行均一化, 所
用引物为18S-F: 5′-CTGAGAAACGGCTACCA-
CA-3 ′和18S-R: 5 ′-CCCAAGGTCCAACTAC-
GAG-3′。
2.3 ZmGBSS表达的诱导因素分析
为了检测目的启动子是否受到其他因子的诱
导影响, 将‘18红’授粉后15 d的胚乳分别在5种处理
培养基上暗培养24 h, 5种培养基配方为: (1)甘露醇
200 mmol·L-1; (2)葡萄糖200 mmol·L-1; (3)蔗糖200
mmol·L -1; (4)甘露醇200 mmol·L -1+ABA 50
µmol·L-1; (5)甘露醇200 mmol·L-1+GA3 1 µmol·L
-1;
每种处理均含CaCl 2 20 mmol·L
-1、琥珀酸20
mmol·L-1和氯霉素10 µmol·L-1, pH 5.0。提取诱导
培养后的胚乳总RNA, 反转录合成cDNA, 利用
qRT-PCR检测不同诱导培养基对ZmGBSS表达的影
响。qRT-PCR所用引物同半定量分析。
2.4 ZmGBSS启动子瞬时表达载体的构建
首先将扩增得到的ZmGBSS启动子连接到克
隆载体pEasy-B-Z上, 得到重组克隆载体pEasy-B-
Z-ZmGBSS。瞬时表达载体构建以植物表达载体
pBI221-LUC作为基础载体。分别利用HindIII和
BamHI酶切植物表达载体pBI221-LUC和重组克隆
载体pEasy-B-Z-ZmGBSS。37 ℃恒温酶切2 h, 65
℃加热10 min, 使限制性内切酶失活, 于1%的琼脂
糖凝胶电泳分离, 在紫外灯下将克隆载体的目的
启动子以及表达载体的线性载体目的条带进行回
收。将启动子PZmGBSS代替35S启动子与pBI221-
LUC线性载体相连, 获得目的启动子PZmGBSS的瞬时
表达载体pPZmGBSS-LUC。同时构建对照载体pU-
bi-LUC和内参载体pUbi-GUS。
2.5 基因枪转化
取‘18红’授粉15 d的果穗, 用75%酒精消毒, 再
用解剖刀削去籽粒顶端部分, 剥开种皮, 用镊子挑
出胚和胚乳, 分别置于高渗培养基上作为基因枪
转化受体。每皿放15~20个胚乳。同样取‘18红’出
苗10 d的根和叶作为受体进行转化。利用Bio-Rad
公司DuPont PDS1000/He型基因枪, 以7.584 Mpa系
统压力和0.095 Mpa真空度, 转化玉米受体。以组
成型表达载体pUbi-GUS为内参, 与构建好的瞬时
表达载体按质量比为1:4的比例混合分别转化。
2.6 瞬时表达产物的定量检测
以组成型表达载体pUbi-GUS为内参, 对转化
受体检测LUC基因表达情况, 每个转化事件, 轰击3
皿, 每皿20块, 每皿轰击3次。为了消除基因枪转
化率的影响, 在微弹载体制备时加入内参质粒pU-
bi-GUS, 检测载体和内参质粒比为4:1, 用以平衡基
因枪转化率, 同时以pUbi-GUS与pUbi-LUC质量比
为1:4的比例混合液转化事件为对照。每个处理加
入2 mL荧光素酶检测系统里的CCLR溶液(Cell
Culture Lysis Reagent, 5×), 在–70 ℃预冷的研钵中
研磨成匀浆状, 加入2 mL离心管中10 000 r·min-1离
心5 min, 取上清。
GUS荧光值的测定: 取1.5 mL离心管加入150
µL预热的GUS反应缓冲液, 加入150 µL转化后受
体提取的上清液, 混匀, 取100 µL混合液加入1 900
µL反应终止液中, 作为荧光测定时的0 h空白对
照。37 ℃反应2 h, 立即取出100 µL加入反应终止
液中。用Fluoroskan Ascent FL荧光/化学发光微孔
检测仪在355 nm的激发光、460 nm发射光下检测
0和2 h的GUS的荧光值, 2 h与0 h的荧光值相减得
到GUS酶荧光值。
LUC发光值的测定: 取50 µL的上清液置于96
孔微孔检测板中, 加入荧光素酶检测系统中的反
应液, 混匀, 立即使用Fluoroskan Ascent FL延迟12
s检测LUC发光值。用GUS值/LUC值作为表达量
来评价启动子在受体中的启动活性。
实验结果
1 ZmGBSS基因的半定量分析
以玉米自交系‘18红’授粉15 d后胚乳、胚以及
‘18红’出苗10 d后的叶片和根为材料, GBSSQP-F和
GBSSQP-R为引物进行半定量PCR分析, 以18S rRNA
为内参基因, 扩增结果(图1)可以看出, ZmGBSS基因
图1 ZmGBSS基因半定量PCR结果
Fig.1 Semi-quantitative RT-PCR analyses of ZmGBSS gene
植物生理学报1436
在胚乳中表达量相对于在根、胚、叶中比较高,
说明ZmGBSS可能为胚乳特异性启动子。
2 ZmGBSS基因启动子的克隆及序列分析
基于ZmGBSS基因的mRNA序列, 在玉米基因
组中比对得到相应的DNA序列, 根据DNA序列设
计引物, 通过PCR扩增得到ATG起始密码子上游
2 000 bp左右的序列。以玉米自交系‘18红’的叶片
DNA为模板, 引物为PZmGBSS-F和PZmGBSS-R, 扩增结
果如图2。
图2 ZmGBSS启动子序列的PCR扩增
Fig.2 The PCR amplification of ZmGBSS promoter sequences
M: Marker 2000。
通过回收目的片段并进行测序分析, 将测序
结果与NCBI上B73的基因组信息比对, 其相似性
表1 通过PlantCARE推测GBSS启动子的顺式作用元件
Table 1 Putative cis-elements in the GBSS promoter sequence using PlantCARE
顺式作用元件 基序序列 位置/bp 功能 来源植物
Skn-1基序 GTCAT –632 胚乳特异表达 水稻
GCN4基序 CAAGCCA –562 胚乳特异表达 水稻
ABRE TACGTG –1 247; –97 ABA应答元件 拟南芥
ABRE CGTACGTGCA –577 ABA应答元件 大麦
G-box CACGTA –595; –389 光响应因子 金鱼草
GARE基序 AAACAGA –1 340 GA应答元件 甘蓝
GARE基序 TCTGTTG –1 416 GA应答元件 甘蓝
P-box CCTTTTG –1 718; –1 477 GA应答元件 水稻
O2-site GATGACATGG –1 369 玉米醇溶蛋白代谢调控 玉米
5 UTR Py富集区 TTTCTTCTCT –48 转录增强 番茄
达97%。该启动子片段的大小为1 884 bp, 位于
–1 883~+1 bp (ATG)。利用软件PlantCARE对克隆
的启动子序列进行结构预测分析, 结果见表1。
由表1可以看出, 启动子PZmGBSS包含有顺式作
用元件Skn-1基序和GCN4基序, 这两个顺式作用
元件通常作为判断目的启动子是否是胚乳特异性
启动子的重要标志。由表1还可以看出, 启动子
PZmGBSS同时含有2个ABRE顺式作用元件和2个
GARE顺式作用元件, 其中ABRE作用元件受ABA
诱导, GARE作用元件受GA诱导。
3 启动子PZmGBSS的调控因素分析
为了检测目的启动子是否受到其他因子的诱
导影响, 将‘18红’授粉15 d的胚乳分别在5种不同的
诱导培养基上黑暗培养24 h。将处理后的胚乳提
取总RNA, 反转录合成cDNA, 通过qRT-PCR检测
不同处理对ZmGBSS基因表达的影响。由玉米
ZmGBSS基因的实时荧光定量检测结果(图3)可看
出, 相对于甘露醇处理, ZmGBSS基因受ABA诱导
后表达量明显提高, 提高了将近5倍。受蔗糖诱导
后表达量有略微的提高。ZmGBSS基因的表达受
葡萄糖和GA抑制。由此可见, ABA和蔗糖对玉米
PZmGBSS的启动活性表现为正向调控, 而葡萄糖和GA
却表现为负向调控。
4 启动子PZmGBSS瞬时表达载体构建
利用HindIII和BamHI双酶切重组克隆载体
pEasy-B-Z-GBSS产生1 884 bp的目的片段。将目
的片段连接到已经被HindIII和BamHI双酶切的
pBI221载体上, 将重组质粒转化大肠杆菌, 扩大培
养, 利用PCR检测, 筛选出阳性菌株, 用于制备基因
枪转化载体。将构建好的表达载体送去测序, 引
曾礼华等: 玉米淀粉合成酶基因GBSS启动子的克隆与鉴定 1437
物为pBI221的通用引物。为了克服不同转化事件
之间的误差, 准确分析PZmGBSS的启动活性, 本实验
同时构建了组成型表达的对照载体pUbi-LUC和内
参载体pUbi-GUS (图4)。内参载体主要用于与目
的载体和对照载体进行共转化分析。
4.1 目的启动子与ubiquitin启动子的活性比较
通过扩繁大肠杆菌得到大量的pUbi-GUS、
pUbi-LUC和目的启动子载体pPZmGBSS-LUC。将目
的启动子载体pPZmGBSS-LUC和pUbi-GUS以质量比
4:1的比例混合, 用基因枪转化方法将混合液分别
转化‘18红’授粉15 d后的胚乳。转化材料在28 ℃
暗培养24 h后, 提取胚乳蛋白并检测荧光活性。同
样, 将对照载体pUbi-LUC和pUbi-GUS以质量比4:1
的比例混合, 以同样的方式转化‘18红’授粉15 d的
胚乳, 每个转化重复3次, 分别检测2个转化事件的
荧光活性, 结果(图5)表明, 启动子PZmGBSS的活性明
显低于玉米ubiquitin基因启动子。
4.2 启动子PZmGBSS的组织特异性分析
将pUbi-GUS与pPZmGBSS-LUC以质量比1:4的比
例混合, 用基因枪方法将混合液分别转化‘18红’授
粉15 d后的胚乳、胚与‘18红’出苗10 d后的根、
叶。转化后的材料在28 ℃暗培养24 h, 提取蛋白并
检测荧光活性, 结果(图6)表明LUC在胚乳和胚中
的表达相对高于根和叶。
4.3 启动子PZmGBSS的调控因子分析
基于前述对目的启动子序列的顺式作用元件
分析, 本研究将pUbi-GUS与目的启动子载体以质
量比1:4的比例混合, 用基因枪将混合液分别转化
‘18红’授粉15 d后的胚乳。将转化后材料分别在3
种不同诱导培养基中28 ℃暗培养24 h, 提取胚乳中
的蛋白并检测荧光活性。
从测定结果(图7)可以看出, 由PZmGBSS启动的
LUC基因外源表达受ABA影响较大, 表达效率提
高了9倍左右。而在GA诱导下, 表达效率提高了3
倍左右。
讨　　论
1 启动子表达的组织特异性
通过利用PlantCARE启动子分析软件对本研
究所克隆的1 884 bp启动子PZmGBSS进行序列结构分
析, 发现该启动子含有作用元件Skn-1和GCN4基
序, 而这2个作用元件通常被认为是胚乳特异性启
动子的典型特征。由此推断, 玉米GBSS基因的启
图3 不同处理下玉米胚乳中GBSS基因的qRT-PCR分析
Fig.3 qRT-PCR analysis of ZmGBSS expression in maize
endosperm with different treatment
图4 瞬时表达载体的构建
Fig.4 The construction of transient expression vector
植物生理学报1438
动子具有胚乳特异性启动子的基本特征。本研究
结合基因ZmGBSS在根、叶、胚和胚乳中的表达
分析, 以及启动子PZmGBSS在根、叶、胚和胚乳中的
瞬时表达分析, 一致证明ZmGBSS基因启动子为胚
乳特异性启动子。
2 克隆启动子的活性检测
目前对克隆启动子的活性检测主要是采用瞬
时表达的方法, 该法简单快捷, 周期短。由于LUC
基因和GUS基因在许多物种中无本底效应, 适合于
外源表达活性检测, 已成为最常用的报告基因。
本实验将GUS基因作为转化的内参基因, 目的是减
少在基因枪转化过程中不同转化事件间存在的误
差。以LUC基因作目的启动子的活性检测报告基
因, 采用LUC荧光报告检测试剂盒测定LUC基因表
达蛋白, 尽可能减少实验分析中所产生的误差。
本研究利用GUS和LUC双报告基因检测系统(Hu等
2011), 对克隆启动子PZmGBSS的活性进行检测, 一定
程度上可减少实验误差 , 提高检测结果的准确
性。但本研究所克隆的启动子PZmGBSS, 相对于玉米
ubiquitin基因启动子具有较低的启动活性。这与
Hu等(2011)对玉米胚乳特异启动子PzsS3a的研究
结果相类似。
由于瞬时表达受很多因素影响, 因此利用基
因瞬时表达实验对启动子活性进行研究, 可能与
体内启动子的真实表现存在差异。当瞬时表达结
果与活体表达结果一致时, 则说明测定结果比较
可靠。当瞬时表达结果与活体表达结果不一致时,
需采用其他方法进行进一步分析验证。
3 启动子调控元件的诱导因素分析
本研究利用PlantCARE软件对启动子PZmGBSS
的序列结构进行分析, 预测到2个ABRE顺式作用
元件和2个GARE顺式作用元件, 根据已有的研究
报道, ABRE顺式作用元件受ABA诱导, GARE顺式
作用元件受GA诱导。本研究通过对离体胚乳的活
体表达和瞬时表达进行比较分析, 结果发现, 不论
对离体胚乳的活体表达进行诱导分析, 还是对离
体胚乳的瞬时表达进行诱导分析, ABA均表现为
对启动子PZmGBSS正向调控。这与来自玉米的其他
种子特异性启动子研究结果相类似(Hu等2011,
2012)。而GA的分析结果却不尽一致, 对离体胚乳
的活体表达进行诱导分析表现为负向调控启动子
的表达, 但在对离体胚乳的瞬时表达进行诱导分
析却表现为正向调控作用。因此关于GA的调控作
用有待进一步实验的验证。对离体胚乳的活体表
达分析显示蔗糖对PZmGBSS具有正向诱导作用, 这与
水稻上α-淀粉合成酶基因启动子的研究结果相一
致(Lu等1998)。
图5 目的启动子与ubiquitin启动子在授粉15 d胚乳中的表
达分析
Fig.5 Expression of the target promoter and ubiquitin promoter
in 15 DAP maize endosperm
图6 pPZmGBSS-LUC在玉米不同组织中的表达分析
Fig.6 Tissue specific expression of pPZmGBSS-LUC in maize
图7 启动子PZmGBSS在授粉15 d胚乳中的诱导表达
Fig.7 Expression of promoter PZmGBSS in transformed maize
endosperm with different treatment induced
曾礼华等: 玉米淀粉合成酶基因GBSS启动子的克隆与鉴定 1439
本研究通过对活体內目的基因的表达分析和
对所克隆的目的启动子的瞬时表达分析, 一致证
明玉米ZmGBSS基因启动子为胚乳特异启动子。
通过对克隆启动子的序列分析, 预测到2个胚乳特
异启动子顺式作用元件、2个ABA诱导作用元件
和2个GA诱导作用元件。利用离体胚乳的体外诱
导培养, 结合启动子的瞬时表达分析和內源目的
基因的表达分析, 一致证明ABA对启动子PZmGBSS具
有正向调控作用。这为进一步改良和利用玉米淀
粉合成酶基因GBSS启动子提供重要参考。
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