全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 6期，2009年 6月586
收稿 2009-04-26 修定 　2009-05-22
资助 国家科技部国家科技攻关计划引导项目(2005BA741C)。
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高山龙胆的离体培养与快速繁殖
顾地周 1,*, 赵淑玲 2, 杨静秋 3
1通化师范学院生物系, 吉林通化 134002; 2吉林省通化振国药业有限公司, 吉林通化 134100; 3吉林省通化市靖宇中学, 吉林
通化134001
In vitro Culture and Rapid Propagation of Gentiana algida Pall.
GU Di-Zhou1,*, ZHAO Shu-Ling2, YANG Jing-Qiu3
1Department of Biology, Tonghua Normal College, Tonghua, Jilin 134002, China; 2Jilin Province Tonghua Zhengguo Pharmaceu-
tical Co., Ltd, Tonghua, Jilin 134100, China; 3Jingyu High School of Tonghua City, Tonghua, Jilin 134001, China
1 植物名称 高山龙胆(Gentiana algida Pall.)又称
白花龙胆。
2 材料类别 新萌发嫩叶。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)嫩叶愈伤组织
诱导培养基: 1/4MS+6-BA 1.25 mg·L-1 (单位下同)+
NAA 0.35+3%蔗糖; (2)芽苗分化培养基: 1/4MS+6-
BA 3.5+IAA 0.25+3%蔗糖; (3)芽苗继代增殖培养基:
MS+6-BA 2.8+IAA 0.15+3%蔗糖; (4)壮苗生根培养
基: 1/2MS+IAA 0.05+1.5%蔗糖。上述各培养基
均加 0.75%琼脂, pH 5.6。培养温度为(28±2) ℃;
光照强度为 25 µmol·m-2·s-1, 光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 于8月中旬, 取高山龙胆新萌
发的嫩叶, 在超净工作台上用 70%酒精涮洗 30 s,
再用含 3%次氯酸钠溶液浸泡 10 min, 然后用无菌
水冲洗 8次, 无菌滤纸吸干表面水分, 切除被杀菌
消毒剂损伤部分(顾地周等2008a), 然后将其接种到
培养基(1)中进行愈伤组织诱导培养。30 d后叶片
完全脱分化形成表面致密光滑的绿色愈伤组织, 诱
导率达 93% 以上。
4.2 芽苗的分化 将愈伤组织切割成小块转接至培
养基(2)中培养, 28 d后愈伤组织分化出芽苗, 分化
率达 98%以上, 且苗的形态及长势均很好。
4.3 芽苗的继代与增殖 将带有芽苗的愈伤组织切割
成小块, 转接到培养基(3)中进行继代增殖培养。25
d为一个继代增殖周期, 增殖倍数平均达 50以上。
4.4 壮苗及生根 将生长健壮的丛生苗切下, 然后
将其移入培养基(4)中。培养 21 d, 幼苗的基部长
出 7~10条不定根。35 d后, 苗高达 2.5 cm, 根长
可达 3.0 cm以上, 生根率达 99%。
4.5 炼苗和移栽 壮苗生根后, 从培养瓶中取出试管
苗, 在含有 15 mg·L-1多菌灵溶液中洗去苗上残留
的琼脂(顾地周等2007), 然后植入经20倍杀毒矾消
毒过的腐烂松针、泥炭土和细河砂(3:2:1)混合的
基质中, 用透性好的塑料薄膜覆盖以保湿、保温
(顾地周等 2008b), 湿度保持在 75%, 温度控制在
(15±2) ℃, 自然光照时间 10 h·d-1, 每天中午通风换
气 20 min, 7 d后揭去薄膜, 每天早晨喷洒清水 1次
(顾地周等 2008c)。成活率达 95% 以上。
5 意义与进展 高山龙胆是龙胆科龙胆属多年生草
本植物, 在《吉林省野生动植物保护管理暂行条
例》中定为省级一类重点保护植物。是长白山区
野生珍稀濒危药用植物, 主治感冒发热、肺热咳
嗽、咽痛、目赤、小便淋痛、阴囊湿疹等症。另
外, 其花色美丽, 可引种开发做假山、花坛的绿化,
也可以做地被植物。其在长白山区数量稀少, 分布
区域十分狭窄, 仅集中分布在长白山国家级自然保
护区海拔 2 000~2 500 m的高山苔原带和高山荒漠
带上。因其种子不易获得, 常规繁殖主要靠分蘖方
式, 繁殖系数小。本文结果对其开发和利用可能有
一定的参考意义。与其同属的其它种植物的组织
培养和快速繁殖已有报道, 但高山龙胆的报道未见。
参考文献
顾地周, 何晓燕, 朱俊义, 孙忠林, 张秋菊(2007). 细叶杜香的组织
培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 43 (5): 898
顾地周, 丛小力, 姜海智, 张秋菊, 姜云天, 朱俊义(2008a). 牛皮
杜鹃的组织培养与快速繁殖. 植物生理学通讯, 44 (2): 300
顾地周, 丛小力, 姜云天, 何晓燕(2008b). 色木槭的组织培养与快
速繁殖. 植物生理学通讯, 44 (2): 314
顾地周, 丛小力, 宋利丽, 王艳萍, 姜云天(2008c). 木通马兜铃的
组织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 44 (1): 136
植物组织培养简报Brief Communications of Plant Tissue Culture