全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 7期, 2010年 7月 737
收稿 2010-04-09 修定 　2010-05-23
资助 河南科技大学博士科研基金(09001216)和河南科技大学
青年科研基金(1 30 0 0 3 53 )。
* 通讯作者(E-mail: wzjhaust@gmail.com; Tel: 0 379-
6 4 2 8 2 6 6 9 )。
棒叶落地生根高效再生体系的建立
吴正景 *, 王少先, 刘亚楠
河南科技大学林学院, 河南洛阳 471003
Establishment of Highly Efficient Regeneration System of Kalanchoe tubiflora
(Harv.) Raym.-Hamet
WU Zheng-Jing*, WANG Shao-Xian, LIU Ya-Nan
College of Forestry, Henan University of Science and Technology, Luoyang, Henan 471003, China
1 植物名称 棒叶落地生根[Kalanchoe tubiflora
(Harv.) Raym.-Hamet]植株购自洛阳花卉市场。
2 材料类别 植株中部叶片。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)不定芽诱导
培养基: MS+NAA 0.1、0.5、1.0 mg·L-1 (单位下
同)+6-BA 0.3、1.0、2.0共 9种配比; (2)继代培养
基: MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+GA3 0.1; (3)生根诱导培
养基: 1/2MS+NAA 0.05。各培养基添加 0.7%琼
脂, 在生根诱导培养基中添加 1%蔗糖, 其他加 3%
蔗糖。培养温度为(24±1) ℃; 光照强度 10~15
μmol·m-2·s-1, 光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取生长良好的棒叶落地生
根幼嫩叶片, 冲洗干净, 用 75%的酒精浸泡 10 s,
0.1%的升汞溶液中消毒 10 min, 再用无菌水冲洗
3次, 然后剪成 0.5~0.7 cm的小段接种(图 1)。
1.0+6-BA 0.3配比诱导率最高, 达到100% (其他处
理出芽率为 0~80%), 增殖倍数达 5~16倍, 平均 9
倍(图 3)。4周后切取有不定芽再生的材料转接到
继代培养基上继代培养。
图 1 棒叶落地生根的叶片外植体
4.2 不定芽诱导与继代 含低浓度NAA (0.1 mg·L-1)
的处理没有不定芽形成, 在NAA浓度为 0.5或 1.0
mg·L-1时, 外植体经愈伤组织产生不定芽(图 2), 不
定芽诱导率随6-BA浓度的升高而降低。其中NAA
图 2 棒叶落地生根愈伤组织再生不定芽
图 3 棒叶落地生根的不定芽芽丛
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
植物生理学通讯 第 46卷 第 7期, 2010年 7月738
4.3 生根与移栽 选择高度1 cm以上再生芽转接到
生根培养基上诱导生根, 第 5天开始生根, 10 d后
生根率均达到 100% (图 4); 生根后选择 2 cm以上
植株移栽。移栽前将瓶盖松开, 在自然光照下炼苗
3 d (图 5), 然后取出小苗, 洗去培养基(因根系多而
细弱, 也可以把带有部分培养基的根系用 0.1%的
高锰酸钾溶液浸泡, 避免杂菌快速繁殖), 移栽在事
图 4 棒叶落地生根不定芽生根
图 5 棒叶落地生根的再生苗炼苗
图 6 棒叶落地生根再生植株移栽成活
先浇透水的干净基质(细沙:泥炭:珍珠岩 =1:1:1)中
(图 6), 覆盖塑料薄膜保持湿润。2周后成活率达
95 % 以上。
5 意义与进展 棒叶落地生根为景天科伽蓝菜属植
物。茎直立, 粉褐色; 叶圆棒状, 上表面具沟槽, 粉
色, 叶端锯齿上可生出许多已生根的小植株(由不定
芽生成)。作为盆栽植物, 具有较高观赏价值。其
全草可入药, 具凉血止血、清热解毒等功用。同
属植物银边落地生根和大叶落地生根的组织培养已
有报道(何奕昆和奚惕 1990; 张守琪等 2007)。本
文建立了棒叶落地生根的离体高效再生体系, 并发
现落地生根不定芽诱导的激素比例较为特殊, 这有
助于探讨其不定芽再生机制; 落地生根离体培养的
成功可为其次生代谢物质研究提供参考。
参考文献
何奕昆, 奚惕(1990). 银叶落地生根不同组织和器官的离体培养.
植物生理学通讯, (5): 16~19
张守琪, 胡相伟, 李毅(2007). 大叶落地生根的组织培养和植株再
生. 植物生理学通讯, 43: 733