全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 7期, 2010年 7月 739
收稿 2010-05-06 修定 　2010-06-12
资助 浙江省自然科学基金(Y3080166)和浙江省台州市科技局
项目(0 7 1 KY 0 7 )。
* 通讯作者(E-mail: juville@cjlu.edu.cn; Tel: 0571-86835772)。
枳椇的组织培养与快速繁殖
孙骏威 1,*, 陈珍 2, 李素芳 1, 蔡冲 1
1中国计量学院生命科学学院生物系, 杭州 310018; 2台州学院生命科学学院, 浙江临海 317000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Hovenia acerba Lindl.
SUN Jun-Wei1,*, CHEN Zhen2, LI Su-Fang1, CAI Chong1
1Department of Biology, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, China; 2School of Life Sciences,
College of Taizhou, Linhai, Zhejiang 317000, China
1 植物名称 枳椇(Hovenia acerba Lindl.), 又名拐
枣、金钩梨、万寿果、金钩子、鸡爪梨等。
2 材料类别 叶片。
3 培养条件 愈伤组织诱导培养基: (1) 1/2MS+2,4-
D 2.0 mg·L-1 (单位下同)+6-BA 0.5。分化增殖培
养基: (2) 1/2MS+6-BA 2.0; (3) 1/2MS+6-BA 2.0+NAA
0.1。生根壮苗培养基: (4) 1/4MS; (5) 1/4MS+NAA
0.1; (6) 1/4MS+NAA 0.5。1/2MS为大量元素减半,
1/4MS为 1/2MS各元素减半且不添加肌醇。培养
基(1)~(3)均添加 1.5 g·L-1聚乙烯吡咯唍酮(PVP)。
培养温度为(25±1) ℃; 光照强度为 30~40 μmol·m-2·
s-1, 光照时间为 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 取刚发芽不久的细嫩叶片, 加
适量洗涤剂仔细刷洗, 再用流水冲洗 0.5~1.0 h后,
在超净台上将叶片转入0.2% HgCl2溶液内消毒5~6
min, 用无菌水冲洗 4~5次, 然后将叶片切成 1.5
cm×1.5 cm的小块, 接种到愈伤组织诱导培养基(1)
上培养。培养 15~18 d后叶片切口处开始出现愈
伤组织(图 1), 30 d时愈伤组织诱导率达 90%以上,
但愈伤组织容易褐化, 可以采取在培养基内添加
1.5% PVP和 15 d继代 1次的方法以减轻褐化。
4.2 不定芽的诱导和增殖 在继代3~4次后, 将生长
良好的愈伤组织转入分化增殖培养基(3)和(4)上, 转
后 13 d左右出现芽点, 并不断长大, 形成芽丛(图
2), 25 d时的不定芽诱导率分别为 63%和 77%。
待丛生芽长至 1 cm时, 可切下继续进行增殖培养,
诱导更多的芽。
4.3 生根壮苗培养 待苗高 3~4 cm时, 切取长势好
的无根苗, 将其转接到生根壮苗培养基(4)~(6)上进
行生根诱导。6~8 d后在培养基(5)和(6)上首先生
根(图 3), 比培养基(4)上的早 2 d左右。18 d时生
图 1 枳椇愈伤组织的诱导
图 2 枳椇不定芽的诱导
根率均达 100%, 但以培养基(4)上的根最长细, 培
养基(6)上的为最短和粗且根很少扎入培养基。
4.4 炼苗移栽 待根数超过 5条且苗高有了明显增
高时, 微开培养瓶盖进行炼苗, 1 d后取出并洗净根
部附着的培养基, 移入小粉土中(图 4)。初期可在
苗上方罩一烧杯以保持湿润, 10 d后可带土移栽入
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大田。培养基(4)和(5)上生根的幼苗移栽成活率超
过 95%, 培养基(6)上生根的幼苗移栽成活率约为
70%。
5 意义与进展 枳椇为鼠李科(Rhamnaceae)枳椇属
的落叶乔木, 分布于长江流域以南各地及河南、甘
肃、陕西等省。它对土壤和气候要求不严, 生长
速度快, 可作为绿化、退耕还林和水土保持的树
种; 木材纹理粗而美观, 材质坚硬, 适合做家俱和饰
材; 其果柄由花序轴在结果时膨大, 扭曲形成, 多分
枝, 弯曲不直, 形似鸡爪, 在分枝及弯曲处常更膨大
如关节状, 分枝多呈丁字形或相互成垂直状, 俗称
果实, 在霜降后涩味减轻变甜, 并略带芳香, 可以用
以食用或酿酒(丁向阳 2005)。另外, 树皮、叶、
果实和种子均可入药。树皮主治腓肠肌痉挛、小
儿积食等; 叶主治酒醉、风热感冒、外感腹痛等;
果实蒸熟浸酒, 作滋养补血用。种子入药名为枳椇
子, 其性平, 味甘, 具清热利尿、止渴除烦、解酒
毒的功效, 主治热病烦渴、呃逆、呕吐、小便不
利、酒精中毒等症(《全国中草药汇编》编写组
1996)。枳椇目前多为野生状态, 由于种子不易发
芽, 野生成林极为罕见。采用组织培养技术, 可在
短期获得大量种苗, 对于种质资源保护及开发利用
有一定的参考价值。同属植物北枳椇(Hovenia
dulcis)的组织培养已有报道(葛扣麟等1987; 李成浩
等 2007), 但枳椇的组织培养与快速繁殖的报道尚
未见。
参考文献
丁向阳(2005). 枳椇种质资源及利用. 经济林研究, 23 (3): 85~88
葛扣麟, 王蕴珠, 杨金水, 叶鸣明(1987). 枳椇的组织培养与植株
再生. 植物生理学通讯, (6): 44~45
李成浩, 刘宝光, 王伟达, 刘立琨, Yu CY (2007). 温度对枳椇次生
胚发生和植株再生的影响. 植物生理学通讯, 43 (3): 453~456
《全国中草药汇编》编写组(1996). 全国中草药汇编. 第 2版. 北京:
人民卫生出版社
图 3 枳椇无根苗的生根诱导
图 4 枳椇组织培养苗的移栽