全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 3期,2008年 6月512
收稿 2008-02-13 修定 2008-03-24
资助 通化师范学院自然科学基金(XS07007 9)。
* E-ma il:gudizhou@163.com;Tel:043 5-3208 073
松毛翠的组织培养和快速繁殖
顾地周 1,*,张艳红 2,宋清燕 1,顾美影 1,曹逊 1,杨色娇 1
1通化师范学院生物系,吉林通化 134002;2通化市城市园林绿化管理办公室,吉林通化 134001
Tissue Culture and Rapid Propagation of Phyllodoce caerulea L. Bab.
GU Di-Zhou1,*, ZHANG Yan-Hong2, SONG Qing-Yan1, GU Mei-Ying1, CAO Xun1, YANG Se-Jiao1
1Department of Biology, Tonghua Normal College, Tonghua, Jilin 134002, China; 2Tonghua City Gardens Afforestation Adminis-
trative Office, Tonghua, Jilin 134001, China
1 植物名称 松毛翠(Phyllodoce caerulea L. Bab.)。
2 材料类别 新萌发嫩茎尖。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)嫩茎尖愈伤组
织诱导培养基:1/3MS+2-Ip 5.0 mg·L-1 (单位下
同)+NAA 0.5+3%蔗糖;(2)愈伤组织再分化培养
基:1/3MS+2-Ip 4.5+IAA 0.4+3%蔗糖;(3)芽的
继代增殖培养基:1/3MS+2-Ip 3.5+IAA 0.25+3%
蔗糖;(4)壮苗及生根培养基:1/4MS (大量元素)+
IBA 0.6+KT 0.5+2%蔗糖。上述各培养基均加0.9%
琼脂,pH 5.4,培养温度为(25±2) ℃,光照强
度为 20 µmol·m-2·s-1,光照时间 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 嫩茎尖愈伤组织的诱导 于 7月中旬,取松毛
翠的新萌发嫩芽,在超净工作台上用 70%酒精涮
洗 2 min,再用 1%次氯酸钠溶液(含 3%青霉素)
浸泡 10 min,然后用无菌水冲洗 10次,无菌滤
纸吸干表面水分,切除被杀菌消毒剂损伤部分,
然后将其接种到培养基(1)中进行嫩茎尖愈伤组织
诱导培养。35 d后嫩芽基部完全脱分化形成愈伤
组织,诱导率达 100%,且局部已分化出少量芽
苗 。
4.2 愈伤组织的分化 将嫩芽基部产生的愈伤组织
转接至培养基(2)中继续培养,50 d愈伤组织分化
出大量芽苗。培养至 60 d,苗高可达 0 .5~ 1 .0
cm,且苗的形态及长势很好。分化率为 100%。
4.3 芽的继代与增殖 将带有芽苗的愈伤组织切割
成小块,转接到培养基(3)中进行芽苗继代增殖培
养。40 d为一个继代增殖周期,增殖倍数平均达
3 5 以上。
4.4 壮苗与生根 将生长健壮的丛生苗切下,然后
将其移入培养基(4)中。培养 30 d后,幼苗的基
部长出 2~3条带有侧根的不定根,45 d后苗根可
长至2.0 cm以上,生根率达 100%。苗高可达 1.0 cm
以上,且矮而健壮。
4.5 炼苗与移栽 壮苗生根后,从培养瓶中取出试
管苗,在含有 5 mg·L-1多菌灵溶液中洗去苗上残
留的琼脂,然后植入经 50倍杀毒矾消毒过的腐烂
松针、泥炭土和细河砂(4:1:1)混合的基质中,用
透光好的塑料薄膜覆盖以保湿保温,湿度保持在
80%,温度控制在(16±2) ℃,每天自然光照 10 h,
每天适时通风换气 1次,10 d后揭去薄膜,每天
早晚喷洒清水各 1次。成活率达 78% 以上。
5 意义与进展 松毛翠是杜鹃花科松毛翠属常绿低
矮小灌木,国家三级重点保护植物。《中国珍稀
濒危保护植物名录(第 1册)》中定为渐危种,《中
国物种红色名录》中定为无危种。其株形矮小优
美,枝叶密集,花色粉红色,色泽艳丽,具有
较高的观赏价值,可驯化为假山的观赏绿化植物
和制作盆景。在研究植物区系中也有意义。松毛
翠在严寒季节叶片仍为绿色,是上好的观赏园艺
品种。多生于高山冻原和石质山坡,对维持生态
平衡有一定的作用,其分布区域十分狭窄,仅集
中分布在长白山国家级自然保护区的高山苔原带和
高山荒漠地带,开发和利用受到极大限制。本文
结果可能对其开发和利用有一定的参考意义。与
其同科的其他种植物的组织培养已有报道。但松
毛翠的组织培养和快速繁殖尚未见报道。