全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月692
花花柴的组织培养与植株再生
张霞 曾幼玲 叶锋 张富春*
新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐 830046
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Karelinia caspica (Pall.) Less.
ZHANG Xia, ZENG You-Ling, YE Feng, ZHANG Fu-Chun*
Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang
University, Urumqi 830046, China
收稿 2006-03-30 修定 2006-05-22
资助 新疆高校创新研究群体基金项目(XJEDU2004G02)。
*通讯作者(E-mail: zfcxju@xju.edu.cn , Tel: 0991-8583259)。
1 植物名称 花花柴[Karelinia caspica (Pall.)
Less.]。
2 材料类别 花花柴种子萌发形成的幼嫩叶片。
3 培养条件 丛生芽诱导培养基:MS+6-BA 0.4
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5;生根培养基:1/2
MS+NAA 0.2。上述培养基均加入 2.5% 蔗糖和
0.7% 琼脂,pH 5.8~6.0。培养温度为 23~26℃,
光照时间为16 h·d-1,光强约34 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将花花柴的种子在超净工作
台中先用 70% 酒精消毒 30 s,无菌水冲洗 3 遍,
再用 0.1% 升汞处理 7 min,无菌水冲洗 4~7 遍。
随即将处理好的花花柴种子平铺在垫有2层滤纸、
90 mm 的平皿中,其内加入 5 mL 的无菌水。1
个星期后,将刚发芽的花花柴接种于 MS 培养基
中,待其长出 2 ~ 3 对幼叶后,将其幼嫩叶片切
下,接种于丛生芽诱导培养基中。
4.2 不定芽的分化及增殖 外植体在愈伤组织及丛
生芽诱导培养基上培养14 d,开始出现淡绿色的
愈伤组织,继续培养 7 d 左右,其上出现若干芽
点,这些芽点在该培养基上生长 10 d 后,即分
化为0.5 cm的不定芽丛。将这些不定芽切成若干
份后,继续在该培养基上培养,每20 d继代1次。
4.3 芽及根的生长 将产生的丛生芽分割成单芽,
接入壮苗培养基中壮苗,待其长成较健壮的小植
株后,切除其下部的愈伤组织,剩余部分移入生
根培养基中,15 d 后生根率为 90% 以上。每株
大致上只有1条主根(图 1)。
4.4 试管苗的移栽 打开装有再生苗的培养瓶塞,
室温条件下炼苗 1 h,小心取出,去除根上的培
养基,移入沙土和蛭石(3:1)的混合基质中,保证
湿度,控制温度和光照,其成活率在 95% 以上;
没有生根的花花柴植株移入上述混合基质中也能成
活,且能自然生根。
5 意义与进展 花花柴属菊科花花柴属,是生长
于盐生荒漠和盐生沼泽中的一种盐生植物,已被
公认为最有效的泌盐植物之一( 贾磊和安黎哲
2004)。花花柴特殊的外部形态和内部结构与之抗
盐的特性相适应,如具有泌盐腺与泌盐孔两种泌
盐器。在盐胁迫下,花花柴的叶片会出现肉质化
的现象,在根部的薄皮细胞质膜附近出现盐运输
相关的质膜泡状结构(章英才和闫天珍2003)。野
外的花花柴为多年生植株,其根深埋于地下,移
栽入室内不易成活。其种子尤其在冬季的萌发率
较低,而且由于其属于肉质化植株,生长缓慢,
因而研究周期较长。本文结果可能有利于解决这
些问题。花花柴的组织培养快速繁殖尚未见报
道。
图1 花花柴生根的诱导
参考文献
贾磊, 安黎哲(2004). 花花柴脱盐能力及脱盐结构研究. 西北植物
学报, 24 (3): 510~515
章英才, 闫天珍(2003). 花花柴叶片解剖结构与生态环境关系的
研究. 宁夏农学院学报, 24 (1): 30~33