全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月 947
云南重楼的组织培养与植株再生
杨丽云 *, 陈翠, 吕丽芬, 袁理春
云南省农业科学院高山经济植物研究所, 云南丽江 674100
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Paris polyphylla Smith var.
yunnanensis (Franch.) Hand.-Mazz.
YANG Li-Yun*, CHEN Cui, LÜ Li-Fen, YUAN Li-Chun
Alpine Economic Plant Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Lijiang, Yunnan 674100, China
收稿 2008-06-23 修定 　2008-07-14
* E-mail: yangly1211@163.com; Tel: 0888-3113773
1 植物名称 云南重楼[Paris polyphylla Smith var.
yunnanensis (Franch.) Hand.-Mazz.]。
2 材料类别 芽。
3 培养条件 愈伤组织诱导培养基: (1) MS+6-BA 2
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1; 愈伤组织增殖和分化
培养基: (2) MS+6-BA 2+NAA 0.5+KT 0.5; 生根培养
基: (3) 1/2MS+NAA 0.5+IAA 0.5。上述培养基中
均附加 3%蔗糖和 0.7%琼脂, pH 5.8, 在 121 ℃下
高压灭菌 20 min。培养温度控制在(20±2) ℃, 光
照时间 8 h·d-1, 光照强度 20~30 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的灭菌与接种 取云南重楼的芽, 自来水
冲洗2~3 h, 去除表层的芽鞘, 再用自来水冲洗干净
后, 蒸馏水冲洗 3遍。在无菌条件下, 用 75%酒
精消毒 30 s, 无菌水冲洗 3~5次, 0.1%升汞灭菌 15
min, 无菌水冲洗 5~8次。将芽外部的芽鞘按层剥
下, 切成长宽分别为 1 cm左右的小块, 芽内部不能
分层的部分按切外层芽鞘的大小切成小块, 接种到
愈伤组织诱导培养基(1)上。
4.2 愈伤组织的诱导 芽组织切块接种到愈伤组织
诱导培养基(1)上 25 d后, 接种切块开始膨大; 再过
15 d左右, 接种块切口处逐步形成淡黄色表面粗糙
突起质地较坚硬的愈伤组织。
4.3 愈伤组织的增殖和分化 把诱导出愈伤组织的
切块转接到培养基(2)上, 愈伤组织开始缓慢增殖;
90 d后再转接到新的培养基(2)上; 经过约180 d, 增
殖到直径约 0.5 cm的愈伤组织块由淡黄色逐步变
为白色, 表面由粗糙突起逐步变为平滑; 再过 30 d
后, 逐步分化形成一个芽。分化出的芽如果不进行
生根诱导, 在培养基(2)上继续生长 150 d左右可展
叶形成完整的无根苗(图 1)。210~240 d为一个增
殖周期, 每个周期可繁殖不定芽 1~2倍。
4.4 诱导生根 将分化出的芽切下, 接种于培养基
(3)上进行根的诱导。在培养过程中芽的基部逐步
褐化伸长成根茎状, 培养 60 d左右, 在褐化伸长前
端芽的基部可长出 2~3条根, 生根率为 76.3%。
4.5 移栽 将根长为 2~3 cm的芽取出, 洗净培养基
后移栽于腐殖质土中, 置于 18~20 ℃温度下, 土壤
湿度保持 50%~60%, 180 d左右芽可生长出土展叶
(图 2), 形成完整植株, 出土展叶成活率可达 65%。
图 1 云南重楼愈伤组织增殖和分化
图 2 云南重楼组织培养生根芽移栽展叶成活苗
植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月948
5 意义与进展 云南重楼是百合科重楼属多年生草
本植物, 是国家药典收入的药用重楼原植物种之
一。长期以来, 人们对重楼的利用一直依靠天然野
生资源, 由于长期过度的掠夺式的采挖, 野生重楼
遭到了毁灭性的破坏, 现己濒临枯竭, 人工种植成
为解决重楼资源匮乏的必然选择。近几年, 许多地
方虽已开始重楼的人工栽培, 但由于重楼种子在自
然状态下需要经过两年时间才能萌发, 而且出苗率
很低, 目前重楼的人工种植主要是采用野生根茎直
接种植或根茎切段种植, 这需要用大量的原料药, 会
加剧用种与原料药的矛盾。因此, 用组织培养和快
速繁殖技术解决其资源保护和开发利用之间的矛盾
值得考虑。本文中的云南重楼是我所经过多年对
重楼的引种驯化栽培过程中优选出的一个较适宜人
工栽培的品种, 其组织培养和快速繁殖还未见报
道。本文实验证明云南重楼组织培养可实现植株
再生, 虽然其分化周期较长, 分化率较低, 还不适用
于生产, 但本文结果对云南重楼进一步的组织培养
和快速繁殖研究有一定的参考价值。