全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月136
尖叶石仙桃的胚培养与快速繁殖
王莲辉*,姜运力
贵州省林业科学研究院生物技术中心,贵阳550005
Embryo Culture and Rapid Propagation of Pholidota missionariorum Gagnep.
WANG Lian-Hui*, JIANG Yun-Li
Center of Biologic Technology, Guizhou Institute of Forestry, Guiyang 550005, China
收稿 2006-12-08 修定 2006-12-31
资助 贵州省林业厅兰花基地建设项目(黔林计复[2003]145号)。
*E-mail:gzwanglianhui@163.com;Tel:0851-
3921038
1 植物名称 尖叶石仙桃(Pholidota missionariorum
Gagnep.)。
2 材料类别 蒴果内的种子。
3 培养条件 尖叶石仙桃种子萌发培养基:(1)
1/2MS+100 mL·L-1 椰乳;(2) MS+100 mL·L-1 椰乳。
原球茎继代增殖培养基:(3) MS+KT 0.5 mg·L-1 (单
位下同)+IBA 0.2+100 mL·L-1 椰乳;(4) MS+6-BA
0.5+NAA 0.2+100 mL·L-1 椰乳。壮苗及生根培养
基:(5) 3 g·L-1花宝1号+IBA 0.5+2 g·L-1活性炭。以
上培养基均加2.0%蔗糖和0.6%琼脂,pH 5.2~5.4,
培养温度(25±2) ℃,光照强度为30~40 mmol·m-2·
s-1,光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取人工授粉160 d的近成熟蒴
果经自来水洗净后,滤纸吸干,置于 1 0 % 次氯
酸钠溶液中消毒20 min,用 70%的酒精表面消毒
30 s,再以 0.1%的升汞溶液消毒5 min,最后用
无菌水冲洗 5 次。将洗净的蒴果置于灭菌滤纸上
吸干水分,用解剖刀切开蒴果,将种子接种到培
养基上。
4.2 种子萌发 种子分别接种到萌发培养基(1)和(2)
上,培养 120 d,可见乳白色原球体出现;继续
培养 3 周后,原球茎转绿;8 周后,原球茎上长
芽。培养基(1)、(2)萌发率相差不大,都在 50%
左右,但培养基(2)上萌发和生长速度较快,表明
MS培养基较1/2MS 培养基更有利于尖叶石仙桃种
子生长发育。
4.3 原球茎继代增殖 将初代培养的原球茎和芽分
别在培养基(3)、(4)上继代增殖培养。培养基(3)
上原球茎增殖速度慢,有小部分原球茎形成植
株;培养基(4)上原球茎大多形成植株且增殖速度
快,增殖效果好,植株径粗 1~2 mm,60~70 d
能继代增殖 1 次。由此可见,NAA 和 6-BA 组合
是原球茎增殖及植株形成的主要因素,IBA 和 KT
组合增殖效果不理想。
4.4 生根培养 芽长至2 cm左右即可同小假鳞茎切
下转接到生根培养基(5),进行不定根的诱导。培
养 20 d 左右,即可长出 2~5 条约 1 cm 长的根,
不定根的诱导率达 95% 以上。
4.5 移栽 将培养瓶置于温室中炼苗2周后,从培
养瓶中取出生根苗,洗净附着的培养基。将苔藓
用 1 000 倍多菌灵溶液浸泡 1 h,挤干水分,包
裹苗的根部,种植于育苗盘中,保持适度温度,
置于阴凉通风处栽培。在此期间不浇水,这样有
利于新根生长和防止病害发生,3 周后移入温室
中栽培,正常水、肥、药管理,成活率可达 90%
以 上 。
5 意义与进展 尖叶石仙桃属兰科石仙桃属植物,
全属约 30 种,分布于热带、亚洲至大洋洲。我
国有 14 种,在西南、华南及台湾地区都有分布,
贵州则有 7 种。附生草本,根状茎呈分支,假
鳞茎卵形,总状花序具 8~9 朵花,花白色带绿色
或稍有红色晕,具有很高的观赏价值。野生尖叶
石仙桃的资源再生缓慢,受到国际植物保护公约
的保护,其种子在自然状况下极难萌发,主要靠
分株繁殖,速度慢,采用无菌播种能加快繁殖速
度。本文结果对野生尖叶石仙桃资源的保护和商
业化生产开发可能有一定的参考价值。尖叶石仙
桃的组织培养和快速繁殖未见报道。