全 文 ：植物生理学通讯 第 40卷 第 6期，2004年 12月 1
杜鹃兰的组织培养与植株再生
毛堂芬* 丁映
贵州省农业科学院生物技术研究所， 贵阳 550006
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Cremastra appendiculata
MAO Tang-Fen*, DING Ying
Biotechnology Institute, Guizhou Academy of Agricultural Sciences, Guiyang 550006
收稿 2004-04-28 修定 　 2004-08-02
资助　 贵州省农业科学院基金项目(2002-03)。
* E-mail: maotangfen@sohu.com, Tel: 0851-3760332
1 植物名称 杜鹃兰(Cremastra appendiculata)。
2 材料类别 自然条件下杜鹃兰种子萌发形成的原
球 茎 。
3 培养条件 基本培养基为MS。 (1)无菌材料的建立
培养基：MS+NAA 0.2 mg·L-1(单位下同); (2)增殖
培养基：MS+6-BA 6.0+NAA 0.3；(3)分化培养
基：MS+6-BA 2.0+NAA 0.3；(4)生根培养基：
1/2MS+NAA 0.5。以上培养基均附加 2% 蔗糖、
0.8% 琼脂粉和 0.2% 活性炭，pH 5.8。培养温度
为(25±1)℃，光照时间12 h·d-1，光照度为1 500
lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得与增殖 将在自然条件下杜鹃
兰种子萌发形成的原球茎用自来水冲洗 30 min
后，用软刷轻刷根状茎缝隙处未冲掉的泥土。再
用0.1% 升汞表面消毒8 min，无菌水冲洗5~6次，
随后以灭菌后的滤纸吸干水分。在无菌条件下用
解剖刀切取幼嫩的原球茎，接种于培养基(1)上。
培养20 d后，原球茎开始长大并萌生新的原球茎。
将新生的原球茎转接入培养基(2)，培养30 d后，
每个外植体长出根状的原球茎，表面长出许多白
色的绒毛。40 d后，将根状茎横切成0.5~1 cm大
小转接到相同的培养基进行继代增殖，增殖系数
为 4~6 倍。
4.2 原球茎的分化 将增殖的根状原球茎横切成
0.5~1 cm 左右的小块，接种于培养基(3)上，根
状茎基部产生增殖，而顶端及侧端分化出芽，在
芽的分化生长过程中也存在根的同步分化生长。
培养约30 d 后芽长成1 cm 左右高的小苗。
4.3 生根及移栽 将生长约1 cm高的小苗移入培养
基(4)，约 20 d 后，原球茎基部分化出多条辐射
状小根，且长有白色绒毛，生根率 100%。待根
长到1~2 cm时，将培养瓶置室温自然条件下炼苗
3 d，再揭去封口膜炼苗。2 d后用镊子轻轻夹出
瓶苗，用自来水洗去附在试管苗根部的培养基。
用800倍液的多菌灵消毒10 min，再用清水洗净
后移栽到已消毒处理的基质(腐殖土∶蛭石 =2∶
1)上，并浇水淋透。1 星期后再浇水，喷施少许
营养液，长成再生植株。成活率达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 杜鹃兰又名毛慈姑，为兰科杜鹃兰
属多年生草本植物。毛慈姑始见《本草拾遗》，
以假球茎入药，其根茎含粘液及葡配甘露聚糖(由
甘露糖与葡萄糖 2∶1 聚成)，具有消肿、散结、
化痰、解毒等功效。主要分布于四川、贵州等
地。由于长期无节制的乱采滥挖，野生资源已枯
竭，现已列为我国珍稀濒危植物。采用组织培养
快速繁殖育苗技术，有可能解决杜鹃兰繁殖困难
和种苗缺乏的问题。有关杜鹃兰的组织培养和植
株再生尚未见报道。
图1 杜鹃兰的原球茎分化