全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 6期，2008年 12月 1171
同色兜兰的组织培养与快速繁殖
王莲辉, 姜运力, 余金勇, 罗在柒, 陈景艳 *
贵州省林业科学研究院生物技术中心, 贵阳 550005
Tissue Culture and Rapid Propagation of Paphiopedilum concolor (Bateman)
Pfitz.
WANG Lian-Hui, JIANG Yun-Li, YU Jin-Yong, LUO Zai-Qi, CHEN Jing-Yan*
Center of Biological Technology, Guizhou Academy of Forestry, Guiyang 550005, China
收稿 2008-09-02 修定 2008-11-10
资助 贵州省科技厅农业、社会发展科技攻关项目(黔科合
NY 字[2006]3062 号)。
* 通讯作者(E-mail: gzwanglianhui@163.com; Tel: 0851-
3 9 2 1 0 3 8 )。
1 植物名称 同色兜兰[Paphiopedilum concolor
(Bateman) Pfitz.]。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) MS+100 mL·L-1
香蕉汁; (2) 1/2MS+100 mL·L-1香蕉汁。原球茎继
代增殖培养基: (3) 1/2MS+NAA 0.2 mg ·L-1 (单位下
同)+100 mL·L-1香蕉汁; (4) 1/2MS+NAA 0.4+100
mL·L-1香蕉汁; (5) 1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.2+100
mL·L-1香蕉汁; (6) 1/2MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+100
mL·L-1香蕉汁。壮苗及生根培养基: (7) 1/2MS+
IBA 0.2+2 g·L-1活性炭; (8) 1/2MS+IBA 0.4+2 g·L-1
活性炭。以上培养基均加 2.0%蔗糖和 0.6%琼脂,
pH 5.2~5.4。培养温度(25±2) ℃; 光照强度 30~40
µmol·m-2·s-1, 光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 人工授粉 210 d的荚果经自
来水洗净后, 置于10%次氯酸钠溶液中消毒20 min,
用 70%的酒精表面消毒 30 s, 再以 0.1%的升汞溶
液消毒 15 min, 最后用无菌水冲洗 5次。将洗净
的成熟荚果置于灭菌滤纸上吸干水分, 用解剖刀切
开荚果, 将种子接种到培养基上。
4.2 种子萌发 发育 210 d的种子分别接种到萌发
培养基(1)和(2)上, 暗培养 5周后, 可见白色原球体
出现, 转入光下培养, 3周后原球茎转绿, 10周后原
球茎上长芽。培养基(1)的萌发率比较低, 在 20%
左右, 且培养1个月后发现部分原球茎褐化死亡; 培
养基(2)上种子的萌发速度和生长速度更快, 约有
60%萌发, 需 7周左右, 表明 1/2MS培养基较MS
培养基更有利于同色兜兰种子生长发育。
4.3 原球茎继代增殖 将初代培养的原球茎和芽分
别转接至培养基(3)~(6)上继代增殖培养, 培养基
(3)、(4)上原球茎大多形成植株, 增殖速度慢; 培养
基(5)、(6)上原球茎增殖速度快, 其中培养基(6)增
殖效果好, 80~90 d能继代增殖 1次。由此可见,
生长素NAA和细胞分裂素6-BA组合是原球茎继代
增殖的主要因素, 以细胞分裂素与生长素浓度比为
10:1时效果最佳。
4.4 生根培养 将较大的无根苗分别转入生根培养
基(7)、(8)上培养, 生根率达 90%以上, 植株生长
旺盛, 7周后长成 1~2条肉质根, 生长为高 3~5 cm
的小苗, 培养基(7)比培养基(8)根系发达。可见, 低
浓度的 IBA有利于根的产生, 高浓度 IBA对根的萌
发有抑制作用, 因而生产中采用(7)作为生根壮苗培
养基为宜。
4.5 移栽 将培养瓶置于温室中炼苗2周后, 从培养
瓶中取出生根苗, 洗净附着的培养基, 将水苔用
1 000倍多菌灵溶液浸泡 1 h, 挤干水分, 包裹出瓶
苗根部, 种植于穴盘中。管理中保持适度温湿度,
置于阴凉通风处栽培, 期间不要浇水, 有利于新根
生长和防止病害发生, 6周后移入温室中栽培, 进
行正常水、肥、药管理, 成活率可达 90%以上。
5 意义与进展 兜兰属兰科兜兰属植物, 迄今已发
现有 90余种, 分布于亚洲热带; 我国有近 44个种,
大多分布于我国西南地区。兜兰之所以广受人们
喜爱, 是因为它具有讨人喜欢的株型和美丽迷人的
花朵, 叶片大小也具多样性, 花序通常直立或弯曲,
兜兰属最为重要的特征是它的花, 具深囊状的唇瓣,
尤如淑女穿着的拖鞋。我国是世界兜兰的重要分
布地和许多新种模式产地, 全部种类都有观赏价值,
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社会需求量大。由于长期无节制乱采滥挖, 野生资
源已枯竭, 现在不仅已列入国家的珍稀濒危植物而
加以保护, 而且还收载于国际贸易公约(CITES)附
录二中, 受到国际保护。同色兜兰常用种子或分株
法繁殖, 其种子在自然条件中极难萌发, 且繁殖率
低。采用组织培养的技术可能有利于解决其繁殖
困难和种苗不足的问题。短期内可以提供大量种
苗, 同属的带叶兜兰组织培养与快速繁殖已有过报
道(曾宋君等2006), 但是以同色兜兰种子进行组织
培养和快速繁殖尚未见报道。
参考文献
曾宋君, 陈之林, 段俊(2006). 带叶兜兰的无菌播种和离体快速繁
殖. 植物生理学通讯, 42 (2): 247