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黄檗的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月792
黄檗的组织培养和快速繁殖
郭勇1,* 石大兴1 孙雁霞2 林桂芸2 陈先才1
1 四川农业大学林学园艺学院,四川雅安 625014;2 成都大学生物工程系,成都 610066
Tissue Culture and Rapid Propagation of Phellodendron chinense Schneid.
GUO Yong1,*, SHI Da-Xing1, SUN Yan-Xia2, LIN Gui-Yun2, CHEN Xian-Cai1
1College of Forestry and Horticulture, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China; 2Department of Biological
Engineering, Chengdu College, Chengdu 610066, China
收稿 2004-12-19 修定   2005-05-08
资助 四川省重点学科建设项目(SZD0419)。
*E-mail: guoyong0519@yahoo.com.cn, Tel: 0835-2882787
1 植物名称 黄檗(Phellodendron chinense Schneid.)。
2 材料类别 茎 段 。
3 培养条件 诱导培养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.05+3% 蔗糖;(2) MS+6-BA
0.25+NAA 1.5+3% 蔗糖。增殖培养基:(3) MS+
6-BA 1.0+NAA 0.1+GA 0.25+3% 蔗糖。生根培
养基:(4) 1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.1+1.5% 蔗糖。
所有培养基均附加 0.7% 琼脂,pH 5.8~6.0。培
养温度为(25±2)℃,光照时间 12 h·d-1,光强为
30~40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 于4月上旬,剪取黄檗幼嫩
枝条,用自来水冲洗干净,在 1% 消洗灵液中漂
洗10 min,流水冲洗2 h。然后在超净工作台上,
用75%酒精消毒20 s,0.1%升汞(HgCl2)液消毒8
min,无菌水冲洗5次。将无菌材料切割成1~2 cm
长、带1~2个芽和不带芽的两种茎段,供接种用。
4.2 丛生芽的诱导和增殖 将带芽茎段接种在培养
基(1)上,不带芽的茎段接种在培养基(2)上。在
培养基(1)上接种7 d后,腋芽开始萌动;20 d时
长成 3 cm左右高的小芽苗,每个芽苗上有2~4个
侧芽,诱导率可达87.5%;30 d 后转移到培养基
(3)上进行继代增殖培养,25~30 d 可增殖 1 代,
增殖系数为4.2。在培养基(2)上接种 7 d 后,外
植体基部开始产生黄绿色的愈伤组织;20 d 时诱
导率可达82%;30 d 后愈伤组织开始分化出浅绿
色小芽丛;40 d 后每个芽苗可分化出 3~4 个芽,
切割小芽丛并转移到培养基(3)上继代增殖,30 d
左右增殖 1 代,增殖系数可达 6.5。
4.3 生根与移栽 将继代培养获得的健壮无根单苗
(苗高≥3 cm)转移到培养基(4)上进行生根培养。
6 d 时单苗基部切口处微有膨大;15 d 后开始生
根;30 d 时统计,生根率为 82.5%,平均根数
4.6,平均根长1.8 cm (图1)。将生根瓶苗在室温
散射光下培养5 d,揭开封口膜后室内再培养5 d,
取出生根苗,洗去根部培养基,移栽到温室中,育
苗基质为珍珠岩和河沙(1∶1)。保持湿度在 85%
以上,每周定期喷洒 1 / 2 M S 大量元素营养液。
15 d时开始有新叶长出,30 d时成活率为84%。
5 意义与进展 黄檗又名黄皮树,系芸香科黄檗属
落叶乔木。以树皮入药,含小檗碱、黄檗酮、
黄檗内脂、药根碱(jatrorrhizine)及少量非洲防己碱
等成分,有健脾止泻、清热泻火、燥湿解毒和
抑菌等功效,是我国传统的“三木药材”之一,
也是提取小檗碱的重要原料。黄檗主要靠种子和
根蘖繁殖,繁殖速度慢,难以满足市场需求。组
织培养快繁技术可在短期内得到大量优质整齐的组
培苗,可能是解决种苗短缺的有效途径之一。有
关黄檗的组织培养和快速繁殖尚未见报道。
图1 黄檗的生根苗