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北方羊耳蒜的组织培养与植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 2期,2008年 4月288
北方羊耳蒜的组织培养与植株再生
纪春艳 *
牡丹江师范学院生物系,黑龙江牡丹江 157012
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Liparis makinoana Schltr.
JI Chun-Yan*
Department of Biology, Mudanjiang Normal College, Mudanjiang, Heilongjiang 157012, China
收稿 2007-11-26 修定  2008-03-14
* E-mai l:swxjcy@12 6.com;Tel:04 53 -6 51 10 26
1 植物名称 北方羊耳蒜(L ip a r i s m a k in o an a
Schltr.)。
2 材料类别 鳞茎。
3 培养条件 (1 )芽诱导培养基:MS+6-BA 1.5
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;(2)继代培养基:
MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+50 g·L-1椰汁;(3)生根培
养基:1/2MS+NAA 0.5。以上培养基均加入 6.5
g·L- 1琼脂、3 .0% 蔗糖,pH 5 .8。培养温度为
(24±2) ℃,光照时间 12 h·d-1,光照度为 25~30
µmol·m-2s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取北方羊耳蒜的鳞茎,在自
来水下冲洗20~40 min后,在超净工作台上用75%
酒精消毒 10~15 s,无菌水冲洗 3次,然后用 0.1%
HgCl2浸没材料(加入 1~2滴吐温)振荡灭菌 5~7
min,无菌水冲洗 4~5次,每次 1 min,用消毒
滤纸吸干材料表面的水分,然后将无菌的鳞茎纵
切成 0.5 cm的小块作为外植体接种。
4.2 芽的诱导 将鳞茎块接种于芽诱导培养基(1)
上,培养 10 d左右,鳞茎块膨大;15 d后分化
形成浅绿色小突起即芽点;25 d左右小突起发育
成幼芽。切下幼芽接种于培养基(2 )上,进行继
代培养,每一鳞茎经过20 d左右可形成2~3株幼苗。
4.3 诱导生根与移栽 选择高为 1.5~2.0 cm、生长
健壮的幼苗接种到培养基(3)上,15 d左右,幼
苗基部形成根原基,25 d左右形成 2~3条白色的
根,32 d后生根率达 95% 以上。当根长至 2~3
cm时,将瓶口打开,在培养室内炼苗 3~4 d,再
移至温室内炼苗 2 d后取出小苗,用清水洗去培
养基,移栽至腐植土(灭过菌)的疏松肥沃土质的
花钵内(图 1),放在半阴通风处,注意保暖,每
天适当地喷雾浇水,保湿,避免阳光直射。移
栽成活率达 90% 以上。
5 意义与进展 北方羊耳蒜属兰科羊耳蒜属,是
一种陆生、濒危的兰科植物,生于林缘湿地,高
10~30 cm。假鳞茎卵状球形。基生叶 2枚,椭
圆形,长 4~12 cm,宽 2.5~7 cm,表面具不明
显的网状脉。花序总状,具十余花,淡紫色,
较稀疏;分布于我国东北,日本、朝鲜也有分
布。可活血调经、止血止痛、强心镇静,治崩
漏白带、产后腹痛、外伤急救等,具很高的药
用价值。由于种子很小,胚乳极端退化,胚也
没有分化,多数需要靠真菌共生来促进其萌发,
繁殖率极低,采用组织培养技术可以快速繁殖,
可能有助于解决中药材来源和有效地保护野生资
源。兰科中观赏花卉蝴蝶兰(李进进等 2000)、大
花君子兰(陈为民 1986)等的组织培养已有报道,
但北方羊耳蒜组织培养和快速繁殖尚未见报道。
参考文献
陈为民(1986). 大花君子兰子房、花托和花丝培养再生植株. 植
物生理学通讯, (3): 46
李进进, 廖俊杰, 柯丽婉, 蔡佩玲(2000). 蝴蝶兰根段的组织培养.
植物生理学通讯, 36 (1): 37
图 1 北方羊耳蒜的植株