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银带虾脊兰的离体繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第1期,2006年2月 71
银带虾脊兰的离体繁殖
曾宋君 陈之林 温铁龙 黄向力 段俊*
中国科学院华南植物园, 广州510650
In vitro Propagation of Calanthe argenteo-striata C. Z. Tang et S. J. Cheng
ZENG Song-Jun, CHEN Zhi-Lin, WEN Tie-Long, HUANG Xiang-Li, DUAN Jun*
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China
收稿 2005-03-24 修定   2005-06-20
资助  中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-319)、
中国科学院华南植物园前沿项目(20023301)。
*通讯作者(E-mail:duanj@scib.ac.cn, Tel:020-
37252978)。
1 植物名称 银带虾脊兰(Calanthe argenteo-striata
C. Z. Tang et S. J. Cheng)。
2 材料类别 种 子 。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1) VW;(2) VW+
椰子乳 100 mL·L-1;(3) VW+椰子乳 100 mL·L-1+
活性炭2 g·L-1;(4) 1/2MS;(5) 1/2MS+100 mL·L-1
椰子乳;(6) 1/2MS+椰子乳 100 mL·L-1+活性炭2 g·L-1;
(7)花宝 1号(美国Haponex公司产品,N∶P∶=7∶
6∶19) 1 g·L-1+花宝2号(美国Haponex公司产品,
N∶P∶K=20∶20∶20) 1 g·L-1+ 蛋白胨 2 g·L-1;
(8)花宝1号 1 g·L-1+花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2
g·L-1+ 椰子乳 100 mL·L-1;(9)花宝 1号 1 g·L-1+
花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+椰子乳100 mL·L-1+
活性炭2 g·L-1。原球茎增殖培养基:(10)花宝1号
1 g·L-1+花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+ NAA 0.5
mg·L-1 (单位下同) +6-BA 1. 0; (11)花宝1号 1 g·L-1+
花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+椰子乳 100 mL·L-1;
(12)花宝1号 1 g·L-1+花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2
g·L-1+ NAA 0.5+ 6-BA 1. 0+椰子乳 100 mL·L-1。生
根壮苗培养基:(13)花宝1号 1 g·L-1+花宝2号 1
g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+活性炭2 g·L-1;(14) 花宝1号
1 g·L-1+花宝2号 1 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+活性炭2
g·L-1+香蕉汁100 g·L-1。以上培养基中均附加2.0%
蔗糖和 0.7% 琼脂,pH为 5.2~5.4。培养温度为
(25±2)℃,光强30~40 mmol·m-2·s-1,光照12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取人工授粉90、120、150 d
的荚果,自来水洗净后,用 7 0 % 酒精表面消毒
30 s,再以0.1% 升汞溶液消毒15 min,最后用
无菌水洗5次。将洗净的荚果置灭菌滤纸上吸干水
分,用解剖刀切开荚果,将种子散落到培养基上。
4.2 种子萌发 授粉90 d的种子通过显微观察发现
还未发育成球形胚,在所有培养基上均未萌发。
120 d时种子未成熟,只在培养基(2)、(5)、(8)上
有少量萌发。150 d的种子接种到培养基(1)~(9)
上,(1)、(4)、(7)上未有萌发;在(2)、(5)、(8)上
30 d 左右开始萌发,50 d 时萌发率分别是 35%、
44% 和 52%;在(3)、(6)、(9)上 40 d 左右才有萌
发,60 d 时萌发率分别是 20%、32% 和 40%。
4.3 原球茎培养和出芽 银带虾脊兰种子萌发率低,
原球茎在培养基(2)、(3)、(5)、(6)、(8)、(9)上直
接成苗,不能进行原球茎的增殖。利用萌发不久
的原球茎在培养基(10)~(12)中可进行增殖,40 d
左右时,原球茎的增殖倍率分别为 2.2、2 . 5、
3.6,但同时部分原球茎会分化形成小苗。
4.4 生根壮苗培养 将种子萌发和继代培养得到的
小苗移到培养基(13)和(14)中,生根率达 100%。
培养基(13)中的苗较瘦弱;(14)中小苗生长粗壮,
根系发达,40 d左右能形成4~6 cm高的试管苗。
4.5 移栽 试管苗在温棚中或室温下炼苗2周后,取
出并洗净附着的培养基,种植于泥炭土和蛭石混
合的栽培基质中。保持足够的空气湿度,精心管
理,成活率可达 7 5 % 左右。
5 意义与进展 银带虾瘠兰原产我国广东、广西、
云南、贵州等地区,属地生兰类。根状茎近圆
锥形;叶片椭圆形或卵状披针形,上有 5~6 条银
灰色的条带,十分美观;花葶高出叶面,具 1 0
多朵花,较少,花瓣白色,有一定的观赏价值。
可盆栽或地栽观赏。其种子无胚乳,在野外需与
真菌共生才能萌发,发芽率极低。人工栽培中虽
然可以用常规的分株繁殖获得种苗,但繁殖倍率
低,用无菌播种种子萌发的难度也较大。本文通
过培养基的优选已获得了大量的试管苗,移栽后
种植时叶片能保持原来的斑纹。银带虾瘠兰的种
子离体培养和组织培养均未见报道。