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梅花草的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月798
梅花草的组织培养和快速繁殖
贾瑞冬1 贾桂霞1,* 郝喜龙1 牛林龙2 周国峰2
1 北京林业大学园林学院,北京 100083;2 黑里河国家级自然保护区,内蒙古赤峰 024219
Tissue Culture and Rapid Propagation of Parnassia palustris L.
JIA Rui-Dong1, JIA Gui-Xia1,*, HAO Xi-Long1, NIU Lin-Long2, ZHOU Guo-Feng2
1College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China; 2Heilihe National Nature Reserve, Chifeng,
Inner Mongolia 024219, China
收稿 2005-09-30 修定   2005-11-21
*通讯作者(E-mail: gxjia@bjfu.edu.cn, Tel: 010-
82376017×604)。
1 植物材料 梅花草(Parnassia palustris L.)。
2 材料类别 无菌苗。
3 培养条件 种子萌发采用MS基本培养基。不定
芽诱导与增殖培养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单
位下同); (2) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+GA 2.0。壮
苗培养基:(3) MS+NAA 0.1。生根培养基:(4)
1/2MS+NAA 0.1。上述培养基中均附加 3% 蔗糖
和 0.6% 琼脂,pH 5.8。培养温度为(24±2)℃,
光照时间16 h·d-1,光强 27~36 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 梅花草种子细小,容易流
失,灭菌操作困难。用离心法[1]和白布包裹[2]灭
菌效果较好。先将种子置于 20~25℃清水中浸泡
30 min,吸水膨胀后种子沉入三角瓶底部。滴入
2~3 滴洗洁精,加适量自来水振荡10 min,用白
布扎口置于流水下冲洗3 h。在超净工作台上,以
70% 酒精表面消毒 30 s,无菌水冲洗 3遍,再加
入2%次氯酸钠溶液浸泡15 min,无菌水冲洗4~6
次,接入 MS 基本培养基。7 d 后种子相继萌发,
一直延续 30 d 左右。在萌发过程中,不断用镊
子将其挑到新的 MS 培养基中,并使胚根扎入培
养基,胚轴直立。
4.2 丛生芽的诱导 萌发 30 d 后,76% 幼苗正常
生根。生根的幼苗健壮,株高1~2 cm,4~6 片真
叶;没有生根的矮小瘦弱,根部发黑。将幼苗
去根后接种在培养基(1)、(2)中。30 d后,培养基
(1)中增殖系数为6~8,芽大小正常而健壮;培养
基(2)中基部形成较大的愈伤组织,其周围长出很
多小芽,有的长成球形的丛生芽,增殖系数为15
以上。在培养基(1)、(2)中增殖芽不断切割继代,
能不断增殖,迅速得到很多种苗。
4.3 壮苗和生根 将培养基(1)中得到的丛生芽接种
在培养基(4)中,10~15 d 生根,30~40 d 后长出
大量根,生根率 95%。将培养基(2)中的梅花草
切割后接种在培养基(3)中,20 d后细弱的丛生芽
增殖健壮,基部有短而细弱的根长出;将丛生芽
切割后接种在培养基(4)中,20 d后长出大量的根。
4.4 移栽 将生根苗揭开封口膜,在实验室中炼苗
2 d,取出并洗净根部的培养基。分别移植到珍珠
岩、蛭石和1/2珍珠岩+1/2蛭石的基质(高压灭菌
40 min),放入温室,搭小拱棚,保持湿度 90%,
适当遮阴,7 d 后取出,14 d 移入培养土中,常
规管理,成活率都达 9 0 % 以上。另外,把培养
基(4)中的生根苗侧芽剥掉,移入灭菌后的蛭石
中,放入小拱棚和生根苗一起管理,7 d 可见须
根,20 d 后可移栽,生根率达80%。部分移栽苗
浇1/2Hoagland营养液[3]后,成活率有所提高。
5 意义与进展 梅花草是虎耳草科梅花草属的多年
生草本植物,高 10~50 cm。基生叶丛生,茎生
叶 1 ;花瓣 5 ,大小和形状似梅花,白色。生
于湿草甸,分布于我国东北、华北、西北,日
本及北温带其他一些地区,亚寒带也有分布。梅
花草观赏价值高,可用于湿地、水景园或室内观
赏,在国外早有园林应用。全草煎服可治痢疾。
梅花草种子细小,发芽率低,苗生长缓慢,苗
期长,播种繁殖困难。我们于 2005 年 1 月在温
室中播种,4 月只有 6~8 片叶子,9 月份基生叶
明显长大,也有 2 ~ 3 侧芽分生,但未开花。组
织培养法能加快繁殖速度,繁殖系数高,缩短了
无性生长时间,这对满足园林和医药需求可能有
潜在的应用价值。梅花草的组织培养和快速繁殖
未见报道。
参考文献
1 徐艳, 石雷, 刘燕等. 大叶黑桫椤孢子的无菌培养. 植物生理
学通讯, 2004, 40(1): 72
2 秦廷豪, 邹宗兰. 鸟巢蕨的组织培养. 植物生理学通讯, 2004,
40(3): 349
3 马生健, 曾富华, 蓝海婷等. 假俭草的组织培养与植株再生.
植物生理学通讯, 2004, 40(1): 62