全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 4期,2007年 8月 735
川滇金丝桃的组织培养
任华,王永清 * ,林静
四川农业大学林学园艺学院,四川雅安 625014
Tissue Culture of Hypericum forrestii N. Robson
REN Hua, WANG Yong-Qing* , LIN Jing
College of Forestry and Horticulture, Sichuan Agricultural University, Ya’an, Sichuan 625014, China
收稿 2007-01-04 修定 2007-06-01
* 通讯作者(E-mail:yqw14@sicau.edu.cn;Tel:0835-
2 8 8 2 7 8 2 )。
1 植物名称 川滇金丝桃(Hypericum forrestii N.
Robson)。
2 材料类别 茎段、叶片、幼嫩的花蕾。
3 培养条件 (1)茎段芽诱导培养基:MS+6-BA
2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;(2)叶片、幼嫩
的花蕾愈伤组织的诱导培养基:MS+2,4-D 1.0+
NAA 0.3+TDZ 0.01;(3)愈伤组织的增殖培养基:
MS+6-BA 3.0+NAA 0.1+2,4-D 0.1;(4)愈伤组织的
分化培养基:MS + 6-BA 1.0+NAA 0.1;(5)无根
试管苗增殖培养基:MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(6)
生根培养基:1/2 MS+NAA 1.0+IBA 0.5+AC 0.3%。
上述培养基均附加 0.8%琼脂、3%蔗糖,pH 5.6~
5.8。培养温度为(25±2) ℃,光照 14 h·d-1,光
照强度 30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选当年生幼嫩茎段、叶片及
幼嫩的花蕾,在流水中冲洗干净,茎段剪成 3 cm
左右长(带一个节),用滤纸吸去多余的水分,在
超净工作台上用 70%酒精浸泡 30 s,无菌水冲洗
3遍,再转入 0.1%的升汞溶液中振荡消毒 5 min,
无菌水冲洗 5遍,然后置于高压灭菌过的铺有滤
纸的小瓷碟中,茎段修剪成长 0.5~1.0 cm带 1个
芽的小茎段种在分化培养基(1)中进行培养;叶片
剪成 1.0 cm×1.0 cm左右大小、花蕾去除花托大
小 0.5 cm左右接种在分化培养基(2)中进行培养。
4.2 丛生芽的诱导与增殖 无菌小茎段在分化培养
基(1)上 15 d后茎节处逐渐分化出丛芽,30 d后
芽长 2.5 cm左右。此时剪下芽并切成 1 cm左右
小段(带 1~2个节)转入增殖培养基(5)上培养,40
d时平均苗高 3 cm,增殖倍数为 5~8倍。
4.3 愈伤组织的诱导、分化及增殖 接种到诱导培
养基(2)的叶片、幼嫩的花蕾 15 d后开始启动,30
d后长出绿色而致密的愈伤组织。将所得的愈伤
组织上有褐化现象的剥下来转入愈伤组织增殖培养
基(3)中,30 d后愈伤组织增殖 3倍左右。再将
其转入愈伤组织分化培养基(4)中,约 10 d后开始
分化,30 d后每块愈伤组织可分化出 4~6个长 2
c m 以上的芽。
4.4 生根与移栽 芽苗长至约 2 cm高时,剪下转
入生根培养基(6)中,15 d后每株生根 3~5条,生
根率达 100%。苗高 5~6 cm、根长 3~4 cm时移
栽,先打开培养瓶封口膜,置于室温散射光下,
2 d后取出试管苗洗去根部培养基,移栽入花盆
中。栽培基质为 1:1:1的壤土、珍珠沙、腐叶土,
移栽后花盆上覆盖塑料薄膜,放在散射光下,湿
度保持 90% 左右,10 d后揭去塑料薄膜,试管
苗成活率达 90%。
5 意义与进展 川滇金丝桃属于藤黄科金丝桃属常
绿灌木,花期 6~7月,在川西有时一年开 2次花
(4月初和 8月中旬)。本种产于中国四川西部,云
南西北、东北及西南部地区,缅甸东北部也有。
生长于海拔 1 000~3 000 m山坡、溪边或松林林
缘,喜光又耐一点荫,忌阳光直射,夏季强光
会引起叶片灼伤,我国尚未引入园林使用。它含
有的金丝桃苷和总黄酮, 有消炎和镇痛疗效,可
治疗多种疾病。迄今,与其同科的西南金丝桃、
金丝梅和元宝草的快繁已有报道(关文灵2003;曾
虹燕和周朴华 2002;雷颖和焦兴礼 2004),但川
滇金丝桃的组培快繁尚未见报道。
参考文献
关文灵(2003). 西南金丝桃茎段的离体培养和植株再生. 植物生
理学通讯, 39 (3): 226
雷颖, 焦兴礼(2004). 金丝梅的组织培养和快速繁殖. 植物生理学
通讯, 40 (5): 580
曾虹燕, 周朴华(2002). 元宝草愈伤组织诱导和器官分化. 植物生
理学通讯, 38 (3): 231~234