全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月348
神农香菊花蕾的组织培养
孙明* 张启翔
北京林业大学园林学院,北京100083
Tissue Culture of Flower Bud of Dendranthema indicum var. aromaticum
SUN Ming*, ZHANG Qi-Xiang
College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
收稿 2004-11-22 修定 2004-12-13
资助 国家林业局重点项目(2003-008-L08)。
*E-mail: sun.sm@163.com, Tel: 010-62391461
1 植物名称 神农香菊(Dendranthema indicum var.
aromaticum)。
2 材料类别 花蕾。
3 培养条件 以MS为基本培养基。愈伤组织诱导
培养基:(1)MS+6-BA 2 mg·L-1(单位下同)+NAA 1;
芽分化培养基:(2)MS+6-BA 2+NAA 0.2,(3)
MS+6-BA 0.2+NAA 0.02;生根培养基:(4)
1/2MS+NAA 0.1,(5)1/2MS+IBA 0.3,(6)MS。上
述培养基均添加3% 蔗糖、0.5% 琼脂,pH 为 5.8。
培养温度为25~28℃,光照度1 600~2 000 lx,光
照时间 14 h·d-1,湿度 70%~80%。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 取神农香菊无病虫害、生长
饱满的幼蕾,先用洗涤液洗净,自来水冲 4 h 后
滤纸吸干。在超净工作台上,用 7 0 % 酒精浸泡
15 s , 0.1%的升汞消毒液浸泡8~10 min,无菌水
冲洗 5~6 次。用镊子剥去外层鳞片,切开花蕾,
将花托、花瓣接种于培养基(1)上。7~11 d 开始
萌动,形成少量愈伤组织;20 d 后形成大愈伤组
织块,随后分化出芽丛。此时,将花托、花瓣
转接到分化培养基中,否则芽丛在(1)中继续生
长,易产生玻璃化现象。
4.2 增殖培养 将初代培养的芽丛分离,接种于培
养基(2)、(3)中,保持室温25~28℃。4 d 左右基
部均开始膨大,8 d 左右腋芽萌动,生长,很快
形成株丛。继代周期为 20 d 左右,增殖系数约
为6。培养基(2)中生长的植株,叶片出现黄化现
象,并且基部形成大块愈伤组织,影响芽丛生长
和腋芽、侧芽的分化生长,随着培养的继续,部
分植株褐化死亡,褐化率达到 57%;在(3)中的
植株则表现良好 ,叶片浓 绿,成活率 达到
9 8 % 。
4.3 生根 将培养基(3)中分化出的芽切成1~2 cm长
的茎段,接种到培养基(4)~(6)中,诱导生根。
6 d 后,(4)中茎段切口膨大,并出现绿色突起;
14 d 左右,平均每个茎段产生 6 条 1~3 cm 长的
根,生根率达到 99.2%;(5)、(6)中茎段也可生
根,生根率分别为 92.6% 和 87.4%,但叶片易黄
化,植株有徒长现象。由此可见,神农香菊生
根的最适培养基为(4)。
4.4 移栽 当根长3~4 cm、植株高 4 cm左右时,
将三角瓶瓶口打开,在温室散射光下炼苗3~4 d,
洗净根部琼脂,移至装有无菌基质(草炭∶珍珠
岩= 2∶1 ) 的育苗盘中,立即浇水,保持室温
20~25℃,适当遮荫。20 d 后成活率达到 100%。
5 意义与进展 神农香菊是菊科菊属植物野菊的一
个新变种,多年生草本。植株矮小,叶、花等
具有浓郁的特殊香气,含有 a- 侧柏酮、b- 侧柏
酮及龙脑等萜类化合物,广泛用于化工、饮料和
医药等工业。其花、叶有清热解毒的功效,是
一种值得研究、开发、利用的药用植物新资源。
神农香菊分布范围不大,资源有限,需要积极进
行人工繁殖和栽培,合理地开发利用。茎段及花
蕾的组织培养是繁殖神农香菊的有效途径,目前
这方面的研究尚未见报道。