全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月1018
植物组织培养中畸形胚的发生和控制
孔冬梅 1,2,*, 沈海龙 3
1山西大学生命科学与技术学院, 太原 030006; 东北林业大学 2生命科学学院, 3林学院, 林木遗传育种与生物技术教育部重
点实验室, 哈尔滨 150040
Formation and Control of Abnormal Somatic Embryogenesis in Plant Tissue
Culture
KONG Dong-Mei1,2,*, SHEN Hai-Long3
1School of Life Science and Technology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China; 2College of Life Science, 3College of Forestry,
Key Laboratory of Forest Tree Genetic Improvement and Biotechnology of Ministry of Education, Northeast Forestry University,
Harbin 150040, China
提要: 文章介绍植物组织培养中畸形胚的常见类型、发生原因、发生机制、调控手段及畸形胚成苗等研究进展。
关键词: 体细胞胚发生; 形态建成; 畸形胚
收稿 2008-06-11 修定 2008-09-04
资助 山西省自然科学(青年)基金(2008021042)和山西大学青
年科技基金(2 0 0 7 1 0 8 )。
* E-mail: kdongmei@sxu.edu.cn; Tel: 0351-7010599
体细胞胚胎(以下简称体胚)发生是植物体细胞
在离体培养条件下再生植株的一条基本途径。随
着体胚发生研究的不断深入, 已从至少100种植物
中诱导出了体胚(陈金慧等 2003)。但由于多数植
物体胚发生中还存在这样或那样的问题, 致使体胚
发生的实际应用受到限制。畸形胚的形成是植物
体胚发生中甚为普遍的现象之一。例如, 我们曾从
水曲柳(Fraxinus mandshurica)的成熟和近成熟合子
胚获得约30%的体胚诱导率, 但这些体胚中绝大多
数发育时呈现畸形 , 不能萌发成苗(孔冬梅等
2006)。畸形胚由于其形态、生理异常, 难以发育
成苗或不能移栽成活, 严重制约了体胚发生技术在
生产和育种中的应用。此现象已引起人们的普遍
关注。本文就植物组织培养中畸形胚的常见类
型、发生机制及调控手段的研究进展作介绍。
1 畸形胚的形态表现
体胚发生发育过程中产生畸形是相当普遍的,
根据其形态大致可分为以下几种类型(邝哲师等
1996; 刘德华等 1999; 亓建飞等 2004; 陶铭 2001;
郑泗军等 1993)。
1.1 连体胚 2个或多个体胚相互联合在一起, 形成
双生胚或多生胚。体胚之间的联合可以发生在胚
轴、子叶或胚根部位, 甚至 2到多个胚之间从头到
尾均联合在一起, 从而形成复杂的连体胚现象。连
接部分较少的连体胚用机械的方法容易分开, 连接
部位较多的则不易分开。
1.2 子叶畸形胚 包括子叶形态畸形和子叶数目畸
形两种, 具体表现为子叶发育不全、过小, 甚至无
子叶; 子叶数目减少或增加, 或子叶连合形成喇叭
状, 或子叶过度生长、膨大, 形成超度含水态等。
1.3 重新愈伤组织化的体胚 体胚切割或受创伤时,
在含有较高浓度生长素或细胞分裂素的培养基上很
容易重新愈伤组织化。愈伤组织化可以发生在体
胚的任何发育时期、任何部位, 甚至整个胚体都可
以重新愈伤组织化, 致使胚停止发育。未受创伤的
体胚在一定条件下也可以重新愈伤组织化。
1.4 超度含水态胚 也称玻璃化胚。整个体胚肿胀
畸形, 呈半透明状, 其形态结构类似于超度含水态
苗。超度含水态胚的子叶加厚或变薄, 常过度生
长、膨大, 胚芽、胚根很少发育。
1.5 白化胚 体胚子叶的全部或局部失绿而形成白
化胚, 萌发后形成白化苗。
1.6 生长点畸形胚 包括以下 3种情况。(1)单极胚:
无茎尖生长点或无根尖生长点, 一般单芽极体胚成
苗率比单根极高; (2)多极胚: 由至少 2个芽生长点
和根生长点构成, 以芽多极胚最多见, 萌发后往往
植物生理学与农业及生产应用 Plant Physiology and Agriculture and Applications
植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月 1019
形成多头苗; (3)无极胚: 没有胚根和胚芽, 由于没
有生长点, 一般不能发育成植株。
1.7 其它类型的畸形胚 以上是比较典型的畸形胚
类型。由于植物种类繁多, 在复杂的培养条件下畸
形胚的形态也往往复杂多样, 无法用上述几种类型
来归类。如棉花(Gossypium hirsutum)组织培养中,
所形成的体胚的胚轴多种多样, 有的细长, 有的粗
短, 有的扁平, 有的呈纺锤形, 形态各异, 只有胚轴
均匀细长者才是正常的体胚(张宝红等 1996)。
事实上, 更多的畸形胚会同时表现多种类型复
合的特征。最常见的复合类型就是子叶畸形与芽
分生组织缺失相伴。而同一种植物, 也往往在同一
培养体系中表现多种异常形态。这为研究畸形胚
的发生及控制带来困难。尽管如此, 近年来对畸形
胚的发生原因和控制的研究还是取得了不少进展。
2 畸形胚发生的原因
畸形胚的发生与遗传背景、培养基成分和培
养环境等多种因素有关。
2.1 外源植物激素和生长调节物质 外源激素和生
长调节物质是影响畸形胚发生的主要因素之一。
大多数植物, 如香蕉(Musa sapientum)、水稻(Oryza
sativa)、香根草(Vetiveria zizanioides)和一些松属
(Pinus)树种等, 较高浓度的 2,4-D是这些植物体胚
发生所必需的。2,4-D作为强效生长素, 在胚性愈
伤组织的长期继代培养过程中所导致的变异有累积
效应, 影响体胚的发生并且导致畸形胚的产生。其
它类型的生长素和细胞分裂素的类似物如NAA和
6-BA对体胚诱导也有类似的效应, 即长期处在高浓
度的生长素和细胞分裂素和它们的类似物的培养基
中可导致畸形胚的发生。
乔琦等(2005)在防风(Saposhnikovia divaricata)
体胚诱导研究中发现, 当长期用 0.5 mg·L-1 2,4-D
进行胚性愈伤组织的继代培养, 和分化培养基中生
长素和细胞分裂素类物质的任何之一或二者均超过
诱导培养基所用的浓度时, 体胚的发生率即大大降
低, 并且产生大量畸形胚, 如多子叶胚、连体胚、
玻璃化胚和喇叭形胚等。菠萝(Ananas comosus)叶
基愈伤组织诱导体胚产生的最佳 2,4-D浓度为 5.0
mg·L-1; 当 2,4-D浓度在 7.0~11.0 mg·L-1时, 畸形胚
比率即随着2,4-D浓度的增加而大幅度增加; 2,4-D
浓度达到或超过11.0 mg·L-1时产生的体胚即不能萌
发(何业华等 2007)。大豆(Glycine max)畸形胚的
发生也与2,4-D有直接关系(Buchhelm等1989)。高
浓度的NAA能促进菠萝叶基胚性愈伤组织产生体
胚, 但高浓度NAA得到的体胚多为畸形胚, 很难继
续增殖 , 且在萌发时只生根不发芽(何业华等
2 00 7)。周志国等( 20 0 7)报道萝卜( R ap ha nu s
sativus)小孢子培养基中添加6-BA可以显著提高体
胚的诱导率, 6-BA在促进小孢子分裂形成体胚的同
时畸形胚也明显增加, 并对体胚进一步分化成苗有
抑制作用。
赤霉素类(GA3)对陆地棉等少数植物体胚发生
有一定的促进作用。但GA3必须控制在一个低浓
度的范围, 浓度过高也会导致畸形胚的发生(吴蝴蝶
等 1997; 张宝红等 1996)。
2.2 培养基成分 早期培养基中添加L-脯氨酸可以
明显促进月季(Rosa hybrida)2个品种的叶柄或根发
生体胚, 但在体胚成熟培养阶段, 添加 L-脯氨酸则
诱发单子叶和融合子叶胚的产生, 且畸形胚发生率
与L-脯氨酸的浓度呈正相关, 这些胚均不能正常萌
发(Marchant等 1996)。
2.3 培养条件和方式 玻璃化胚的形成与培养容器
内的湿度有密切关系, 封口膜的透气性差时容易产
生玻璃化胚, 这种体胚多半不能发育成正常植株。
连续在黑暗下培养, 茶树(Camellia sinensis)子叶的
畸形胚发生率高; 在光照下培养的茶树子叶外植体,
其畸形胚发生率明显降低, 且在子叶片上形成畸形
胚的数量也少(刘德华等1999), 说明光照对体胚的
形态建成也有一定的影响。
2.4 继代时间和次数 培养时间是造成体胚畸变的
一个重要原因。实验证明, 随着胚性愈伤组织培养
时间的延长和继代次数的增多, 体胚变异频率逐渐
升高, 再生能力逐渐下降。薛美凤等(2002)观察
‘川棉239’胚性愈伤组织不同培养时间产生体胚的
结果表明, 随着培养代数的增加, 畸形胚发生频率
有呈逐渐升高的趋势, 最高可达 90%以上。在连
体胚、无级胚、单级胚、多级胚、子叶畸形胚、
胚轴畸形胚、玻璃化胚、白化胚和重新愈伤化胚
等多种畸形胚中, 除连体胚有可能进一步发育长成
再生植株外, 其它类型的胚均难以发育成正常苗。
2.5 其它因素 一般认为次生胚发生是体胚增殖的
一种方法, 但次生胚的不断产生可能会影响初级胚
本身的正常发育, 最终发育成畸形(Popescu 1996)。
此外, 不同种或不同品种, 或基因型不同, 畸形胚发
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生潜力也不同, 如陆地棉(李克勤等 1991)。
3 畸形胚的发生机制
近年来, 采用各种先进的仪器和技术手段, 从
细胞学、生理生化、基因表达调控等角度研究植
物体胚发生机制的进展虽然迅速, 但对体胚形态变
异的机制了解还很少(Ibaraki等 2000; 亓建飞等
2004)。
3.1 畸形胚的形态建成 为了了解体胚形态异常的
机制, Ibaraki等(2000)连续观察胡萝卜体胚形成过
程的结果表明, 一些胚性细胞团是由几个相互独立
生长的部分组成的, 如果两个部分联合形成一个体
胚, 则偶尔会看到卷曲和肿块状的异常胚形成。据
此认为一个胚性细胞团内不同部分的联合是胚卷曲
或膨大的原因之一。因此他们认为, 收集只有一个
组成部分的胚性细胞团或分离一个胚性细胞团的不
同部分, 培养形态上整齐一致的高质量体胚的几率
即会大一些, 但有关这一方法的具体实施目前还是
未知数。Halperin (1966)还观察到小的胚性细胞团
(<45 µm)只形成单个胚, 而大的胚性细胞团(>45
µm)可以形成多个体胚, 这些胚的一端融合在一起,
即为连体胚。后来有人研究也发现, 原胚复合物离
解成单个原胚的效率和原胚本身的大小是影响体胚
群体中各类胚比例的主要因素, 较小的原胚可以顺
利地进行体胚各个阶段的发育; 如果过大, 分化培
养基中即会形成两个生长中心, 从而发育成双头胚
甚至多重胚; 如果原胚增大部位发生在芽端, 则在
带根的胚轴中即形成两个苗芽(沈海龙 2005)。因
此认为每个胚性细胞团的大小与最终形成体胚的数
量和形态可能有关系。
3.2 畸形胚发生的组织学 胚胎发生过程中内部组
织的分化是在球形胚到心形胚的过度阶段发生的
(Kaplan和 Cooke 1997), 内部组织分化的异常有可
能表现为外部形态上的畸形。正常胚胎在心形胚
以后的胚轴内可见到呈“Y”形状分布的维管束, 此
种维管束从茎顶端的两侧一直延伸到根端, 其形成
层最为明显。位于子叶基部的顶端分生区很明显,
其组成细胞的核明显大于周围细胞; 根端也具有明
显的顶端分生组织和根冠。而畸形胚往往没有茎
顶端分生区, 胚轴内也无清晰的形成层(Choi等
2001), 甚至没有茎维管束的分化(孔冬梅等 2006)。
畸形胚的形成与原胚结构发育的顺序不正常
有关。正常的分化和发育通常是按细胞分裂、细
胞增大和分化的顺序, 这种顺序对于形态发生的结
果影响很大。Ammirato (1983)从细胞学角度总结
过子叶发育畸形的几种发生情况认为: 一般双子叶
植物体胚子叶的形成是由原胚经过一系列的细胞分
裂实现的, 其中一圈细胞形成 “子叶托”, 并出现两
个生长中心, 由此发育出两个子叶原基; 如果出现
过多的细胞分裂或过早的细胞增大, 这种“子叶托”
细胞的结构即受影响, 可能形成多个生长中心, 发
育出多个子叶; 如果形成子叶托的细胞分裂过少, 最
后则只能形成一个子叶; 如在子叶托形成, 甚至在
子叶原基发生之后, 细胞分裂活动仍旺盛进行, 子
叶发育即会彼此连成一片; 如果细胞分裂活性过低,
细胞液泡化即过早出现, 从而导致子叶发育停止。
3.3 畸形胚发生中的细胞学变异 畸形胚是遗传变
异的一个重要表现。一般认为, 间接发生途径比直
接发生途径所产生的体胚更容易产生变异, 这无疑
与愈伤组织的形成有关。
细胞学研究表明, 染色体变异是植物体细胞无
性系变异的主要来源之一。在离体培养条件下, 染
色体的变异主要发生在愈伤组织及其继代培养过程
中。邝哲师等(1996)观察继代培养一段时间的荔
枝(Litchi chinensis)幼胚胚性愈伤组织的细胞组织的
结果表明, 胚性愈伤组织细胞中存在大量染色体数
目变异, 有整倍性, 也有非整倍性的变异。棉花继
代培养6个月以上的胚性悬浮系中胚性愈伤组织细
胞也存在大量染色体数目和结构的变异, 有从二倍
到六倍体的整倍性变异, 也有16~78以上的非整倍
性变异, 在有丝分裂间期存在着多核和微核, 中期
出现环状染色体、末期染色体桥等结构产生变异
(郑泗军等 1993)。因此这些植物胚性愈伤组织中
细胞染色体变异可能是导致大量畸形胚形成的原因
之一。陈发菊等(2007)的研究也表明, 胚性愈伤组
织细胞在染色体水平上的变异, 可能是瘿椒树
(Tapiscia sinensis)畸形胚产生的根本原因。另有研
究表明, 染色体数目变异与培养时间也有很大关系
(郭晓红等 2001; 叶新荣和余毓君 1989)。
3.4 畸形胚发生的位置 茶树子叶柄的切口附近畸
形胚的发生有位置效应, 即在子叶柄切口附近处正
常胚分化率高, 越靠近子叶片, 畸形胚分化率越高,
甚至在子叶片上的不定胚几乎全部是畸形胚(肖海
军等2005), 这可能是细胞的位置效应所至, 其机制
还有待进一步研究。
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3.5 畸形胚发生与内源生长素的极性运输 胚性细
胞的形成通常要求高浓度的生长素。胚性细胞一
旦形成, 其后的形态发生和发育则要求一定水平的
内源生长素梯度的极性分布, 任何影响内源生长素
梯度分布的因素都会影响胚胎正常的形态建成。
例如, 生长素极性运输抑制剂三碘苯甲酸(2,3,5-
triiodobenzoic acid, TIBA)干扰胚性细胞团内生长素
的极性运输可以影响体胚的形态建成和后期发育。
刺五加(Eleutherococcus senticosus)体胚发生的研究
表明, 早期球形胚时期用 TIBA可影响胚轴和子叶
的正常分化, 导致胚的愈伤组织化或子叶融合, 分
化出子叶以后用TIBA, 则具融合子叶的体胚既不生
根也不长茎, 只有胚轴伸长(Choi等 2001)。这表
明, TIBA不仅抑制胚轴形成和两侧对称性分化, 也
抑制根 /茎生长点的形成。有些研究结果还表明,
球形胚期形成的生长素的极性运输对体胚的进一步
发育尤为重要(Liu等 1993; 谢从华和柳俊 2004)。
甘薯(Ipomoea batatas)体胚发生的研究表明, 体胚
生理极性的建成先于形态极性(Chee和 Cantliffe
1989); 而拟南芥(Arabidopsis thaliana)的一些缺失
生长素极性运输的突变体在形态上则表现为根/茎
生长点的缺失(Mayer等1993; Laux等1996; Aida等
1997), 这些结果表明, 维持体胚内部一定水平的生
长素的极性梯度分布, 对体胚正常的形态建成至关
重要。
大多数植物体胚诱导阶段需要 2,4-D, 而体胚
形成和发育阶段则需要去除 2,4-D, 否则体胚的正
常分化即受抑制, 2,4-D的这种抑制作用似乎也是
由于内源生长素的梯度分布受到干扰所致(Choi等
2001)。
3.6 畸形胚发生的分子生物学 体胚的形成和进一
步发育决定于起始细胞的最初几次分裂。与细胞
分裂、生长和分化的有序过程有关的遗传因素在
胚胎发生的最初阶段非常重要, 这些遗传因素是畸
形胚发生的主要原因之一(Popescu等 1996)。荔枝
的 RAPD分析表明, 不同细胞系类型之间、白色正
常胚与玻璃化胚之间的DNA分子标记存在差异, 这
表明, 白色胚与玻璃化胚之间的差异不仅仅是生理
性的, 其遗传基础也有不同(黄素华和赖钟雄2006)。
4 畸形胚发生的控制和转化
一般认为畸形胚在体胚发生的初期就已形成,
随着培养的进程而逐渐表现出来(张宝红等 1996),
因此对畸形胚发生的控制应在体胚发生的早期采取
措施。有关控制畸形胚发生的研究还不是很深入,
大多通过调整培养基和改善培养环境来降低畸形胚
发生率。
4.1 畸形胚发生的控制
4.1.1 调整生长调节物质的种类和浓度 在有些裸
子植物中, 培养基中加入适当浓度的ABA, 胚发育
不正常的情况, 如子叶合生和早熟发芽等均会受到
抑制。加入适量的ABA, 不仅能够抑制杂交鹅掌
楸(Liriodendron tulipifera)畸形胚的产生, 而且能够
提高体胚的萌发率; 一旦球形胚形成以后, 立即转
入不含任何生长调节物质的MS培养基上, 也能有
效减少畸形胚的发生(陈金慧 2003)。胚性愈伤组
织形成后降低2,4-D浓度, 或选用适当浓度NAA替
代 2,4-D, 对降低一些植物畸形胚的发生率也有显
著效果。盾叶鬼臼(Podophyllum peltatum)胚性愈
伤组织在含有2,4-D的MS培养基上能够诱导体胚
形成, 但形成的体胚在后期表现为子叶畸形或没有
极性等, 若将胚性愈伤组织先放在含ABA的培养基
中培养3周, 再转至不含生长调节物质的培养基上,
则体胚的后期发育即表现正常(Kim等 2007)。适
当浓度的ZT对于高频率诱导荔枝胚性愈伤组织分
化正常胚至关重要(赖钟雄和桑庆亮 2003)。通过
调整生长调节物质的种类和浓度来控制畸形胚的发
生在防风、棉花中也有明显的效果(马骥等 2005;
乔琦等 2005; 迟吉娜等 2005; 许欣然等 2005)。
4.1.2 制造一定的水分胁迫环境 体胚发育后期一
定程度的水分胁迫有助于体胚正常发育, 促进体胚
成熟。在培养中, 通常通过增加蔗糖浓度、添加
PEG、用适当种类和浓度的固化剂等来提高渗透
压, 或用直接干燥的方法造成水分胁迫, 从而减少
畸形胚的发生。
在荔枝组织培养中, 胚性愈伤组织分化可形成
白色胚和玻璃化胚, 白色胚的比例随着蔗糖浓度的
增加而呈上升趋势, 蔗糖浓度为20和40 g·L-1时, 白
色胚所占比例分别为 60%和 90%左右, 蔗糖浓度
提高到 60~90 g·L-1时, 白色胚可达 100% (赖钟雄
和桑庆亮 2003)。在棉花的组织培养中, 胚性愈伤
组织向胚分化时用 2.0、2.5和 3.0 g·L-1三种不同
浓度的Gelrite, 畸形胚的发生率分别为4.0%、2.5%
和 2.0% (吴家和等 1999)。Kumria等(2003)在固体
培养基上铺上滤纸, 以使放在滤纸上的棉花胚性愈
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伤组织处于一定的水分胁迫状态, 其体胚的正常发
生和发育即受到明显的促进。
一定程度的水分胁迫促进胚的正常发育, 可能
是由于此种条件下的胚性愈伤组织从培养基中吸收
营养物质受到影响之果, 这种营养饥饿状态可能在
一定程度上会促进胚性愈伤组织向胚分化, 进而促
进苗的形成。
4.1.3 调整培养基成分 AgNO3对细胞染色体有稳
定作用。AgNO3可以抑制乙烯的形成或抑制其生
理效应以及防止胚性愈伤组织由于体胚发育而丧失
胚性, 在一些植物胚性愈伤组织长期继代保持中起
关键性作用(赖钟雄等 2001)。另外, 在MS培养基
中加入500 g·L-1的水解酪蛋白CH, 同时将NH4NO3
减半和KNO3加倍可显著降低棉花异常胚发生的比
例(迟吉娜等 2005)。
4.1.4 缩短培养时间 培养时间也是造成表型变异
的原因之一。因此, 要克服大量畸形胚的产生, 减
小再生植株的变异频率, 就必须缩短培养时间, 用
短期培养的胚性愈伤组织诱导体胚发生。
4.1.5 调整接种和培养的方式 调整接种胚性愈伤
组织的密度、数量以及放置方法也能控制畸形胚
的发生。如在防风体胚发生中, 减少接种密度并且
将胚性愈伤组织按其颗粒的自然状态分割成较小的
块, 或者先将胚性愈伤组织进行悬浮培养24 h后再
转入固体培养基中, 便可以有效减少芽端畸形胚和
连体胚的发生, 从而促进正常体胚的发生和发育(马
骥等2005)。控制高温高湿的出现以及选用透光良
好、通气较好的培养容器也能有效减少多种植物
的畸形胚发生。
4.2 畸形胚的转化 控制畸形胚发生的最终目的是
为了得到正常健康的小植株, 但很多时候采取的各
种措施并不一定收到明显的效果。尤其是在直接
途径发生体胚、从球形胚到子叶胚的过度又特别
快的情况下, 往往很难把握住措施的合适时期。如
我们实验室培养的水曲柳子叶曾观察到, 从外植体
表面产生早期原胚到子叶胚的形成只需3 d就可完
成, 而且体胚的发生不同步(孔冬梅 2004), 很难找
到畸形胚发生的有效控制途径。但如果能在体胚
转化成苗过程中采取一定的措施, 促使畸形胚萌发
后能得到正常的小植株, 也可以达到同样的目的。
一些研究已查明, 体胚早期发育的不正常现象并不
一定完全影响嗣后的器官建成和正常发育, 在后期
采取一定的措施促使一些类型的畸形胚转化为正常
苗也是可行的(达克东等 2004; 冯大领等 2004; 王
声斌等 2002; Loureiro等 2005)。
通常柑橘(Citrus)体胚发育后期常会发生较高
比例的畸形胚, 王声斌等(2002)将切割的宽皮橘蕉
柑(Citrus reticulata)畸形胚放在MT+2.0 mg·L-1 6-
BA+0.5 mg·L-1 IAA培养基上不断地继代培养, 可以
诱导形成形态正常的丛生芽 , 再将此幼芽放在
1/2MT+1.0 mg·L-1 NAA的生根培养基上培养 1个
多月后大部分能正常生根成苗。2,4-D诱导的花生
(Arachis hypogaea)畸形体胚较严重, 往往发育不全,
特别是没有茎生长点, 但这些体胚可在含有低浓度
BA、KT和TDZ的培养基中萌发形成再生植株(梁
丽琨等 2004)。枳椇(Hovenia dulcis)在体胚诱导培
养基上只能形成无再生能力的畸形胚( E o m 等
2002), 而适当将培养温度提高至 30 ℃时, 这些畸
形的初生胚上可以诱导出大量发育正常的次生胚,
这些次生胚在20 ℃下大多能正常萌发和再生(李成
浩等 2007)。经过调整培养方式或培养条件, 或对
培养物进行适当处理后, 畸形胚可以正常成苗在棉
花、花生、柑橘、爬山虎( P a r t h e n o c i s s u s
tricuspida)和苹果(Malus domestic)中也都获得成功
(张宝红等1996; Chengalrayan等1997; 洪勇等2000;
冯大领等 2004; 达克东等 2004)。利用畸形胚能够
再次愈伤组织化并形成胚性愈伤组织这一特点可使
陆地棉胚性愈伤组织的胚性至少保持20个月(迟吉
娜等2005), 这表明从畸形胚得到正常苗是可能的。
5 结束语
体胚的发生是一个复杂的过程, 研究这一问题
仅仅局限于形态学和细胞胚胎学的直观描述是不够
的, 还应该在已有研究基础上, 结合细胞胚胎学过
程和体胚发育过程中的生理生化机制, 探讨体胚发
生的分子生物学基础。近年来对组织培养中畸形
胚的形态、发生和控制的研究已有了一定的基础,
但有关体胚发生的分子调控和机制的研究相对比较
薄弱, 对畸形胚形成的根本原因还缺乏足够的了
解。今后, 还应加强这方面的研究。
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