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阳桃的组织培养与植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月 69
阳桃的组织培养与植株再生
刘建福1,* 吴 清2 梁国鲁3
1华侨大学生物工程系, 泉州362011; 2宜宾市园林管理局, 宜宾644000; 3西南农业大学园林园艺学院,重庆 400716
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Averrhoa carambola
LIU Jian-Fu1,*, WU Qing2, LIANG Guo-Lu3
1Department of Biology Engineering, Huaqiao University, Quanzhou 362011; 2Yibin Gardens Bureau ,Yibin 644000; 3College of
Landscape Architecture & Horticulture, Southwest Agricultural University, Chongqing 400716
收稿 2003-03-24 修定  2003-10-08
* E-mail:swauliujf@sina.com, Tel:0595-2025606
1 植物名称 阳桃(Averrhoa carambola),别
名杨桃、五敛子、三廉子。
2 材料类别 无菌胚乳。
3 培养条件 诱导愈伤组织培养基:(1)MS+
2,4-D 2.0 mg.L-1(单位下同) +6-BA 0.2;(2)MS +
2,4-D 3.0+6-BA 0.1。诱导分化培养基:(3)
MS+ZT 3.0+NAA 0.2;(4)MS+ZT 1.0+NAA 0.2;
(5)MS+ZT 5.0+NAA 0.2。生根培养基:(6)
1/2 MS+IBA 0.2+IAA 0.1。上述培养基均附加3.0%
蔗糖、0.7% 琼脂、0.2% 活性炭,pH 5.8。培养
室温度为(25±2)℃ ,光照度为1 500~2 000 lx,
光照时间为12~14 h.d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取成熟、饱满的干种子去
壳,在超净工作台上,先用75% 乙醇浸泡10~12
s,无菌水冲洗2次,再用0.1% HgCl2(加数滴吐
温)消毒10 min,无菌水冲洗4~5 次,接种于
MS 培养基上萌发。待种子萌发至胚乳开裂但尚未
完全脱落时,在超净工作台上仔细剔除其种胚,
再将胚乳分段切取接种在愈伤组织诱导培养基上。
4.2 愈伤组织的诱导 将从种子中剥离的胚乳接种
到愈伤组织诱导培养基(1 )和(2 )上,培
养15 d后,多数胚乳边缘均出现不同程度局部膨
大,形成一种乳白色半透明组织,而且存在不同
程度褐化。此时,为避免褐化程度加剧,须将
褐化组织剔除并及时转移到成分相同的新鲜培养基
上继续诱导愈伤组织。再经35 d培养,膨大部分
胚乳开始形成乳白色的愈伤组织。培养基(1)
上的愈伤组织结构致密,愈伤组织量多且褐化程
度轻,诱导率达93.5%,初始愈伤化时间为10 d;
培养基(2)上的愈伤组织结构疏松,愈伤组织
量少且褐化程度严重,诱导频率为 43.3%,初始
愈伤化时间达18 d。故较为适宜的愈伤组织诱导
培养基为(2 )。
4.3 不定芽的诱导 将经诱导得到的乳白色致密胚
乳愈伤组织接种到培养基(3 )~ (5 )中诱导
分化。30 d后,多数愈伤组织由乳白色转为淡绿
色。再培养一段时间,愈伤组织团块上出现绿色
芽点,进一步分化成芽,而且同一愈伤组织块上
可形成多个小芽,有些芽点可形成芽丛。60 d 后
进行统计,培养基(3)上的分化频率最高,达
73.7%,而且分化出的芽形态正常、生长旺盛,
愈伤组织褐化程度轻;而培养基(4 )和(5 )
上的分化频率较低,褐化程度严重,平均分化芽
数较低,畸形苗率较高。因此,较适宜的诱导
分化培养基为(3)。将增殖后的不定芽连同基
部小块愈伤组织切下并接入继代培养基中繁殖,
即可获得大量不定芽。2~5 cm高胚乳苗既可继续
进行扩繁,又可将其进行生根培养。
4.4 生根与移栽 将继代培养的高达2~5 cm、生
长健壮的试管苗,切除基部愈伤组织,接种到培养
基(6)上诱导生根。40 d 后试管苗基部长出1~
3根乳白色粗壮的不定根,生根频率达87.1%。当
试管苗长至6~7 cm高时,将其从培养室中移至气
温较低的室内放置4~5 d后,开瓶炼苗2~3 d,然
后在瓶内加少许自来水炼苗1~2 d再移栽。栽植
前先将培养土灭菌,苗栽后浇透水,初期加盖覆
盖物进行保温、保湿,并保持较高的空气湿度。
移栽 15 d 后统计,成活率达 85%。
5 意义与进展 阳桃属酢酱草科阳桃属植物,为
热带常绿果树,原产于亚洲东南部。我国栽培历
史悠久,广泛分布在台湾和海南两岛及大陆南方
各省、自治区等,为南方名果之一。其成熟果
实清甜多汁,风味可口,营养丰富,含人体需
要的多种维生素、氨基酸、矿物质及有机酸等,
果形独特美观,又具有药用价值。目前阳桃品种
落后严重制约着生产和发展,亟待选育优良品
种。本文对阳桃的快速繁殖和进一步选育优良品
种可能有一定的参考价值。有关阳桃的组织培养
尚未见报道。