全 文 ：植物生理学通讯 第 41卷 第 2期，2005年 4月196
樱桃种间杂交种的幼胚培养
李文生 牛爱国 闫国华 张晓明 周宇 姜立杰 张开春*
北京市农林科学院林业果树研究所，北京100093
Immature Embryo Culture for Interspecific Hybrids of Cherry
LI Wen-Sheng, NIU Ai-Guo, YAN Guo-Hua, ZHANG Xiao-Ming, ZHOU Yu, JIANG Li-Jie, ZHANG Kai-Chun*
Research Institute of Pomology and Forestry, Beijing Academy of Agricultural and Forestry Science, Beijing 100093
收稿 2004-06-10 修定 　 2004-12-13
资助　 北京市自然科学基金重点项目(6041002)。
*通讯作者(E-mail: zhangkaichun@baafs.net.cn, Tel: 010-
82596007)。
1 植物名称 樱桃种间杂交后代。杂交组合有甜樱
桃(Prunus avium)×酸樱桃(P. cerasus)， 甜樱桃(P.
avium)×欧洲李(P. domestica)、甜樱桃(P. avium)×
中国樱桃(P. pseudocerasus)、酸樱桃(P. cerasus)×
欧洲李(P. domestica)、酸樱桃(P. cerasus)×中国樱
桃(P. pseudocerasus)。
2 材料类别 幼胚。
3 培养条件 基本培养基为F14。 (1)幼胚培养培养
基：F14+6-BA 0.5 mg·L-1(单位下同)+IBA 1.0+GA
1.0；(2)胚芽继代增殖培养基：F14+6-BA 0.5+IBA
0.2+GA 0.2；(3)生根培养基：F14+IBA 0.5+NAA
0.05。培养基中蔗糖为2%，琼脂为0.7%, pH 5.4。
培养温度(25±2)℃，光照12 h·d-1，光照度为2 000
lx。
4 生长与分化情况
4.1 幼胚的获得 从即将脱落的幼果取出种子，或
者果实虽成熟但胚停留在硬核期发育状态的秕种
子。
4.2 幼胚的消毒 将去除果肉的果核用清水洗净，
然后在超净台上用70%酒精表面灭菌30 s，再用
0.1% 升汞浸泡5 min，无菌水冲洗 5次，获得无
菌的果核。再用 70% 酒精擦洗过的尖嘴钳破掉种
壳，用灭过菌的镊子剥去种皮取出幼胚，接种于
幼胚培养培养基上。
4.3 幼胚的培养 接种后的幼胚10 d后见子叶内胚
芽转绿，15 d 后胚芽萌发，25 d 后丛生芽形成。
4.4 胚芽的继代增殖及生根移栽 分割丛生幼芽转
入继代增殖培养基，30 d 左右增殖3~5 倍。待芽
数量较多时，从丛生芽上切取1~2 cm高的小芽转
入生根培养基，再经30 d左右每个小芽可发根3~5
条形成幼苗，生根率达 80%~100%(图 1)。打开
瓶盖锻炼 7 d，小心取出幼苗，洗净培养基栽入
蛭石中驯化30 d，再转入土、砂、草炭(1∶1∶
1)的营养土中栽培，成活率达到 87%。第 2 年春
末夏初定植于大田。
5 意义与进展 种间杂交是创新樱桃种质资源的重
要方法，但由于亲本间的亲缘关系较远，胚发育
不协调和胚败育是杂交的主要障碍，败育胚的挽
救是种间杂交成功与否的关键。本文建立的幼胚
培养方法已经在 5 种樱桃种间杂种培养中获得成
功，表明此种培养方法有广泛适用性，实用价值
较大。经杂交种种苗的形态鉴定或分子检测，证
实了杂种的真实性。我们采用此方法已在 2 年间
获得各种组合的几十个种间杂种株系。樱桃种间
杂交种的幼胚培养尚未见报道。
图1 樱桃种间杂交后代的组培生根苗