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泽泻的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期,2004 年 6 月334
收稿 2003-05-20 修定   2003-08-14
资助  福建省科技招标资助项目(2001Z145)。
* E-mail:email-jy@163.net, Tel: 0591-7596140
泽泻的组织培养和快速繁殖
陈菁瑛1,* 张丽梅1 胡明华1 陈义挺1 郑伟文2 刘波2 张秋芳2 朱炳耀2 蔡宣梅2 杨志敏2
1 福建省农业科学院果树研究所,福州 350013;2 福建省农业科学院生物技术中心,福州 350003
Tissue Culture and Rapid Propagation of Alisma orientalis
CHEN Jing-Ying1,*, ZHANG Li-Mei1, HU Ming-Hua1, CHEN Yi-Ting1, ZHENG Wei-Wen2, LIU Bo2, ZHANG Qiu-Fang2, ZHU
Bing-Yao2, CAI Xuan-Mei2, YANG Zhi-Min2
1Institute of Pomology, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350013; 2Biotechnology Center, Fujian Academy of Agricul-
tural Sciences, Fuzhou 350003
1 植物名称 泽泻(Alisma orientalis)。
2 材料类别 种子萌发的无菌苗茎尖。
3 培养条件 (1)种子萌发培养基:MS;(2)不定
芽诱导和增殖培养基:MS+6-BA 2.0 mg.L-1(单位
下同)+KT 0.5+IAA 0.2 ;(3)壮苗与生根培养基:
MS+6-BA 0.1+NAA 0.8。培养基(1)~(3)附加 3%
蔗糖、0.7% 琼脂,pH 5.8~6.0,在 121℃下高压
灭菌15 min。培养温度为25~28℃,光照时间10
h.d-1,光照度为1 500 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌外植体的获得 将泽泻种子先用无菌水洗
2次,75% 乙醇处理30 s,再用 0.1% HgCl2 灭菌
8 min,无菌水冲洗5次,播种于种子萌发培养基
(1)上,置于28℃培养室内培育无菌苗。7 d后种
子萌动,约经 3 周,子叶初展开时,切去子叶
及下胚轴,取 3~5 mm 长茎尖为外植体。
4.2 不定芽的诱导增殖 将外植体转接到培养基(2)
上培养 2 周后,外植体开始膨大长高,基部切口
处出现白色瘤状突起,逐渐转绿长大,2 周后形
成含有 2~4 个芽的芽丛。不断切分丛生芽并继续
转接到培养基(2)中进行增殖,不定芽迅速扩增,
可在短期内繁殖出大量的试管苗。3~4周为1个继
代增殖周期,每个周期可繁殖不定芽 4 倍左右。
继代增殖 6 代后,繁殖系数下降,且增殖的丛生
芽中会出现一些缺少生长点的叶丛和黄化的无效
芽。因此,继代培养 6 代后,不宜继续培养,
需要重新建立增殖体系。
4.3 壮苗生根与移栽 在增殖培养基上不定芽长势
细弱,需要经过壮苗才能生根,即将绿芽切下转
移至培养基(3)中培养。3 周后,植株伸长增粗,
叶片浓绿,形成正常芽,还有分化小植株的能
力。大部分正常芽在壮苗培养的同时也能发根或
长出根点。因此,为了简化程序,节约成本,
可免去生根培养阶段,将幼芽继续切分壮苗,而
将带根点的幼苗取出,洗净根部琼脂,栽植于灭
菌过的菜园土中,注意保湿。移栽成活率平均在
8 3 % 以上。
5 意义与进展 泽泻为泽泻科泽泻属多年生草本植
物,其干燥块茎可入药,具有利尿、泄热、降
血压等功效,现代临床尚用于治疗高血压病、糖
尿病和高血脂等症[1,2],是中国药典法定药物[3],
福建省地道药材之一[4]。生产上主要采用种子繁
殖,但自然环境下泽泻种子的寿命很短[5],繁殖
率低,出苗不整齐,影响产量与质量。研究泽
泻规范化栽培(GAP)时,首先应研究泽泻良种繁
育,以解决种子提纯复壮问题。本文结果将为泽
泻良种繁育、种质提纯复壮和试管苗快速繁殖可
能有一定的参考价值。泽泻组织离体培养未见报
道。
参考文献
1 彭贤,黄舒,郦皆秀等.泽泻属植物化学成分与药理活性.
国外医学植物药分册.2000,15(6):245~247
2 徐良主编.中国名贵药材规范化栽培与产业化开发新技术.北
京:中国协和医科大学出版社,2001.289~293
3 国家药典委员会.中国药典.北京:化学工业出版社,2000
一部.184
4 王强,徐国钧主编.道地药材图典华东卷.福州:福建科学
技术出版社,2003.227~228
5 陈瑛主编.实用中药种子技术手册.北京:人民卫生出版社,
1999.607~609