全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月462
虎耳兰的组织培养和快速繁殖
杨银萍 史益敏* 陶懿伟
上海交通大学农业与生物学院,上海 201101
Tissue Culture and Rapid Propagation of Haemanthus albiflos
YANG Yin-Ping, SHI Yi-Min*, TAO Yi-Wei
School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 201101
收稿 2003-10-24 修定 2004-03-22
* 通讯作者(shiyimin@sjtu.edu.cn,Tel:021-64788492)。
1 植物名称 虎耳兰(Haemanthus albiflos)。
2 材料类别 幼嫩叶片。
3 培养条件 诱导愈伤组织和芽分化培养基:(1)
MS+6-BA 3.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(3)MS+6-BA 2.0+NAA 1.0。
增殖培养基: (4) MS+6-BA 2.0+NAA 0.1+0.2% AC (活
性炭)。诱导生根培养基:(5)1/2MS+NAA 0.2;(6)
1/2MS+NAA 0.2+0.2% AC。以上培养基均加入琼
脂6.2 g·L-1,pH 5.8。培养基(1)~(3)中蔗糖为
3.0%,(5)和(6)中蔗糖为1.5%。培养温度(25±2)℃,
光照度1 500~2 000 lx,光照12 h ·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取春季新发嫩叶,自来水冲
洗干净,无菌水冲洗 3 ~ 4 次,滤纸吸干表面水
分,75% 酒精消毒 30 s,无菌水冲洗 2次,再于
饱和漂白粉溶液中振荡洗涤20 min,无菌水冲小
洗 3~4次。无菌滤纸吸干后,叶片切成0.5 cm×
0.5 cm 大小块状。
4.2 愈伤组织及不定芽的诱导 叶片外植体接种到
培养基(1)~(3)上,约15 d后外植体均有明显增厚
膨大。3周时接种到培养基(1)、(2)上的外植体切
口处产生少量愈伤组织,随后其表面有晶莹透明
的颗粒出现,颗粒逐渐变绿,形成小芽。其中
(1)形成的小芽数量大,但多为白化苗;(2)形成的
小芽数量较(1)少,但极少白化苗。接种到培养基
(3)上的外植体,30 d后于切口处产生淡黄绿色愈
伤组织,继续培养,愈伤组织长大且致密,只
有极少芽点出现;若将其愈伤组织转接入培养基
(1)、(2),1 周后即分化出大量芽。
4.3 增殖培养 虎耳兰不定芽在培养基(4)上发育良
好,并可不断增殖,增殖系数达到 3.9,芽生长
健壮、旺盛。经几次继代后,形成大量不定芽,
这些不定芽可直接进行不定根的诱导。
4.4 根的诱导 芽长至1.5 cm左右时切下,移入培
养基(5)、(6)上。不定芽在培养基(6)上1周后开始
生根,2周后统计生根率达100%,每个芽生根4~6
条,根长约 2~5 cm;在培养基(5)上不定芽较难
生根,生根率仅 41%,根长在 1 cm 以下,数量
少。实验中还发现,外植体在培养基(2)上可一次
性成苗,但这样成苗需要的时间长,且其中的愈
伤组织难以除去,不易移栽成活。
4.5 试管苗移栽 待小苗长出旺盛的根,苗高至5
c m 以上,即可移栽。打开培养瓶封口,在室温
下炼苗2 d后,移栽入基质 (1/3泥炭+2/3沙壤土)
中,成活率可达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 虎耳兰是石蒜科网球花属植物,又
名白花虎耳兰、白花网球花、白花画刷花,原
产南非开普省中南部山区。其花叶娇嫩,秀丽大
方,是适于室内盆栽观赏的常绿植物。常用分株
和播种繁殖,繁殖非常慢。本文结果为虎耳兰的
快速繁殖提供了一条新的可行途径,可用于生
产,大量繁殖。目前,有关虎耳兰组培国外已
有报道[1],国内尚未见报道。
参考文献
1 Rabe T, Van Staden J. In vitro propagation of three Haemanthus
species.South African J Bot,1999,65: 438~440