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银叶菊的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 40卷 第 5期,2004年 10月578
银叶菊的组织培养
赵宏波* 陈发棣** 房伟民
南京农业大学园艺学院,南京 210095
Tissue Culture of Senecio cineraria
ZHAO Hong-Bo*, CHEN Fa-Di**, FANG Wei-Min
College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095
收稿 2003-11-12 修定   2004-05-08
资助  江苏省高技术研究(BG2003305)、江苏省农业三项工
程(SX2003065)。
* E-mail:zhaohbzhou@yahoo.com,Tel:025-84395231
** 通讯作者。
1 植物名称 银叶菊(Senecio cineraria)。
2 材料类别 嫩叶及其叶柄。
3 培养条件 愈伤组织的诱导和分化培养基:(1)
MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(3)MS+6-BA 1.0+KT
2.0+NAA 0.1。增殖培养基:(4)MS+6-BA 0.5+
NAA 0.1。生根培养基:(5)MS+NAA 0.2。培养
基均加 3% 蔗糖和 0.6% 琼脂,pH 5.8。培养温
度22~27℃,光照度1 500~2 000 lx,光照12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取植株第3~5张叶片,先放
入肥皂水中漂洗 8~10 min,冲净,然后用 75%
乙醇浸泡40 s,再用 0.1% HgCl2 消毒 8 min,无
菌水冲洗 4 次,将叶片切成 2~3 mm×2~3 mm 大
小,叶柄切成 2~3 mm 长的切段,接种于培养基
(1)~(3)中。
4.2 愈伤组织的诱导 接种于培养基(1)~(3)中的叶
片和叶柄在7 d后都陆续形成了愈伤组织。20 d后
叶片周边形成的愈伤组织量较少,继代培养之后
极易发生褐化,不能分化;叶柄在培养基(1)上
形成的愈伤组织较少,而在(2)和(3)上形成的愈伤
组织量相差无几,但在(3)上的愈伤组织呈透明
状,分化能力很弱。
4.3 不定芽的诱导和增殖 将愈伤组织及时转接到
培养基(2)上,15 d 后便陆续分化出不定芽。在
不定芽形成之后需及时转接,若转接太迟易发生
玻璃化。形成的不定芽及时转接到培养基(1)和(4)
上。在培养基(1)上不定芽分化过快,形成不定芽
过多且小,易发生玻璃化,玻璃化程度达到
40%~50%;而在培养基(4)上每株不定芽可分化
出4~8 个不定芽(图 1),较粗壮,适合生根移栽。
4.4 根的诱导 将长至3~5 cm高、长势较好的试
管苗接种到培养基(5)上。10 d 后,从试管苗基
部长出白色的根。30 d 后,不定芽基部形成4~8
条白色而粗壮的根,根上形成了清晰可见的根
毛,生根率达到 9 5 % 。
4.5 炼苗移栽 将装有已生根试管苗的培养瓶瓶盖
打开,在培养室(培养条件不变)中锻炼 2 d,然
后拿出培养室,室内自然光下锻炼 3 d,最后用
镊子将试管苗取出,在自来水下将培养基冲净,
栽到已经过高温灭菌的珍珠岩中,保湿。1 个月
后移栽,成活率达到 9 5 % 以上。
5 意义与进展 银叶菊是菊科千里光属植物,原产
地中海沿岸,叶匙形和羽状深裂,全株密被白色
柔毛,为观叶植物中叶色较独特的一种,观赏价
值极高,在植物模块色彩搭配中,是白色观叶植
物的首选。组织培养可快速获得大量种苗,成苗
快而整齐,具有一定的潜在应用前景。建立银叶
菊离体培养和再生体系将为进一步进行银叶菊的生
理、遗传育种等方面的研究奠定基础。目前,尚
未见银叶菊组织培养的相关报道。
图1 银叶菊不定芽的增殖