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诱导北五味子腋芽丛生分化培养基的筛选



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月580
诱导北五味子腋芽丛生分化培养基的筛选
朱俊义* 刘雪莲 刘立娟 秦佳梅 顾地州
通化师范学院生物系,吉林通化134002
收稿 2005-09-08 修定  2005-11-07
资助 吉林省科技厅项目(20040904-21-2)。
* E-mail: swx0527@163.com
北五味子[Schisandra chinensis (Turcz.) Baill]
为五味子科五味子属的多年生落叶木质藤本植物,
分布于我国东北、华北和朝鲜、俄罗斯远东地区
的混交林及灌木丛中。其果实和种子为著名中
药,茎皮可作调料香料,果汁可作饮料果酒等,
国内外需求量一直都很大。但近年来由于森林资
源的减少,适合北五味子生长的环境被破坏,其
储量急骤下降。组织培养技术能有助于这一问题
的解决。对此,有人曾以带腋芽的北五味子嫩
茎,诱导腋芽分化,长成完整植株,但其中没
有提到腋芽丛生分化的诱导问题(陈雅君等1999),
为此,我们就此作了一些探讨。
取采回的嫩茎,剪去叶片及叶柄,用自来水
冲洗干净,切成约 5 cm 长的茎段,在超净工作
台上进行灭菌处理:先用70% 酒精浸泡30 s,再
用 0.2% 升汞溶液消毒 8~10 min,然后取出,用
无菌水漂洗 4~6 次,切成 1 cm 长的小段,分别
接种于下述MS和 B5培养基中(胡凯和谈锋2004)。
MS培养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+
NAA 0.2+KT 1.0;(2) MS+6-BA 1.5+NAA 0.2+KT 1.0;
(3) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+KT 1.0。B5 培养基:
(4) B5+6-BA 1.0+IBA 0.2+NAA 0.2+ZT 0.1;(5)
B5+6-BA 1.5+NAA 0.2+KT 0.1;(6) B5+6-BA
2.0+2,4-D 0.2+KT 0.1。MS培养基加0.64%琼脂
和 3% 蔗糖,B5 培养基加0.64% 琼脂和2% 蔗糖,
pH 5.8。培养温度(25±2)℃,光照时间12 h·d-1,
光强30~40 mmol·m-2·s-1 (杨振国和杜凤国2005)。
结果是接种于培养基(1)、(2)中的外植体40 d后开
始在茎段叶腋处萌生侧芽,诱导率为 90%,诱导
时间长且继续培养时无丛生芽出现,诱导出的侧
芽生长缓慢;培养基(3)中的外植体培养20~30 d
时萌发侧芽,侧芽生长健壮,继续在原培养基中
培养7 d左右侧芽基部又萌发出2个以上丛生芽,
且生长健壮,诱导率为 100%,增殖倍数为 3.2
倍;而接种于培养基(4)中的外植体于50 d左右萌
发侧芽,诱导率为 8 5 % ,继续培养无丛生芽出
现;培养基(5)、(6)中的外植体于接种后10 d 左
右基部膨胀,但继续培养侧芽的诱导率很低,为
3 4 % ,并且无丛生芽分化。从这些结果看,诱
导北五味子腋芽丛生分化的培养基以(3)为最好,
诱导率为 100%,增殖倍数为 3.2 倍。腋芽经诱
导丛生分化产生大量的茎叶外植体,当茎叶外植
体高2.0 cm左右时,在特定培养基中进行生根培
养,生根率达 1 0 0 %。当每株生根数 4 条左右、
根长1.5 cm左右时,移栽于消毒的浮石基质中,保
证光照和湿度,20 d后成活率达99%。这些结果对
北五味子进行规模化生产可能有一定的参考价值。
参考文献
陈雅君, 吴秀菊, 关政华(1999). 药用植物北五味子的组织培养.
植物研究, 19 (3): 318~322
胡凯, 谈锋(2004). 药用植物细胞的大规模培养技术. 植物生理
学通讯, 40 (2): 251~259
杨振国, 杜凤国(2005). 长白木葱木的组织培养与植株再生. 植
物生理学通讯, 41 (2): 194
·小经验·