全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 5期,2007年 10月 883
十二卷属植物西山寿的组织培养与快速繁殖
宋晓涛 1,沈萌 1,左志宇 1,安晓云 1,尹晓爽 1,孙涛 2,杨雪 3,*,李德森 3
1天津 102中学生物教研室,天津 300161;2天津医科大学基础医学院,天津 300070;3南开大学生命科学学院,天
津300071
Tissue Culture and Rapid Propagation of Haworthia mutica var. nigra M. B.
Bayer.
SONG Xiao-Tao1, SHEN Meng1, ZUO Zhi-Yu1, AN Xiao-Yun1, YIN Xiao-Shuang1, SUN Tao2, YANGXue3,*, LI De-Sen3
1Teaching and Research Section of Biology, Tianjin 102 Middle School, Tianjin 300161, China; 2College of Basic Medicine, Tianjin
Medical University, Tianjin 300070, China; 3College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China
收稿 2007-04-23 修定 2007-09-04
* 通讯作者(E-mail:Briskair@gmail.com;Tel:022-
2 3 5 0 0 5 6 1 )。
1 植物名称 十二卷属植物西山寿( H a w o r t h i a
mutica var. nigra M. B. Bayer)
2 材料类别 成年西山寿的春生花茎子房部位。
材料来自日本奈良多肉植物研究会。
3 培养条件 (1)启动培养基:MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.2;(2)分化培养基:MS+6-BA
1.0+KT 1.0+NAA 0.1;(3)继代与增殖培养基:
MS+6-BA 0.5+KT 1.0;(4)壮苗培养基:MS+NAA
0.1。以上培养基均加入 3%蔗糖和 0.7%琼脂,pH
5.8。培养温度为(25±2) ℃,光照时间 8 h·d-1,
光照强度约为 40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取温室内栽种植株的春生
花茎,保留有花蕾的部分经流水冲洗 30 min以
上,超净台内以 0.1% HgCl2溶液(加入 Tween-20
1滴) 消毒 7 min,无菌水再冲洗 6次。将消毒的
材料置于无菌滤纸上,分离每个花蕾的子房组织
作为外植体。
4.2 启动培养 将西山寿的外植体接入启动培养基
(1)上,21 d后,花子房部或花茎截面逐渐膨大;
40 d后,膨胀形成球状愈伤组织,增殖速度较
快,周边可见淡绿色或黄色愈伤组织长出。此时
也有部分外植体直接分化出单个芽,分离这样的
芽可直接用于继代培养。
4.3 分化培养 分离愈伤组织的深绿色部分转入分
化培养基(2)中,30~40 d后愈伤组织上绿色较深
部位开始分化,逐渐形成很多绿色芽点;再经过
15 d后,芽点部位形成丛生芽,丛生芽分辨出较
明显的叶片时,将其分割用于继代培养。
4.4 芽的增殖 将上述培养物转入增殖培养基(3)
上,大约 30 d后,各瓶都可以形成丛生苗(图 1)。
将苗丛分割后转入新培养基上增殖,芽基部几无
愈伤组织,植株易分离,每瓶可形成有确定形态
的苗 1 0 个左右。在此过程中光照强度降至 2 0
µmol·m-2·s-1,光照时间不变,保证繁殖系数,继
代周期为 25 d,繁殖系数可达到 3~4倍。
4.5 壮苗 在增殖培养基(3)上的苗由于光照强度下
降而表现得很纤细,因此将苗分为单个,转入生
根培养基(4)中培养 1~2个月,这样的苗生长较快
且健壮,幼苗新生叶片顶端可以形成此品种所特
有的“窗”,表明壮苗成功。在转入生根培养
基后,光照强度增大到 60 µmol·m-2·s-1,并补充
散射阳光,部分壮苗叶的“窗”部位泛红,表
明苗符合原产地的生理特征。
图 1 西山寿的增殖
植物生理学通讯 第 43卷 第 5期,2007年 10月884
4.6 移栽与定植 西山寿的复壮苗无需生根培养,
可直接移栽。采用蛭石作为基质,经高压灭菌后
装入苗钵。将开口炼苗 2 d的出瓶苗取出置于暗
处风干 3 d (该方法符合多肉植物移栽的特点),然
后均匀插入基质中,置于塑料棚中保湿。用 0.1%
的多菌灵溶液浇灌,逐渐透光。在 2~3周内幼苗
即可生根,根白色、粗大,2~3周后可见新叶生
出,表明移栽成功,移栽成活率可达 90%以上。
1 年后部分植株可以开花,且授粉后可正常结
实。
5 意义与进展 西山寿是百合科十二卷属的肉质
植物,原产于南非。植株体型较大,低矮,叶
呈莲座状排列,叶顶端“窗”部位较同属植物
大而透明,是该品种的主要特点之一。此品种是
百合科多肉植物中的代表种,数量稀少,繁殖困
难,是十二卷属中为数不多的大型植株品种,其
形态特殊,有极高的观赏和收藏价值,也是植物
园和园艺植物爱好者喜欢收集的珍贵品种。此品
种繁殖率很低,传统的繁殖方法大多用分株、叶
插和种子繁殖,不易成活且生长缓慢,采用组织
培养方法可能是解决西山寿等十二卷属植物繁殖的
途径之一,此种植物无须经过生根步骤即可直接
移栽,而经过生根步骤的苗在后期移栽时容易烂
苗,如果结合干法移栽则可有效提高成活率。其
同属的厚叶莲花掌(戴策刚和谭文澄 1987)、康平
寿(孙涛等 2 0 0 3 )、截形十二卷(孙涛和李德森
2002)、条纹十二卷(蒯娟和谭文澄 2001)、万象
(黄清俊等2003)和克里克特寿(左志宇等2007)的组
培和快繁已有报道,而西山寿的组培和快繁还未
见报道。
参考文献
戴策刚, 谭文澄(1987). 厚叶莲花掌的组织培养和植株再生. 植物
生理学通讯, 23 (2): 55~56
孙涛, 金蕊, 李德森(2003). 康平寿的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 39 (3): 232
孙涛, 李德森(2002). 截形十二卷的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 38 (6): 586
蒯娟, 谭文澄(2001). 条纹十二卷的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 37 (1): 36
杨祎敏, 丁雨龙, 黄清俊(2003). 万象的组织培养和植株再生. 植
物生理学通讯, 39 (6): 642
左志宇, 安晓云, 尹晓爽, 杨雪(2007). 克里克特寿的组织培养与
快速繁殖. 植物生理学通讯, 43 (2): 311~312