全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月470
轮叶狐尾藻的组织培养和快速繁殖
顾福根* 万志刚 颜顺意
苏州大学生命科学学院,江苏苏州215123
Tissue Culture and Rapid Propagation of Myriophyllum verticillatum L.
GU Fu-Gen*, WAN Zhi-Gang, YAN Shun-Yi
College of Life Sciences, Suzhou University, Suzhou, Jiangsu 215123, China
收稿 2005-11-09 修定 2006-03-22
*E-mail: gufugen64@163.com, Tel: 0512-65880172
1 植物名称 轮叶狐尾藻(Myriophyllum verticillatum
L.)。
2 材料类别 带节茎段,植株购于苏州花鸟市场
水族馆。
3 培养条件 (1)初代培养基:MS+6-BA 0.1 mg·L-1
(单位下同) ;(2)增殖培养基:MS+6-BA 1.0+NAA
0.1;(3)生根培养基:MS+6-BA 0.05+NAA 0.1。
上述培养基中含20 g·L-1白砂糖和6 g·L-1琼脂粉,
pH 5.8。培养温度(23±2)℃,光照强度 16~20
µmol·m-2·s-1,光照时间为12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的准备与接种 将轮叶狐尾藻固定于玻璃
棒上后养在玻璃缸中,枝顶冒出水面约5 mm,以
后保持水位不变。保持水温在 20~25℃,以利于
植株的快速生长。待轮叶狐尾藻长出水面约 1 0
c m 时,剪下气生部分,切去叶片,取带节茎段
作外植体;用 70% 酒精灭菌 1 min,0.1% 升汞
灭菌 5 min,再用无菌水漂洗 5 次;切取 10 mm
左右的带节茎段,接种于初代培养基上,10 d后
观察,污染率为 3 . 3 3 %,死亡率为 0 %。
4.2 增殖培养 接种在初代培养基上的外植体7 d
后长出腋芽,20 d 后腋芽长至高约 3 cm。将腋
芽切下,接种到增殖培养基上,20 d 后,在试
管苗基部形成直径为 5~8 mm 的愈伤组织块,并
从愈伤组织上长出丛生苗,高约 3 cm,每块愈
伤组织上可以长出20~30株苗,新生丛苗上有2~3
个次级腋芽萌出。在以后的继代增殖中,可以切
取愈伤组织上长出的丛苗,也可直接切取愈伤组
织进行继代培养。
4.3 生根与移植 将丛生苗切下,接种在生根培
养基上,10 d后有根长出,20 d时每株生根5~12
条,生根率 100%。30 d 后,根长约 5 cm,苗
高约 8 cm。此时,打开瓶盖,灌满冷开水,在
15~28℃的室内炼苗1~3 d 后,小心取出试管苗,
洗去培养基,将根部栽入玻璃缸底的黄沙里,水
温保持在 10~30℃。栽植用水及黄沙要预先灭菌
或烧开后冷却,以杀死水中的微生物。移栽成活
率为 9 6 % 。
5 意义与进展 轮叶狐尾藻是水族箱装饰植物中比
较普通的一种沉水植物,其售价高达每丛8~10元
(一丛 10 枝左右),其经济意义不言而喻。目前,
对沉水植物的组织培养研究较少,这可能与外植
体灭菌条件难以掌握有关,灭菌时间过短,会全
部污染,灭菌时间过长则全部死亡。轮叶狐尾藻
水中茎节用70%酒精处理1 min后,再用0.1%升
汞处理 5 min 的外植体全部污染;用 70% 酒精处
理1 min 后,再用0.1% 升汞处理10 min 的外植
体又全部死亡。本文对其外植体的处理和灭菌方
法是在多次反复摸索中获得的,效果十分理想,
对其他沉水植物的组织培养有一定的参考价值。
轮叶狐尾藻的组织培养迄今未见报道。
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture