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中华猕猴桃和美味猕猴桃种间杂交的胚抢救



全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 1期,2005年 2月 61
中华猕猴桃和美味猕猴桃种间杂交的胚抢救
付志惠 李洪林 杨波*
中国科学院武汉植物园,武汉 430074
Embryo Rescure of an Interspecific Cross Between Actinidia chinensis and A.
deliciosa
FU Zhi-Hui, LI Hong-Lin, YANG Bo*
Wuhan Botanic Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074
收稿 2004-03-26 修定   2004-08-27
资助  中国科学院方向项目(KSCX2-SW-320)。
* 通讯作者(E-mail:yangbo@rose.whiob.ac.cn, Tel:
027-87510054)。
1 植物名称 中华猕猴桃变种(Actinidia chinensis
var. rufopulpa)“红阳”猕猴桃 × 美味猕猴桃
(Actinidia deliciosa)两性品种。
2 材料类别 幼胚。
3 培养条件 (1)幼胚诱导增殖培养基:MS+ZT 0.2
mg·L-1(单位下同)+GA3 0.5+CH(水解酪蛋白) 600.0+
Gln(谷氨酰胺) 400.0;(2)分化培养基:MS+6-BA
0.5+NAA 0.05+GA3 0.5;(3)生根培养基:1/2MS+IBA
0.2。以上培养基的蔗糖浓度(1)为7.0%, (2)为
3.0%, (3)为 2.0%;琼脂7.0 g·L-1,pH 5.8。培
养温度(26±2)℃,光照时间为 12 h·d-1,光照度
2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 诱导培养 取花后58 d未成熟果实,洗净表面,
在超净工作台上用0.1%的升汞溶液消毒12 min,
再用无菌水冲洗 4~5 次,置于灭过菌的滤纸上,
吸干水分后,从果实中部剥开,取出种子,在
解剖镜下剥去种壳,用镊子按住种子中后部,挤
出针状胚,迅速接种到培养基(1)上。7 d 后,白
色幼胚开始萌动,转绿;20 d 可见其形成绿色致
密愈伤组织,出愈率达 6 0 % 。
4.2 增殖培养 将获得的愈伤组织块呈十字形切开,
转接入新鲜培养基(1)中继代培养,20 d时愈伤组
织出现明显增殖。以 20 d 为一个继代周期,如
果继代周期过长,愈伤组织块会发白,部分变
红、老化、失去分化能力。
4.3 分化与生根 将增殖的愈伤组织块接入到培养
基(2)上,愈伤组织块继续长大,15 d 时开始分
化出芽(图 1),30 d 时分化率达 80%。将分化出
的小芽转接入新鲜培养基(2)中,小芽逐渐长大,
且有丛生芽生成。待小苗长至 2~3 cm 高时,选
取无根壮苗移至生根培养基(3)上,12 d后可发现
有根长出,20 d后每株苗皆有3条以上根,长2 cm
左右,生根率是 92%。株高 4~5 c m 时,可出
瓶移栽。
4.4 移栽 猕猴桃组培苗叶片容易失水萎蔫,因此,
移栽时速度要快。将瓶盖打开后,立即将苗取
出,洗净根部琼脂栽入预先准备好的炼苗基质中
(2/3泥炭土+1/3河沙+少许珍珠岩),盖膜保湿15 d,
湿度 85 %~ 9 0 %,每天揭膜通风,环境温度保持
在 20~25℃,成活率可达 90%。4~5 周后即可带
土移栽。
5 意义与进展 中华猕猴桃红肉品种“红阳”果实
横切面呈红、黄绿相间的鲜艳图案,具有特殊的
商品价值,美味两性猕猴桃具有雌雄同株的特
点。我园猕猴桃育种学家采用常规方法将二者进
行杂交,希望选育出兼有父母本特殊性状的优良
品种。但由于远缘杂交的不亲和性,导致杂交胚
早期败育。采用组织培养的方法进行胚抢救获得
杂种苗,对猕猴桃的杂交育种可能有一定的参考
价 值 。
图1 杂交猕猴桃愈伤组织分化出芽