全 文 ：植物生理学通讯 第 41卷 第 1期，2005年 2月54
藓羽藻的组织培养和快速繁殖
叶乃好 王发左 王广策* 曾呈奎
中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室，青岛 266071
Tissue Culture and Rapid Propagation of Bryopsis hypnoides
YE Nai-Hao, WANG Fa-Zuo, WANG Guang-Ce*, ZENG Cheng-Kui
Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071
收稿 2004-04-16 修定 　 2004-07-22
资助　 自然科学基金(30170499、40476059、30250003、
39890390)、中国科学院海洋研究所知识创新工程(2002-
2005)、中国科学院知识创新方向性项目(KZCX2-211)、
“86 3”计划(2 00 4 A A 6 0 3 2 2 )。
* 通讯作者(E-mail：gcwang@ms.qdio.ac.cn, Tel:
0532-2898574)。
1 植物名称 藓羽藻 (Bryopsis hypnoides)。
2 材料类别 叶状体片段。
3 培养条件 培养基均为高压灭菌的天然海水，内
含0.1 mol·L-1 NaNO3 和 0.1 mol·L-1 NH3H2PO4。诱
导分化的条件为：温度18℃，光照度15 mmol·m-2·s-1，
光照时间 12 h·d-1。移植后的培养条件为：温度
18℃，光照强度 20~50 mmol·m-2·s-1，光照时间
8 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选择完整、生物量大、洁净
的藓羽藻新鲜个体，解剖镜下去除表面杂藻，用
无菌海水冲洗10 min 后再以 0.3% KMnO4(以无菌
海水为溶剂)浸泡 5 min，最后以无菌海水冲洗 5
次。在超净工作台上用75%的酒精迅速冲洗1遍，
立即转入0.05% HgCl2(以无菌海水为溶剂)消毒8
min，后以无菌海水冲洗6次。将叶状体剪成3~4
m m 的片段后，置入含有培养基的培养皿中，培
养基厚度为2 mm。然后把培养皿放入光照培养箱
中培养。8 h 后，片段两端完全愈合；4 d 后，
片段两端分别长出新的叶状体和少许假根。4 d后
每天更换新的培养基，培养基厚度每天增加
2 m m。
4.2 移植培养 叶状体片段的存活率为100%。10 d
后，假根大量产生，并开始萌发出大量新的叶状
体。将培养皿放入大的培养缸(r=20 mm， h=40
mm)中进行通气培养(图 1)，光照度逐渐增强
至50 mmol·m-2·s-1(每天增大5 mmol·m-2·s-1)。培养
基每天更换 1 次。
5 意义与进展 藓羽藻属羽藻科羽藻属，是多核单
细胞的大型绿藻。目前人们以其为材料进行着许
多有重要意义的研究，如：(1)原生质体的再生过
程， (2)细胞膜、细胞壁和细胞骨架的再生机制和
过程， (3)次生代谢活性物质的提取与鉴定。野生
藓羽藻的季节性非常强，温度太高或太低都不能
存活。渤海沿岸只有8~11月份才能采集到野生的
藓羽藻。组织培养可以快繁，在实验室条件下常
年可以拥有一定生物量的植物材料，以满足实验
和生产需要。藓羽藻的组培快繁尚未见报道。
图1 培养缸中的再生藓羽藻
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture