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Sterilization of diseased plants infected with Fusarium wilt disease in banana fields

香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选



全 文 :植物保护学报 Journal of Plant Protection, 2015, 42(3): 362 - 369 DOI: 10􀆰 13802 / j. cnki. zwbhxb. 2015􀆰 03􀆰 012
基金项目: 国家公益性行业(农业)科研专项(200903049),中央级公益性科研院所基本科研业务专项(2015hzs1J015),海南省动植物
重大病虫害防治项目
∗通讯作者(Author for correspondence), E⁃mail: H8881111@ 126. com
收稿日期: 2014 - 03 - 12
香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选
刘  磊1   梁昌聪1   覃和业2   杨腊英1   郭立佳1   黄俊生1∗
(1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所, 农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室, 海南省
热带农业有害生物监测与控制重点实验室, 海口 571101; 2.热作两院种苗组培中心, 海南 儋州 571737)
摘要: 为筛选有效防控香蕉枯萎病菌扩散蔓延的灭菌方法,采用含毒介质培养法测定咪鲜胺和多
菌灵不同配比对枯萎病菌的毒力作用以筛选最佳混配液,比较最佳混配液与生石灰、草甘膦、咪鲜
胺的平板抑菌和大田灭菌效果,并研究了大田不同施用方式对最佳混配液灭菌效果的影响。 结果
表明,咪鲜胺与多菌灵体积比为 10∶ 1时得最佳混配液,可显著提高对香蕉枯萎病菌的抑制效果,增
效系数为 1􀆰 53,EC50值最小,为 0􀆰 025 mg / L;4 种药剂的 EC50值由大到小为草甘膦 >生石灰 >咪鲜
胺 >最佳混配液。 1 000 mg / L 最佳混配液喷施于大田病株 5 d 后根际土壤病菌含量下降了
95􀆰 93% ,10 d后球茎病菌含量减少了 71􀆰 88% ,综合灭菌效果显著优于其它处理。 此外,应用打孔
灌药法可显著提高最佳混配液对大田病株的灭菌效果,施用 5 d 后球茎病菌含量减少了 95􀆰 95% 。
表明以打孔灌药法施用 1 000 mg / L最佳混配液灭菌效果显著且操作便捷,易于推广应用。
关键词: 香蕉枯萎病; 混配杀菌剂; 打孔灌药; 病株灭菌
Sterilization of diseased plants infected with Fusarium wilt
disease in banana fields
Liu Lei1   Liang Changcong1   Qin Heye2   Yang Laying1   Guo Lijia1   Huang Junsheng1∗
(1. Hainan Key Laboratory for Monitoring and Control of Tropical Agricultural Pests; Key Laboratory of Integrated Pest
Management on Tropical Crops, Ministry of Agriculture; Environment and Plant Protection Institute, Chinese Academy
of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, Hainan Province, China; 2. Cultivation Center of Seedlings,
Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou 571737, Hainan Province, China)
Abstract: To control the spread of Fusarium oxyporum f. sp. cubense ( FOC ), sterilization of
bananaplant infected with the disease should be done. The inhibitory activity test of the mixtures of
prochloraz and carbendazim at different mixing ratios against FOC was determined by the plates containing
fungicides and the synergistic ratios were calculated according to Wadley formula. Then, the effects of
quicklime, glyphosate, prochloraz, and the best mixture of fungicides were investigated on the PDA
plates and diseased bananas, and the effects of different treatments with the best mixture of fungicides
were tested. The synergistic interactions against FOC of the mixtures of prochloraz and carbendazim were
observed at the ratio of 10 ∶ 1, and the synergism ratio was 1􀆰 53, and the EC50 of the best mixture of
fungicides was 0􀆰 025 mg / L, significantly smaller than that of other reagents tested. The FOC on the
rhizosphere and banana corms sprayed with 1 000 mg / L the best mixture of fungicides decreased 95􀆰 93%
after five days, and 71􀆰 88% after ten days, respectively, significantly higher than that of other reagents
tested. Moreover, perfusion with the best mixture of fungicides after perforation on the banana cauloid
was significantly better than spraying with the best mixture of fungicides. The FOC from banana corms
treated with the best mixture of fungicides after perforation decreased 95􀆰 95% after five days. The
sterilization method was efficient and convenient for controlling Fusarium wilt disease in banana fields.
Key words: Fusarium wilt disease; mixture of fungicides; perfusion after perforation; sterilization of
diseased plant
    香蕉枯萎病(Banana Fusarium wilt disease),又
称巴拿马病、黄叶病,是由于尖孢镰刀菌古巴专化型
Fusarium oxyporum f. sp. cubense破坏植株维管束导
致其死亡的一种土传毁灭性病害。 目前,除地中海、
印度洋、南太平洋一些岛屿国家外,几乎所有香蕉种
植区均有遭受该病害的报道(魏岳荣等,2005;王振
中,2006;Fourie et al. ,2009)。 在我国广东、广西、
福建、海南、云南和台湾等主要香蕉种植区也已出现
该病害,蕉园中病株率一般为 10% ~ 40% ,且发病
加重趋势明显,超过 90%则造成全园毁灭、蕉园丢
荒,2009—2013 年累计发生面积超过 5􀆰 8 万 hm2,造
成直接经济损失约 104􀆰 4 亿元,严重影响我国香蕉
产业的发展(莫贱友等,2008;Dong & Wang,2011;
Zeng et al. ,2013)。
香蕉枯萎病菌是兼性寄生菌,腐生能力较强,在
发病株(主要集中在地下球茎和靠近球茎部分的假
茎)及土壤中存活周期较长(刘磊等,2015),特别是
形成休眠孢子后可存活数年,期间可通过病株残体、
耕作工具、带菌种苗、土壤和流水等传播,使病区不
断扩大,蔓延快而防治难。 病原菌从香蕉根系侵入
后,可在维管束中定殖并扩散,导致维管束堵塞,逐
步使叶片黄化、假茎基部开裂,最终萎蔫死亡(Li et
al. ,2011)。 目前尚未发现真正抗枯萎病的香蕉种
质资源,因此,对主要病源采取有针对性的预防措
施、消毒处理等,可避免病菌扩散蔓延 (王振中,
2006)。 国家质量监督检验检疫总局和国家标准化
管理委员会已颁布了《香蕉种苗产地检疫规程》,有
关枯萎病检测诊断及抗病、耐病品种筛选方面的研
究已在开展(彭埃天等,2009;黄秉智等,2009)。 枯
萎病菌灭菌处理的研究多集中于室内化学(许文耀
和吴刚,2004;杜宜新等,2008;郭立佳等,2013)、生
防药剂筛选(杨秀娟等,2010;黄霄波等,2013;刘磊
等,2013)和土壤消毒(杜志勇和樊小林,2008;刘小
玉等,2012;贲海燕等,2013)等方面,对香蕉枯萎病
大田病株灭菌处理的研究较少,仅陈福如等(2009)
进行了注射草甘膦和咪鲜胺来防治枯萎病病株的试
验。 田间传统灭菌方法,如砍倒病株弃置于田间暴
晒、生石灰消毒、喷施除草剂、喷施或灌注杀菌剂、深
埋或焚毁病株等,均难以有效控制该病害的发生
蔓延。
近年来抑菌试验中效果较好的咪鲜胺、多菌灵
等杀菌剂由于长期单一使用,病原菌抗性增加(李
赤等,2008;郭立佳等,2013),田间防效下降,亟需
研制针对性强的混配杀菌剂以提高防效。 因此,本
试验在筛选得到咪鲜胺与多菌灵最佳混配液的基础
上,比较了其与生石灰、草甘膦和咪鲜胺的室内和大
田防治效果,并进一步研究了最佳混配液不同施用
方式对大田病株灭菌效果的影响,以期为便捷高效
灭除大田病株、防止枯萎病菌以病株残体为中心扩
散蔓延提供技术支持。
1 材料与方法
1􀆰 1 材料
供试菌株及香蕉:尖孢镰刀菌古巴专化型 4 号
生理小种 B2 菌株,由中国热带农业科学院环境与
植物保护研究所微生物农药资源课题组保存。 巴西
蕉Musa AAA Cavendish subgroup ‘Brazil’,由热作两
院种苗组培中心提供。
药剂:92%生石灰( quicklime)粉剂,河南源丰
钙业有限公司;95%咪鲜胺( prochloraz)原药,广州
易合通农化供应链有限公司;95%多菌灵(carbenda⁃
zim)原药,南京艾森精细化工有限公司;41%草甘膦
(glyphosate)水剂,美国孟山都公司。
培养基:马铃薯葡萄糖琼脂 ( potato dextrose
agar,PDA)培养基:马铃薯 200 g、葡萄糖 20 g、琼脂
15 ~ 20 g、水 1 L。
1􀆰 2 方法
1􀆰 2􀆰 1 杀菌剂混配组合筛选
按照联合国粮食及农业组织推荐的菌落直径
法,结合含毒介质培养法、Horsfall 法测定药剂最佳
混配比例,即将咪鲜胺、多菌灵以少量二甲基亚砜溶
解,用含 0􀆰 1% Tween - 80 的去离子水配成 1 000
mg / L母液,以体积比 1 ∶ 0、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 4、1 ∶ 6、1 ∶
8、1 ∶ 10、10 ∶ 1、8 ∶ 1、6 ∶ 1、4 ∶ 1、2 ∶ 1、0 ∶ 1混匀后配
制药剂 PDA 平板,终浓度为 0􀆰 01、0􀆰 1、1、10、100
mg / L。 用打孔器在 B2 菌株 PDA 平板打菌碟后接
3633 期 刘  磊等: 香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选
入上述药剂平板,28 ℃下培养 7 d,用十字交叉法测
定菌落直径,计算不同体积比药剂对 B2 菌株的抑
制率。 采用 Finney 几率值法分析,以浓度的自然对
数值为自变量(x),抑菌率的几率值为因变量(y)建
立回归方程,得到有效抑制中浓度 EC50,根据 Wad⁃
ley公式计算不同体积比药剂的增效系数(synergis⁃
tic ratio,SR),以确定最佳配比组合。 每处理 3 次重
复,以接入不加药剂 PDA平板的菌落为对照。 抑制
率 = (对照菌落直径平均数 - 处理菌落直径平均
数) / (对照菌落直径平均数 -菌碟直径) × 100% ;
EC50( t) = (a + b) / [a / EC(A) 50 + b / EC(B) 50],SR
= EC50( t) / EC50(o),其中:A、B 为单剂,a、b 为相应
单剂在混剂中的百分含量,t 为理论值,o 为实际观
察值。 SR > 1􀆰 5,表现为增效作用;0􀆰 5≤SR≤1􀆰 5,
表现为相加作用;SR < 0􀆰 5,表现为拮抗作用(Gisi et
al. ,1985)。
1􀆰 2􀆰 2 不同药剂平板的抑菌试验
根据预试验结果,分别配制含生石灰、草甘膦、
咪鲜胺及最佳混配液的 PDA 平板,终浓度均为
0􀆰 001、0􀆰 01、 0􀆰 1、 1、 10、 100、 1 000 mg / L。 按照
1􀆰 2􀆰 1 方法进行抑菌试验,计算不同浓度药剂对菌
落生长的抑制率,得出各药剂的 EC50值。 每处理 3
次重复,以接入不加药剂 PDA平板的菌落为对照。
1􀆰 2􀆰 3 不同药剂的大田病株灭菌试验
大田灭菌试验于 2012 年 6 月—2013 年 6 月在
海南省儋州市中国热带农业科学院环境与植物保护
研究所铺仔基地进行,该基地连续 6 年种植香蕉,枯
萎病发生严重。 选择高度约为 2 m,直径 15 ~ 20
cm,下部 3 ~ 4 片叶出现黄化的发病株(球茎带菌量
约为 1􀆰 00 × 104 CFU / g,根际带菌量约为 0􀆰 30 × 104
CFU / g)进行试验。 分别在蕉头周围及近地假茎表
面喷施 10、100、1 000 mg / L的生石灰、草甘膦、咪鲜
胺和最佳混配液,每株 50 mL。
植株球茎带菌量测定:施药后每隔 4 d 分别用
打孔取样器在上述各处理的球茎病斑、病健交界处
和健康组织中取样,带回实验室称取样品质量后用
75%酒精处理 2 s,之后经 0􀆰 1%升汞处理 2 ~ 3 min,
用无菌水冲洗 3 遍,研磨后加入 100 mL无菌水制成
匀浆(肖荣凤等,2009;苏明星等,2010)。 将梯度稀
释的匀浆液接入含抗生素(50 μg / mL 潮霉素和 200
μg / mL硫酸链霉素)的 PDA平板,每皿 0􀆰 1 mL均匀
涂布。 28 ℃培养 3 d 后,采用平板菌落计数法统计
菌落形成单位(CFU),计算每克鲜重样品组织的平
均含菌量。 以未进行施药处理的发病株为对照,每
处理 3 次重复,试验周期为 30 d。
根际土壤带菌量测定:施药后每隔 4 d 分别取
各处理病株周围根际土样 50 g,加入 50 mL水混匀,
取上清液适当稀释。 将稀释的组织悬液接入上述含
抗生素的 PDA平板,每皿 0􀆰 1 mL 均匀涂布。 28 ℃
培养 3 d后,计算每克样品的平均含菌量。 试验以
未进行施药处理的发病株为对照,每处理 3 次重复,
试验周期为 30 d。
图 1 咪鲜胺与多菌灵混配对香蕉枯萎病菌的
毒力增效作用
Fig. 1 Synergistic interaction of prochloraz used in
combination with carbendazim against Fusarium
oxyporum f. sp. cubense 
1􀆰 2􀆰 4 药剂施用方式对大田病株灭菌效果的影响
分别通过喷施(在蕉头周围及近地假茎表面喷
洒)、注射(用 100 mL注射器在假茎近地端注入)和
打孔灌注(在假茎近地端向球茎中心打孔后灌注,
孔径 2 ~ 3 cm,孔深 15 ~ 20 cm)3 种方式施用 1 000
mg / L最佳混配液,每株 50 mL。 按照 1􀆰 2􀆰 3 方法分
别测定并比较不同施用方式处理后植株球茎的平均
含菌量、根际土壤平均带菌量,以未施药的发病株为
对照,每处理 3 次重复,试验周期为 30 d。
1􀆰 3 数据分析
采用 Excel 2003 进行数据整理和绘图,运用
SAS 9􀆰 0 软件计算均值和方差,用 Duncan 氏新复极
差法进行差异显著性检验。
2 结果与分析
2􀆰 1 不同混配比药剂的毒力增效作用
咪鲜胺与多菌灵以不同比例混配对香蕉枯萎病
菌的联合毒力结果表明,以 10 ∶ 1混配时增效系数为
1􀆰 53,具有增效作用(图 1),其余比例混合液在平
板抑制试验中表现为相加作用(0􀆰 5 < SR < 1􀆰 5),
因此选择体积比 10 ∶ 1的咪鲜胺与多菌灵混剂作
463 植  物  保  护  学  报 42 卷
为最佳混配液进行后续试验。
2􀆰 2 不同药剂平板的抑菌效果
供试的 4 种药剂对香蕉枯萎病菌的抑制效果表
明,最佳混配液的 EC50最小,为 0􀆰 025 mg / L,防效最
好,4 种药剂的 EC50由大到小顺序为草甘膦 >生石
灰 >咪鲜胺 >最佳混配液(表 1)。
表 1 不同药剂对香蕉枯萎病菌的平板抑菌效果
Table 1 Inhibition effects of different insecticides on Fusarium oxyporum f. sp. cubense
药剂
Insecticide
回归方程
Regression equation
相关系数 R2
Correlation coefficient
EC50
(mg / L)
生石灰 Quicklime y = 1􀆰 5712 + 1􀆰 2537x 0􀆰 9615 249􀆰 737
草甘膦 Glyphosate y = 1􀆰 8242 + 0􀆰 3126x 0􀆰 9902 386􀆰 296
咪鲜胺 Prochloraz y = 0􀆰 6277 + 5􀆰 1646x 0􀆰 9468 0􀆰 216
最佳混配液 The best mixture of fungicides y = 0􀆰 7251 + 6􀆰 1934x 0􀆰 9689 0􀆰 025
2􀆰 3 不同药剂对大田病株的灭菌效果
对照病株球茎的枯萎病病原菌含量在 30 d 内
有缓慢增加趋势,以最佳混配液的灭菌效果最好,
1 000 mg / L处理 10 d 后可使病原菌含量减少
71􀆰 88% ,比同期对照低 75􀆰 56% ,除 1 000 mg / L 咪
鲜胺处理外,显著优于其它处理,且灭菌持效性较
好,30 d内可有效抑制病菌。 不同剂量咪鲜胺处理
间的灭菌效果存在显著差异,1 000 mg / L 处理 10 d
后可使病原菌减少 55􀆰 13% ,但 25 d 后病原菌有增
加趋势,降低剂量进行处理发现速效性和持效性均
减弱。 草甘膦处理在各剂量间也有一定差异,但灭
     
菌效果有限,最高浓度处理施用 10 d 后病原菌含量
可降低 27􀆰 72% 。 生石灰处理效果最差,1 000 mg / L
处理 10 d后病原菌含量仅下降了 21􀆰 48% ,且 15 d
后各浓度处理病原菌含量均有反弹,持效性不理想
(表 2)。
2􀆰 4 不同药剂对大田病株根际土壤的灭菌效果
对照病株根际土壤枯萎病病原菌含量在 30 d
内略有增减,但整体变化不显著。 草甘膦 1 000 mg /
L 处理后 5 d 时可使土壤中病原菌含量降低
22􀆰 38% ,但 10 d后病原菌含量增加,降低浓度处理
抑制效果也随之减弱。 其它 3 种药剂在 30 d 内均
     
表 2 喷施不同药剂后病株球茎尖孢镰刀菌数量的动态变化
Table 2 Dynamic change of Fusarium oxyporum f. sp. cubense from banana corms sprayed with different insecticides
药剂
Insecticide
浓度(mg / L)
Concentration
尖孢镰刀菌数量 ( × 104 CFU / g)
Amounts of Fusarium oxyporum f. sp. cubense
0 d    5 d    10 d    15 d    20 d    25 d    30 d   
对照 CK 1􀆰 00 ±
0􀆰 09 Ca
1􀆰 06 ±
0􀆰 08 BCa
1􀆰 07 ±
0􀆰 10 Ba
1􀆰 11 ±
0􀆰 05 ABa
1􀆰 09 ±
0􀆰 08 ABa
1􀆰 15 ±
0􀆰 09 Aa
1􀆰 12 ±
0􀆰 05 ABa
生石灰
Quicklime
10 1􀆰 00 ±
0􀆰 08 Aa
0􀆰 93 ±
0􀆰 05 Cb
0􀆰 92 ±
0􀆰 04 Cab
0􀆰 94 ±
0􀆰 06 BCab
0􀆰 96 ±
0􀆰 05 ABab
0􀆰 96 ±
0􀆰 06 ABab
0􀆰 98 ±
0􀆰 05 ABab
100 1􀆰 00 ±
0􀆰 09 Aa
0􀆰 83 ±
0􀆰 04 Cbc
0􀆰 85 ±
0􀆰 02 BCab
0􀆰 91 ±
0􀆰 07 Bab
0􀆰 94 ±
0􀆰 06 ABab
0􀆰 94 ±
0􀆰 06 ABab
0􀆰 95 ±
0􀆰 08 ABab
1 000 1􀆰 00 ±
0􀆰 05 Aa
0􀆰 81 ±
0􀆰 06 Cbc
0􀆰 79 ±
0􀆰 01 Cab
0􀆰 83 ±
0􀆰 03 BCab
0􀆰 87 ±
0􀆰 05 Bab
0􀆰 91 ±
0􀆰 06 Bab
0􀆰 92 ±
0􀆰 07 ABab
草甘膦
Qlyphosate
10 1􀆰 00 ±
0􀆰 10 Aa
0􀆰 84 ±
0􀆰 03 Cbc
0􀆰 82 ±
0􀆰 05 Cab
0􀆰 87 ±
0􀆰 02 BCab
0􀆰 84 ±
0􀆰 03 BCab
0􀆰 88 ±
0􀆰 07 Bab
0􀆰 90 ±
0􀆰 04 Bab
100 1􀆰 00 ±
0􀆰 06 Aa
0􀆰 81 ±
0􀆰 01 BCbc
0􀆰 76 ±
0􀆰 02 Cb
0􀆰 79 ±
0􀆰 06 Cb
0􀆰 81 ±
0􀆰 04 BCab
0􀆰 79 ±
0􀆰 06 BCb
0􀆰 86 ±
0􀆰 08 Bab
1 000 1􀆰 00 ±
0􀆰 08 Aa
0􀆰 83 ±
0􀆰 05 Bbc
0􀆰 72 ±
0􀆰 06 Cb
0􀆰 74 ±
0􀆰 02 Cb
0􀆰 80 ±
0􀆰 05 BCb
0􀆰 84 ±
0􀆰 04 Bab
0􀆰 86 ±
0􀆰 04 Bab
咪鲜胺
Prochloraz
10 1􀆰 00 ±
0􀆰 07 Aa
0􀆰 80 ±
0􀆰 06 BCbc
0􀆰 88 ±
0􀆰 01 Bab
0􀆰 86 ±
0􀆰 06 Bab
0􀆰 76 ±
0􀆰 05 Cb
0􀆰 74 ±
0􀆰 05 Cb
0􀆰 83 ±
0􀆰 06 BCab
100 1􀆰 00 ±
0􀆰 09 Aa
0􀆰 75 ±
0􀆰 04 Bbc
0􀆰 72 ±
0􀆰 05 BCb
0􀆰 57 ±
0􀆰 02 Cbc
0􀆰 62 ±
0􀆰 04 BCb
0􀆰 70 ±
0􀆰 07 BCb
0􀆰 73 ±
0􀆰 06 BCb
1 000 1􀆰 00 ±
0􀆰 05 Aa
0􀆰 58 ±
0􀆰 04 BCc
0􀆰 45 ±
0􀆰 03 Cbc
0􀆰 47 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 54 ±
0􀆰 03 BCbc
0􀆰 60 ±
0􀆰 05 BCbc
0􀆰 67 ±
0􀆰 05 Bb
5633 期 刘  磊等: 香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选
续表 2
药剂
Insecticide
浓度(mg / L)
Concentration
尖孢镰刀菌数量 ( × 104 CFU / g)
Amounts of Fusarium oxyporum f. sp. cubense
0 d    5 d    10 d    15 d    20 d    25 d    30 d   
最佳混配液
The best
10 1􀆰 00 ±
0􀆰 09 Aa
0􀆰 71 ±
0􀆰 05 Bbc
0􀆰 78 ±
0􀆰 06 Bb
0􀆰 65 ±
0􀆰 04 BCb
0􀆰 48 ±
0􀆰 02 Cbc
0􀆰 52 ±
0􀆰 05 Cbc
0􀆰 66 ±
0􀆰 05 BCb
mixture of
fungicides
100 1􀆰 00 ±
0􀆰 07 Aa
0􀆰 58 ±
0􀆰 05 BCc
0􀆰 40 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 33 ±
0􀆰 03 Cc
0􀆰 41 ±
0􀆰 04 Cc
0􀆰 39 ±
0􀆰 03 Cc
0􀆰 43 ±
0􀆰 02 BCbc
1 000 1􀆰 00 ±
0􀆰 07 Aa
0􀆰 46 ±
0􀆰 04 BCc
0􀆰 28 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 32 ±
0􀆰 02 Cc
0􀆰 34 ±
0􀆰 03 Cc
0􀆰 32 ±
0􀆰 02 Cc
0􀆰 32 ±
0􀆰 01 Cc
    表中数据为平均数 ±标准差。 同行不同大写字母、同列不同小写字母表示经 Duncan 氏新复极差法检验在 P < 0􀆰 05 水平差异显
著。 Data are mean ± SD. Different uppercase letters in the same row and different lowercase letters in the same column indicate significant
difference at P < 0􀆰 05 level by Duncan’s new multiple range test.
可抑制土壤中的尖孢镰刀菌,灭菌效果依次为最佳
混配液 >咪鲜胺 >生石灰。 生石灰 1 000 mg / L 处
理后 5 d时病原菌含量降低了 41􀆰 12% ,10 mg / L 处
理抑制效果较差。 咪鲜胺和最佳混配液在不同浓度
时均有明显的抑制效果,高浓度时抑制效果更显著,
5 d时分别降低了 86􀆰 51%和 95􀆰 93% (表 3)。
表 3 喷施不同药剂后病株根际土壤尖孢镰刀菌数量的动态变化
Table 3 Dynamic change of Fusarium oxyporum f. sp. cubense from rhizosphere sprayed with different insecticide
药剂
Insecticide
浓度(mg / L)
Concentration
尖孢镰刀菌数量 ( × 104 CFU / g)
Amounts of Fusarium oxyporum f. sp. cubense
0 d    5 d    10 d    15 d    20 d    25 d    30 d   
对照 CK 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 BCa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 BCa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 ABa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Ca
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 BCa
生石灰
Quicklime
10 0􀆰 30 ±
0􀆰 01 Aa
0􀆰 25 ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 28 ±
0􀆰 02 Ba
0􀆰 28 ±
0􀆰 02 ABa
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 31 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 29 ±
0􀆰 02 ABa
100 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 20 ±
0􀆰 01 Cb
0􀆰 25B ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 27 ±
0􀆰 02 Bab
0􀆰 25 ±
0􀆰 02 BCab
0􀆰 26 ±
0􀆰 01 Bab
0􀆰 27 ±
0􀆰 02 ABab
1 000 0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 18 ±
0􀆰 01 Cb
0􀆰 19 ±
0􀆰 01 Cb
0􀆰 20 ±
0􀆰 02 BCb
0􀆰 20 ±
0􀆰 01 BCab
0􀆰 20 ±
0􀆰 02 BCb
0􀆰 20 ±
0􀆰 02 BCb
草甘膦
Qlyphosate
10 0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 28 ±
0􀆰 02 Ca
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 ABa
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 29 ±
0􀆰 02 Ba
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
100 0􀆰 30 ±
0􀆰 01 Aa
0􀆰 25 ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 25 ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 28 ±
0􀆰 03 Ba
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 01 Aa
1 000 0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 23 ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 24 ±
0􀆰 02 Cab
0􀆰 26 ±
0􀆰 02 Bab
0􀆰 28 ±
0􀆰 03 ABa
0􀆰 28 ±
0􀆰 02 ABa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
咪鲜胺
Prochloraz
10 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 10 ±
0􀆰 005 Cbc
0􀆰 10 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 12 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 13 ±
0􀆰 01 BCb
0􀆰 14 ±
0􀆰 01 BCb
0􀆰 18 ±
0􀆰 004 BCb
100 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 06 ±
0􀆰 003 Cbc
0􀆰 08 ±
0􀆰 003 Cbc
0􀆰 07 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 06 ±
0􀆰 004 Cc
0􀆰 09 ±
0􀆰 01 BCbc
0􀆰 10 ±
0􀆰 002 BCbc
1 000 0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 04 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 004 Cc
0􀆰 05 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 05 ±
0􀆰 003 Cc
0􀆰 06 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 09 ±
0􀆰 003 BCbc
最佳混配液
The best
10 0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 07 ±
0􀆰 005 Cbc
0􀆰 09 ±
0􀆰 002 Cbc
0􀆰 09 ±
0􀆰 005 Cbc
0􀆰 07 ±
0􀆰 003 Cc
0􀆰 10 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 15 ±
0􀆰 01 BCb
mixture of
fungicides
100 0􀆰 30 ±
0􀆰 01 Aa
0􀆰 05 ±
0􀆰 002 Cbc
0􀆰 06 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 06 ±
0􀆰 005 Cc
0􀆰 06 ±
0􀆰 004 Cc
0􀆰 07 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 08 ±
0􀆰 003 BCc
1 000 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 01 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 02 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 003 Cc
0􀆰 02 ±
0􀆰 002 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 002 Cc
0􀆰 05 ±
0􀆰 004 Cc
    表中数据为平均数 ±标准差。 同行不同大写字母、同列不同小写字母表示经 Duncan 氏新复极差法检验在 P < 0􀆰 05 水平差异显
著。 Data are mean ± SD. Different uppercase letters in the same row and different lowercase letters in the same column indicate significant
difference at P < 0􀆰 05 level by Duncan’s new multiple range test.
2􀆰 5 药剂施用方式对大田病株灭菌效果的影响
最佳混配液 3 种不同的施用方式均可降低病株
球茎病原菌含量,其中打孔灌药处理效果最好,施药
5 d时病原菌含量下降了 95􀆰 95%,速效性最显著,注
663 植  物  保  护  学  报 42 卷
射和喷施方法处理后 10 d 时病菌含量分别下降了
88􀆰 39%和 71􀆰 88%。 不同施用方式对病株根际土壤
的灭菌效果差异显著,喷施方法对病株根际土壤病原
菌的抑制效果最显著,5 d 后病原菌含量降低了
95􀆰 93%,且持效性较好,注射和打孔灌药方法处理对
根际土壤中枯萎病菌无显著抑制作用(表 4)。
表 4 不同施用方式对病株球茎及其根际土壤尖孢镰刀菌数量动态变化的影响
Table 4 Effects of different treatments on dynamic change of Fusarium oxyporum f. sp. cubense from banana corms and rhizosphere
施用方式
Treatment
球茎尖孢镰刀菌数量 Amounts of F. oxyporum f. sp. cubense of corm ( × 104 CFU / g)
0 d    5 d    10 d    15 d    20 d    25 d    30 d   
对照 CK 1􀆰 00 ±
0􀆰 09 Ca
1􀆰 06 ±
0􀆰 08 BCa
1􀆰 07 ±
0􀆰 10 Ba
1􀆰 11 ±
0􀆰 05 ABa
1􀆰 09 ±
0􀆰 08 ABa
1􀆰 15 ±
0􀆰 09 Aa
1􀆰 12 ±
0􀆰 05 ABa
喷施 Spray 1􀆰 00 ±
0􀆰 07 Aa
0􀆰 46 ±
0􀆰 04 BCb
0􀆰 28 ±
0􀆰 01 Cbc
0􀆰 32 ±
0􀆰 02 Cbc
0􀆰 34 ±
0􀆰 03 Cbc
0􀆰 32 ±
0􀆰 02 Cbc
0􀆰 32 ±
0􀆰 01 Cbc
注射 Inject 1􀆰 00 ±
0􀆰 05 Aa
0􀆰 42 ±
0􀆰 02 BCb
0􀆰 12 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 14 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 14 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 16 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 15 ±
0􀆰 01 Cc
打孔灌药
Perfusion after perforation
1􀆰 00 ±
0􀆰 05 Aa
0􀆰 04 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 003 Cc
0􀆰 06 ±
0􀆰 01 Cc
0􀆰 05 ±
0􀆰 002 Cc
0􀆰 07 ±
0􀆰 005 Cc
0􀆰 03 ±
0􀆰 003 Cc
施用方式
Treatment
根际土壤尖孢镰刀菌数量 Amounts of F. oxyporum f. sp. cubense from rhizosphere ( × 104 CFU / g)
0 d    5 d    10 d    15 d    20 d    25 d    30 d   
对照 CK 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 BCa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 BCa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 ABa
0􀆰 31 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 Ca
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 BCa
喷施 Spray 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 01 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 02 ±
0􀆰 001 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 00 3Cc
0􀆰 02 ±
0􀆰 002 Cc
0􀆰 04 ±
0􀆰 002 Cc
0􀆰 05 ±
0􀆰 004 Cc
注射 Injection 0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Ba
0􀆰 31 ±
0􀆰 02 Aa
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 ABa
0􀆰 29 ±
0􀆰 03 BCa
0􀆰 29 ±
0􀆰 02 BCa
0􀆰 29 ±
0􀆰 01 Ca
0􀆰 29 ±
0􀆰 02 BCa
打孔灌药
Perfusion after perforation
0􀆰 30 ±
0􀆰 02 ABa
0􀆰 29 ±
0􀆰 01 Ba
0􀆰 28 ±
0􀆰 01 Ca
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
0􀆰 28 ±
0􀆰 02 Ca
0􀆰 29 ±
0􀆰 02 Ba
0􀆰 30 ±
0􀆰 03 Aa
    表中数据为平均数 ±标准差。 同行不同大写字母、同列不同小写字母表示经 Duncan 氏新复极差法检验在 P < 0􀆰 05 水平差异显
著。 Data are mean ± SD. Different uppercase letters in the same row and different lowercase letters in the same column indicate significant
difference at P < 0􀆰 05 level by Duncan’s new multiple range test.
3 讨论
将抑制甾醇生物合成的咪唑类杀菌剂咪鲜胺与
影响真菌细胞分裂的内吸性苯并咪唑类杀菌剂多菌
灵混配,可防治稻瘟病、芒果炭疽病等 (李锐等,
2004;陈阳婷等,2012),本研究也筛选到对香蕉枯
萎病菌抑菌效果较好的混配组合,混配后表现协同
增效作用,推测原因与其作用机制和抗药机制有关。
生石灰在消毒病株及病地方面应用较广,但本研究
表明,生石灰对大田病株灭菌效果不显著,对根际土
壤病菌有一定的抑制作用,这可能是因为生石灰长
时间暴露在空气中易丧失消毒杀菌、干燥作用,且撒
在土壤表面的生石灰难以有效作用于病株内部的枯
萎病菌,贲海燕(2013)、杜志勇和樊小林(2008)认
为应用氰氨化钙、改性石灰氮等能较好地防治蔬菜
土传病害。 发病蕉园喷施内吸灭生性除草剂草甘膦
对病株携带的病原菌有一定抑制作用,但对土壤中
病原菌的灭除效果不理想,前者与汤东生等(2011)
研究除草剂对石榴枯萎病菌影响的结果相吻合,推
测是因为植株死亡,病原菌不能获取营养,未能进一
步扩展,而直接喷入土壤时,草甘膦易与铁、铝等金
属离子结合而失去活性。 此外,纪翠红(2014)、马
德成等(2006)分别提出在防控水稻黑条矮缩病、苜
蓿黄萎病等时应及早砍除、拔除病株。 防控瓜菜枯
萎病也经常采用拔除病株并消毒土壤的方法,但香
蕉植株假茎含水量极高,生物量较大,难以应用拔除
病株的常规方法进行灭除,对其进行砍除、粉碎、深
埋、焚毁等处理费工费时,且处理过程中极易造成人
为的病菌传播,给周边生态环境带来不利影响。 与
此同时,若不及时处理,病株自然枯萎时间较长,病
原菌易向周围扩散蔓延,在田间形成明显的发病中
心(刘磊等,2015)。 陆瑞好等(2007)研究发现应用
树干打孔埋药等方法防控桑树黄化病,可使病株
转绿。
本研究在筛选得到最佳混配杀菌剂的基础上,
结合香蕉枯萎病土传维管束致病特征,配套建立了
高效便捷的打孔灌药消毒方法,即:在田间发现零星
枯萎病发病株后,在其假茎近地端向球茎中心打孔,
7633 期 刘  磊等: 香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选
孔径 2 ~ 3 cm,孔深 15 ~ 20 cm,并灌注 1 000 mg / L
最佳混配液 50 mL,抑菌效果显著。 但是,研究也表
明,打孔灌药和注射处理对根际土壤的枯萎病菌无
显著抑制作用,这可能是因为药剂灌注或注射到植
株后,30 d 内药效可保持在植株内部,未明显向根
际土壤扩散,因此,可在打孔灌注的同时喷施药液于
病株附近土壤,以形成对病株的立体灭菌。 该方法
既可提高田间灭菌效果,又便于操作,易于大面积推
广。 后续研究将考虑引入生防菌(刘磊等,2013)等
与该混配剂配合施用,增强灭菌持效性、环境安全性
等,力争从源头综合防控香蕉枯萎病。
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(责任编辑:李美娟)
9633 期 刘  磊等: 香蕉枯萎病田间发病株的高效灭菌方法筛选