全 文 :植物病理学报
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两种葱属 植物提取液对香蕉枯萎病菌的毒力测定及
分析
杨静美 , 王 强 , 伍惠媚 , 何小静 , 冯 岩
仲恺农业工程学院农学院 广州
摘要 : 以韭菜和葱的 乙酸乙酯提取液对香蕉枯萎病菌进行 了抑菌试验 , 并在高温条件下 , 采用气相色谱 质谱法 (
对葱的各部位 、 韭菜根的乙酸乙 酯提取液进行分析 。 结果表明 : 韭菜和葱各部位乙酸乙酯提取液对香蒸枯萎病菌均有一定
的抑制作用 以 韭菜茎的抑制效果最好 为 韭菜根的抑制 效果次之 葱 的根 、 茎 、 叶和韭菜根的乙酸乙酯提取液检
出 物分别为 、 、 和 种 其中韭菜根提取液中有较多 的含硫化合物 脒基硫脲最多 为 。 葱提取液中除含硫
化合物外 , 还检出 噻吩 、 吡嗪和喹啉类物质 。
关键词 : 韭菜 ; 葱 ; 香蕉枯萎病菌 ; ; 抑菌作用
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中 图分类号 : 文献标识码 : 文章编号 :
葱 ( 和韭菜 ( 丙基硫醚 、 丙錄基甲 基二硫化物和二甲 基三硫
作为百合科葱属植物 不仅可作蔬菜 , 还具有 化物等 , 还含有噻吩 、 海 罂粟碱、 吲哚 、 咔唑 、
一定的药用价值 , 因此在我 国各地方均有种植 。 吡唑、 吡喃和毒扁 豆碱等 。 葱属植物挥发油对
目 前对这 种葱属植物体内 化学成分及作用 的深 毛癣菌属 和 曲霉属真菌有一定的 抑制 作用 — 。
入研究 已有报道 , 如 葱属植物 中 有多种含硫化合 研究表明 ,韭菜具有杀虫扰菌、抗突变 、抗氧化和温
物一二丙基二硫化物 、 丙基烯丙基二硫化物 、 烯 肾助阳等多种生物学功 能 。 韭菜挥发油中 的化
收稿日 期 : 修回 日期 :
基金项目 : 广东省科技计划项 目 (
通讯作者 : 冯 岩 ,教授 , 主要从事植物病理学研究 , £
第一作者 : 杨静美 , 女 , 湖北宜 昌人 , 实验师 主要从事植物病理学研究 。
4 期 杨静美 等 : 两种葱属植物提取液对香蕉枯萎病菌的毒力测定及 分析
学成分如二丙烯基二硫醚 、二丙烯基三硫醚和 浸泡 , 晾干 表面消毒 , 其根 、 茎和 叶切碎后
甲基甲焼硫代亚磺酸盐等 , 对大肠杆菌 、 婚状芽孢 备用 。 称取上述备用并稍加研磨的葱 ( 根、 茎 、 叶 )
杆菌 、沙门 氏菌和金黄色葡萄球菌等都有显著的抑 和韭菜 根 各 分别置于 的磨 口 瓶中 ,
制作用 ° 。 各加入 乙 酸 乙 酯 , 萃取 后 , 收集有机
香蕉枯萎病 ( 由 尖孢镰 相 。 另称取未研磨的韭菜 ( 根 、茎 、 叶 ) 和葱 ( 根 、
刀菌古巴专化型侵染引 起的维管束系统性病害 是 茎、 叶 各 置于 的磨 口 瓶中 分别加人
世界农业史上记载的分布最广 、毁灭性最强的植物 乙酸乙酯 , 萃取 后 ,无菌条件下将乙酸乙
病害之一 。 等 ’ 研究报道 : 韭菜和葱各 酯完全挥发 然后各加人 无菌水浸泡 收
部位不同浓度的稀释汁液对香蒸枯萎病菌孢子萌 集水相 。 空白对照则 只加入等体积的 乙酸乙酯 , 待
发的抑制率均达 , 表现出极强 的抑 菌活性 , 其完全挥发后 , 加人等体积无菌水 , 收集水相 。
同时对香蕉枯萎病菌菌丝生长也有一定的抑制作 韭菜和葱各部位提取液对香蕉枯萎病 菌 的
用 葱和韭菜根 的石油醚提取液 抑菌 实验 在无菌条件下 分别吸取上述 步
检测结果表 明 了葱茎的石 骤韭菜 、 葱各部位 的 收集液以 及空 白 对照 液各
油醚提取液 中含有较多的二硫化物和噻烷类化合 加入到 培 养基 ( 中摇
物 , 对植物病原菌有一定的抑菌活性。 匀 等量倒人 个无菌培养皿 ( 中 , 冷
依据前人的试验研究 , 本文采用 了韭菜和葱各 却放置。 用打孔器 ( 打取预培养 (
部位 乙酸 乙酯的提取物进行香蕉枯萎病菌抑菌试 的香蕉枯萎病菌菌落最边缘成菌饼 , 用接菌针
验 , 并对它们各部位 的提取成分进行 分 每皿接 个菌饼 ; 试验重复 次 。 恒温培养
析 从而探索出一种更有利于抑菌活性成分提取的 后 采用十字交叉法测量菌落生长直径 ( 并
有机溶剂 , 以便找出对香蕉枯萎病菌具有抑菌活性 计算抑制百分率 % 。 数据用 软件 ,邓肯
的 主要化学成分及这些化学成分的位置分布 , 为植 新复极差法分析 。
物源农药的发展提供理论依据 。 御嘀阵 %
对照 径 画 一 画 径 麵 画材料与方法 对照繼径 顧制
材料 提取液 测 定 样品按上述 的■ 色谱条件参照文献 分别对葱 和韭菜各部位 乙
供试 菌及植物 香蕉枯萎病菌 ( 酸乙酯提取液进行 分析测定 。 其中进样
号生理小种 ( 病原 口 和接 口 温度分别为 : , 程序 升温 保持
为尖孢镰刀菌古巴专化型 , 由 仲恺农业工程学院植 以 升温至 : 保持 进
物病理研究所提供 ) ; 韭菜 品 种为蓼江韭菜 葱 品 样方式为不分流进样 进样量 。
种为四季葱 ( 均采 自 广东省广州 市 白 云 区江高镇
蓼江村农户 ) 。 结果与分析
供试试 剂 乙 酸 乙 醋 ( , 分析 韭菜和葱提取液的抑菌效果测定
纯 , 广州化学试剂厂 ) ▲
供试仪器及色谱条件 韭菜和葱各部位 乙酸 乙酯提取液对香蕉枯萎
气相色谱 质谱联用仪 ( 美国 公 司 ) ; 毛细 病菌菌丝生长 的影响结果见表 和图 香蕉枯
管气相色谱柱 萎鋪在无菌水对照条件下 后贿生长直径
美国 公司 ) ; 载气 : 高纯 纯度 为 韭菜根和茎提取液对病原細抑制率
以上 ) ; 质谱条件 源 , 电离电压 离子源温 达纖以上 。 提取液的抑菌效果 韭菜茎 韭菜根
度 质量扫描范围 。 韭菜叶 ; 葱 葱莲 葱叶 。 与对照相 比 , 韭菜和
、
葱各部位对病原菌均有抑制作用 说明 种葱属植卞东 物各部分的乙 酸乙酯提取液 中都含有抑 制香蕉枯
样品 预处理 将韭菜和葱洗净后用无菌水 萎病菌的活性成分 。
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检测结果 取液抑菌活性达到 以 上 , 这 与之前平 板对
通过对細根 、 莲 、 叶和韭菜 的根部位乙 酸 入法巾韭菜》菌活性胃果相 致 ; 但
酯提 取液抑 菌活 性成分进 行 分析 , 并对 将葱和韭菜直接研 磨后其汁液加人到病原菌 中的
检 出 物进行峰 面积归一化分析 , 减去与空 抑制活性相比 , 其结果差异较大 , 这表明两种葱
白对照保 留 时间相 同 的组分 与标准质谱库 比对 ’ 属植物提取液 中具有抑 菌活性 的化合物可能具有
将相似度高的含硫 、 噻吩和吡嗪等杂环类 的化合物 挥发性 , 也可能是由 于乙酸乙酯提取 的仅是亲酯类
列表 表 。 结果表 明 葱的根 、茎 、 叶和韭菜的根 的物质 应用其它溶 剂进行进一步研究 。 葱 的根 、
部位 乙酸 乙酯检 出 物 分别 为 、 、 和 种 。 茎 、 叶和韭菜根 的 乙酸 乙酯检 出 物分别为 、 、
韭菜 根 的 提 取液 中 , 脒 基 硫 脲 的 含 量 最 高 , 为 和 种 其中葱部位 的乙 酸乙酯提取液中含有
二烯丙基 二硫化 物 的 含量 为 这 的二硫化物和少量 的噻吩 、 吡嗪类化合物 ;
种化合物可能是抑菌 的 主要成分 。 葱 的各部位 菜根中含有 的硫酸二 甲酯 的二稀
提取液中检测出 噻吩 、 吡嗪和喹啉类化合物 未检 丙基二硫化物及 〗 的 脒基硫脲 这些活性化
出噻烷 , 这与石油醚提取液检测物有所不 同 。 葱根 合物的抑菌活性评价指标有待于进一步的研究 , 并
和 叶的提取液 中二丙基二硫化物含量较高 , 可能是 且提取工艺还需进一步优化以 达到理想的抑菌效
抑菌活性 的 主要成分 ( 其 中 叶 中 的 含量较多 , 为 果 。 与前期 种葱属植物石油醚提取液相 比 , 乙酸
。 乙酯提取液中硫化合物的含量和种类都较少 其中
葱的各部位 乙酸 乙酯 提取物 中共检 出 种化合
物 ,石油醚为 种 ; 韭菜各部位乙酸乙酯提取物中
本文进行了韭菜和葱不 同部位的 乙 酸乙酯提 共检 出 种化合物 , 石油醚 为 种… , 表明不
取液对香蕉枯萎病菌的毒力试验 , 并对提取液进行 同 的有机溶剂对不同植物部位提取效果不同 具有
了 检测 。 结果显示 韭菜茎的 乙 酸乙酯提 选择性 。
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参考文献
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责任编辑 张宗英 曾 晓葳