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Isolation, identification of BM-24 strains and its antifungal activity of antagonistic bacteria against Fusarium oxysporum f.sp.cubense

菌株BM-24的分离鉴定及对香蕉枯萎病菌的抑菌活性



全 文 :菌株 月酝鄄圆源的分离鉴定及对香蕉
枯萎病菌的抑菌活性
黄摇 霄员袁 圆 摇 陈摇 波圆 摇 周登博员袁 圆 摇 谭摇 昕圆 摇 张锡炎圆鄢
渊员援海南大学园艺园林学院袁 海口 缘苑园圆圆愿曰 圆援中国热带农业科学院热带生物技术研究所袁 海口 缘苑员员园员冤
摘要院 为了从饼肥发酵液中分离筛选出对香蕉枯萎病菌 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 糟怎遭藻灶泽藻有良好拮
抗效果的菌株袁以香蕉枯萎病病原菌为指示菌进行拮抗菌分离筛选遥 筛选得到 圆怨 株拮抗菌袁其中
分离自菜子饼的菌株 月酝鄄圆源 拮抗效果最显著遥 利用平板对峙法测定菌株 月酝鄄圆源 抑菌谱袁根据形态
特征尧培养特征及生理生化特征和 员远杂 则阅晕粤序列分析对其进行鉴定袁并测定其发酵液不同处理的
抑菌活性遥 经鉴定袁此菌株为甲基营养型芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 皂藻贼澡赠造燥贼则燥责澡蚤糟怎泽袁该菌株对供试的 员圆 种
植物病原真菌均有很强的抑制作用袁尤其对香蕉枯萎病菌 员 号和 源 号小种菌丝生长抑制作用最强袁
抑菌率分别达到 愿苑援 圆豫和 愿园援 源豫 袁其发酵液对香蕉枯萎病菌具有很强抑菌效果袁抑菌活性主要源
于菌体竞争遥
关键词院 香蕉枯萎病曰 生防细菌曰 分类鉴定曰 抑菌活性
陨泽燥造葬贼蚤燥灶袁 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 月酝鄄圆源 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶凿 蚤贼泽 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣
葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 糟怎遭藻灶泽藻
匀怎葬灶早 载蚤葬燥员袁 圆 摇 悦澡藻灶 月燥圆 摇 在澡燥怎 阅藻灶早遭燥员袁 圆 摇 栽葬灶 载蚤灶圆 摇 在澡葬灶早 载蚤赠葬灶圆鄢
渊员援 悦燥造造藻早藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻泽 葬灶凿 蕴葬灶凿泽糟葬责藻 粤则糟澡蚤贼藻糟贼怎则藻袁 匀葬蚤灶葬灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬蚤噪燥怎 缘苑园圆圆愿袁 匀葬蚤灶葬灶
孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 栽则燥责蚤糟葬造 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣
栽则燥责蚤糟葬造 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀葬蚤噪燥怎 缘苑员员园员袁 匀葬蚤灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 蚤泽燥造葬贼藻 葬灶凿 泽糟则藻藻灶 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 泽贼则葬蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 糟怎遭藻灶泽藻 燥枣
遭葬灶葬灶葬 枣则燥皂 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 糟葬噪藻 枣藻则贼蚤造蚤扎藻则 造蚤择怎蚤凿袁 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 憎葬泽 贼葬噪藻灶 葬泽 蚤灶凿蚤糟葬贼蚤增藻 遭葬糟贼藻则蚤葬 贼燥 泽藻责葬则葬贼藻
葬灶凿 泽糟则藻藻灶 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 圆怨 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿袁 葬皂燥灶早 燥枣 憎澡蚤糟澡 贼澡藻
泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 则葬责藻泽藻藻凿 糟葬噪藻 澡葬凿 贼澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 藻枣枣藻糟贼援 栽澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 泽责藻糟贼则怎皂 燥枣
贼澡藻 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源 憎葬泽 贼藻泽贼藻凿 遭赠 责造葬贼藻 泽贼葬灶凿鄄燥责责燥泽蚤贼藻 糟怎造贼怎则藻 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 怎泽蚤灶早 员远杂 则阅晕粤 泽藻鄄
择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 糟燥皂遭蚤灶藻凿 憎蚤贼澡 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 糟怎造贼怎则藻 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿
遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽援 栽澡藻 葬灶贼蚤遭葬糟贼藻则蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 燥灶 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶
造蚤择怎蚤凿 憎葬泽 贼藻泽贼藻凿 枣怎则贼澡藻则皂燥则藻援 栽澡藻 泽贼则葬蚤灶 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 贼燥 遭藻 月葬糟蚤造造怎泽 皂藻贼澡赠造燥贼则燥责澡蚤糟怎泽援 陨贼 泽澡燥憎藻凿 泽贼则燥灶早
蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 贼燥 员圆 噪蚤灶凿泽 燥枣 责造葬灶贼 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早蚤袁 藻泽责藻糟蚤葬造造赠 贼燥 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 砸葬糟藻 员 葬灶凿 砸葬糟藻 源 燥枣 遭葬灶葬灶葬
憎蚤贼澡 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻泽 燥枣 愿苑援 圆豫 葬灶凿 愿园援 源豫 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 澡葬凿 泽贼则燥灶早
葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼 藻枣枣藻糟贼泽 贼燥 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 皂葬蚤灶造赠 遭藻糟葬怎泽藻 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤葬 糟燥皂责藻贼蚤贼蚤燥灶援
运藻赠 憎燥则凿泽院 遭葬灶葬灶葬 云怎泽葬则蚤怎皂 憎蚤造贼曰 遭蚤燥鄄糟燥灶贼则燥造 遭葬糟贼藻则蚤葬曰 糟造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 遭葬糟贼藻则蚤燥泽贼葬贼蚤糟
葬糟贼蚤增蚤贼赠
基金项目院 国家现代农业产业技术体系建设专项渊糟则葬泽鄄猿圆冤
作者简介院 黄霄袁男袁员怨愿远年生袁硕士研究生袁研究方向为香蕉枯萎病防控袁 耘鄄皂葬蚤造院 澡怎葬灶早曾蚤葬燥园猿员缘岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 扎曾赠葬灶员怨愿员岳 员远猿援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员圆 原 员园 原 园愿
第 源园 卷摇 第 圆 期
圆园员猿 年摇 源 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 圆
粤责则援 摇 圆园员猿
摇 摇 香蕉是热带亚热带地区重要的经济作物遥 联合
国粮食及农业组织渊 云燥燥凿 葬灶凿 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 韵则早葬灶蚤扎葬鄄
贼蚤燥灶袁云粤韵冤 咱员暂最新统计数据显示袁圆园员员 年全球种植
香蕉的国家有 员圆苑 个袁总产量达 员园远缘源援 圆 万吨袁收获
面积从 圆园园园 年 源圆源援 远 万 澡皂圆 增长到 圆园员员 年 缘员缘援 愿
万 澡皂圆袁增幅达 圆员援 园豫 遥 随着全球香蕉种植面积大
幅增加袁香蕉枯萎病也随之大面积暴发咱圆暂 遥
香蕉枯萎病是一种由真菌引起的具有毁灭性的
土传维管束病害袁其病原菌为尖孢镰刀菌古巴专
化型 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 糟怎遭藻灶泽藻渊云韵悦冤 咱猿暂 遥 该
病害于 员愿苑源 年在澳大利亚首次发现袁至今已蔓延至
全球大部分香蕉分布地袁发病蕉园病株率一般在
员园豫 耀 源园豫 袁严重时可达 怨园豫 以上袁以致蕉园废
弃咱源暂 袁严重制约香蕉产业发展遥
目前袁防治香蕉枯萎病的方法主要有生物防
治咱缘 原 远暂 尧化学防治咱苑暂 尧抗病品种选育咱愿暂 尧轮作以及土
壤消毒等遥 病原菌易对化学药剂产生抗药性袁药剂
残留会导致环境污染和食品安全等问题咱源袁 怨暂 曰抗病
品种选育周期长袁且抗病性与农艺性状很难兼
顾咱员园暂 曰轮作和土壤消毒在实际生产中并未取得有效
防治效果遥 生物防治符合环境保护和农业可持续发
展的要求袁已受到广泛关注遥
国内外对香蕉枯萎病生物防治的研究主要集中
在拮抗菌株分离筛选尧菌株发酵液尧悬浮液尧代谢产
物等对香蕉枯萎病的防效和机制袁以及菌株定殖等
方面遥 其中对香蕉枯萎病菌有较好拮抗效果的菌株
主要集中在以下几个属院芽胞杆菌属 月葬糟蚤造造怎泽尧假单
胞杆菌属 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽尧放线菌属 粤糟贼蚤灶燥皂赠糟藻泽及木霉
菌属 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬咱员员暂 遥
菌种在实际应用过程中常发生变异和退化现
象咱员圆暂 袁需要不断补充新的高效生防菌株遥 本试验拟
通过对多种饼肥进行发酵处理袁从中分离筛选对香
蕉枯萎病菌有较好拮抗作用的菌株袁对其中抑菌效
果最好的菌株进行分类鉴定袁并对其发酵液的抑菌
活性进行研究袁以期为香蕉枯萎病生防制剂的开发
提供理论依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
病原菌院尖孢镰刀菌古巴专化型 员 号尧源 号小
种袁分离自海南省香蕉枯萎病病株组织中袁保存于中
国热带农业科学院热带生物技术研究所遥 香蕉长形
斑病菌 悦怎则增怎造葬则蚤葬 枣葬造造葬曾尧芒果链格孢霉叶斑病菌 粤造鄄
贼藻则灶葬则蚤葬 贼藻灶怎蚤泽泽蚤皂葬尧香蕉炭疽病菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 皂怎鄄
泽葬藻尧香蕉大灰斑病菌 悦怎则增怎造葬则蚤葬 造怎灶葬贼葬尧贡蕉眼斑病
菌 月蚤燥责造葬则蚤泽 燥则赠扎葬藻尧香蕉果尖腐烂病菌 阅藻蚤早澡贼燥灶蚤藻造造葬
贼则燥怎造燥泽葬尧香蕉叶缘枯斑病菌 粤造贼藻则灶葬则蚤葬 皂怎泽葬藻尧荔枝炭
疽病菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥葬责燥则蚤燥蚤凿泽尧芒果炭疽病菌
悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥葬责燥则蚤燥蚤凿泽尧芒果叶枯病菌 孕藻泽贼葬造燥贼蚤鄄
燥责泽蚤泽 皂葬灶早蚤枣藻则葬藻袁均由中国热带农业科学院环境与植
物保护研究所提供遥
培养基院蕴月培养基尧高氏 员 号培养基尧马丁培养
基尧马铃薯葡萄糖琼脂培养基遥
药剂院怨怨援 愿豫重铬酸钾渊责燥贼葬泽泽蚤怎皂 凿蚤糟澡则燥皂葬贼藻冤袁
购自广州化学试剂厂曰源 源园园 哉 辕 皂早 制霉菌素渊灶赠泽贼葬鄄
贼蚤灶冤袁购自上海金穗生物科技有限公司曰质量体积比
为 员 源缘苑援 猿愿 的链霉素渊泽贼则藻责贼燥皂赠糟蚤灶 泽怎造枣葬贼藻冤尧怨园豫孟
加拉红渊则燥泽藻 遭藻灶早葬造 泽燥凿蚤怎皂 泽葬造贼冤尧怨缘豫利福平渊则蚤枣葬皂鄄
责蚤糟蚤灶冤均购自 杂燥造葬则遭蚤燥 公司曰员 皂燥造 辕 蕴尧责匀 苑援 圆 栽则蚤泽鄄
匀悦陨缓冲液袁购自上海双螺旋生物科技有限公司曰
员援 员园 早 辕 皂蕴 二甲基亚砜 渊 凿蚤皂藻贼澡赠造 泽怎造枣燥曾蚤凿藻冤袁购自
月蚤燥杂澡葬则责公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 拮抗菌株筛选及抑菌谱测定
分别用菜籽饼尧豆饼尧花生饼尧芝麻饼尧麦麸和红
糖配制 圆缘园 早碳氮比为 猿园 颐 员 的混合物袁并放入 缘园园园
皂蕴的烧瓶中袁加入 员 园园园 皂蕴 去离子水袁猿苑 益尧圆缘园 则 辕
皂蚤灶震荡培养 猿 凿袁再采用本试验其它发酵方法和发
酵条件进行发酵袁获得各饼肥发酵液遥
采用平板涂布法咱员猿暂分离菌株遥 取 员园 皂蕴 饼肥
发酵液于离心管中袁振荡 员 皂蚤灶袁逐级吸取 员 皂蕴样品
液加入到 怨 皂蕴 无菌水中袁分别配制成 员园 原员尧员园 原圆尧
员园 原 猿尧员园 原源稀释度的发酵液袁振荡 员 皂蚤灶袁吸取 员园园
滋蕴袁依次涂布于含 缘园 皂早 辕 蕴 重铬酸钾和 缘园 皂早 辕 蕴 制
霉菌素的高氏培养基尧马丁培养基以及 蕴月 培养基
的平板上袁每处理重复 猿 次遥 将涂布好的高氏和马
丁平板置于 圆愿 益恒温箱培养 苑圆 澡尧蕴月 平板置于 猿苑
益恒温箱培养 源愿 澡袁挑取培养特征相异的单菌落袁经
培养纯化后作为供试菌遥 分离得到的菌株经多次划
线纯化并镜检后袁转接到斜面袁源 益保存袁每隔 圆 个
月活化 员 次遥
将 孕阅粤 培养基融化并冷却至 源缘 益左右袁加入
适量香蕉枯萎病菌 员 号小种孢子悬液袁混匀袁调整孢
子浓度至 员园远 个 辕 皂蕴袁制板遥 将供试菌株点接于病
原菌平板上袁圆愿 益培养 源愿 澡袁观察并测量抑菌圈袁挑
选抑菌效果较好的菌株进行复筛遥
圆圆员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
摇 摇 采用平板对峙法咱员源暂测定拮抗菌抑菌效果和菌
株抑菌谱遥 在 孕阅粤平板中间接一直径为 缘 皂皂 的香
蕉枯萎病菌 员 号小种菌饼袁将初筛得到的菌株对称
点接在平板边缘距中心 圆缘 皂皂处袁每皿接 源 点袁每处
理重复 猿 次袁以只接种香蕉枯萎病病原菌为对照袁圆愿
益培养遥 待对照平板长满菌丝后观察待测菌株的抑
菌效果遥
员援 圆援 圆 菌株分类鉴定
菌株形态和培养特征尧生理生化特性测定参照
叶常见细菌系统鉴定手册曳 咱员缘暂 尧叶伯杰细菌鉴定手
册曳 咱员远暂进行遥
菌株 员远杂 则阅晕粤 序列测定及比对分析院选用细
菌 员远杂 则阅晕粤通用引物 圆苑云院缘忆鄄粤郧粤郧栽栽栽郧粤栽悦悦栽郧鄄
郧悦栽悦粤郧鄄猿忆和 员源怨圆砸院缘忆鄄郧郧栽栽粤悦悦栽栽郧栽栽粤悦郧粤悦栽栽鄄
猿忆对菌株进行 孕悦砸扩增遥 反应体系院圆 伊 栽葬责 酝葬泽贼藻则鄄
酝蚤曾 圆缘 滋蕴尧员园 皂皂燥造 辕 蕴 云燥则憎葬则凿 孕则蚤皂藻则 员 滋蕴尧员园 皂皂燥造 辕
蕴 砸藻增藻则泽藻 孕则蚤皂藻则 员 滋蕴尧模板 员 滋蕴袁补充 砸晕葬泽藻鄄枣则藻藻水
至 缘园 滋蕴遥 孕悦砸 反应程序院怨源 益预变性 猿 皂蚤灶曰怨源 益
变性 源缘 泽袁缘源益退火 源缘 泽袁苑圆益延伸 员援 缘皂蚤灶袁 猿缘 个循
环曰 苑圆 益延伸 员园 皂蚤灶袁 源 益保存遥 经 员援 园豫琼脂糖
凝胶电泳对扩增产物进行检测后送北京六合华大基
因科技股份有限公司测序遥 测通拼接后袁进行
月蕴粤杂栽相似序列检索袁选取相似性较高菌株的模式
菌株作为参比对象袁构建系统发育树遥
员援 圆援 猿 不同处理发酵液抑菌活性测定
发酵液制备院将菌株 月酝鄄圆源 在 蕴月 平板上划线袁
猿苑 益培养 圆源 澡袁挑取单菌落接种到 蕴月 液体培养基
中袁猿苑益尧圆缘园 则 辕 皂蚤灶震荡培养 猿 凿遥 取 缘园 皂蕴发酵液袁
室温尧员园 园园园 早离心 圆园 皂蚤灶袁取上清用细菌过滤器除
菌袁得到发酵液上清遥
发酵液粗蛋白提取咱员苑暂 院取 缘园 皂蕴发酵液 源益尧员园
园园园 早 离心 员园 皂蚤灶袁收集上清液遥 向上清液边搅拌边
缓慢加入硫酸铵至 远缘豫饱和度袁源 益静置 圆源 澡遥 源
益尧员猿 园园园 则 辕 皂蚤灶 离心 圆园 皂蚤灶袁收集沉淀遥 上清液即
为硫酸铵处理上清液遥 沉淀用 员 皂蕴 栽则蚤泽鄄匀悦陨 缓冲
液溶解袁得到粗蛋白液遥
发酵液甲醇粗提物的提取咱员愿暂 院用无菌滤纸过滤
发酵液袁取树脂袁加入 员园 倍体积甲醇浸提 猿 凿遥 浸提
物 源缘 益减压蒸馏除去溶剂袁得到甲醇粗提物遥 将粗
提物用少量二甲基亚砜溶解备用遥
发酵液抑菌活性测定院以无菌水为对照袁采用滤
纸法咱员怨暂分别测定发酵液原液尧硫酸铵处理上清液尧
发酵液粗蛋白液尧发酵液上清液尧甲醇提取物的抑菌
活性遥 将直径为 员园皂皂的无菌滤纸片放入各待测液
和无菌水中浸泡 圆 澡袁取出置于超净工作台常温吹
干遥 在 孕阅粤培养基平板中间接一直径为 缘 皂皂的香
蕉枯萎病菌 员 号小种菌饼袁分别将各个处理滤纸片
放到平板边缘距中心 圆缘 皂皂处袁每皿对称放 源 片袁每
处理重复 猿 次袁以无菌水处理为对照袁圆愿 益培养袁待
对照平板长满菌丝后观察待测菌株抑菌效果遥 从平
板中挑取病原菌菌丝袁以正常生长菌落菌丝为对照袁
通过显微镜观察其生长形态及被抑制情况遥
员援 猿 数据分析
采用 耘曾糟藻造 圆园园猿 和 杂粤杂 怨援 员 统计软件进行数据
分析处理袁用单因素方差分析统计各处理平均数的
差异袁阅怎灶糟葬灶氏新复极差法比较各处理间的差异显
著性遥
圆 结果与分析
圆援 员 拮抗菌株筛选及抑菌谱测定
经平板涂布分离并划线纯化共得到 圆猿愿 株菌
株遥 其中细菌 圆圆怨 株渊包括 圆员 株放线菌冤尧真菌 怨
株遥 通过初筛尧复筛袁最终得到 圆怨 株对香蕉枯萎病
菌拮抗活性较好的细菌遥 其中袁分离自菜子饼发酵
液的菌株 月酝鄄圆源 抑菌效果最显著袁且稳定性好遥
菌株 月酝鄄圆源 对供试 员圆 种植物病原真菌均有不
同程度的抑制作用袁尤其对香蕉枯萎病菌 员 号和 源
号小种的抑菌作用最强袁抑菌率分别达到 愿苑援 圆豫和
愿园援 源豫 遥 除香蕉叶缘枯斑病菌外对其余 怨 种供试病
原菌也有很强的抑菌效果袁表明菌株 月酝鄄圆源 抑菌谱
广泛渊表 员冤遥
圆援 圆 菌株 月酝鄄圆源 的鉴定
圆援 圆援 员 形态特征及培养特征
在 蕴月培养基上袁菌株 月酝鄄圆源 生长良好袁猿苑 益恒
温培养 圆 凿菌落直径可达到 猿 耀 远 皂皂遥 菌落形状不
规则尧边缘不整齐尧表面干燥褶皱尧呈浅黄色且不透
明尧不产色素渊图 员鄄葬冤尧革兰氏阳性尧好氧尧短杆状尧
椭圆形芽胞中生渊图 员鄄遭冤尧鞭毛侧生渊图 员鄄糟冤遥
圆援 圆援 圆 生理生化特征
菌株 月酝鄄圆源 灾鄄孕 测定尧接触酶尧硝酸盐还原尧柠
檬酸盐利用试验均为阳性袁氧化酶尧甲基红渊酝援 砸冤尧
丙二酸利用均为阴性袁能水解淀粉尧明胶曰能利用的
唯一碳源有麦芽糖尧蔗糖尧葡萄糖尧乳糖尧甘露醇尧甘
油尧山梨醇袁不能利用可溶性淀粉尧肌醇尧阅 原 半乳
糖遥 能利用的唯一氮源有硫酸铵尧草酸铵尧氯化铵尧
硝酸铵袁不能利用钼酸铵曰能够在 责匀为 圆援 园 耀 员园援 园尧
猿圆员圆 期 黄摇 霄等院菌株 月酝鄄圆源 的分离鉴定及对香蕉枯萎病菌的抑菌活性
表 员 菌株 月酝鄄圆源 对 员圆 种病原真菌的抑制作用
栽葬遭造藻 员 陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽 月酝鄄圆源 葬早葬蚤灶泽贼 员圆 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早蚤
植物病原真菌摇
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早怎泽摇
抑菌带宽渊皂皂冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 扎燥灶藻 憎蚤凿贼澡
抑菌率渊豫 冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻
香蕉枯萎病菌 员号小种 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 砸葬糟藻 员 圆员援 愿 依 园援 猿 葬粤 愿苑援 圆 依 员援 圆 葬粤
香蕉枯萎病菌 源号小种 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 砸葬糟藻 源 圆园援 员 依 园援 远 葬遭月 愿园援 源 依 圆援 源 葬遭月
香蕉长形斑病菌 悦援 枣葬造造葬曾 员圆援 源 依 园援 远 枣云 源怨援 远 依 圆援 源 枣云
芒果链格孢霉叶斑病菌 粤援 贼藻灶怎蚤泽泽蚤皂葬 员苑援 苑 依 园援 苑 糟凿阅 苑园援 愿 依 圆援 愿 糟凿阅
香蕉炭疽病菌 悦援 皂怎泽葬藻 员源援 缘 依 园援 远 藻耘 缘愿援 园 依 圆援 源 藻耘
香蕉大灰斑病菌 悦援 造怎灶葬贼葬 员缘援 园 依 园援 苑 藻耘 远园援 园 依 圆援 愿 藻耘
贡蕉眼斑病菌 月援 燥则赠扎葬藻 员怨援 远 依 园援 怨 遭糟月悦 苑愿援 源 依 猿援 远 遭糟月悦
香蕉果尖腐烂病菌 阅援 贼则燥怎造燥泽葬 员苑援 远 依 园援 远 凿阅 苑园援 源 依 圆援 源 凿阅
香蕉叶缘枯斑病菌 粤援 皂怎泽葬藻 愿援 缘 依 园援 怨 早郧 猿源援 园 依 猿援 远 早郧
荔枝炭疽病菌 悦援 早造燥藻燥葬责燥则蚤燥蚤凿泽 圆园援 园 依 园援 猿 葬遭月 愿园援 园 依 员援 圆 葬遭月
芒果炭疽病菌 悦援 早造燥藻燥葬责燥则蚤燥蚤凿泽 员愿援 猿 依 员援 苑 遭糟凿悦阅 苑猿援 圆 依 远援 愿 遭糟凿悦阅
芒果叶枯病菌 孕援 皂葬灶早蚤枣藻则葬藻 员怨援 缘 依 园援 缘 遭糟月悦 苑愿援 员 依 圆援 园 遭糟月悦
摇 摇 注院表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同大尧小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园员 和 孕 约 园援 园缘 水平差
异显著遥 晕燥贼藻院 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 怎责责藻则糟葬泽藻 燥则 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 泽澡燥憎 贼澡藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼
孕 约 园援 园员 燥则 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援
图 员 菌株 月酝鄄圆源 形态特征及培养特征
云蚤早援 员 酝燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 糟怎造贼怎则藻 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源
摇 摇 注院 葬院菌落形态曰 遭院芽胞染色电镜照片渊员 园园园 伊 冤曰 糟院鞭毛染色电镜照片渊员 园园园 伊 冤遥 晕燥贼藻院 葬院 栽澡藻 糟燥造燥灶赠 皂燥则责澡燥造燥早赠曰 遭院 贼澡藻 藻造藻糟鄄
贼则燥灶蚤糟 皂蚤糟则燥泽糟燥责赠 责澡燥贼燥 燥枣 泽责燥则藻 凿赠藻凿 渊员 园园园 伊 冤曰 糟院 贼澡藻 藻造藻糟贼则燥灶蚤糟 皂蚤糟则燥泽糟燥责赠 责澡燥贼燥 燥枣 枣造葬早藻造造怎皂 凿赠藻凿 渊员 园园园 伊 冤援
温度为 圆园 耀 源缘益尧含盐量小于 缘援 园豫的条件下生长袁
适宜生长的 责匀为 缘援 园 耀 怨援 园尧温度为 猿园 耀 源员 益遥 最
适 责匀为 苑援 园袁最适生长温度为 猿园 益遥
上述鉴定特征与叶伯杰细菌鉴定手册曳 咱员远暂 尧叶常
见细菌鉴定手册曳 咱员缘暂对芽胞杆菌属 月葬糟蚤造造怎泽 描述相
符袁因此将菌株 月酝鄄圆源 归入芽胞杆菌属 月葬糟蚤造造怎泽遥
圆援 圆援 猿 员远杂 则阅晕粤序列分析及系统发育树构建
菌株 月酝鄄圆源 经 员远杂 则阅晕粤测序得到长度为 员源缘员
遭责的基因片段袁将其与 郧藻灶月葬灶噪 数据库中 员远杂 则阅鄄
晕粤序列进行相似性比较遥 结果显示袁待测菌株序
列与甲基营养型芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 皂藻贼澡赠造燥贼则燥责澡蚤糟怎泽尧
特基拉芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 贼藻择怎蚤造藻灶泽蚤泽尧解淀粉芽胞杆菌
月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽尧枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭鄄
贼蚤造蚤泽尧死谷芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 增葬造造蚤泽皂燥则贼蚤泽 等菌株序列
的相似度都在 怨怨援 园豫以上遥 选取 员圆 株相似性较高
的芽胞杆菌属标准菌株序列与待测菌株序列构建系
统发育树遥 菌株 月酝鄄圆源 与甲基营养型芽胞杆菌 月援
皂藻贼澡赠造燥贼则燥责澡蚤糟怎泽标准株位于同一分支尧其相似度达
怨怨援 怨豫 渊图 圆冤遥 根据系统发育树相似性和同源性分
析袁结合形态特征尧培养特征及生理生化特征袁鉴定
此菌株为甲基营养型芽胞杆菌 月援 皂藻贼澡赠造燥贼则燥责澡蚤糟怎泽袁
将其编号为 月酝鄄圆源遥
圆援 猿 菌株 月酝鄄圆源 发酵液的抑菌活性
圆援 猿援 员 对 员 号小种的抑菌活性
菌株 月酝鄄圆源 发酵液原液对香蕉枯萎病菌菌丝
有很强的抑菌效果袁甲醇提取物也有明显的抑菌带袁
源圆员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
图 圆 菌株 月酝鄄圆源 系统发育树
云蚤早援 圆 栽澡藻 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源
发酵液粗蛋白液活性较弱袁其余 圆 个处理未观察到
抑菌带渊图 猿冤遥 表明菌株 月酝鄄圆源 发酵液的抑真菌
活性主要是菌体竞争的结果袁其代谢物也有一定抑
菌活性遥
图 猿 不同处理的菌株 月酝鄄圆源 发酵液对香蕉枯萎病菌 员 号小种的抑菌活性
云蚤早援 猿 耘枣枣藻糟贼 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 燥灶 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶
月酝鄄圆源 葬早葬蚤灶泽贼 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 砸葬糟藻 员
摇 摇 注院 葬院 硫酸铵处理上清液曰遭院发酵液原液曰糟院发酵液粗蛋白液曰凿院发酵液上清曰藻院无菌水对照曰枣院甲醇提取物遥 晕燥贼藻院葬院 杂怎责藻则灶葬贼葬灶贼
燥枣 葬皂皂燥灶蚤怎皂 泽怎造枣葬贼藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼曰 遭院 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 造蚤择怎燥则曰 糟院 糟则怎凿藻 责则燥贼藻蚤灶 枣则燥皂 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 造蚤择怎燥则曰 凿院 泽怎责藻则灶葬贼葬灶贼 燥枣 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 造蚤择怎燥则曰 藻院
泽贼藻则蚤造蚤扎藻凿 憎葬贼藻则 渊糟燥灶贼则燥造冤曰 枣院 皂藻贼澡葬灶燥造 藻曾贼则葬糟贼泽援
圆援 猿援 圆 对香蕉枯萎病菌菌丝生长的影响
光学显微镜 源园园 倍镜下观察袁正常生长的香蕉
枯萎病菌菌丝茂盛尧笔直光滑袁较被抑制的病原菌菌
丝长且粗壮尧生长状态均匀一致袁而被抑制菌丝弯曲
盘旋尧粗细不一袁出现畸形肿胀等现象遥 在抑菌活性
测定的平板上挑取的病原菌菌丝中畸形菌丝达到
愿园援 园豫以上渊图 源冤遥
猿 讨论
众多研究表明袁使用生防菌剂可有效防治植物
缘圆员圆 期 黄摇 霄等院菌株 月酝鄄圆源 的分离鉴定及对香蕉枯萎病菌的抑菌活性
图 源 菌株 月酝鄄圆源 发酵液对香蕉枯萎病病原菌菌丝生长的影响 渊源园园 伊 冤
云蚤早援 源 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月酝鄄圆源 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 造蚤择怎蚤凿 燥灶 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 渊源园园 伊 冤
摇 摇 注院 葬院正常生长的菌丝曰 遭院被抑制生长的菌丝遥 晕燥贼藻院 葬院 晕燥则皂葬造 责葬贼澡燥早藻灶泽 澡赠责澡葬藻曰 遭院 蚤灶澡蚤遭蚤贼藻凿 责葬贼澡燥早藻灶泽 澡赠责澡葬藻援
病害遥 分离筛选高效拮抗菌是开发生防试剂的关
键袁而充分发挥拮抗菌株抑菌或杀菌效果袁首先需在
相应的微生态环境中成为优势种群遥 目前袁用生防
菌防治植物病害的主要途径是将拮抗菌与有机质通
过发酵等方法制成生物有机肥施用到田间遥 凌宁
等咱圆园暂研究发现袁西瓜专用有机肥料 月韵云 能有效促
进西瓜植株生长袁防止西瓜枯萎病发生曰胡伟等咱缘暂
研究认为加入解淀粉芽胞杆菌的生物有机肥能有效
降低香蕉枯萎病病情指数曰李国良等咱远暂研究表明袁
鸡粪有机肥与复合芽胞杆菌配施对香蕉有很好的促
生作用袁且能有效降低枯萎病发病率遥 饼肥是各种
油料作物果实或种子榨油后剩下的副产物袁种类繁
多袁主要包括菜籽饼尧豆饼尧花生饼尧芝麻饼尧麦麸尧棉
籽饼尧向日葵饼尧胡麻饼等袁其粗蛋白和有机质含量
丰富袁施入田间能起到防病增产的作用袁目前已作为
有机肥广泛应用于农业生产中咱圆员暂 遥 饼肥中丰富的
有机质能提供适宜菌株生长繁殖的营养条件袁本研
究从 缘 种饼肥发酵液中分离到 圆猿愿 株菌株袁其中对
香蕉枯萎病菌有很好拮抗效果的菌株有 圆怨 株袁若将
拮抗菌大量培养后与分离到该菌株的饼肥进行 圆 次
发酵袁不仅有利于拮抗菌定殖并成为优势种群袁发酵
过程中产生的有益微生物也能起到一定防病效果袁
而且发酵后的饼肥可为植株提供更为丰富的养分遥
员远杂 则阅晕粤序列分析是微生物分类学中重要的
方法袁通过 员远杂 则阅晕粤 序列与 郧藻灶月葬灶噪 数据库中相
应序列比较分析袁可快速尧准确地对微生物进行分类
鉴定咱圆圆暂 遥 本研究采用菌株形态和培养特征尧生理生
化特征与 员远杂 则阅晕粤序列分析相结合的方法对菌株
月酝鄄圆源 进行鉴定袁最终鉴定此菌株为甲基营养型芽
胞杆菌遥 芽胞杆菌抗逆性强尧对环境有很强的适应
性袁是植物和土壤微生物群落的优势种群和最具潜
力的植物病害生防细菌袁其中部分性状优良的拮抗
菌株已成功地应用于植物病害生物防治咱圆猿暂 遥
甲基营养型芽胞杆菌最早是由 酝葬凿澡葬蚤赠葬灶
等咱圆源暂于 圆园园怨 年从田间水稻根际土壤中分离得到袁
其后陈新春等咱圆缘暂研究发现该菌株对水稻白叶枯病
菌 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽燥则赠扎葬藻责增 燥则赠扎葬藻 和水稻细菌条斑病菌
载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 有较强的抑菌效果袁冯云利
等咱圆远暂研究认为该菌是对烟草黑胫病菌 孕澡赠贼燥责澡贼澡燥则葬
责葬则葬泽蚤贼蚤糟葬 增葬则援 灶蚤糟燥贼蚤葬灶葬藻有较强抑制作用的烟草内生
细菌优势种群遥 陈太春等咱圆苑暂从秦岭采集的土壤中
分离得到该菌株袁其对稻瘟病菌 孕赠则蚤糟怎造葬则蚤葬 燥则赠扎葬藻和
番茄灰霉病菌 月燥贼则赠贼蚤泽 糟蚤则藻则藻葬 抑制率分别达到
怨猿援 缘豫和 怨圆援 远豫 遥 杂澡葬灶 等咱圆愿暂从烟叶表面分离得到
该菌株袁研究表明 责匀 苑援 园尧员苑园 则 辕 皂蚤灶尧猿园 益培养 源愿 澡
是该菌株生长的最适宜条件袁并发现该菌株能快速
定殖于烟株组织中袁对烟草灰霉病菌 月燥贼则赠贼蚤泽 糟蚤灶藻则藻葬
有很好的抑制效果遥 本研究结果表明袁菌株 月酝鄄圆源
抑菌谱广袁对多种植物病原真菌都有较强的抑制作
用袁对香蕉枯萎病 员 号尧源 号小种效果尤为突出袁在
拮抗试验平板中袁菌丝生长畸形遥 菌株 月酝鄄圆源 蕴月
发酵液原液对香蕉枯萎病菌菌丝生长有很强的抑制
作用袁其甲醇提取物和粗蛋白对菌丝生长有一定抑
制效果袁说明菌株代谢产物中含有能消融或杀灭香
蕉枯萎病菌的水解酶或其它活性物质遥 目前袁关于
甲基营养型芽胞杆菌对香蕉枯萎病防控效果的报道
还较少袁有关菌株的抑菌机制尧田间定殖尧田间防病
应用以及生防制剂的开发还有待深入研究遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 袁媛袁彭冬燕袁陈升东袁等援 世界香蕉产业形势浅析援 云南农
业科技袁圆园园远 渊圆冤院缘怨 原 远园
远圆员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
咱圆暂 云粤韵援 云粤韵杂栽粤栽援 澡贼贼责院 辕辕 枣葬燥泽贼葬贼援 枣葬燥援 燥则早 辕 袁 允葬灶怎葬则赠 员远袁 圆园员猿
咱猿暂 孕造燥藻贼扎 砸 悦援 云怎泽葬则蚤怎皂 憎蚤造贼 燥枣 遭葬灶葬灶葬 蚤泽 糟葬怎泽藻凿 遭赠 泽藻增藻则葬造 责葬贼澡燥鄄
早藻灶泽 则藻枣藻则则藻凿 贼燥 葬泽 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 糟怎遭藻灶泽藻援 孕澡赠贼燥责葬鄄
贼澡燥造燥早赠袁 圆园园远袁 怨远院 远缘猿 原 远缘远
咱源暂 林兰稳袁奚伟鹏袁黄赛花援 香蕉镰刀菌枯萎病防治药剂的筛
选援 生态环境袁圆园园猿袁员圆渊圆冤院员愿圆 原 员愿猿
咱缘暂 胡伟袁赵兰凤袁张亮袁等援 不同种植模式配施生物有机肥对香
蕉枯萎病的防治效果研究援 植物营养与肥料学报袁圆园员圆袁员愿
渊猿冤院苑源圆 原 苑源愿
咱远暂 李国良袁姚丽贤袁杨苞梅袁等援 有机肥与生防菌结合防治香蕉
枯萎病的初步研究援 中国土壤与肥料袁圆园员圆渊圆冤院远苑 原 苑圆
咱苑暂 许文耀袁吴刚援 恶霉灵与溴菌腈混配对香蕉枯萎病菌的抑制
效果援 植物保护学报袁圆园园源袁猿员渊员冤院怨员 原 怨缘
咱愿暂 孕蚤藻贼则燥 粤袁 凿蚤 匀怎藻则贼葬泽鄄郧燥灶扎葬造藻扎 酝袁 郧怎贼蚤藻则则藻扎鄄悦燥则燥灶葬 允 云袁 藻贼 葬造援
酝燥造藻糟怎造葬则 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬 泽怎遭贼蚤造葬泽藻 枣则燥皂 贼澡藻 增葬泽糟怎造葬则 憎蚤造贼
枣怎灶早怎泽 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂援 酝燥造藻糟怎造葬则 孕造葬灶贼鄄酝蚤糟则燥遭藻 陨灶贼藻则葬糟鄄
贼蚤燥灶泽袁 圆园园员袁 员源渊缘冤院 远缘猿 原 远远圆
咱怨暂 晕藻蕴 月袁 灾蚤造躁燥藻灶 粤袁 杂贼藻蚤灶遭凿早 悦袁 藻贼 葬员援 耘增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 糟澡藻皂蚤糟葬造
泽怎遭泽贼葬灶糟藻泽 枣燥则 贼澡藻 皂葬灶葬早藻皂藻灶贼 葬灶凿 糟燥灶贼则燥造 燥枣 云怎皂则蚤怎皂 憎蚤造贼 燥枣
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憎葬灶援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁 圆园园源袁 愿愿渊远冤院 缘愿园 原 缘愿愿
咱员员暂 杨秀娟袁杜宜新袁甘林袁等援 香蕉枯萎病生物防治和抗病育
种研究进展援 中国果树袁圆园园愿渊远冤院源圆 原 源缘
咱员圆暂 朱天辉袁杨佐忠援 枯草芽孢杆菌菌种退化及其控制援 西南
林学院学报袁圆园园园袁圆园渊员冤院猿员 原 猿缘
咱员猿暂 中国科学院土壤研究所微生物室援 土壤微生物研究方法援
北京院科学出版社袁员怨愿缘
咱员源暂贾凤安袁陈亮袁陈立袁等 援 大棚甜瓜三种主要真菌病害拮
抗细菌的筛选与鉴定 援 植物保护学报袁圆园员园 袁猿苑 渊远 冤 院
缘园缘 原 缘员园
咱员缘暂 东秀珠袁蔡妙英援 常见细菌系统鉴定手册援 北京院科学出版
社袁圆园园员
咱员远暂 月怎糟澡葬灶葬灶 砸 耘袁 郧蚤遭遭燥灶泽 晕 耘援 伯杰细菌鉴定手册渊愿 版冤援
中国科学院微生物研究所叶伯杰细菌鉴定手册曳翻译组援
北京院科学出版社袁员怨愿源
咱员苑暂 允蚤灶早 蕴袁 再葬灶早 匝袁 在澡葬燥 蕴 匀袁 藻贼 葬造援 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 糟澡葬则葬糟贼藻则鄄
蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬 灶燥增藻造 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 责则燥贼藻蚤灶 枣则燥皂 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 泽贼则葬蚤灶
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责则燥皂燥贼蚤灶早 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 则蚤糟藻 则澡蚤扎燥泽责澡藻则藻 泽燥蚤造援 陨灶贼藻则鄄
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贼澡藻 责澡藻灶葬皂蚤灶燥皂藻贼澡赠造葬糟藻贼蚤糟 葬糟蚤凿 责则燥凿怎糟藻则 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 皂藻贼澡赠造鄄
燥贼则燥责澡蚤糟怎泽 泽贼则葬蚤灶 月悦苑怨援 悦则燥责 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 圆园员猿袁 源源院 圆怨 原 猿苑
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苑圆员圆 期 黄摇 霄等院菌株 月酝鄄圆源 的分离鉴定及对香蕉枯萎病菌的抑菌活性