全 文 ：植物营养与肥料学报 ２０１６，２２（３）：７２９－７３５ ｄｏｉ牶１０１１６７４／ｚｗｙｆ．１４５３７
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄＦｅｒｔｉｌｉｚｅｒ ｈｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｌａｎｔｎｕｔｒｉｆｅｒｔ．ｏｒｇ
收稿日期：２０１４－１１－２５　　　接受日期：２０１５－０７－２０　　　网络出版日期：２０１５－１２－０８
基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１１７２０３８）；教育部科技研究重点资助项目（２１０１５４）；广东省省级重大科研项目（２０１４ＫＺＤＸＭ０６１）
资助。
作者简介：李学文（１９８７—），男，山东临沂人，博士研究生，主要从事植物营养生理研究。
Ｔｅｌ：０７５７－８５５０１９８６，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｗｅｎ＿１０２４＠１６３ｃｏｍ。　通信作者 Ｔｅｌ：０７５７－８５５０１９８６，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｍｉｎ＠ｆｏｓｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
豌豆不同耐铝品种根尖细胞壁果胶及其
甲基酯化度的差异
李学文１，２，李亚林１，２，杨 锦１，２，吴礼树２，萧洪东１，
冯英明１，刘家友１，喻 敏１
（１佛山科学技术学院园艺系，广东佛山 ５２８０００；２华中农业大学资环学院，湖北武汉 ４３００７０）
摘要：【目的】研究豌豆不同品种耐铝性和根尖根段耐铝性与果胶及其甲基酯化间的关系，为进一步揭示植物耐铝
机理以及耐铝性状的遗传改良提供依据。【方法】以豌豆品种 Ｈｙｏｇｏ和 Ａｌａｓｋａ为试验材料，采用 Ｈｏａｇｌａｎｄ培养方
式，测定了不同品种不同根段果胶含量、果胶甲基酯化度和果胶甲酯酶活性，研究了其差异及原因。【结果】在１５
和３０μｍｏｌ／Ｌ铝浓度胁迫条件下，豌豆品种Ａｌａｓｋａ根相对伸长率均显著高于品种Ｈｙｏｇｏ，同时有根尖０ ５ｍｍ和５
１０ｍｍ段有更少的胼胝质生成和累积，在３０μｍｏｌ／Ｌ浓度下不同根段间均达到显著差异，同时品种Ｈｙｏｇｏ根尖０
２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ段铝含量均显著高于品种Ａｌａｓｋａ，说明品种Ａｌａｓｋａ和品种 Ｈｙｏｇｏ间存在耐铝性差异，
其中品种Ａｌａｓｋａ耐铝性高于品种Ｈｙｏｇｏ，即品种Ｈｙｏｇｏ为铝敏感品种，品种Ａｌａｓｋａ是耐铝品种。比较两者不同根段
（０ ２５ｍｍ、２５ ５０ｍｍ和５０ １００ｍｍ）的铝含量与果胶含量、果胶甲基酯化度、ＰＭＥ活性间的关系，发
现耐铝品种不同根段中的铝含量均小于敏感品种，并且在０ ２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ段间达到显著性差异；根
尖不同根段果胶糖醛酸含量大小依次为０ ２５＞２５ ５０＞５０ １００ｍｍ，耐铝品种Ａｌａｓｋａ根尖细胞壁果胶
和未甲酯化果胶含量均显著低于Ｈｙｏｇｏ，并且０ ２５ｍｍ根段差异最大。根尖不同根段果胶甲基酯化度从根尖向
上逐渐降低，并且耐铝品种Ａｌａｓｋａ高于铝敏感品种Ｈｙｏｇｏ，其中０ ２５ｍｍ段间的差异达到显著水平；在对两个品
种果胶甲基酯化酶（ＰＭＥ）活性进一步分析发现，ＰＭＥ活性大小依次为０ ２５＞２５ ５０＞５０ １００ｍｍ，两品
种０ ２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ根段间均达到显著差异。【结论】铝敏感品种Ｈｙｏｇｏ在０ ２５ｍｍ和２５ ５０
ｍｍ根段具有较高 ＰＭＥ活性和较低果胶甲基酯化程度。豌豆根尖果胶含量和甲基酯化度尤其是０ ２５ｍｍ根段
是豌豆耐铝性差异的重要原因；Ａｌａｓｋａ根尖细胞壁的果胶含量低和果胶甲基酯化度高（尤其是０ ２５ｍｍ段）是
其耐铝的重要机制。
关键词：豌豆；耐铝性；细胞壁果胶；甲基酯化度；果胶甲基酯化酶
中图分类号：Ｑ９４５７８　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００８－５０５Ｘ（２０１６）０３－０７２９－０７
Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｐｅｃｔｉｎｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｉｎｒｏｏｔｃｅｌｗａｌｏｆ
ｐｅａ（Ｐｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍ）ｃｕｌｔｉｖａｒｓｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔＡｌｔｏｌｅｒａｎｃｅ
ＬＩＸｕｅｗｅｎ１，２，ＬＩＹａｌｉｎ１，２，ＹＡＮＧＪｉｎ１，２，ＷＵＬｉｓｈｕ２，ＸＩＡＯＨｏｎｇｄｏｎｇ１，ＦＥＮＧＹｉｎｇｍｉｎｇ１，ＬＩＵＪｉａｙｏｕ１，ＹＵＭｉｎ１
（１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＦｏｓｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｏｓｈａｎ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５２８０００，Ｃｈｉｎａ；
２ＣｏｌｅｇｅｏｆＲｅｓｏｕｒｃｅａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ】Ｔｈｅｓｔｕｄｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｅｌｗａｌｐｅｃｔｉｎ，ｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌ
ｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｄｅｇｒｅｅａｎｄａｌｕｍｉｎｕｍｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｃｕｌｔｉｖａｒｓｏｆｐｅａ（Ｐｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍ）ｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ
ｅｖｉｄｅｎｃｅｓｈｏｗｇｅｎｅｔｉｃｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓａｆｅｃｔｅｄａｌｕｍｉｎｕｍｔｏｌｅｒａｎｃｅｄｕｒｉｎｇｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈ．【Ｍｅｔｈｏｄｓ】Ａｌｃｕｌｔｉｖａｒｓｗｅｒｅ
ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｂｙｍｉｓｔｕｎｄｅｒ２４℃ ｇｒｏｗｔｈｃｈａｍｂｅｒｆｏｒ２４ｈａｆｔｅｒｓｅｅｄｓｏａｋｉｎｇ．Ｔｈｅｒｏｏｔｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅ
植 物 营 养 与 肥 料 学 报 ２２卷
ｓｅｇｍｅｎｔｓ：０－２５ｍｍ，２５－５０ｍｍａｎｄ５０－１００ｍｍ．Ｐｅｃｔｉｎｃｏｎｔｅｎｔ，ｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｄｅｇｒｅｅａｎｄｔｈｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ（ＰＭＥ）ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏａｎｄｃｕｌｔｉｖａｒ
Ａｌａｓｋａ．Ｒｅｌａｔｉｖｅｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｒａｔｅ（ＲＥＲ），ｃａｌｏｓｅａｎｄＡｌｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅａｌｓｏｔｅｓｔｅｄｔｏｃｏｍｐａｒｅＡｌｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｒｏｏｔｚｏｎｅｓａｎｄｃｕｌｔｉｖａｒｓｏｆｐｅａ．【Ｒｅｓｕｌｔｓ】ＴｈｅＲＥＲｏｆＡｌａｓｋａｃｕｌｔｉｖａｒｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎ
ＨｙｏｇｏｕｎｄｅｒＡｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１５μｍｏｌ／Ｌａｎｄ３０μｍｏｌ／Ｌ．Ａｎｄ，ｔｈｅｃａｌｏｓｅａｎｄＡｌｏｆ０－５ｍｍｏｒ５－１０ｍｍ
ｓｅｇｍｅｎｔｓｉｎＡｌａｓｋａｃｕｌｔｉｖａｒｗｅｒｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｍｕｃｈｌｅｓｓｔｈａｎＨｙｏｇｏ．ＴｈｉｓｒｅｓｕｌｔｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈａｔｔｈｅＡｌａｓｋａｗａｓａｎ
ＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒａｎｄＨｙｏｇｏｗａｓａｎＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒ．ＡｌａｓｋａｓｈｏｗｅｄｌｏｗｅｒＡｌｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎａｌｓｅｇｍｅｎｔｓ．Ｉｎ
ｔｈｅｍｅａｎｔｉｍｅ，ｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔＡｌｌｅｖｅｌｓｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｓｐｅｃｉｅｓｗｅｒｅｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎ２５－５０ｍｍａｎｄ５０－
１００ｍｍｓｅｇｍｅｎｔｓ．Ｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔｉｎｃｅｌｗａｌｐｅｃｔｉｎｗａｓｆｏｕｎｄｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｙｆｒｏｍｓｅｇｍｅｎｔ０－２５
ｍｍｔｏ５０－１００ｍｍｉｎｂｏｔｈｐｅａｓｐｅｃｉｅｓ．Ａｌａｓｋａｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｌｏｗｅｒｃｅｌｗａｌｐｅｃｔｉｎａｎｄｕｎｍｅｔｈｙｌａｔｅｄｐｅｃｔｉｎ
ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＨｙｏｇｏ，ｅｓｐｅｃｉａｌｙｉｎｓｅｇｍｅｎｔ０－２５ｍｍ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＭＥａｌｓｏｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｌｙｆｒｏｍ
ｓｅｇｍｅｎｔ０－２５ｍｍ ｔｏ５０－１００ｍｍ ｉｎｂｏｔｈＡｌａｓｋａａｎｄＨｙｏｇｏ．Ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｗａｓ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｉｎ０－２５ｍｍｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｓｉｎＡｌａｓｋａ．Ａｌａｓｋａｈａｄｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｏｗｅｒ
ｃｏｎｔｅｎｔｏｆｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ，ｌｏｗｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＭＥ，ａｎｄｈｉｇｈｅｒｄｅｇｒｅｅｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ，ｅｓｐｅｃｉａｌｙｉｎ０－２５ｍｍ
ｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ】ＴｈｅｋｅｙｆａｃｔｏｒｆｏｒｐｅａｃｕｌｔｉｖａｒｓｓｈｏｗｓＡｌｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｒＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｏｕｌｄｂｅｐｅｃｔｉｎ
ｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｉｎ０－２５ｍｍｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔ．ＨｙｏｇｏｉｓｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏＡｌ，ｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｅｄｈｉｇｈｅｒ
ｐｅｃｔｉｎｉｎ０－２５ｍｍｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｏｗｅｒｐｅｃｔｉｎｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｈｉｇｈｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ，ｅｓｐｅｃｉａｌｙｉｎ０－２５
ｍｍ，ｏｆＡｌａｓｋａａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＡｌｔｏｌｅｒａｎｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｅａ；Ａｌｔｏｌｅｒａｎｃｅ；ｃｅｌｗａｌｐｅｃｔｉｎ；ｄｅｇｒｅｅｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ；ｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ
铝是地壳中含量最丰富的金属元素，约占地壳
总重量的７％，通常以难溶性的硅酸盐或氧化铝形
式存在，对植物无毒害作用。当土壤的ｐＨ低于５０
时，部分铝就会以离子形式释放到土壤溶液中，微摩
尔级的铝就可以在短时间内对根系的伸长产生抑制
作用。铝毒是酸性土壤中限制作物生长的众多胁迫
因素中最重要的因子。最近几十年来，科学家们虽
然已对植物铝毒和耐铝性机理做了大量研究，但对
其生理和分子机制仍缺乏足够的了解［１－２］。铝毒对
植物的危害首先表现在抑制植物根系的生长及对养
分和水分的吸收，从而最终影响作物的产量。Ｒｙａｎ
等提出根尖是铝毒的主要作用位点，也是铝抑制根
系生长的作用靶［３］。铝毒导致植物根尖生长受到
抑制的原因主要是细胞伸长受到抑制；Ａｌ３＋与根表
皮和皮层细胞的细胞壁结合，对细胞壁的结构和功
能（如细胞壁的伸展性等）产生影响［４］。植物根尖
细胞壁作为植物响应铝毒环境的第一道屏障，既是
铝毒害的最初位点，也是铝积累的主要部位［１，５］，在
铝毒害机理和植物耐铝机制中起到重要作用。根系
中３０％ ９０％的铝累积于根尖细胞壁，而细胞壁对
铝的结合能力主要取决于细胞壁果胶含量及其果胶
甲基化度［６－９］，果胶甲基酯化度受果胶甲基酯酶
（ＰＭＥ）调控。Ｓｉｖａｇｕｒｕ和 Ｈｏｒｓｔ［１０］对玉米根尖不同
根段分别进行铝诱导时发现，玉米根尖１ ２ｍｍ根
段比０ １ｍｍ和２ ３ｍｍ根段受铝影响更大，如
胼胝质的形成和铝的累积更多，而１ ２ｍｍ根段
为过渡区（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｚｏｎｅ），恰好位于分生区和伸长
区之间，提出过渡区远端是玉米根尖的敏感部位，
同时也表明根尖不同区域可能对铝的敏感性不
同。Ｙａｎｇ等［７］对比不同耐铝性水稻品种发现，铝
敏感型品种 Ｚｈｅｆｕ８０２根尖０ １０ｍｍ段 ＰＭＥ活
性、细胞壁多糖（果胶，半纤维素，半纤维素２）和
果胶的去甲基化程度均显著高于耐铝型品种
Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ。导致根尖不同区域铝敏感性差异的
原因是什么？是否与根尖细胞壁果胶含量及其甲
基化程度有关？这种机制是否也引起不同品种耐
铝差异？本研究以耐铝豌豆品种和铝敏感豌豆品
种为材料，通过分析根尖不同根段果胶含量和甲
基酯化程度及 ＰＭＥ活性等，研究根尖细胞壁果胶
含量和性质与根不同区域及不同豌豆品种耐铝差
异的关系，以期更加深入地揭示铝对植物的毒害
机理及植物耐铝机制。
１　材料与方法
１１　供试品种
豌豆（Ｐｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍ）耐铝品种 Ａｌａｓｋａ和铝敏
感品种 Ｈｙｏｇｏ由 ＹｏｋｏＹａｍａｍｏｔｏ教授（Ｏｋａｙａｍａ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）馈赠。
０３７
３期　　　 李学文，等：豌豆不同耐铝品种根尖细胞壁果胶及其甲基酯化度的差异
１２　种子萌发
采用雾培法进行催芽［１１］。
１３　测定方法
１３１铝处理及其根伸长率的测定　选取根长相对
一致（约８０ １００ｍｍ）的幼苗各３０ ４０株，测量
根长后，转移至塑料烧杯中，分别用 ０、１５、３０
μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３（含０５ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２，ｐＨ４５）处理
２４ｈ，再次分别测量根长。铝处理前根长分别记为
ＬＣＫ０和 ＬＡｌ０，铝处理 ２４ｈ相对应根长分别记为
ＬＣＫ２４和 ＬＡｌ２４。根相对伸长率 （ｒｏｏｔｒｅｌａｔｉｖｅ
ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｒａｔｅｓ，ＲＥＲ）按下列公式计算：
ＲＥＲ（％）＝ＬＡｌ２４－ＬＡｌ０ＬＣＫ２４－ＬＣＫ０×１００
１３２胼胝质含量的测定　剪取距根尖 ０ ５０
ｍｍ、５０ １００ｍｍ的根段各 ５株，用 ４ｍＬ１
ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ研磨提取，收集研磨液于１０ｍＬ离心管
中，于８０℃水浴 ２０ｍｉｎ，４８００ｒｐｍ离心，收集上清
液，加入苯胺蓝混合反应液，于５０℃水浴２０ｍｉｎ，冷
却后采用荧光分光光度法（９７０ＣＲＴ，上海），在 λｅｘ
＝４００／３０ｎｍ，λｅｍ＝４８５／４０ｎｍ，灵敏度为２，测定胼
胝质含量［１２］。
１３３铝处理及其铝含量的测定　剪取距根尖 ０
２５ｍｍ、２５ ５０ｍｍ、５０ １００ｍｍ的根样各７
株，用１ｍＬ２ｍｏｌ／ＬＨＣｌ振荡提取４８ｈ，４８００ｒｐｍ离
心，收集上清液，采用ＩＣＰ－ＡＥＳ法 （ＩＲＩＳ－Ａｄｖａｎｔａｇｅ，
ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｍｅｎｔａｌ，ＭＡ，ＵＳＡ）测定铝含量。
１３４ＰＭＥ的测定　选取根长相对一致（约２０ ２５
ｍｍ）的幼苗，收集０ ２５ｍｍ、２５ ５０ｍｍ和５０
１００ｍｍ根段，用于样品提取，参考 Ｊｏｌｉｅ等［１３］的
方法提取粗酶，按照Ｌｉ等［８］的方法测定酶活性。
１３５细胞壁果胶含量的测定　参考 Ｔａｋａｙｕｋｉ
等［４］和 Ｈｅｉｍ等［１４］的方法稍作修改，对 ０ ２５
ｍｍ、２５ ５０ｍｍ和５０ １００ｍｍ根段进行细
胞壁粗提取。在 －２０℃冷冻 ３０ｍｉｎ，研磨使其达
到均匀的状态，移入离心管，加入５ｍＬ超纯水（预
冷）淋洗，在４５００ｒｐｍ条件下离心１５ｍｉｎ，弃上清
液，沉淀再用超纯水重复淋洗 ２次。然后将沉淀
用５ｍＬ丙酮（预冷）淋洗，室温下振荡浸提 ３０
ｍｉｎ，在４５００ｒｐｍ条件下离心１５ｍｉｎ，弃去上清液，
沉淀再用丙酮重复淋洗 ２次。沉淀物即为细胞
壁，真空干燥后备用。
用５０ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＣＯ３（含２０ｍｍｏｌ／ＬＣＤＴＡ）提
取细胞壁果胶，采用苯二酚比色法［１５］测定果胶中糖
醛酸含量，以Ｄ－半乳糖醛酸（Ｍｒ＝２１２１６）为标准
物，制备标准曲线。
１３６细胞壁果胶甲基酯化度的测定　吸取 １００
μＬ细胞壁果胶待测液，加入 ５０μＬ１５ｍｏｌ／Ｌ
ＮａＯＨ，进行皂化，常温条件反应３０ｍｉｎ，然后加入
５５μＬ０７５ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４，参考 ＰＭＥ测定方法
［８］，
测定皂化反应后产生的甲醇。以甲醛为标准物，制
备标准曲线。
果胶甲基酯化度（ＤＭ，％）＝
Ｃｍｅｔｈａｎｏｌ
Ｃｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ
×１００；
未甲基化果胶含量＝果胶含量×（１－ＤＭ）。
１４　数据处理
结果为 ３次独立试验的平均值，采用 Ｅｘｃｅｌ
２０１０和ＳＡＳ９１３进行数据处理和统计分析。
２　结果与分析
２１　铝对豌豆不同品种根伸长的影响
经１５μｍｏｌ／Ｌ和３０μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３溶液（含０５
ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２ｐＨ４５）处理豌豆幼根２４ｈ后，Ａｌａｓｋａ
和Ｈｙｏｇｏ两个豌豆品种的根相对伸长率如图 １所
示。在不同浓度铝胁迫下，Ａｌａｓｋａ根相对伸长率均
显著高于 Ｈｙｏｇｏ，进一步验证 Ａｌａｓｋａ和 Ｈｙｏｇｏ分别
为耐铝品种和铝敏感品种［１６］。
图１　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种
（Ｈｙｏｇｏ）根相对伸长率的差异
Ｆｉｇ．１　Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｉｎｒｏｏｔｒｅｌａｔｉｖｅｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｒａｔｅｓｕｎｄｅｒ
ＡｌＣｌ３ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｉｎＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒ
ＡｌａｓｋａａｎｄＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
２２　铝对豌豆不同品种根尖胼胝质含量的影响
经１５μｍｏｌ／Ｌ和３０μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３溶液（含０５
ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２ｐＨ４５）处理根尖２４ｈ后，Ａｌａｓｋａ和
Ｈｙｏｇｏ根系不同根段胼胝质含量结果如图２所示。
１５μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３条件下，Ｈｙｏｇｏ不同根段胼胝质含
量有大于 Ａｌａｓｋａ的趋势，但未达到显著差异；３０
１３７
植 物 营 养 与 肥 料 学 报 ２２卷
图２　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种（Ｈｙｏｇｏ）
不同根段的胼胝质含量差异
Ｆｉｇ．２　Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｃａｌｏｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｓ
ｏｆＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒＡｌａｓｋａａｎｄ
ＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３浓度时，Ｈｙｏｇｏ根尖 ０ ５０ｍｍ和
５０ １００ｍｍ段胼胝质含量均显著大于 Ａｌａｓｋａ，
分别是Ａｌａｓｋａ的２３倍和２７倍。
图３　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种（Ｈｙｏｇｏ）
不同根段的铝含量差异
Ｆｉｇ．３　Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆａｌｕｍｉｎｕｍｃｏｎｔｅｎｔｉｎｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｓ
ｏｆＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒＡｌａｓｋａａｎｄ
ＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
２３　豌豆不同品种根尖铝含量的差异
经３０μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３溶液处理根尖２４ｈ后，同
一品种不同根段铝含量有从根尖向上递减的趋势
（图３），其中Ａｌａｓｋａ品种０ ２５ｍｍ根段铝含量显
著大于２５ ５０ｍｍ根段，Ｈｙｏｇｏ品种则 ０ ２５
ｍｍ根段铝含量和２５ ５０ｍｍ根段中无明显差
异，但均显著高于５０ １００ｍｍ根段。不同耐铝
性豌豆品种间根尖铝含量存在明显差异，Ｈｙｏｇｏ品
种根尖０ ２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ根段铝含量显
著高于Ａｌａｓｋａ品种，分别为１２倍和１８倍，５０
１０ｍｍ根段差异不明显。
２４　豌豆不同品种根尖细胞壁果胶甲基酯化度的
差异
果胶是铝结合到细胞壁的主要吸附位点，果胶
结合铝的能力取决于果胶含量和果胶甲基酯化度。
新生果胶一般都是高度酯化，只有脱甲基后，形成果
胶酸，才能与铝结合，即果胶甲基酯化度越低，结合
的铝吸附位点越多［６］。不同品种不同根段细胞壁
中果胶甲基酯化度如图４所示。同一品种不同根段
果胶甲基酯化度有从根尖向上依次递减的趋势，
Ａｌａｓｋａ果胶甲基酯化度０ ２５ｍｍ根段显著高于
２５ ５０ｍｍ和５０ １０ｍｍ根段，而 Ｈｙｏｇｏ品种
则差异不显著。不同豌豆品种间果胶甲基酯化度的
差异主要是０ ２５ｍｍ根段，Ａｌａｓｋａ品种 ０ ２５
ｍｍ根段果胶甲基酯化度显著高于 Ｈｙｏｇｏ品种，
Ａｌａｓｋａ品种２５ ５０ｍｍ和５０ｍｍ １００ｍｍ根
段果胶甲基酯化度有高于 Ｈｙｏｇｏ品种的趋势，但未
达显著水平。
图４　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种（Ｈｙｏｇｏ）
不同根段的果胶甲基酯化度的差异
Ｆｉｇ．４　Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｄｅｇｒｅｅ
ｉｎｒｏｏｔｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒ
ＡｌａｓｋａａｎｄＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
２５　豌豆不同品种根尖细胞壁中果胶和未甲酯化
果胶含量的差异
果胶主要是由聚半乳糖醛酸构成，测定了不同
根段的细胞壁中糖醛酸含量（图５）。同一品种不同
根段果胶糖醛酸含量有从根尖向上依次递减的趋
势，Ｈｙｏｇｏ品种各个根段间糖醛酸含量差异显著，
Ａｌａｓｋａ品种 ０ ２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ根段无显
著差异；不同豌豆品种间根尖糖醛酸含量存在显著
差异，Ｈｙｏｇｏ品种不同根段糖醛酸含量均显著高于
２３７
３期　　　 李学文，等：豌豆不同耐铝品种根尖细胞壁果胶及其甲基酯化度的差异
Ａｌａｓｋａ品种，分别是Ａｌａｓｋａ品种的１８倍、１５倍和
１７倍。这些结果表明，铝敏感品种根尖细胞壁糖
醛酸含量高于耐铝品种，尤其是０ ２５ｍｍ根段两
品种差异更大。
图５　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种（Ｈｙｏｇｏ）
不同根段的糖醛酸含量的差异
Ｆｉｇ．５　Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔｉｎｒｏｏｔ
ｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒＡｌａｓｋａａｎｄ
ＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
同一品种不同根段未甲酯化果胶糖醛酸含量有
从根尖向上依次递减的趋势，Ｈｙｏｇｏ品种根尖不同
根段未甲酯化果胶含量均高于 Ａｌａｓｋａ品种，并且０
２５ｍｍ和５０ １０ｍｍ根段差异达到显著水平，
整体趋势与果胶含量保持一致。根尖未甲酯化果胶
糖醛酸含量与根尖铝含量呈正比（图５），相关性达
到显著水平，说明根尖铝含量与根尖未甲酯化果胶
糖醛酸含量密切相关。
２６　豌豆不同品种根尖ＰＭＥ活性的差异
果胶甲基酯化度受果胶甲基酯化酶的控制，
ＰＭＥ能使果胶去甲基化后转变为含有大量游离羧
基的果胶酸，从而调节根尖细胞壁的果胶甲基酯化
程度，间接地影响了植物对铝毒的耐性。Ｈｙｏｇｏ和
Ａｌａｓｋａ品种根尖不同根段的 ＰＭＥ活性均是从根尖
向上活性依次降低，其中在 ０ ２５ｍｍ和 ２５
５０ｍｍ根段 Ｈｙｏｇｏ品种显著高于 Ａｌａｓｋａ品种（图
６）。
图６　豌豆耐铝品种（Ａｌａｓｋａ）和铝敏感品种（Ｈｙｏｇｏ）
不同根段的ＰＭＥ活性的差异
Ｆｉｇ．６　ＤｉｆｅｒｅｎｃｅｉｎｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＭＥｉｎｒｏｏｔ
ｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆＡｌｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒＡｌａｓｋａａｎｄ
ＡｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒＨｙｏｇｏ
［注（Ｎｏｔｅ）：柱上不同字母表示在００５水平上差异显著 Ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｌｅｔｅｒｓａｂｏｖｅｔｈｅｂａｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｔ００５ｌｅｖｅｌ．］
３　讨论与结论
３１　豌豆不同品种和不同根段的耐铝性差异
植物根系伸长的抑制是铝毒最敏感和最易观察
到的典型症状，而胼胝质作为植物应激反应的一部
分，在植物受伤或各种胁迫时能够快速、大量地合
成，由于铝毒作用会诱导胼胝质的大量产生，因而通
常认为胼胝质含量是衡量根尖铝毒害程度的敏感指
标［１７］。本研究结果表明，在 １５μｍｏｌ／Ｌ和 ３０
μｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３胁迫下，Ａｌａｓｋａ主根的根相对伸长率
均大于Ｈｙｏｇｏ，并且胼胝质含量小于品种 Ｈｙｏｇｏ，说
明两品种在耐铝性上确实存在差异，其中 Ｈｙｏｇｏ属
铝敏感品种，Ａｌａｓｋａ属耐铝品种，结果与 Ｋｏｂａｙａｓｈｉ
等［１６］的一致。Ｓｉｖａｇｕｒｕ等提出根尖过渡区远端为铝
敏感区域［１０］，在豌豆中，根尖０ ２５ｍｍ根段包括
根冠、分生区和过渡区（李学文等，未发表资料），主
３３７
植 物 营 养 与 肥 料 学 报 ２２卷
要进行细胞有丝分裂和为细胞伸长做准备；２５ ５
ｍｍ根段为伸长区，主要进行植物细胞的伸长；５
１０ｍｍ根段为成熟区，主要进行水和养分的吸收。
本研究结果中，不同根段中的铝含量表现出由根尖
向上依次递减，０ ２５ｍｍ段根尖铝含量显著高于
其他根段，是根尖铝敏感根段。
３２　豌豆不同根段铝敏感性与果胶含量和甲酯化
程度的关系
植物根系的不同部位对铝毒的敏感性存在差
异［１８］，耐铝性差异与果胶含量和果胶甲基酯化度密
切相关［６－７，１９］。本研究表明，不同根段间果胶糖醛
酸含量和果胶甲基酯化度在不同根段均存在差异，
根尖不同根段中果胶含量和果胶甲基酯化程度均为
０ ２５ｍｍ＞２５ ５０ｍｍ＞５０ ５０ｍｍ，根段
铝敏感性与果胶糖醛酸正相关，与果胶甲基酯化度
负相关，与前人研究［６］并不完全一致。不同根段果
胶含量和甲基酯化度的差异可能与不同根段所对应
的根区及根区功能相关。越靠近根尖部位，植物生
理活动越活跃，细胞的有丝分裂和细胞伸长过程都
伴随大量细胞壁的生成，而新生果胶均为高度酯化，
在ＰＭＥ作用下脱甲基，伴随细胞伸长成熟，果胶甲
酯化度降低。因此我们认为不同根段间果胶含量和
果胶甲基酯化度的差异是由不同根段及根段所对应
区域的功能所决定的，鉴于０ ２５ｍｍ区域功能和
果胶含量最高，尽管其果胶甲基酯化度较高，未甲基
酯化果胶依然最高，表明细胞壁果胶吸附铝的位点
较多，分析表明铝累积与未甲基酯化果胶相关性高
于与总果胶的相关性，因此根尖根段铝敏感性与未
甲酯化果胶含量呈正比，０ ２５ｍｍ根段铝敏感性
最高。
３３　豌豆不同品种耐铝差异与果胶含量和甲酯化
程度的关系
本研究表明，两个品种果胶糖醛酸含量和果胶
甲基酯化度存在差异，Ｈｙｏｇｏ品种根尖０ ２５ｍｍ
和２５ ５０ｍｍ根段果胶含量显著高于 Ａｌａｓｋａ品
种，０ ２５ｍｍ段果胶甲基酯化度显著低于 Ａｌａｓｋａ
品种。品种Ａｌａｓｋａ根尖０ ２５ｍｍ和２５ ５０
ｍｍ根段因为具有较低果胶含量和较高果胶甲酯化
度，所以表现出更低未甲酯化果胶含量，因此在铝毒
条件下表现出低铝累积和低胼胝质含量为耐铝品
种。这与对玉米和水稻等耐铝性／铝敏感性的研究
结果一致［６］。Ｅｔｉｃｈａ等［１９］发现不同耐铝性玉米品
种根尖细胞壁果胶含量和果胶甲基酯化度存在明显
差异，铝敏感品种中果胶含量高于耐铝品种，果胶甲
酯化度低于耐铝品种，指出铝敏感型品种 Ｌｉｘｉｓ根尖
中高果胶含量和低比例的甲基化果胶可能是其铝敏
感的原因。
３４　ＰＭＥ和果胶甲基酯化度的关系
ＰＭＥ广泛存在于高等植物中，它的作用是水解
果胶分子中甲酯化的羧基，通过脱甲基化来降低甲
基酯化度 （ＰｅｃｔｉｎＣＯＯＣＨ３ ＋２Ｈ２ＯＰｅｃｔｉｎＣＯＯ＋
＋Ｈ３Ｏ＋ ＋ＣＨ３ＯＨ）
［２０］。本研究结果表明，不同根
段间ＰＭＥ活性存在显著差异，依次是０ ２５ｍｍ
＞２５ ５０ｍｍ＞５０ １００ｍｍ，不同品种间也存
在差异，Ｈｙｏｇｏ根尖０ ２５ｍｍ和２５ ５０ｍｍ
根段均高于Ａｌａｓｋａ。因此Ｈｙｏｇｏ果胶甲基酯化度低
于Ａｌａｓｋａ。这与 Ｓｃｈｍｏｈｌ等［２１］的研究结果一致，表
明根尖细胞壁ＰＭＥ活性越高，果胶甲基酯化程度越
低，说明根段或品种间果胶甲基酯化度的差异是
ＰＭＥ活性不同引起的。
总之，根段或品种间耐铝性差异是由根尖未甲
酯化果胶含量决定的，而未甲酯化果胶含量又受根
尖细胞壁果胶含量和果胶甲酯化度影响。根尖（尤
其是０ ２５ｍｍ根段）低果胶含量和低果胶甲基酯
化酶活性导致的高果胶甲基酯化度是豌豆不同耐铝
品种的重要耐铝机制。本研究揭示果胶和 ＰＭＥ在
植物耐铝机制中的作用，为进一步揭示植物耐铝机
理以及耐铝性状的遗传改良提供依据。
参 考 文 献：
［１］　ＨｏｒｓｔＷＪ，ＷａｎｇＹ，ＥｔｉｃｈａＤ．Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｔｈｅｒｏｏｔａｐｏｐｌａｓｔｉｎ
ａｌｕｍｉｎｉｕｍｉｎｄｕｃｅｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｒｏｏｔｅｌｏｎｇａｔｉｏｎａｎｄｉｎａｌｕｍｉｎｉｕｍ
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ａｌｕｍｉｎｉｕｍｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅｓｐｒｏｖｉｄｅｓｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓｆｏｒｅｎｈａｎｃｉｎｇ
ｃｒｏｐｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｎａｃｉｄｓｏｉｌｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙ，
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４３７
３期　　　 李学文，等：豌豆不同耐铝品种根尖细胞壁果胶及其甲基酯化度的差异
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Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９８，１１６（１）：１５５－１６３
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ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇｏｆｒｏｏｔｂｏｒｄｅｒｃｅｌｓ：ａｌｕｍｉｎｕｍｅｆｅｃｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ
ＰｌａｎｔＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄＳｏｉｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００６，１６９（５）：６７０－６７４
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ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｓｏｙｂｅａｎｃｅｌｓａｓａＣａ２＋ －ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｃｅｓｓ［Ｊ］．
ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９８５，７７（３）：５４４－５５１
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ｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ［Ｊ］．ＩｎｎｏｖａｔｉｖｅＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｅｍｅｒｇｉｎｇ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，２００９，１０（４）：６０１－６０９
［１４］　ＨｅｉｍＤＲ，ＳｋｏｍｐＪＲ，ＷａｌｄｒｏｎＣ，ｅｔａｌ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｔｏｉｓｏｘａｂｅｎｏｆｃｅｌｕｌｏｓｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｂｙｗｉｌｄｔｙｐｅａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｔ
ｓｔｒａｉｎｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ［Ｊ］．ＰｅｓｔｉｃｉｄｅＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄ
Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９１，３９（２）：９３－９９
［１５］　ＢｌｕｍｅｎｋｒａｎｔｚＮ，ＡｓｂｏｅＨａｎｓｅｎＧ．Ｎｅｗｍｅｔｈｏｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｓ［Ｊ］．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
１９７３，５４（２）：４８４－４８９
［１６］　ＫｏｂａｙａｓｈｉＹ，ＹａｍａｍｏｔｏＹ，ＭａｔｓｕｍｏｔｏＨ．Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｌｕｍｉｎｕｍｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｐｅａ（ＰｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）
ｕｓｉｎｇａｌｕｍｉｎｕｍｔｏｌｅｒａｎｔｃｕｌｔｉｖａｒ‘Ａｌａｓｋａ’ａｎｄ ａｌｕｍｉｎｕｍ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｕｌｔｉｖａｒ‘Ｈｙｏｇｏ’［Ｊ］．ＳｏｉｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｌａｎｔＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，
２００４，５０（２）：１９７－２０４
［１７］　ＷｉｓｓｅｍｅｉｅｒＡＨ，ＫｌｏｔｚＦ，ＨｏｒｓｔＷ Ｊ．Ａｌｕｍｉｎｉｕｍ ｉｎｄｕｃｅｄ
ｃａｌｏｓｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｒｏｏｔｓｏｆｓｏｙｂｅａｎ（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬ．）［Ｊ］．
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９８７，１２９（５）：４８７－４９２
［１８］　ＨｏｒｓｔＷ Ｊ，ＳｃｈｍｏｈｌＮ，ＫｏｌｍｅｉｅｒＭ，ｅｔａｌ．Ｄｏｅｓａｌｕｍｉｎｉｕｍ
ａｆｅｃｔｒｏｏｔｇｒｏｗｔｈｏｆｍａｉｚｅｔｈｒｏｕｇｈｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｃｅｌｗａｌ
ｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎｃｏｎｔｉｎｕｕｍ？［Ｊ］．ＰｌａｎｔａｎｄＳｏｉｌ，
１９９９，２１５（２）：１６３－１７４
［１９］　ＥｔｉｃｈａＤ，ＳｔａｓｓＡ，ＨｏｒｓｔＷＪ．Ｃｅｌｗａｌｐｅｃｔｉｎａｎｄｉｔｓｄｅｇｒｅｅｏｆ
ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｍａｉｚｅｒｏｏｔａｐｅｘ：ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｆｏｒｇｅｎｏｔｙｐｉｃ
ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔ， Ｃｅｌ ＆
Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，２００５，２８（１１）：１４１０－１４２０
［２０］　ＧｒｓｉｃＲａｕｓｃｈＳ， Ｒａｕｓｃｈ Ｔ． Ａ ｃｏｕｐｌｅｄ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ
ｅｎｚｙｍｅａｓｓａｙｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙｐｒｏｔｅｉｎａｃｅｏｕｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．
ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４，３３３（１）：１４－１８
［２１］　ＳｃｈｍｏｈｌＮ，ＰｉｌｉｎｇＪ，ＦｉｓａｈｎＪ，ｅｔａｌ．Ｐｅｃｔｉｎｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ
ｍｏｄｕｌａｔｅｓａｌｕｍｉｎｉｕｍ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎＺｅａｍａｙｓａｎｄＳｏｌａｎｕｍ
ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉａＰｌａｎｔａｒｕｍ，２０００，１０９（４）：４１９
－４２７．
５３７