全 文 ：书西北植物学报!
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文章编号$
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-
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收稿日期$
!"#)*#!*#&
&修改稿收到日期$
!"#$*"%*"
!!
基金项目$陕西省科技厅自然科学基础研究计划"
!"#&12%##%
#&陕西省教育厅自然科学研究项目"
#&13##)4
#&陕西理工学院科研基金
"
56738#)*&#
#&陕西理工学院研究生创新基金"
56789:#)#+
#
!!
作者简介$蒋景龙"
#4"(
#!男!博士!讲师!硕士生导师!主要从事逆境植物学方面的研究
;*<=.>
$
-
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#$%,A@<
外源
$
%
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%
对低温胁迫下柑橘叶片抗寒性的影响
蒋景龙
"陕西理工学院 生物科学与工程学院!陕西汉中
+!%""#
#
摘
!
要$以柑橘品种(日南
#
号)离体秋稍为试材!采用
B@=
?
>=0C
营养液培养方法!研究添加不同浓度
B
!
D
!
处理对
&E
低温胁迫下柑橘生长状态和叶片细胞相对电导率"
F;9
#*丙二醛"
GHI
#含量*脯氨酸含量以及过氧化氢酶
"
9IJ
#*超氧化物歧化酶"
5DH
#和过氧化物酶"
KDH
#活性等生理指标的影响!筛选缓解柑橘低温伤害的最佳
B
!
D
!
处理浓度!探讨外源
B
!
D
!
处理对柑橘耐寒能力影响机制结果显示$随低温胁迫时间的延长!各处理组柑橘叶片
卷曲和叶片细胞膜伤害程度均逐渐加重&外源施加
",!
和
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理均能缓解低温胁迫引起的叶
片卷曲和萎蔫!降低叶片中
F;9
和
GHI
的升高!减少叶片细胞中内源
B
!
D
!
的积累!提高渗透调节物质脯氨酸的
含量和抗氧化酶
5DH
*
9IJ
和
KDH
的活性!并以
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
缓解效果更为显著研究表明!
&E
低温能
够引起柑橘离体秋梢叶片卷曲*枯萎*脱落和细胞膜伤害症状!外源
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
可以通过提高叶片的脯
氨酸含量和
5DH
*
9IJ
和
KDH
抗氧化酶活性!有效缓解低温对柑橘叶片细胞膜的伤害!从而增强其抗寒性
关键词$柑橘&低温胁迫&外源过氧化氢&抗寒性
中图分类号$
2&),+4
!!!
文献标志码$
I
(()*+"(,"
-
)."/0$
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&
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12)3+4).+".5"6!7)0#0+3.*)"(
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D
!
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W
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W
"
F;9
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A@0VQ0V/@O<=>@0C.=>CQ*
N
W
CQ
"
GHI
#
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[
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"
9IJ
#!
/Z
[
QR@S.CQC./"
5DH
#
=0C
[
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C=/Q
"
KDH
#
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[
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D
!
A@0AQ0VR=*
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-
ZR
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D
!
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[
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?
Q@O>Q=O
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W
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6
(#
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+
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(#
A@0AQ0VR=V.@0/@OB
!
D
!
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*
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W
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!
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!
D
!
!
=0C.0ARQ=/QVNQA@0VQ0V@O@/<@V.A
[
R@>.0Q=0C=AV.U.V.Q/@O5DH
!
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!
D
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(#
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!
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!
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W
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6
(#
B
!
D
!
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[
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!
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QR=VZRQ/VRQ//
!
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W
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?
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$
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QR=VZRQ/VRQ//
&
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Q0@Z/N
W
CR@
?
Q0
[
QR@S.CQ
&
A@>CRQ/./V=0AQ
!!
柑橘"
!"#$%&$#"(%)*#*P>=0A@,
#为芸香科柑橘
亚属常绿小乔木或灌木!主要分布在热带和亚热带
地区!性喜温暖湿润气候柑橘在陕西汉中*安康等
地分布广泛!栽培历史悠久!是陕南地区农业的主导
产业之一陕南地区地处亚热带的北缘!也是中国
柑橘种植的最北缘!冻害的多发地带近几年陕南
柑橘连续遭受周期性大面积冻害
!"#!
"
!"#%
年
陕南地区发生
%"
年一遇的持续低温天气!柑橘受冻
面积占全省柑橘总种植面积的
#
%
&
!汉中主产区受
灾尤为严重,#-研究抗冻机制或筛选良好的抗冻剂
对提高柑橘的抗冻性和减轻冷冻伤害具有重要意
义,!-众所周知!过氧化氢"
B
!
D
!
#是生物体内各种
生理代谢的副产物!也是活性氧"
FQ=AV.UQ@S
W?
Q0
/
[
QA.Q/
!
FD5
#中最稳定的一种!一直被认为是对细
胞产生毒性的代谢物!近些年发现它在生物体内还
可以作为一种信号分子!在信号转导过程中扮演重
要角色!如诱导气孔关闭*参与根的向地性生长*细
胞壁木质化*细胞程序性死亡*侧根的发育以及花粉
管和柱头相互作用等,%-当植物遭受轻度的生物或
非生物胁迫时!产生的
B
!
D
!
能够通过参与信号转
导调节植物的代谢"如光合作用*呼吸作用*蒸腾作
用#及保护系统"如抗氧化胁迫的酶系统与非酶系
统#!使植物获得环境胁迫或生物胁迫的抗性,&-很
多研究表明
B
!
D
!
与
9=
!^ 和
MD
一样可以通过外
源喷施或向培养液中添加的方式提高植物的抗逆
性!近几年越来越多的学者开始研究通过施加
B
!
D
!
溶液来提高一些作物抗性!例如通过外源施
加
B
!
D
!
提高小麦*水稻*大豆和玉米的耐盐性*耐
冷冻性和耐旱性等,)*+-然而!针对不同的植物和不
同的胁迫处理!能有效提高抗逆性作用的
B
!
D
!
浓
度差别较大!本研究拟通过分析不同浓度
B
!
D
!
处
理对
&E
低温胁迫下(日南
#
号)柑橘秋稍生长状态
和叶片细胞膜伤害程度*渗透调节物质含量和抗氧
化酶活性等指标影响!筛选缓解柑橘低温伤害的最
佳
B
!
D
!
处理浓度并探讨外源
B
!
D
!
处理对柑橘耐
寒能力影响机制!以期为提高柑橘抗冻能力提供理
论依据
#
!
材料和方法
ABA
!
材料培养与
$
%
&
%
处理
供试材料为柑橘品种(日南
#
号)!由汉中泛亚
绿色食品有限公司提供!在陕南柑橘脱毒良种苗木
繁育基地保存剪取生长整齐*健壮的柑橘秋稍培
养在
B@=
?
>=0C
营养液中!置于"
&_",)
#
E
的低温
培养箱中胁迫
#"C
!空气相对湿度为
4"`
!光照时
间为
#!N
%
#!N
"昼%夜#!光照度为
#""">S
将
&E
低温培养的柑橘秋稍分为
!
组!一组向
B@=
?
>=0C
营养液中分别加入
",!
"
J
#
#*
#,"
"
J
!
#和
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
"
J
%
#溶液作为处理组!不添加
B
!
D
!
溶
液仅进行低温处理的作为对照组"
93
#!每个处理设
置
%
瓶!每瓶培养
%
个柑橘秋稍分别在
B
!
D
!
处
理的第
!
*
&
*
$
*
4
和
#"C
进行叶片采样!一部分叶片
直接用于
B
!
D
!
组织化学染色和相对电导率的检
测!其余每份均取
",)
?
用锡箔纸包好保存在
(4"E
冰箱中以检测其他生理指标!所有指标均设
置
%
次重复
A,%
!
测定指标及方法
A,%,A
!
形态观察
!
将培养在
B@=
?
>=0C
营养液中
的对照组"
93
组#和各处理"
J
#
*
J
!
和
J
%
#组柑橘离
体秋稍分别在处理的第
!
*
&
*
$
*
4
和
#"
天进行观察!
并利用
9=0@0
数码照相机
;D5$""H
进行数码拍照
A,%,%
!
叶片相对电导率
!
将对照组和处理组的柑
橘叶片分别用自来水和蒸馏水冲洗
%
次!去离子水
冲洗
#
次后滤纸吸干表面水分!将叶片避开主脉剪
成长条!快速称取
%
份!每份
",#
?
!分别置于含
!"
<6
去离子水的刻度试管中!室温下浸泡处理
#!N
!
用雷磁
HH51*%"4Y
型电导率仪测定叶片浸提液电
导率!记为
-
#
&然后将装有叶片浸提液的试管放入
水浴锅沸水浴
%"<.0
!冷却至室温后摇匀!再次测
定浸提液电导率!记为
-
!
!最后计算叶片相对电导
率"
-.!
#
-.!a
"
-
#
%
-
!
#
b#""`

A,%,C
!
B
%
D
%
组织化学定位与染色
!
分别取对照
组和处理组的柑橘叶片进行
B
!
D
!
组织化学定位与
染色!染色方法参照
1.=0
?
等,4-的方法用
B
!
D
!
的
特异性染色试剂二氨基联苯胺"
%
!
%*H.=<.0@]Q0X.*
C.0Q
!
HIP
#检测叶片中内源
B
!
D
!
的组织定位!依
据叶片染色范围和染色程度判断柑橘叶片内源
B
!
D
!
组织分布变化和积累程度
A,%,D
!
其他生理指标
!
叶片丙二醛"
GHI
#含量测
定参照
Y=R@@
c
等,-的方法!叶片中脯氨酸含量与超
氧化物歧化酶"
5DH
#*过氧化氢酶"
9IJ
#和 过氧
化物酶"
KDH
#活性均参照李玲等,#"-的方法测定
"")
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
%$
卷
A,C
!
数据处理
实验数据采用
5K55#$,"
软件进行统计分析
!
!
结果与分析
%BA
!
外源
$
%
&
%
对低温胁迫下柑橘离体枝条叶片
形态的影响
!!
就对照组而言!在
&E
低温胁迫处理
!C
时!柑
橘离体枝条叶片无明显变化"图
#
!
I
#&在低温处理
&
"
$C
时!部分柑橘叶片开始出现卷曲"图
#
!
P
*
9
#&处理
4C
时!
4"`
柑橘叶片出现卷曲!卷曲程度
明显比处理
&
"
$C
时严重"图
#
!
H
#&当低温处理
#"
C
时!所有的叶片全部出现卷曲!部分叶片甚至开始
干枯死亡"图
#
!
;
#
J
#
组观察结果显示!低温处理
&C
以前!柑橘叶片无卷曲症状出现"图
#
!
Y
*
7
#&处
理
$C
时开始出现叶片卷曲"图
#
!
B
#!但卷曲的叶
片数量和卷曲程度明显比同期对照组要轻!处理
4
和
#"C
时也未出现大部分叶片卷曲或干枯现象"图
#
!
L
*
1
#!由此表明施加
",!<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
有效缓
解了低温胁迫对柑橘的伤害当外源施加
B
!
D
!
浓
度增加至
#,"<<@>
+
6
(#时"
J
!
组#!其缓解低温胁
迫对柑橘的伤害作用更加显著!低温处理
#"C
的整
个过程中几乎没有叶片卷曲的现象出现"图
#
!
3
"
D
#
J
%
组观察结果显示!
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
不
仅没有减轻低温胁迫对柑橘造成的伤害!反而对低
温胁迫的柑橘造成了更严重的伤害!在处理
&C
就
开始出现了大部分叶片卷曲现象"图
#
!
2
#!处理
4C
卷曲更加严重而且还出现了部分叶片萎蔫干枯的症
状"图
#
!
5
#!处理
#"C
时有部分叶片已经开始脱落
"图
#
!
J
#柑橘离体枝条叶片形态的变化表明!外
源
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
能够有效缓解低温胁迫对
柑橘离体枝条叶片的伤害
%B%
!
外源
$
%
&
%
处理对低温胁迫下柑橘离体枝条
叶片相对电导率和丙二醛含量的影响
!!
在
&E
低温胁迫处理下!对照及处理组柑橘离
体枝条叶片的相对电导率"
F;9
#均随处理时间而逐
渐显著增加"表
#
#其中!对照组柑橘离体枝条叶
片的
F;9
在处理
!
"
#"C
显著提高了
&,&$
倍!表
明叶片细胞膜受损伤程度随低温胁迫时间的延长也
越来越严重在
J
#
处理组中!柑橘叶片
F;9
在低
温胁迫
!
"
&C
与对照组无明显差异!在低温处理
$
C
时比对照组显著降低了
!%`
!处理
#"C
时显著降
低了
!4`
!表明外源施加
",! <<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处
93
*
J
#
*
J
!
*
J
%
分别表示
"
*
",!
*
#,"
*和
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理&下同
图
#
!
不同浓度外源
B
!
D
!
处理对
&E
低温胁迫下柑橘离体枝条叶片形态的影响
93
!
J
#
!
J
!
=0CJ
%
/V=0CO@RVNQVRQ=V!
",!
!
#,"=0C),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
!
RQ/
[
QAV.UQ>
W
&
JNQ/=@\,
Y.
?
,#
!
;OOQAV@OC.OOQRQ0VA@0AQ0VR=V.@0/@OQS@
?
Q0@Z/B
!
D
!
VRQ=VQ=O<@R
[
N@>@
?W
@O
!+$#"(%)*#*"/0"#$1]R=0ANZ0CQR>@\VQ<
[
QR=VZRQ
"
&E
#
/VRQ//
#")
%
期 蒋景龙$外源
B
!
D
!
对低温胁迫下柑橘叶片抗寒性的影响
表
A
!
$
%
&
%
处理对低温胁迫柑橘离体枝条叶片相对电导率和丙二醛含量的影响
J=]>Q#
!
;OOQAV/@OB
!
D
!
VRQ=VQ=UQ/F;9=0CA@0VQ0V@OGHI@O!+$#"(%)*#*
"/0"#$1]R=0ANZ0CQR&E>@\VQ<
[
QR=VZRQ/VRQ//
检测指标
HQVQAV.@0.0CQS
处理时间
JRQ=V!C &C $C 4C #"C
相对电导率
-.!
%
`
93 #&,&$_#,%&QP %$,"_#,)CP &+,)+_",4+AP )%,++_#,)]P $&,)$_#,!$=P
J
#
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J
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J
%
!",!_#,%QI &",#+_!,!!CI )4,$_#,%&AI $%,!)_#,4&]I +#,$+_!,)+=I
丙二醛含量
GHIA@0VQ0V
%"
#
<@>
+
?
(#
#
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J
%
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!!
注$同行不同小写字母表示不同处理时期间在
",")
水平存在显著性差异&同列不同大写字母表示同一处理时间对照组和不同浓度
B
!
D
!
处理组间在
",")
水平存在显著性差异
M@VQ
$
JNQC.OOQRQ0V0@R<=>>QVVQR/.0VNQ/=?
0.O.A=0VC.OOQRQ0AQ=<@0
?
C.OOQRQ0VVRQ=VQUQ>
&
JNQC.OOQRQ0V
A=
[
.V=>>QVVQR/.0VNQ/=./V.0C.A=VQ/.
?
0.O.A=0VC.OOQRQ0AQ=<@0
?
VRQ=V!
D
!
=V",")>QUQ>,
理降低了低温胁迫导致的叶片
F;9
上升在
J
!
组处理下!柑橘叶片的
F;9
在低温胁迫
&C
时比同
期对照组显著降低了
%%,)`
!处理
#"C
时则显著降
低了
&4`
!表明
J
!
比
J
#
处理能更有效缓解低温胁
迫下柑橘叶片
F;9
的升高趋势与
J
!
和
J
#
处理
组表现不同!
J
%
组处理不仅没有缓解低温胁迫诱导
的柑橘叶片
F;9
上升趋势!反而使柑橘叶片
F;9
上升更高!在处理
!C
时已比同期对照升高了
%",4`
!处理
#"C
时上升幅度略有降低但仍比对照
升高了
,`
!表明
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理没有
缓解低温胁迫下柑橘叶片
F;9
的升高!反而有加剧
作用同时!柑橘叶片中
GHI
含量的变化趋势与
F;9
变化趋势基本相似!也是随低温胁迫时间的延
长而显著升高!外源
",!
和
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理均能有效缓解低温胁迫下柑橘叶片
GHI
含量
的升高!且
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理效果更好&
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理反而促进了叶片
GHI
含量的进一步升高!加剧了低温胁迫伤害的程度各
处理组间数据比较显示!柑橘叶片中
GHI
含量与
-.!
变化均从处理的第
$
天开始出现显著性差异
%BC
!
外源
$
%
&
%
处理对低温胁迫下柑橘离体枝条
叶片
$
%
&
%
积累的影响
!!
HIP
能够与
B
!
D
!
反应生成红褐色物质!因此
红褐色物质的出现反映了组织内
B
!
D
!
的积累情
况图
!
可以看出!对照组柑橘叶片在
&E
低温胁
迫处理
!C
时几乎没有明显的红褐色物质出现"图
!
!
I
#!在低温处理
&C
时叶片的左下角冻伤区有明
显的红褐色出现!反映出柑橘叶片的冻伤部位出现
了明显的
B
!
D
!
积累"图
!
!
P
#!在处理
$C
时柑橘叶
片左侧出现了大面积的
B
!
D
!
积累"图
!
!
9
#!在低
温处理
4C
后柑橘叶片中的
B
!
D
!
积累继续增高!
叶片的大部分组织部位出现
B
!
D
!
积累"图
!
!
H
#!
当低温胁迫
#"C
时几乎全部柑橘叶片出现严重卷
曲!
B
!
D
!
积累更加严重"图
!
!
;
#同时!
J
#
组低温
处理
4
和
#"C
时柑橘叶片均出现了
B
!
D
!
积累"图
!
!
L
"
7
#!但其积累的程度明显比未对照组要轻&
J
!
组柑橘叶片中的
B
!
D
!
积累明显降低!甚至处理
#"
C
时
B
!
D
!
积累量仍然很低"图
!
!
D
#&
J
%
组柑橘叶
片中的
B
!
D
!
积累没有明显的降低趋势!但与同期
对照组相比
B
!
D
!
积累较轻"图
!
!
K
"
J
#以上结
果表明!柑橘离体枝条叶片中
B
!
D
!
积累水平随着
低温胁迫时间的延长而逐渐上升!当外源施加
",!
和
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
时其
B
!
D
!
积累水平明显降
低!并以
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理的降低效果最
为显著
%BD
!
外源
$
%
&
%
处理对低温胁迫下柑橘离体枝条
叶片脯氨酸含量和抗氧化酶活性的影响
!!
随低温胁迫时间的延长!
93
组和
J
#
*
J
!
*
J
%
处
理组柑橘叶片的脯氨酸含量均呈逐渐升高趋势!且
在处理
#"C
达到最大值"图
%
!
I
#其中!对照组柑
橘叶片的脯氨酸含量在
&E
低温胁迫处理
!
"
#"C
期间提高了
#,+4
倍&
J
#
组柑橘叶片脯氨酸含量在
处理
$
和
#"C
时分别比处理
!C
相比升高
#,$!
和
!,!$
倍&
J
!
组叶片的脯氨酸含量在处理
$
和
#"C
时分别比处理
!C
时升高
!,"$
和
!,&$
倍!且在处
理期间始终明显高于同期对照组!在低温处理
#"C
时几乎是同期对照组的
!
倍&
J
%
组柑橘叶片中脯氨
酸含量始终低于同期对照!且处理期间变化幅度不
!")
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
%$
卷
93
*
J
#
*
J
!
*
J
%
分别表示
"
*
",!
*
#,"
*和
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理!
图片中左侧为
HIP
染色前的形态!右侧为
HIP
染色后的
B
!
D
!
组织化学定位结果
图
!
!
B
!
D
!
处理对
&E
低温胁迫下柑橘离体枝条叶片形态变化和内源
B
!
D
!
积累的影响
93
!
J
#
!
J
!
=0CJ
%
/V=0CO@RVNQVRQ=V!
",!
!
#,"=0C),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
!
RQ/
[
QAV.UQ>
W
,
I>.<=
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Q/.0VNQ>QOV/.CQ@OVNQO.
?
ZRQ./VNQO@R<@O0@/V=.0.0
?
!
=0CVNQR.
?
NV@0Q./VNQO@R<@O
B
!
D
!
N./V@ANQ<.A=>>@A=>.X=V.@0\.VNHIP/V=.0QC,
Y.
?
,!
!
;OOQAV/@OB
!
D
!
VRQ=V[
N@>@
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.A=>AN=0
?
Q/=0C=AAZ=V.@0@OQ0C@
?
Q0@Z/
B
!
D
!
@O>Q=UQ/@O!+$#"(%)*#*"/0"#$1]R=0ANZ0CQR&E>@\VQ<
[
QR=VZRQ/VRQ//,
大可见!各处理叶片脯氨酸含量均随低温胁迫处
理时间延长而升高!外源
#,"
和
",!<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理提高了脯氨酸含量的增幅!并以
#,"
<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理的效果较好!而
),"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理则有降低脯氨酸含量的效应
同时!各处理组柑橘叶片中
5DH
活性随低温处
理时间均呈现先升高后降低的趋势!
93
和
J
%
处理
组在处理的
&C
后达到最大值!而
J
#
和
J
!
组则在
处理
$C
后达到最大值&在低温处理的
$
"
#"C
!各
处理组柑橘叶片中
5DH
活性均以
J
!
处理最高!
J
#
处理其次!
J
%
组和
93
组最低"图
%
!
P
#各处理组
柑橘叶片中
9IJ
酶活性也随处理时间呈先升高后
降低的趋势!均在处理
!C
后增速较快!至处理
$C
时达到最大值&在处理
!C
时!各处理及对照间无显
著性差异!在处理
&
"
#"C
!柑橘叶片中
9IJ
活性
及其升幅表现为
J
!
"
J
#
"
93
"
J
%
"图
%
!
9
#各处
理柑橘叶片中
KDH
活性变化趋势和
5DH
活性相
似!整体也呈现先升高后降低趋势!且在处理后的
$
"
#"C
仍以
J
!
组最高!
J
#
组其次!
93
组和
J
%
组
最低"图
%
!
H
#以上结果说明
#,"
和
",!<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理均明显提高了低温胁迫下柑橘叶片
中
5DH
*
9IJ
*
KDH
活性!有效缓解低温胁迫引起
的过氧化伤害!并以
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理效
果更明显
%
!
讨
!
论
叶片是柑橘进行光合作用和呼吸的主要器官!同
时也是冻害最容易侵袭的部位!轻冻时可使柑橘叶片
表皮细胞受害!叶片慢慢卷缩!光合作用减弱!重冻时
则使柑橘叶片呈桶状卷曲!很快凋萎干枯!落叶严重!
%")
%
期 蒋景龙$外源
B
!
D
!
对低温胁迫下柑橘叶片抗寒性的影响
图
%
!
B
!
D
!
处理对低温胁迫下柑橘离体枝条叶片脯氨酸含量和
5DH
!
9IJ
!
KDH
活性的影响
Y.
?
,%
!
;OOQAV/@OB
!
D
!
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[
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光合作用停止,#-本研究结果显示(日南
#
号)柑橘
离体秋稍经
&E
低温胁迫处理
#"C
后!其叶片由轻
微卷曲到严重卷曲再到萎蔫干枯脱落!而外源施加
",!
"
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
能够缓解了低温胁迫引
起的柑橘叶片卷曲和萎蔫!提高柑橘的抗冻性
L/N.*
]=/N.=
等,##-研究表明!向干旱胁迫
4C
的大豆叶片喷
施
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
可以延迟叶片萎蔫并提高
叶片的相对含水量!本研究结果与之一致
相对电导率"
-.!
#和
GHI
含量均是植物遭受
低温胁迫后细胞膜透性变化的重要生理指标!能有
效反映细胞膜系统遭受低温伤害的程度!且大多数
植物在低温胁迫下
-.!
和
GHI
含量升高,#!*#%-
本实验结果表明!柑橘叶片的
-.!
经
&E
低温胁迫
处理
#"C
后显著升高!其细胞膜受损伤程度随低温
胁迫时间的延长也愈加严重!施加
",!
"
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理
#"C
后有效缓解低温胁迫造成的
柑橘叶片
F;9
大幅升高的趋势!但浓度超过
),"
<<@>
+
6
(#时作用不明显甚至后期加重低温胁迫造
成的伤害研究表明!先后通过向
&E
低温处理
%$
N
的绿豆叶片喷施
!""<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
!绿豆幼苗
的存活率由
%"`
提高到
+"`
!相对电导率由
4$`
降低到
!#`
,
$
!
#&*#)
-
!本实验结果虽然与之相似!但施
用的
B
!
D
!
浓度却相差很大!这可能与处理的植物*
处理时间和取材差异有关同时!本研究中柑橘叶
片中
GHI
含量的变化趋势与
F;9
变化趋势基本
相似!也是随低温时间的延长而显著升高!
#,"
<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理能缓解低温胁迫下柑橘叶片
GHI
含量的升高李金亭等,#$-研究结果也表明
",")
#
<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理降低了
#)"<<@>
+
6
(#
M=9>
盐胁迫处理引起的
GHI
含量升高另外!本
研究中
B
!
D
!
的
HIP
组织化学定位结果表明!随着
低温胁迫时间的延长!柑橘叶片中
B
!
D
!
积累水平
逐渐上升!
#,"<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理对低温胁迫柑
橘叶片中
B
!
D
!
积累的降低效果最为显著!这一结
果进一步证实了各剂量外源
B
!
D
!
处理对低温胁迫
下柑橘叶片细胞膜受损害的缓解效应
脯氨酸为渗透调节物质,#+-!而
5DH
*
9IJ
和
KDH
均是植物细胞内清除活性氧和维持植物体内
活性氧的重要酶,#4-!它们对维持细胞膜的完整性及
提高植物的抗逆性具有重要的意义本研究结果表
明!外源施加合适浓度的
B
!
D
!
处理可以提高低温
胁迫下柑橘叶片的渗透调节能力!增强了柑橘叶片
中的
5DH
*
9IJ
和
KDH
等抗氧化酶的活性!增强
了
FD5
清除能力!但随
B
!
D
!
处理浓度增至
),"
<<@>
+
6
(#时超出了抗氧化系统自我调节的范围!
抗氧化系统活性又表现出了明显的下降趋势
MQ*
V@
等,#-向水培玉米根中施加
#Z<@>
+
6
(#
B
!
D
!
进
行预处理!发现
B
!
D
!
减轻了
M=9>
胁迫对盐胁迫敏
感型玉米的伤害!提高了
5DH
*
9IJ
和
KDH
的活
性!从而使盐敏感型玉米获得了更高的盐耐受能力
&")
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
%$
卷
吴国荣等研究证实适宜浓度
B
!
D
!
预处理盐泽螺旋
藻诱导提高了其
5DH
*
9IJ
和
KDH
的活性!有效
地抑制了藻细胞内活性氧的积累,!"-!这与本研究中
#,"
和
",!<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
处理组柑橘叶片中
5DH
*
9IJ
和
KDH
活性表现一致
综上所述!
&E
低温处理能够引起柑橘离体秋
梢叶片卷曲*枯萎*脱落等受害症状!外源喷施
#,"
<<@>
+
6
(#
B
!
D
!
可以提高低温胁迫下柑橘叶片的
脯氨酸含量与
5DH
*
9IJ
和
KDH
抗氧化酶活性!
有效缓解低温对柑橘叶片细胞膜的伤害!从而增强
其耐寒性该研究为后期开发含
B
!
D
!
的抗冻剂和
柑橘冻害的防控提供了重要依据
参考文献!
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李新生!江
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海!郭念文
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北方园艺!
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!
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外源水杨酸对低温胁迫下圆柏属
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广西植物!
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