全 文 ：书西北植物学报!
"#$
!
$$
"
##
#$
!!"%&!!#
!"#$%&#%&()$*+,""-.)/#0-/
!!
文章编号$
#"""()"!
"
!"#$
#
#(!!"%("*
收稿日期$
!"#$("(!%
%修改稿收到日期$
!"#$(#"(!)
基金项目$国家自然科学基金"
$#!+"#$!
!
$#"+"###
#%内蒙古自然科学基金"
!"#!,-"#)
#
作者简介$樊永军"
#%*&
#!男!博士!副教授!主要从事菌根应用技术研究&
.(/012
$
304
56
#%*
!
#+$789/
"
通信作者$闫
!
伟!博士!教授!主要从事菌根应用技术研究&
.(/012
$
:;1
5
04
!
1/0<7;=<784
内蒙古地区白桦外生菌根
形态类型及分子鉴定
樊永军!闫
!
伟
"
#
内蒙古包头师范学院!内蒙古包头
"#)"$"
%
!
内蒙古农业大学 林学院!呼和浩特
"#""#%
#
摘
!
要$以内蒙古不同地区白桦外生菌根为材料!采用形态解剖学方法和分子生物学手段对与白桦共生的外生菌
根真菌多样性进行全面的调查!并经对所测序列与
>;4?04@
和
A0B0C0D;
比对&结果显示$在内蒙古地区与白桦共
生的外生菌根真菌共
#$
种!其中担子菌
*
种!子囊菌
)
种!分别来自于丝膜菌属丝盖伞属蜡壳耳属毛革菌属滑
菇属和空团菌属块菌属地怀菌属&其中!菌根类型
E
F
和
E
##
未能提出其总
AGH
!根据其外生菌根形态类型并参
照
H
I
;J;J
体视显微镜菌根图谱和
K0<
I
菌根图谱进行比较!分类鉴定为荷顿氏疣柄牛肝菌和白桦外生菌根真菌一
种&结果表明!内蒙古地区白桦外生菌根真菌多样性相对较高!且与利用地上子实体鉴定的外生菌根真菌种类有
一定的区别&
关键词$白桦外生菌根%形态解剖学特征%分子鉴定%
LE-
中图分类号$
M%$($$#
文献标志码$
H
!"#
$
%"&"

()*&+
,$
-*./!"&-)0&*#1/-.2(3()*2("."34)2"5
,
)"##%(6*-
".%)#1*$
2
*$#
32
4
3
**$(.1..-#!".

"&(*7#-*
NHGO94
I6
<4
!
OHGP;1
"
#EQ;?1929
I5
-81;48;04=E;8Q4929
I
1802A;
R
0JB/;4B93?09B9(
S92;
I
;
!
?09B9<
!
L44;J,94
I
9210"#)"$"
!
SQ140
%
!EQ;
N9J;DBS92;
I
;93L44;J,94
I
9210H
I
J18<2B5
!
K!
SQ140
#
7892#*)2
$
T14
I
BQ;;8B9/
5
89JJQ1V0;94!"#$%&

%&#
(
)
(
%%&14L44;J,94
I
9210=133;J;4B0J;0D0D;W
R
;J1/;4(
B02/0B;J1027EQ;
R
J1/0J
5
DB<=
5
94BQ;=1U;JD1B
5
93;8B9/
5
89JJQ1V0D0DD9810B;=:1BQ!*

%&#
(
)
(
%%&14L44;J
,94
I
92100J;0:0D14U;DB1
I
0B;=I
/9J
R
Q929
I
180204=040B9/180204=/92;8<20J/;BQ9=
!
BQ;41=;4B13180(
B194J;D<2BD:;J;9CB014;=0889J=14
I
BQ0BBQ;D;
X
<;48;D:;J;?YH-E;=I
BQ;>;4?04@04=TGLE.=0(
B0C0D;7EQ;J;D<2BD14=180B;=BQ0BBQ;J;0J;#$=133;J;4B.S,3<4
I
194!*

%&#
(
)
(
%%&14L44;J,94
I
92100J(
;07H/94
I
BQ;#$1=;4B131;=;8B9/
5
89JJQ1V023<4
I
1
!
)D
R
;81;DC;294
I
B9HD89/
5
89B14004=BQ;J;DBD
R
;81;D
C;294
I
B9?0D1=19/
5
89B140
!
BQ;
5
C;294
I
B9+,-#./&-.$0
!
1/,2
(
3"
!
4"3&2./&
!
5.%,6"-7&
!
8"3"%,7&04=+"/,9
2,22$7
!
:$3"-
!
;",
(
<.0
!
J;D
R
;8B1U;2
5
04=0/94
I
#$=133;J;4BB
5R
;D
!
E
F
04=E
##
3012;=B9;WBJ08BBQ;AGH7
-90889J=14
I
B9BQ;/0
R
93;8B9/
5
89JJQ1V023<4
I
1:Q18Q:;J;C<12BC
5
H
I
;J;J04=K0<
I
!
BQ;B:9B
5R
;D:;J;
1=;4B131;=0D="22./$7),%,

$004=!"#$%&-).>&%$#",

.//&#&7EQ;J;D<2BDDQ9:4BQ0BBQ;=1U;JD1B
5
93.S,
94!*

%&#
(
)
(
%%&14L44;J,94
I
92100J;01DQ1
I
Q;J
!
04=1B1D=133;J;4B:1BQBQ;J;D<2B:Q18Q:0D1=;4B131;=
C
5
3J<1B14
I
C9=
5
0DD9810B;=:1BQ!*

%&#
(
)
(
%%&7
:-
,
;"#/9
$
;8B9/
5
89JJQ1V0;93!"#$%&

%&#
(
)
(
%%&
%
/9J
R
Q929
I
180204=040B9/18028Q0J08B;J1D0B194
%
/92;8<(
20J1=;4B13180B194
%
LE-
!!
外生菌根是指土壤中一些真菌与植物根系所形
成的共生体!菌根真菌与植物之间建立了互惠共生
的生理整体!在生态系统中!外生菌根在植物之间的
介导作用影响着植物之间的关系!决定着植物的分
布!进而影响群落的组成甚至是生态系统的平衡)#*&
然而!目前国内从一个树种的角度!以菌根共生
体为研究对象!系统研究与之共生的菌根类型的工
作开展得较少&赵忠等)!*将杨树的菌根分为
#)
个
不同类型!从中鉴定出

种菌根真菌&唐明等)$*和
陈辉等)*通过对杨树的
*
种外生菌根的形态特征研
究说明!依据菌根的形状颜色菌索等特征鉴定外
生菌根有一定可行性!并总结了国内外对杨树菌根
的研究成果!认为杨树菌根为内外生混合菌根!有
$"
种外生菌根和

种内生菌根&对桦树外生菌根
真菌的研究就更少了!弓明钦等)*研究了西南桦对
菌根的依赖性及菌根接种效应!发现其对外生菌根
的依赖性较强&国外学者对桦木属"
!"#$%&
#一些种
类的外生菌根进行了比较深入的研究&
Z94;D
等)+*
研究北美白桦"
!"#$%&

&
(
-.
?
"-&
#的几种外生菌
根真菌!发现各真菌随时间的推移一些种类出现演
替现象&
-1/0J=
等)**研究发现北美白桦与美国花
旗松"
50"$6,#0$
@
&7"/>."0..
#的混交林比纯林中的
菌根菌种类和数量要高&不论是国内还是国外!白
桦"
!*

%&#
(
)
(
%%&
#外生菌根的研究都比较少!李桂
兰等)F*对白桦幼苗外生菌根进行了初步研究!筛选
出了包括彩色豆马勃"
5.0,%.#)$0#./2#,-.$0
#在内的
+
种白桦外生菌根真菌&
白桦是一种适应性较广生长快结实量多萌
生能力强的先锋树种&白桦林在内蒙古境内各山地
分布很广!总面积约占全区森林面积
![
&本研究
从形态学解剖学的角度对与白桦共生的外生菌根
真菌做了初步的类型划分!并利用分子生物学手段
对其进行了物种鉴定研究!为白桦外生菌根真菌开
发应用奠定理论基础&
#
!
材料和方法
<7<
!
材
!
料
实验材料取自贺兰山国家自然保护区乌拉山
林场九峰山自然保护区大青山小井沟赤峰的黄
岗梁林场和根河的大兴安岭森林监测站
+
个地区的
实验样地白桦的外生菌根&
<7=
!
方
!
法
<7=7<
!
菌根的采集
!
样品的采集按照
H
I
;J;J
等)%*
方法进行&
!"#"
和
!"##
年!在白桦纯林群落中根
据不同海拔高度随机选取
$
"

个样地!在所有样地
内用小铁锹沿着白桦树种根部达其根的末级!取
!"
8/\!"8/\!"8/
带有细根的土块装入塑料袋中
并编号!每次每个样至少采集
$
个样品!每个生长季
至少取
!
次样! 年共采样
!#)
袋&采回的样品置
于
)]
冰箱中保鲜待测!保藏时间不超过
#
周&
<7=7=
!
清洗处理
!
从冰箱中取出
#
袋样品!置于
筛子中用自来水小心地清洗菌根表面的沙土!洗净
后剪成长约
#8/
的根段!然后将小根段置于体视显
微镜下用镊子细小的毛刷及解剖针进一步清洗&
<7=7>
!
宏观形态观察
!
在体视显微镜下!观察记录
菌根的形状颜色分叉情况菌索及外延菌丝的有
无菌套表面质地是否透明有无囊状体等等!利用
电脑显微照像系统进行拍照并记录其形态特征%同
时选取新鲜幼嫩纯净的同一分支系统菌根
!
"
$
个!置于
SEH?
缓冲液的
.
RR
;4=9J3
中!室温保存!
作为
AGH
提取的样品&
<7=7?
!
显微结构观察
!
新鲜菌根的菌套制片$将上
述分类的新鲜菌根先在解剖镜下用解剖针和镊子把
菌套剥下!取一干净载玻片!在中央滴一小滴水!将
剥下的菌套碎片置于玻片水滴上!再在水滴上滴
#
"
!
滴甘油!用解剖针和镊子轻轻拨动使有些菌套
外层朝上!有些菌套外层朝下!盖上盖玻片制成临时
切片&在
Y^O,_T-(?K!
显微镜下观察!菌套内
外表面菌丝的排列方式外延菌丝的形状直径!菌索
的类型以及菌丝是否有隔有核分叉锁状联合等项
目!最后记录并拍照&
永久封片制作$将新鲜菌根的短根组织"
!
"
$
//
长的根段#!固定于
NHH
中!采用常规石蜡切片
法!番红固绿双重染色!中性树胶封片&
<7=7@
!
分类
!
用显微摄影系统在
#"\)"
倍下观察
拍照并记录结果!用外生菌根的宏观形态特征和显
微结构特征!即采用菌根的颜色形状菌套表面质
地外延菌丝菌索囊状体锁状联合菌套排列图
式等为鉴定依据!参照
H
I
;J;J
等)#"*体视显微镜菌根
图谱和
K0<
I
等)##*菌根图谱进行比较分类鉴定&
<7>
!
分子鉴定
A<
!
总
BC7
的提取
!
供试外生菌根根尖材料为
根据其外部形态及内部解剖结构分出的各种不同类
型典型的保存于
SEH?
中的室温保存的不同的菌
根类型样品&用于
AGH
提取根尖取自同一菌根分
支系统!采用
Z0@<8D
等)#!*的
SEH?
法!总
AGH
的
提取应用
?19D
R
14
真菌基因组
AGH
提取试剂盒!操
作步骤严格按照试剂盒步骤进行操作&
"#!!
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
$$
卷
A=
!
DEF
扩增
!
_S`
反应所需试剂为一管便携
式
!\ ,0DB;J ,1WB&
JAGH
的 扩 增 引 物 为
LE-#N
和
LE-)
)
#$(#
*
!
_S`
扩增反应在
H?L
"
_.
#
(
!*""_S`
仪上进行!扩增产物用
#7[
琼脂糖凝胶
在
"7\E?.
电泳缓冲液中电泳!以凝胶成像系统
检测并记录扩增产物在琼脂糖凝胶上的图谱&
_S`
扩增产物经电泳和凝胶成像系统检测后!
用天根生化科技有限公司的离心柱型普通琼脂糖凝
胶
AGH
回收试剂盒从含有扩增产物条带的琼脂糖
凝胶上回收纯化!具体操作按试剂盒手册进行&
用纯化后的
_S`
扩增产物和引物直接测序&
测序均由上海生工生物工程公司完成&
<7>7>
!
序列比对
!
所测序列运用
?YH-E
与
>;4(
?04@
数据库和
TGLE.
进行比对!一般认为序列相
似性系数超过
%*[
鉴定为种的水平!小于
%*[
的相
似性系数为属或科的水平!并借助软件运用邻接法
"
4;1
I
QC9J(
6
91414
I
GZ
#对所测序列在种的水平上进
行进化地位分析!确定其物种名)#+*&
!
!
结果与分析
=7<
!
形态学组织学特征
通过对白桦外省菌根的宏观形态特征和显微结
构特征的观察分析!参照
H
I
;J;J
等)#"*体视显微镜
菌根图谱和
K0<
I
等)##*菌根图谱进行比较分类鉴
定菌根如下&
=7<7<
!
亚野丝膜菌"
+,-#./&-.$00$3#,-A$0
#
!
!
#
"
形态特征!图版
#
#"
!
菌根系统大多二叉分支!纤
细!每
#"//
分支数量
$
"

!菌根因子长度"
#7%a
"7
#
//
!直径"
7)a"7"$
#
//
!菌根因子明显扭
曲!末端变细!菌根颜色为肉色!成熟时逐渐变为褐
色!外延菌丝纤细绒毛状!有时粘有土壤颗粒!菌套
透明!根状菌索绳状&
!"解剖学特征!图版
#
#
!
"
!
菌套较薄不易剥
离!菌套外表面为密丝组织!菌丝有隔!具明显的锁
状联合!同时菌丝间具桥式接合结构!单个菌丝叉状
分支粗壮且细胞壁比较厚!菌丝结合形成网状!菌
套类型为
S
&
=7<7=
!
土生空团菌"
+"/,2,22$7
@
",

).%$7
#
!
!
#
"
形态学特征!图版
#
#
$
"
!
菌根自尖端幼嫩部至成熟
部均为黑色!大多不分支!少数为二叉分支!最多只
有两级分支!菌根尖端明显膨大!菌根因子长度为
$
"
)//
!直径为
"7)
"
"7+//
!表面有大量的外延
菌丝且菌丝刚硬深色!没有发现根状菌索!菌根周
围有丰富的菌核!菌核球形!椭圆形!深黑色!直径
"7"
"
$//
!表面也有刚硬的菌丝放射状伸出!菌
核表面光滑!但无光泽&
!"解剖学特征!图版
#
#
)
"
!
菌套外表面为排
列紧密的拟薄壁组织!菌丝排列呈星状!菌丝排列的
菌丝在中央伸向一处!隆起!越往中央菌丝的壁越
厚!而凹陷处的菌丝壁较薄!颜色较淡!菌套菌丝有
隔!厚壁!直径"
)7%a"7%
#
$
/
!整个菌套表面由一
个接一个排列整齐的星状突起连接而成!突起之间
的距离为"
+F7!a#7*
#
$
/
!菌核表面的菌丝排列
也与此相仿&菌套类型为
>
&
=7<7>
!
光苞丝盖伞"
1/,2
(
3"%".,2"

)&%&
#
!
!
#
"形
态学特征!图版
#
#

"
!
菌根枝状分支!分支
#
"
!
级!菌根因子长度"
#
#
!
"
+
"
F
#
//
!直径
"7
"
"7F
//
!呈短的念珠状!土黄色!菌根因子有柄!较短!
全株被有土壤颗粒!表面观菌丝纤细!棉絮状!无根
状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
+
"
!
菌套为拟薄壁组
织!菌丝排列整齐!呈表皮细胞状!菌丝分支频繁!不
规则的膨大!单个菌丝或菌丝束缠绕形成环状或平
行排列!菌丝细胞壁厚!大于
"7$
$
/
!透明至淡绿
色!粘合于菌套的外表面!菌套类型为
K
&
=7<7?
!
橙黄块菌"
:$3"--$
?
$7
#!
#
"形态学特征
!图版
#
#
*
"
!
菌根单轴分支!菌根因子棒状!无柄!
基部收缩变细!菌根因子长"
"7Fa"7!
#
//
!直径
"
7!!a"7")
#
//
!菌根表面菌根幼嫩时棕褐色!老
时变黑!并生出粗硬的黑色外延菌丝!菌根表面疏
松!生有短而稀的外延菌丝!无根状菌索!表面观菌
套厚易剥离&
!"解剖学特征!图版
#
#
F
"
!
菌套外表面$为拟
薄壁组织!菌丝互相连接呈表皮细胞状!菌丝细胞壁
厚!直径"
##7)a!7!
#
$
/
!菌丝表面较光滑!菌丝弯
曲分支形成网状!无锁状联合!菌丝特征及其排列方
式为
H
I
;J;J
所描述的类型
Y
&菌套内表面菌丝与
外表面菌丝区别不是很大&
=7<7@
!
双系菌丝蜡壳耳"
4"3&2./&6.7.#.2&
#
!
!
#
"
形态学特征!图版
#
#
%
"
!
菌根肉色或土黄色!指状!
不规则的分支!尖端杵形透明!菌根因子有柄!且具
不规则的缢缩!菌根因子长"
$7)*a"7F
#
//
!全株
被有土壤颗粒!表面观外延菌丝稀少纤细棉絮状!
无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
"
"
!
菌套外表面$菌
丝排列疏松!形成拟薄壁组织!似表皮细胞!菌丝结
合形成疏松网状!菌丝有隔!无锁状联合!细胞壁较
厚!直径"
!7"a"7)
#
$
/
!整个菌套表面似乎由一个
##!!
##
期
!!!!!!!!!!!!
樊永军!等$内蒙古地区白桦外生菌根形态类型及分子鉴定
个网格连接而成!表面由管状乳汁管伸出!菌套类型
为
Y
和
,
型&菌套内表面菌丝与外表面区别不大&
=7<7G
!
梭形革菌"
5.%,6"-7&
?
&%%&<
#
!
!
#
"形态学
特征!图版
#
#
##
"
!
菌根不规则分支!长度达
#"
//
左右!直径
"7
"
"7+//
!整个菌根系统被有绒
毛状的纯白色和纯黄色外延菌丝!菌丝较长!纤细!
似乎一层薄纱交织在菌根上面%菌根因子扭曲!无
柄!被有黄色粉末!根状菌索发达!黄色!在地下基质
中呈网状!表面观呈黄色棒状菌根与绳索菌索缠绕&
!"解剖学特征!图版
#
#
!
"
!
菌套外表面为拟
薄壁组织!菌丝连接形成网状!胶质!镶嵌在菌丝套
表面!菌丝壁薄!透明!菌丝有隔!分支!菌套菌丝凹
凸不平!同时在菌丝锁状联合处分布有似髌骨状结
构!菌套表面观是由一些不规则的细胞组成!有圆
形表皮细胞形等等%菌套内表面呈密丝组织!菌丝
相互交织在一起!埋于基质中!外延菌丝细胞壁厚!
有隔!无锁状联合!有些菌丝接合形成梯形&
=7<7H
!
亚洲丝膜菌"
+,-#./&-.$0%&/.
@
"-
#
!
!
#
"形
态学特征!图版
#
#
$
"
!
菌根不规则分支!全株纯白
色!尖端变细!菌根长
F
"
#!//
!直径
!
"
$//
!菌
根不分支末端直或稍弯曲!不肿大!老的部分呈褐
色!菌根表面光滑!有光泽!细长!棒状!丰富的外延
菌丝绒毛状!簇生!较难分离!菌根易漂浮在水面上!
有根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
)
"
!
菌套外表面为密
丝组织!菌丝致密!有规律地粘合在一起!呈平行排
列!菌丝壁薄!小于
"7$
$
/
!透明到淡绿色!光滑!菌
丝有隔且在分隔处膨大似关节!菌丝细胞呈骨头状!
具锁状联合!菌套内表面菌丝无固定排列方式!不规
则膨大且在膨大处分支!缠绕&菌套类型为
H
和
?
&
=7<7I
!
荷顿氏疣柄牛肝菌"
="22./$7),%,

$0
#
!
!
#
"形态学特征!图版
#
#

"
!
菌根单轴分支到金字
塔型分支!分支
#
"
!
级!且分支紧密的簇生!形成珊
瑚状!菌根因子弯曲到稍扭曲!不分支的末端尖削!
颜色加深!变为褐色!整个菌根为黄褐色!上被有白
色粉末! 级分支较短!簇生!菌根表面观光滑!白色
菌丝稀疏!极短!无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
+
"
!
菌套外表面为密
丝组织!菌丝没有任何模式!比较松散的相互交织在
一起排列于菌套外表面!菌丝细胞壁较薄!菌丝比较
粗!分支多!且分支相互穿插!有单个菌丝或菌丝束
互相缠绕成环状!镶嵌于菌套表面!菌丝光滑无隔!
菌丝细胞质均匀!壁透明!菌套内表面菌丝结合紧密
些!但菌丝形态及排列方式基本相似!只是菌丝细胞
更加粗壮!分支少一些!菌套类型为
H
&
=7<7J
!
喜栎块菌"
:$3"-6-
(
,

).%$7
#
!
!
#
"形态
学特征!图版
#
#
*
"
!
菌根棒状不分支!黄褐色到灰
褐色!菌根因子无柄!菌根表面柔嫩粗糙!表面观菌套
厚且透明!表面分布有稀疏的外延菌丝!无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
F
"
!
菌丝紧密排列成
拟薄壁组织!菌丝结合形成渔网状!许多菌丝排列组
成渔网结点!网眼处菌丝有隔!壁厚!直径"
)7)a
"7%
#
$
/
!结点处菌丝颜色褐红色!其余部分菌丝色
淡!且表面观菌丝排列整齐!外延菌丝具明显的锁状
联合!且在分隔处膨大&
=7<7!
半被毛丝膜菌"
+,-#./&-.$0)"7.#-.2)$0
#
!
!
#
"形态学特征!图版
#
#
%
"
!
菌根单轴分支!
"
"
#
级分支!分支的菌根因子短!未分支的菌根末端相
对较长!且稍弯曲!末端尖削!色深!为灰褐色!且尖
端菌根突破菌丝套露出根尖部!整个菌根棕黄色!不
分支的末端色深!外延菌丝纤细!短!绒毛状!不易观
察!表面观菌套不透明!无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
!"
"
!
菌套为密丝组
织!菌套外表面观菌丝排列有一定的模式!由单个菌
丝或菌丝束相互缠绕形成漩涡状!菌丝结合相对疏
松!相互不粘合!菌丝呈叉状分支!无隔!壁薄!细胞
质均匀&菌套内表面菌丝排列模式不太明确!但菌
丝比较清晰!与其他菌套菌丝缠绕方式区别明显&
菌套类型为
,
&
=7<7<<
!
白桦外生菌根真菌一种"
!"#$%&-).>&
%$#",

.//&#&
#
!
!
#
"形态学特征!图版
#
#
!#
"
!
菌根
系统单轴分支!分支
#
"
!
级!黄褐色!菌根主轴分支
末端扭曲!
#
"
!
级分支菌根因子幼嫩时棕黄色!有
规则的缢缩接近念珠状!无柄!菌根因子长"
$7"a
#7"
#
//
!直径"
7a"7#
#
$
/
&菌根表面外延菌
丝稀疏绒毛状!无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
!!
"
!
菌套外表面为密
丝组织!由疏松的菌丝交织而成!菌丝排列不规则!
菌丝无形态分化!纤细!壁薄!无色!无锁状联合!菌
丝二叉状或假二叉状分支!菌丝末端呈扫帚状!有分
生孢子散发!属子囊菌亚门青霉属&
=7<7<=
!
阿尔卑斯地杯菌"
;",
(
<.0&%

./"
#
!
!
#
"
形态学特征!图版
#
#
!$
"
!
菌根系统不分支!幼嫩时
灰褐色老时变为褐色!菌根因子短小!棒状!有棱似
一节一节!长度
#
"
!//
!直径
"7$
"
"7)//
!菌根
因子有柄!极短!外延菌丝白色!绒毛状!幼时多老
时少!菌根表面观光滑!菌套薄不易剥离!未发现有
根状菌索&菌根周围具菌核!菌核黄色!球形!光滑!
!#!!
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
$$
卷
外被有长绒毛状的外延菌丝!菌丝与菌根上的外延
菌丝相同!只是比菌根上要长一些!约
$
"
)//
&
!"解剖学特征!图版
#
#
!)
"
!
菌丝套外表面$
为密丝组织!菌丝细胞壁薄!小于
"7$
$
/
!透明至淡
黄色!光滑!菌丝叉状分支!菌丝紧密的粘合在一起!
单个菌丝或菌丝束形成不规则的如玫瑰花式的结
构!菌丝无锁状联合!表面隐约可见分布有锥形的乳
汁管&菌丝类型为
S
和
A
&
=7<7<>
!
美柄滑菇"
8"3"%,7&2&A.

"0
#
!
!
#
"形态
学特征!图版
#
#
!
"
!
菌根不规则分支!分支
#
"
!
级!菌根因子长"
#
#
!
"
+
"
F
#
//
!直径
"7$//
!不分
支的末端直或稍有弯曲!尖端略为尖削!其余部分大
小不明显!菌根因子有不同程度的扭曲!菌根整体为
肉色到棕褐色!菌根表面粗糙!粘有不同程度的土壤
颗粒!外延菌丝纤细!致密!绒毛状!无根状菌索&
!"解剖学特征!图版
#
#
!+
"
!
菌套整体为密丝
组织!菌丝壁薄!小于
"7$
$
/
!透明到浅黄色!光滑!
菌丝柱状!表面观菌丝致密!分支丰富!由单个菌丝
或菌丝束形成不规则的如环状的结构!细胞长
$"
"
"
$
/
!直径"
$7
#
)
"

"
7
#
$
/
!菌丝有隔!菌套内
表面菌丝没有明显的交织模式!菌丝不规则的膨大!
菌套内表面观菌丝安排似人的手纹结构!菌丝长
#
"
"
$
/
!直径
!
"
+
$
/
!几乎缺少锁状联合&菌套
类型为
H
和
?
&
=7=
!
外生菌根分子鉴定
经对供试的
#$
种不同类型外生菌根根尖材料
AGH
的提取!以及对其
_S`
扩增产物直接测序!并
运用
>;4?04@
的序列局部相似性查询系统"
?YH-E
#
和
TGLE.
!在
>;4?04@b.,?YbAA?Zb_A?)
个
AGH
序列数据库中搜索与所测
AGH
序列相似的序
列!并进行分析比较&查询结果如下"表
#
#&
本研究分别利用了
>;4?04@
和
TGLE.
数据
库进行了比对!由上表比对结果可以看出!与
>;4(
?04@
数据库中序列相似性都达到
%+[
以上!只有
类型
E
#!
相似性仅有
F"[
!但通过与
TGLE.
数据
库比对确定为阿尔卑斯地杯菌"
;",
(
<.0&%

./"
#%
其次!由于菌根类型
E
F
和
E
##
未能提出其总
AGH
!
另外!本研究中根据其外生菌根形态类型并参照
H
I
;J;J
体视显微镜菌根图谱和
K0<
I
菌根图谱对
未能获得
AGH
数据的类型进行了分类鉴定!其中
类型
E
F
和
E
##
分别鉴定为荷顿氏疣柄牛肝菌"
="2(
2./$7),%,

$0
#和白桦外生菌根真菌一种"
!"#$%&-9
表
<
!
外生菌根根尖
1+L
区段
BC7
序列
MN7L+
比对结果
E0C2;#
!
AGHD;
X
<;48;?YH-EJ;D<2BD93BQ;LE-J;
I
19493AGH;WBJ08B;=3J9/.S,J99BB1
R
D
类型
.S,
B
5R
;
碱基大小
EC
R
>;4?04@
088;DD194497
比对结果
S29D;DB?YH-E/0B8Q
"
088;DD1944#
L4>;4?04@ L4TGLE.=0B0C0D;
鉴定结果
S20DD131;=0D
E
#
*+ NZF"$%#
B/2$%#$-"6"2#,7
(
2,--).>&
"
+,-#./&-.$0
#
.T!+F*7#
"
%F[
#
+,-#./&-.$00$3#,-A$0
"
#"%)C1BD
#
TA?""!)""
+,-#./&-.$00$3#,-A$0
E
!
F$! NZF"$%$!
+"/,2,22$7
@
",

).%$7
.T)%F*$"7#
"
%%[
#
+"/,2,22$7
@
",

).%$7 +"/,2,22$7
@
",

).%$7
E
$
*"# NZF"$%!
T48<2B5
89JJQ1V0
"
L498
5
C;
#
HZF%$!*7#
"
%*[
#
1/,2
(
3"%".,2"

)&%&
"
++!C1BD
#
TA?"""+$
1/,2
(
3"%".,2"

)&%&
E
)
+" NZF"$%$
T48<2B5
89JJQ1V02
3<4
I
"
%F[
#
:$3"--$
?
$7
"
$**C1BD
#
TA?"""%%+
:$3"--$
?
$7
E

++# NZF"$%)
T48<2BKM++*F%#7#
#
"
%F[
#
4"3&2./&6.7.#.2&
"
*)$C1BD
#
TA?"""%*)
4"3&2./&6.7.#.2&
E
+
++% NZF"$%
5.%,6"-7&
?
&%%&<
AM#*%#!7#
"
%F[
#
5.%,6"-7&
?
&%%&<
"
%#"C1BD
#
TA?""#+#)
5.%,6"-7&
?
&%%&<
E
*
+$F NZF"$%+
+,-#./&-.$0%&/.
@
"-
HO++%+++7#
"
%%[
#
+,-#./&-.$0%&/.
@
"-
"
##++C1BD
#
TA?""!!!$
+,-#./&-.$0%&/.
@
"-
E
F
="22./$7),%,

$0 ="22./$7),%,

$0 ="22./$7),%,

$0
E
%
*"! NZF"$%* :$3"-D
R
7H?$)+*7#
"
%+[
#
:$3"-6-
(
,

).%$7
"
)*C1BD
#
TA?""!$"+
:$3"-6-
(
,

).%$7
E
#"
+$F NZF"$%F
+,-#./&-.$0)"7.#-.2)$0
AM"%*F*"7#
"
%%[
#
+,-#./&-.$02,7

#$%$0
"
##!!C1BD
#
TA?""!#%F
+,-#./&-.$0)"7.#-.2)$0
E
##
!"#$%&-).>&%$#",

.//&#& !"#$%&-).>&%$#",

.//&#& !"#$%&-).>&%$#",

.//&#&
E
#!
+$! NZF"$%% C).>./&$/6$%&#".T$)+%!7#
"
F"[
#
;",
(
<.0&%

./"
"
$"*C1BD
#
TA?"""%%#
;",
(
<.0&%

./"
E
#$
*$* NZF"$%+" 8"3"%,7&2&A.

"0.T*"#+$7#
"
%F[
#
8"3"%,7&2&A.

"0
"
#!*C1BD
#
TA?""$#F*
8"3"%,7&2&A.

"0
!!
注$
E
#
"
E
#$
分别代表亚野丝膜菌土生空团菌光苞丝盖伞橙黄块菌双系菌丝蜡壳耳梭形革菌亚洲丝腊菌荷顿氏疣柄牛肝菌喜栎块菌半被毛丝膜
菌白桦外生菌根真菌一种阿尔卑斯地杯菌美柄滑菇&
G9B;
$
E
#
"
E
#$
14DB04=93+,-#./&-.$00$3#,-A$0
!
+"/,2,22$7
@
",

).%$7
!
1/,2
(
3"%".,2"

)&%&
!
:$3"--$
?
$7
!
4"3&2./&6.7.#.2&
!
5.%,6"-7&
?
&%%&0
!
+,-#./&-.$0
%&/.
@
"-
!
="22./$7),%,

$0
!
:$3"-6-
(
,

).%$7
!
+,-#./&-.$0)"7.#-.2)$0
!
"#$%&-).>&%$#",

.//&#&
!
;",
(
<.0&%

./"
!
8"3"%,7&2&A.

"0
!
J;D
R
;8B1U;2
5
7
$#!!
##
期
!!!!!!!!!!!!
樊永军!等$内蒙古地区白桦外生菌根形态类型及分子鉴定
).>&%$#",

.//&#&
#%由以上鉴定结果可知!与内蒙
古地区白桦共生的外生菌根真菌共有
#$
个种!分别
来自于丝膜菌属丝盖伞属蜡壳耳属毛革菌属滑
菇属和空团菌属块菌属地怀菌属&
$
!
讨
!
论
本研究中在对白桦外生菌根外部形态特征分类
的基础上!创造性地利用剥离菌根外菌套的解剖学
手段对所分离的菌根类型从形态学和解剖学角度进
行了分类鉴定和描述!并结合分子生物学方法!利
用真菌特有引物
LE-#N
和
LE-)
!在
_S`
扩增的基
础上对所分类的
#$
个类型的外生菌根真菌
JAGH
的
LE-
区段进行碱基序列测定%经对所测序列运用
局部相似性查询系统"
?YH-E
#与国家生物技术信
息中心"
GS?L
%
QBB
R
$++
:::748C1742/741Q7
I
9U
#的
>;4?04@
数据库和
TGLE.
"
QBB
R
$++
<41B;7#进
行比对!都已鉴定到种&其中!担子菌
*
种!子囊菌
)
种!分别来自于丝膜菌属丝盖伞属蜡壳耳属毛
革菌属滑菇属和空团菌属块菌属地怀菌属!而类
型
E
F
和
E
##
未能提出其总
AGH
!根据其外生菌根
形态类型并参照
H
I
;J;J
体视显微镜菌根图谱和
K0<
I
菌根图谱进行比较!分类鉴定为荷顿氏疣柄
牛肝菌和白桦外生菌根真菌一种&总体上来看!在
内蒙古地区与白桦共生的外生菌根真菌多样性较
高!这是与该地区干旱半干旱环境条件相适应的&
在所分离
#$
种菌根类型中!菌根系统从叉状分
支到单轴羽状单轴金字塔形及珊瑚状分支!颜色范
围由近白色经乳白色到褐色及土生空团菌"
+"/,9
2,22$7
@
",

).%$7
#的黑色!本研究认为水分土壤
及其他环境条件好的区域!其外生菌根生长的比较
粗壮外延菌丝多且发达根状菌索明显!而菌根的
颜色外延菌丝的形态菌套表面的组织学特征等是
由与树种共生的外生菌根真菌自身生物学特征来决
定!而菌根的分支特征可能是由其宿主树种来决定&
土生空团菌形成的外生菌根!无论在哪一种寄
主上!都有一些共同的特征!仅根据菌根的外观形态
特征!就可以很容易地作出鉴定&本研究中!根据对
其在不同树种上形成的外生菌根的宏观特征及分子
测序鉴定!几个树种上该菌外生菌根及与前人所作
的研究关于该菌在其他植物上形成的菌根特征都相
符!说明该菌的外部形态特征及菌核的特征不受寄
主种类的影响!而是由其真菌本身来决定的&
参考文献!
)
#
*
!
-,LEK-.
!
.`HAAZ7,
5
89JJQ1V02-
5
/C19D1D
)
,
*
7-04A1;
I
9
$
H80=;/18_J;DD
!
""F
$
!$&)+7
)
!
*
!
cKH^ cK
"赵
!
忠#!
,Hde
"马刊欣#!
ATHGHH
"段安安#
7`;D;0J8Q94B
5R
;D04=;8929
I
18028Q0J08B;J1DB18D93;8B9/
5
89JJQ1V0935,

9
$%$0#,7"/#,0&
)
Z
*
742."/#.&4.%A&"4./.2&"
"林业科学#!
#%%$
!
=J
"
#
#$
#!&#F
"
14SQ14;D;
#
7
)
$
*
!
EHG> ,
"唐
!
明#!
SK.GK
"陈
!
辉#
7-B<=
5
94/9J
R
Q
5
929
I5
!
040B9/
5
04=B0W093
R
9
R
20J
)
Z
*
*D2#&5"6,%,
@
.2&4./.2&
"土壤学报#!
#%%)
!
$#
$
#**&#F#
"
14SQ14;D;
#
7
)*
!
SK.GK
"陈
!
辉#!
EHG>,
"唐
!
明#
7H=U048;D14/
5
89JJQ1V02J;D;0J8Q94
R
9
R
20J
)
Z
*
*42."/#.&4.%A&"4./.2&"
"林业科学#!
#%%*
!
>>
"
!
#$
#F$&#F*
"
14SQ14;D;
#
7
)

*
!
>^ G>,M
"弓明钦#!
PHG>NcK
"王凤珍#!
SK.GO
"陈
!
羽#!
"#&%7,
5
89JJQ1V02=;
R
;4=;48
5
04=1498<204B;33;8BD94BQ;
I
J9:BQ93
!"#$%&&%/,.6"0D;;=214
I
D
)
Z
*
*E,-"0#C"0"&-2)
"林业科学研究#!
"""
!
<>
"
#
#$
F&#)
"
14SQ14;D;
#
7
)
+
*
!
Z^ G.-,A
!
AT` HYYA,
!
"#&%7.8B9/
5
89JJQ1V02=1U;JD1B
5
94!"#$%&

&
(
-.
?
"-&04=50"$6,#0$
@
&7"/>."0..D;;=214
I
D
I
J9:414BQ;
I
J;;4Q9R
204B;=14D14
I
2;(D
R
;81;D04=/1W;=
R
29BD14D9)
Z
*
*+&/9
?
,-9-"0*
!
#%%*
!
=H
"
##
#$
#F*!&#FF%7
)
*
*
!
-L,H` A-P
!
, Y^LGH`
!
-,LEKZ.7-Q0J;=89/
R
0B1C121B
5
93;8B9/
5
89JJQ1V0;9450"$6,#0$
@
&7"/>."0..04=!"#$%&

&
(
-.
?
"-&D;;=(
214
I
D
I
J9:414/1WB)
Z
*
7+&/9
?
,-9-"0*
!
#%%*
!
=H
"
$
#$
$#&$)!7
)
F
*
!
YL>Y
"李桂兰#!
,HAO
"麻德业#
7.8B9/
5
89JJQ1V0239J/0B19414D;;=214
I
D93!*

%&#
(
)
(
%%&-<@7
)
Z
*
7F,$-/&%,
?
4)&/<.D
@
-.2$%#$-&%
B/.A"-0.#
(
"山西农业大学学报#!
""!
!
==
"
!
#$
#!*&#!F
"
14SQ14;D;
#
7
)
%
*
!
H>.` .` `7SQ0J08B;J1V0B19493;8B9/
5
89JJQ1V0
)
Z
*
*G"#),60G.2-,3.,%
!
#%%#
!
$
$
!&*$7
)
#"
*
!
H>.` .` `7S9295
89JJQ1V0;
$
#DB
"
#$BQ=;21U;J
5
7.14Q9J4(f;J20
I
!
-8Q:gC1D8Q>/h4=
!
#%%*&!""+7
)
##
*
!
KHT>L
!
_` LE-SKd7.8B9/
5
89JJQ1V02B
5R
;D93D
R
J<;;
"
5.2"&&3."0SY7@0JDB7
#
14BQ;?204@39J;DB
)
Z
*
7D7.2-,02,

.2&%&%&0
!
#%%!
$
*#&
F%7
)
#!
*
!
ZHdTS-.
!
d^ fiS->,
!
-c.AYHO>
!
"#&%7,9J
R
Q929
I
180204=/92;8<20J=1U;JD1B
5
04=0C<4=048;93B9/;4B;291=;8B9/
5
89JJQ1V0;14
CJ90=(2;0U;=39J;DBD93BQ;K<4
I
0J104_2014
)
Z
*
7G
(
2,--).>&
!
""
!
#
$
)%&)*"7
)
#$
*
!
>H` A.-,
!
?` TG-EA7S9//<41B
5
DBJ<8B5
89JJQ1V023<4
I
11405./$07$-.2&#&39J;DB
$
0C9U;(04=C;29:(
I
J9<4=U1;:D
)
Z
*
*
+&/*F*!,#*
!
#%%+
!
H?
"
#"
#$
#*!&#F$7
)
#)
*
!
>H` A.-,
!
?` TG-EA7LE-
R
J1/;JD:1BQ;4Q048;=D
R
;813181B
5
39JC0D1=19/
5
8;B;D0
RR
2180B194B9BQ;1=;4B13180B19493/
5
89JJQ1V0;04=
J)
Z
*
7G,%*H2,%*
!
#%%$
!$
##$&##F7
)
#
*
!
PKLE.EZ
!
?` TG-E
!
Y..-
!
"#&%7H/
R
213180B19404==1J;8BD;
X
<;4814
I
933<4
I
02J1C9D9/02` GH
I
;4;D39J
R
Q
5
29
I
;4;B18D
)
,
*++
LGGL-
,H
!
>.YNHGAAK
!
-GLG-dOZZ7_S` _J9B9892D
$
0
I
<1=;B9/;BQ9=D04=0
RR
2180B194D7H80=;/18
!
G;:O9J@
!
#%%"
$
#&$!!7
)
#+
*
!
NHGOZ
"樊永军#!
OHGP
"闫
!
伟#!
PHG>YO
"王黎元#
7,9J
R
Q929
I
1802B
5R
;04=/92;8<20J1=;4B13180B19493;8B9/
5
89JJQ1V0;945.9
2"&2-&00.
?
,%.&14K;204,9<4B014
)
Z
*
742."/#.&4.%A&"4./.2&"
"林业科学#!
"##
!
?H
"
+
#$
#"F&##$
"
14SQ14;D;
#
7
)#!!
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
$$
卷
!!
图版
#!
白桦外生菌根外部形态结构图"
#

$

*

%

##

#$

#

#*

#%

!#

!$

!
#"
\)
#和解剖结构图"
!

)

+

F

#"

#!

#)

#+

#F

!"

!!

!)

!+
#"
\)""
#
#

!7
亚野丝膜菌菌根%
$

)7
土生空团菌菌根%


+7
光苞丝盖伞菌根%
*

F7
橙黄块菌菌根%
#"7
双系菌丝蜡壳耳菌根%
##

#!7
梭形革菌菌根%
#$

#)7
亚洲丝膜菌菌根%
#

#+7
荷顿氏疣柄牛肝菌菌根%
#*

#F7
喜栎块菌菌根%
#%

!"7
半被毛丝膜菌菌根%
!#

!!7
白桦外生菌根%
!$

!)7
阿尔卑
斯地杯菌菌根%
!

!+7
美柄滑菇菌根&
D&*2-
#!
,9J
R
Q929
I
18023;0B"
#
!
$
!

!
*
!
%
!
##
!
#$
!
#
!
#*
!
#%
!
#
!
$
!

#"
\)
#
04=040B9/18023;0B"
!
!
)
!
+
!
F
!
#"
!
#!
!
#)
!
#+
!
#F
!
"
!
!!
!
)
!
+
#"
\)""
#
9395
;JD93!"#$%&

%&#
(
)
(
%%&;8B9/
5
89JJQ1V0;
N1
I
7#
!
7+,-#./&-.$00$3#,-A$0;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7$
!
)7+"/,2,22$7
@
",

).%$7;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7
!
+71/,2
(
3"%".,2"

)&%&;8B9/
5
89J(
JQ1V0;
%
N1
I
7*
!
F7:$3"--$
?
$7;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7%
!
#"74"3&2./&6.7.#.2&;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7##
!
#!7EQ;/9J
R
Q929
I
180204=040B9/18023;0(
B?
&%%&<;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7#$
!
#)7+,-#./&-.$0%&/.
@
"-;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7#
!
#+7="22./$7),%,

$0;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7
#*
!
#F7:$3"-6-
(
,

).%$7;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7#%
!
"7+,-#./&-.$0)"7.#-.2)$0;8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7!#
!
!7!"#$%&-).>&%$#",

.//&#&;8B9/
5
(
89JJQ1V0;
%
N1
I
7!$
!
)7;",
(
<.0&%

./";8B9/
5
89JJQ1V0;
%
N1
I
7!
!
+78"3"%,7&2&A.

"0;8B9/
5
89JJQ1V0;7
#!!
##
期
!!!!!!!!!!!!
樊永军!等$内蒙古地区白桦外生菌根形态类型及分子鉴定