全 文 :书辽宁省刺萼龙葵入侵区和未入侵区
土壤真菌多样性研究
曲波1,2,祝明炜1,杨红1,李楠1,陈旭辉1,张国良3,付卫东3,李天来2
(1.沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁 沈阳110161;2.设施园艺省部共建教育部重点实验室 沈阳农业大学,
辽宁 沈阳110161;3.中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所,北京100081)
摘要:2008-2009年,对辽宁省刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)以及未入侵区(Ⅱ)进行了选择性的取土和抽样调查。对采集
的150份土样用平板法培养,经分离、纯化共鉴定的真菌分属30个属,其中刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)21个属。通过计
数统计发现在刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)土壤真菌的各种类群中,以青霉属、曲霉属、木霉属、毛霉属、根霉属、镰孢菌属、
枝顶孢属种类较多,为该区的优势类群。根据Jaccard相似性指数原理,刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)土壤
真菌群落的相似性指数犆犼 值为0.50~0.75,属于中等相似水平,其真菌多样性差异并不显著。从土壤真菌的角度
分析,刺萼龙葵向未入侵区(Ⅱ)扩散蔓延的可能性较大。
关键词:刺萼龙葵;土壤真菌;多样性
中图分类号:S154.3;S451 文献标识码:A 文章编号:10045759(2011)03029806
刺萼龙葵(犛狅犾犪狀狌犿狉狅狊狋狉犪狋狌犿)又名堪萨斯蓟、黄花刺茄[15],是20世纪80年代入侵我国的恶性杂草,首次发
现是在辽宁的朝阳地区[6,7],种子主要通过河流、交通运输进行传播[8,9]。现已侵入辽宁、吉林、河北、北京、甘肃、
新疆等省市,并给当地生态环境和人类健康造成严重危害[7,10,11]。在辽宁省主要分布在朝阳、阜新、建平、沈阳、
大连地区[5]。因此,为防治刺萼龙葵的迅速蔓延,对其进行全面研究意义重大。
目前,国内外一些学者对刺萼龙葵主要是从形态学特征、生理特性、环境危害及风险评估等方面进行研究。
本试验主要对刺萼龙葵入侵与土壤真菌多样性的的关系展开系统研究,通过对比入侵区与未入侵区的土壤真菌
多样性,从土壤真菌角度分析探讨刺萼龙葵扩散到其他区的可能性,以期为防治刺萼龙葵提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 样品的采集与调查
2008和2009年7-9月分别在辽宁省刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)以及未入侵区(Ⅱ)进行了选择性的取土和抽样
调查。入侵区(Ⅰ)的土样取自朝阳刺萼龙葵入侵比较严重的区域。在未入侵区(Ⅱ)主要沿大凌河、小凌河等河
流沿岸以及国道、高速路沿边荒地进行取土调查,且所选荒地的植被及土壤类型基本一样(表1)。
1.2 取土方法
在每个取土地点分别做5个样方,且用GPS记录取土地点的地理位置(表1),每个样方大小均为10m×10
m,样方间距离大于10m。用土钻(直径3cm)钻洞取0~20cm层的土样[12],在入侵区(Ⅰ)钻洞取刺萼龙葵根际
周围的土壤,在未入侵区(Ⅱ)沿样方对角线随机钻洞取土。每个样方钻16个洞且混成1个土样,这样每个样方
就得到1个土样。去除石块、植物根系和土壤动物等,置于聚乙烯袋中,立即带回实验室过2mm筛。每个样方
的土样取约50g,放于4℃冰箱中保存[13],用于可培养土壤真菌类群分析,并在2周内完成真菌的数量测定[12]。
1.3 土壤真菌的培养
采用平板法对土壤真菌进行分离培养:称取0.0015~0.0150g土样置于培养皿中,分散、粉碎,后将已熔化
并冷却至45℃的孟加拉红培养基倒入培养皿中,旋转以使土粒分散,置于25℃恒温培养箱中培养,为抑制细菌在
298-303
2011年6月
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA
第20卷 第3期
Vol.20,No.3
收稿日期:20100428;改回日期:20100602
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(20110327)和沈阳农业大学博士后基金项目(74739)资助。
作者简介:曲波(1972),女,吉林辉南人,副教授,博士。Email:syau_qb@163.com
孟加拉红培养基里加入少许链霉素。5d后,进行菌落计数和记录,随后转入马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基进
行纯化、保存,待进一步的观察和鉴定[1316]。对每个样方的土样进行3次重复培养、分离及纯化,培养的真菌鉴定
到属。
表1 土壤采集信息
犜犪犫犾犲1 犜犺犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狅狀狅犳犮狅犾犲犮狋犻狀犵狊狅犻犾
取土地点
Thesiteofcolectedsoil
地理位置
Location
样方区域
Plotregions
样方数
Plotnumbers
样地描述
Descriptionofplot
朝阳市Chaoyangcity 41°32′04″N,120°27′15″E
入侵区
Invadedarea(Ⅰ)
25
该区为大凌河沿岸及农田旁的荒地,基本为
刺萼龙葵的单一群落
InvadedarealocatedinthewastelandofDa
lingriversideandfarmlandside,wherewere
singlecommunityof犛.狉狅狊狋狉犪狋狌犿
北票Beipiaocounty 41°40′41″N,121°01′15″E
建平县Jianpingcounty 41°29′35″N,119°28′00″E
朝阳县Chaoyangcounty 41°22′22″N,120°04′28″E
朝阳县Chaoyangcounty 41°18′30″N,119°58′49″E
葫芦岛市 Huludaocity 40°46′40″N,119°50′57″E 辽西区
未入
侵区
Non
inva
ded
area
(Ⅱ)
125
该区为辽西、辽东、辽南、辽北地区的公路、河
岸、旅游区、市郊、港口、船厂、高速公路出口、
农田、水库等旁的荒地。主要有一些菊科、唇
形科、蓼科、禾本科、藜科等的一些杂草,如刺
苍耳、益母草、灰绿藜等
Noninvadedarealocatedinthewastelandof
roadside,riverside,touristarea,suburb,
port,andreservoirinthewest,east,south,
andnorthareaofLiaoningprovince,and
thereweresomeplantsofCompositae,Lami
aceae,Polygonaceae,Poaceae,Chenopodi
aceae,inthisarea,suchas犡犪狀狋犺犻狌犿,犔犲
狅狀狌狉狌狊,犆犺犲狀狅狆狅犱犻狌犿犵犾犪狌犮狌犿andsoon
葫芦岛市 Huludaocity 40°00′57″N,119°54′14″E Western
凌海市Linghaicity 41°10′45″N,121°23′06″E Liaoning
盘锦市Panjincity 41°16′04″N,121°58′36″E area(A)
盘锦市Panjincity 41°02′58″N,122°11′23″E
平顶山公园Pingdingshanpark 41°15′15″N,123°47′37″E 辽东区
本溪动物园Benxizoo 41°16′54″N,123°46′47″E Eastern
本溪市Benxicity 41°18′17″N,123°52′43″E Liaoning
本溪市Benxicity 41°15′46″N,124°00′35″E area(B)
本溪市Benxicity 41°14′58″N,124°05′49″E
营口市 Yingkoucity 40°23′13″N,122°12′25″E 辽南区
鲅鱼圈高速路Bayuquanhighway 40°16′03″N,122°10′32″E Southern
大连市 Daliancity 40°16′03″N,122°10′32″E Liaoning
普兰店Pulandiancity 39°26′53″N,121°51′26″E area(C)
大连市 Daliancity 39°29′38″N,122°23′56″E
八面城镇Bamianchengtown 43°11′34″N,124°01′20″E 辽北区
兴隆山水库Xinglongshanreservoir 42°26′29″N,122°33′54″E Northern
哈尔套乡 Haertaotown 42°26′29″N,122°33′54″E Liaoning
阜新市Fuxincity 42°04′41″N,121°28′40″E area(D)
阜新市Fuxincity 42°02′00″N,121°20′37″E
1.4 数据分析
1.4.1 真菌计数方法 真菌培养5d后开始统计并记录真菌菌落数量,对入侵区(Ⅰ)的土壤真菌菌落数量进行
比较分析,分离率计算公式[13]:
真菌分离率(%)=
某一分离真菌的菌落数
所有分离真菌菌落总数×100
1.4.2 真菌多样性分析 采用物种个体数量(犖)、物种数(犛)、Shannonwiener的多样性指数(犎′)、Pielou的均
匀度指数(犑′)、Margalef丰富度指数(犈)、Jaccard相似性指数(犆犼)对土壤真菌群落结构特征进行分析[1720]。
犎′=-∑犘犻ln犘犻,犑′=犎′/ln犛,犈=(犛-1)/ln犖
式中,犘犻=狀犻/犖,为第犻种占总个体数犖 的比例。犛为物种数,犖 为个体总数。
992第20卷第3期 草业学报2011年
犆犼=犼/(犪+犫-犼)
式中,犪,犫分别为2种生境类型中的物种数,犼为2种生境类型中共有的物种数。根据Jaccard的相似性系数原
理,当犆犼为0~0.25时,为极不相似;犆犼为0.25~0.50时,为中等不相似;犆犼 为0.50~0.75时,为中等相似;犆犼
为0.75~1.00时,为极相似。
表2 不同样地区域土壤真菌菌落的数量及其分离率
犜犪犫犾犲2 犆狅犾狅狀狔狀狌犿犫犲狉犪狀犱犻狊狅犾犪狋犻狅狀狉犪狋犲狅犳狊狅犻犾犳狌狀犵犻犻狀狋犺犲犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪狉犲犪狊
属名Genus
Ⅰ
CN IR(%)
Ⅱ
A
CN IR(%)
B
CN IR(%)
C
CN IR(%)
D
CN IR(%)
附球菌属犈狆犻犮狅犮犮狌犿 1 0.58 0 0 1 0.44 0 0 0 0
丝核菌属犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪 0 0 0 0 1 0.44 1 0.52 1 0.63
脉孢菌属 犖犲狌狉狅狊狆狅狉犪 2 1.16 0 0 0 0 1 0.52 1 0.63
小克银汉属犆狌狀狀犻狀犵犺犪犿犲犾犾犪 4 2.33 3 1.84 3 1.34 5 2.64 4 2.54
被孢霉属 犕狅狉狋犻犲狉犲犾犾犪 4 2.33 4 2.45 5 2.24 5 2.64 2 1.27
毛霉属 犕狌犮狅狉 15 8.77 18 11.04 17 7.62 15 7.93 14 8.91
根霉属犚犺犻狕狅狆狌狊 15 8.77 13 7.97 12 5.38 10 5.29 11 7.00
球梗孢属 犓犪犫犪狋犻犲犾犾犪 0 0 0 0 1 0.44 0 0 1 0.63
接霉属犣狔犵狅狉犺狔狀犮犺狌狊 1 0.58 2 1.22 0 0 0 0 1 0.63
毛壳属犆犺犪犲狋狅犿犻狌犿 2 1.16 0 0 3 1.34 1 0.52 0 0
腐霉属犘狔狋犺犻狌犿 3 1.75 2 1.22 4 1.79 3 1.58 3 1.91
节丛孢属犃狉狋犺狉狅犫狅狋狉狔狊 1 0.58 0 0 1 0.44 1 0.52 0 0
球壳菌属犛狆犺犪犲狉狅犱犲狊 0 0 1 0.61 2 0.89 1 0.52 0 0
枝顶孢属犃犮狉犲犿狅狀犻狌犿 9 5.26 8 4.90 15 6.72 12 6.34 10 6.36
链格孢属犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪 6 3.50 8 4.90 7 3.13 5 2.64 5 3.18
曲霉属犃狊狆犲狉犵犻犾犾狌狊 26 15.20 28 17.17 25 11.21 27 14.28 23 14.64
白僵菌属犅犲犪狌狏犲狉犻犪 0 0 0 0 4 1.79 3 1.58 1 0.63
枝孢属犆犾犪犱狅狊狆狅狉犻狌犿 3 1.75 5 3.06 8 3.58 10 5.29 6 3.82
弯孢属犆狌狉狏狌犾犪狉犻犪 1 0.58 1 0.61 2 0.89 0 0 1 0.63
镰孢菌属犉狌狊犪狉犻狌犿 10 5.85 12 7.36 22 9.86 19 10.05 15 9.55
粘帚霉属犌犾犻狅犮犾犪犱犻狌犿 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0.63
腐质霉属 犎狌犿犻犮狅犾犪 2 1.16 0 0 1 0.44 0 0 0 0
漆斑菌属 犕狔狉狅狋犺犲犮犻狌犿 2 1.16 1 0.61 3 1.34 2 1.05 2 1.27
拟青霉属犘犪犲犮犻犾狅犿狔犮犲狊 3 1.75 2 1.22 5 2.24 2 1.05 1 0.63
青霉属犘犲狀犻犮犻犾犾犻狌犿 31 18.13 28 17.17 36 16.14 30 15.87 27 17.19
帚霉属犛犮狅狆狌犾犪狉犻狅狆狊犻狊 0 0 0 0 2 0.89 1 0.52 1 0.63
木霉属犜狉犻犮犺狅犱犲狉犿犪 13 7.60 13 7.97 19 8.52 15 7.93 12 7.64
聚端孢属犜狉犻犮犺狅狋犺犲犮犻狌犿 0 0 0 0 0 0 1 0.52 0 0
轮枝菌属犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿 0 0 0 0 2 0.89 1 0.52 0 0
丝葚霉属犘犪狆狌犾犪狊狆狅狉犪 0 0 0 0 1 0.44 0 0 1 0.63
未定属犝狀犱犲犳犻狀犲犱犵犲狀狌狊 17 9.94 14 8.58 21 9.41 18 9.52 13 8.28
总计 Total 171 163 223 189 157
Ⅰ:入侵区Invadedarea;Ⅱ:未入侵区 Noninvadedarea;CN:菌落数Colonynumber;IR:分离率(%)Isolationrate;A、B、C、D分别代表辽西、辽
东、辽南、辽北抽样区域 A,B,C,Drespectivelyrepresentthewestern,eastern,southern,andnorthernLiaoningarea.
003 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.3
2 结果与分析
2.1 刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)土壤真菌群落组成分析
通过对刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)土壤真菌的培养,共分离鉴定出了约21个属的真菌(表2)。其中在土壤真菌的
各种类群中,以青霉属(犘犲狀犻犮犻犾犾犻狌犿)、曲霉属(犃狊狆犲狉犵犻犾犾狌狊)、木霉属(犜狉犻犮犺狅犱犲狉犿犪)、毛霉属(犕狌犮狅狉)、根霉属
(犚犺犻狕狅狆狌狊)、镰孢菌属(犉狌狊犪狉犻狌犿)、枝顶孢属(犃犮狉犲犿狅狀犻狌犿)种类较多,为该区的优势类群,分离率分别为
18.13%,15.20%,7.60%,8.77%,8.77%,5.85%和5.26%(表2)。
2.2 入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)土壤真菌相似性比较
通过比较入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)土壤真菌多样性,发现其相似性指数犎′以及土壤真菌群落均匀度犑′
相差不大。在未入侵区(Ⅱ)的各区中,辽东(B区)的土壤真菌丰富度指数高于其他区,辽中(E区)的土壤真菌丰
富度指数最低(表3)。表明入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)的土壤真菌多样性差异不显著(表3)。
通过比较入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)土壤真菌间相似性系数,发现刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)样
方的土壤真菌群落的相似性指数犆犼值为0.50~0.75(表4),处在中等相似水平。
表3 不同区域样地的土壤真菌群落多样性
犜犪犫犾犲3 犇犻狏犲狉狊犻狋狔犻狀犱犲狓狅犳狊狅犻犾犳狌狀犵犪犾犮狅犿犿狌狀犻狋犻犲狊犻狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪狉犲犪狊
样方区域Plotregions 犛(犖) 犎′ 犑′ 犈
入侵区Invadedarea(Ⅰ) 21(171) 2.60 0.85 3.88
未入侵区Noninvadedarea(Ⅱ)
辽西区 WesternLiaoningarea(A) 17(163) 2.47 0.87 3.14
辽东区EasternLiaoningarea(B) 26(223) 2.76 0.84 4.62
辽南区SouthernLiaoningarea(C) 23(189) 2.65 0.84 4.19
辽北区NorthernLiaoningarea(D) 23(157) 2.62 0.83 4.35
表4 Ⅰ与Ⅱ区土壤真菌群落相似性
犜犪犫犾犲4 犛犻犿犻犾犪狉犻狋狔犮狅犲犳犳犻犲犻犲狀狋狅犳狊狅犻犾犳狌狀犵犪犾犮狅犿犿狌狀犻狋犻犲狊犻狀Ⅰ犪狀犱Ⅱ犪狉犲犪狊
样方区域
Plotregions
未入侵区 Noninvadedarea(Ⅱ)
辽西区
WesternLiaoning
area(A)
辽东区
EasternLiaoning
area(B)
辽南区
SouthernLiaoning
area(C)
辽北区
NorthernLiaoning
area(D)
入侵区Invadedarea(Ⅰ) 0.72 0.67 0.62 0.62
未入侵区Noninvadedarea(Ⅱ)
辽西区 WesternLiaoningarea(A) 0.59 0.60 0.66
辽东区EasternLiaoningarea(B) 0.75 0.68
辽南区SouthernLiaoningarea(C) 0.70
3 讨论
综上所述,刺萼龙葵入侵没有使土壤真菌种类及数量产生明显的变化,可能分离出来的真菌大部分是腐生
菌,对刺萼龙葵的生长没有产生太大影响。钟艮平等[21]利用基因演算预测法(GARP)生态位模型预测刺萼龙葵
在中国的潜在分布区,认为辽宁地区刺萼龙葵适生的可能性较高,通过本研究,可能刺萼龙葵也适应了辽宁地区
的土壤真菌环境。因此,从真菌角度考虑,未入侵区(Ⅱ)也应存在着很大的入侵风险。
牛红榜和万方浩[12]对外来植物紫茎泽兰(犈狌狆犪狋狅狉犻狌犿犪犱犲狀狅狆犺狅狉狌犿)入侵的土壤微生物学机制的研究,发
现紫茎泽兰在重度入侵区土壤真菌数量较高,是轻度入侵区的2.2倍,是未入侵区的5.8倍,并进而提出了外来
103第20卷第3期 草业学报2011年
入侵植物自我促进式的土壤微生物学机制。加拿大一枝黄花(犛狅犾犻犱犪犵狅犮犪狀犪犱犲狀狊犻狊)、豚草(犃犿犫狉狅狊犻犪犪狉狋犲犿犻狊犻
犻犳狅犾犻犪)等入侵植物也存在这种自我促进的生长现象[22,23]。而通过本研究,刺萼龙葵入侵区(Ⅰ)与未入侵区(Ⅱ)
土壤真菌多样性差异并不明显,这可能与入侵植物自身特点及环境等因素有关,如根系分泌物及土壤理化性质
等,有些入侵植物的根能够释放一些化感物质和根系分泌物,从而对入侵植物根系的微生物群落产生影响。如北
美矢车菊(犆犲狀狋犪狌狉犲犪犱犻犳犳狌狊犪)根系可以释放具有杀菌作用的化感物质8羟基喹啉,从而引起土壤微生物群落的
变化[23,24]。是否刺萼龙葵的根系也能释放化感物质从而对土壤微生物群落产生影响还应进一步的研究。
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203 ACTAPRATACULTURAESINICA(2011) Vol.20,No.3
犃狊狋狌犱狔狅狀狊狅犻犾犳狌狀犵犪犾犱犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犛狅犾犪狀狌犿狉狅狊狋狉犪狋狌犿犻狀狏犪犱犲犱犪狀犱
狀狅狀犻狀狏犪犱犲犱犪狉犲犪狊犻狀犔犻犪狅狀犻狀犵狆狉狅狏犻狀犮犲
QUBo1,2,ZHUMingwei1,YANGHong1,LINan1,CHENXuhui1,
ZHANGGuoliang3,FU Weidong3,LITianlai2
(1.ColegeofBiologicalTechnology,ShenyangAgriculturalUniversit,Shenyang110161,China;2.Key
LaboratoryofProtectedHorticulture,ShenyangAgriculturalUniversity,MinistryofEducation,
Shenyang110161,China;3.InstituteofEnvironmentandSustainableDevelopmentin
AgricultureofChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Soilfungaldiversityandnumberswereanalysedin犛狅犾犪狀狌犿狉狅狊狋狉犪狋狌犿invadedandnoninvadedareas
inLiaoningprovincefrom2008to2009.Onehundredandfiftysoilsampleswerecolectedandculturedwith
thesoilplatemethod.Althespecieswereidentifiedanddividedinto30genera,ofwhichPenicilium,Asper
gilus,Trichoderma,Mucor,RhizopusandFusariumwerethedominantgroupsofthe犛.狉狅狊狋狉犪狋狌犿invadedar
eas.AccordingtotheJaccardindexofsimilaritytheory,thesimilaritylevelofthesoilfungalcommunitieswas
mediumbetweentheinvadedandnoninvadedareas.犆犼valueswerebetween0.50and0.75.Soilfungaldiversi
tywasnotsignificantlydifferentbetweeninvadedandnoninvadedareas.Fromthesoilfungalflora,itisprob
ablethat犛.狉狅狊狋狉犪狋狌犿spreadtononinvadedareas.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犛狅犾犪狀狌犿狉狅狊狋狉犪狋狌犿;soilfungus;diversity
303第20卷第3期 草业学报2011年