全 文 ：第 !" 卷 第 # 期
$ % & % 年 # 月
林 业 科 学
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/012!"!+02#
-345!$ % & %
响应面法优化黄粉虫幼虫油脂提取工艺#
付6勇&6严善春&6李小平$
"&5东北林业大学林学院 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室6哈尔滨 &9%%!%# $5大兴安岭塔河林业局森林保护站6塔河 &"9$%%$
摘6要!6以黄粉虫幼虫为原料!石油醚作溶剂提取其油脂!并利用响应面分析法对在单因素试验基础上选取的提
取温度%提取时间和提取料液比 7 个主要影响因素进行提取工艺优化!得出黄粉虫幼虫油脂提取的最佳工艺条件
为’ 提取温度 #82A b%提取时间 &%2& K%提取料液比 $p9%!在此提取条件下油脂的实际提取率可达 7&29&o!比单
因素试验最高提取率高出 $27!o& 利用响应面分析法可优化黄粉虫幼虫油脂提取工艺!得到理论最佳提取条件!
验证结果表明该方法科学%高效&
关键词’6资源昆虫# 黄粉虫# 油脂# 提取# 响应面分析
中图分类号! ,’$$!2!666文献标识码!-666文章编号!&%%& C8!##"$%&%#%# C%&$9 C%9
收稿日期’ $%%A C%! C$%# 修回日期’ $%%A C&$ C%7&
基金项目’ 教育部国家科技基础条件平台建设专项"$%%9EZ$&&%9$ &
#严善春为通讯作者& 响应面数据分析系在东北林业大学林木遗传育种教研室夏德安老师指导下完成!谨致谢忱&
B&9’(*R/&‘$0*#*[-0*"(1"%,J0%-90*(6 G+#+’3"& .&("5&3V*$*<
84 H&)$"()&2/%1-9&Z&0’"<"."64
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58)0%-90’6,0LVHTHLGQ1X3PL1H?HS 0VRLP03RTLHGPLTQP! ?LQR01L3ULQKLRYFP3PLS FPHU?RL4GFGQQ0LgQRFTQ1H?HS VR0U
;+$+@*&)3)A&-)*5-HUHG4FQ0?QHUH[FQH0G 0VQKLLgQRFTQH0G 0V;!3)A&-)*1H?HS! 0GLjVFTQ0RQLPQPYFPVHRPQ1X3PLS RLP?LTQHWL1X
Q0QLPQQLU?LRFQ3RL! S3RFQH0G FGS P01WLGQfUFQLRHF1RFQH0LVLTQ5-GS QKLG 0G QKLIFPHP0V?RLWH03PRLP31QPFGS FTT0RSHG4Q0
QKLD0gDLGKG\LG QLPQSLPH4G ?RHGTH?1LP! QKLU0SL10VRLP?0GPLP3RVFTLULQK0S0104X">’<$ YHQK 7 VFTQ0RPFGS 7 1LWL1P
YFPFS0?QLS5>LP?0GPLP3RVFTLFGS T0GQ03RYLRLVHGF1X4RF?KLS YHQK QKLLgQRFTQH0G RFQL0V;!3)A&-)*1H?HS FPQKLRLP?0GPL
WF13L5,KLRLP31QPPK0YLS QKFQQKL0?QHU3U T0GSHQH0GP0V;!3)A&-)*1H?HS LgQRFTQH0G YLRL’ LgQRFTQH0G QLU?LRFQ3RL’
#82A b! LgQRFTQH0G QHUL’ &%2& K! LgQRFTQH0G RFQH00VUFQLRHF1Q0P01WLGQ’ $p9%5,KLRLF1LgQRFTQH0G RFQL0V;!3)A&-)*1H?HS
3GSLRQKLPLT0GSHQH0GPYFP3? Q07&29&o! FGS HQYFP$27!o KH4KLRQKFG QKLILPQRLP31Q0V0GLjVFTQ0RQLPQP5,LTKGH43LP0V
1H?HS LgQRFTQH0G YLRLHU?R0WLS IXRLP?0GPLP3RVFTLULQK0S0104X! QKLLgQRFTQH0G RFQLYFPKH4KLR5,KLRLP31QP344LPQQKFQQKL
GLYULQK0S HPLVLTQHWLFGS LT0G0UHTF15
:&4 ;"%<)’6RLP03RTLHGPLTQ# ;+$+@*&)3)A&-)*# 1H?HS# LgQRFTQH0G# RLP?0GPLP3RVFTLULQK0S0104X
66黄粉虫";+$+@*&)3)A&-)*$!也叫大黄粉虫%黄粉
甲!俗 称 面 包 虫! 属 昆 虫 纲 " )PLTQF$! 鞘 翅 目
"(1L0?QLRF$!拟步行虫科 ",LGLIRH0GHSFL$!粉虫属
"高爱华等!$%%9$!该虫在中国分布广!资源丰富!
容易养殖!成本低!是一种生理%遗传学常用的试验
材料!同时也是极具开发潜力的重要资源昆虫& 黄
粉虫具有丰富的营养成分!味道鲜美!素有(动物蛋
白饲料之王)的称誉 "王文亮等!$%%9#$%%8$!而且
有研究发现该虫经诱导能产生抗菌肽 "黄文等!
$%%9# 王立新等!$%%A$!这些抗菌物质对多种植物
病原菌有抑菌作用"王小平等!&AA#$!因此!是值得
开发利用的一种昆虫& 长期以来!由于缺乏对黄粉
虫立体开发利用的系统研究!对黄粉虫的利用仅限
于食品加工%饲料方面!使大量的营养资源被浪费&
在我国对昆虫资源的产业化利用相对集中在以
蛋白质"陆婕等!$%%8# 吴玛莉等!$%%## 严善春等!
$%%9$%氨基酸类和碳水化合物类为主体的功能性
产品的开发利用上 "刘高强等! $%%## 王敦等!
$%%!$!昆虫油脂及脂肪酸类的功能性产品有很大
的发展空间&
黄粉虫幼虫油脂是一种优良的油脂资源"万本
屹等!$%%&$!但目前国内外有关黄粉虫油脂的研究
林 业 科 学 !" 卷6
仅有少量报道!对其脂肪酸的分析%分离及功能性的
研究也处于初级阶段& 本文针对黄粉虫幼虫油脂的
提取工艺进行探索!是充分开发利用黄粉虫资源的
基础!对提高黄粉虫的经济价值和营养价值有重要
意义&
&6材料与方法
=>=?材料与备品
黄粉虫 &% 龄幼虫!哈尔滨市售# 石油醚"天津
市百世化工有限公司!"% _A% b沸程$!分析纯&
索氏提取装置# J=&%% 型高速万能粉碎机"天
津市泰斯特仪器有限公司$# n’7"9<型电子分析
天平"MRLTHPF)GPQR3ULGQP.QS5f’YHQ[LR1FGS$# >*j9$-
型旋转蒸发器 "上海亚荣生化仪器厂$# ’@Dj$%%%
型循环水真空泵"郑州杜甫仪器厂$# E@;jA$!% 型
电热恒温鼓风干燥箱 "上海一恒科技有限公司$#
EZj’$" 型电热恒温水浴锅"上海森信实验仪器有限
公司$&
=>@?试验方法
&2$2&6油脂提取6黄粉虫幼虫)"% b热水致死)
"% b烘干至恒质量)万能粉碎机粉碎)幼虫干粉
" 4)&9% U.石油醚)索氏提取)旋转蒸发)粗油
脂& 油脂提取率 e"粗油质量 幼虫干粉质量 $
c&%%o&
&2$2$6单因素试验6以石油醚作溶剂"李孟楼等!
$%%"$!采用索氏提取法提取黄粉虫幼虫油脂!分别
考察提取温度%时间及料液比对油脂提取率的影响&
&2$276优化试验6采用响应面分析法!根据 D0g
DLGKG\LG 中心组合试验设计原理 "/F1wRHF+-#A5!
$%%"# 因素试验的基础上!确定提取温度%时间%料液比作
为中心组合试验因子&
=>A?数据分析
单因素试验数据分析采用 件# 优化试验数据分析使用 ’-’ ’XPQLUV0R=HGS0YP
A2%&
$6结果与分析
@>=?单因素对油脂提取率的影响
影响黄粉虫油脂提取率的因素很多!其中提取
温度%提取时间及提取料液比是比较主要的影响因
素!本研究在进行响应面分析前!先通过单因素试验
确定试验因素与水平&
$2&2&6温度对油脂提取率的影响6在提取时间 # K
条件下!分别考查 8%!89!#%!#9!A% b对油脂提取率
的影响!试验结果如图 & 所示&
图 &6不同提取温度对油脂提取率的影响
JH45&6*VLTQP0VLgQRFTQH0G QLU?LRFQ3RL0G LgQRFTQH0G RFQH0
从图 & 中可以看出!随着温度的升高!油脂的提
取率先上升后略有下降!在 #9 b时油脂提取率达到
最大& 温度影响提取率的主要原因是石油醚的沸腾
及循环!温度较低时石油醚的循环速度比较慢!随着
温度的升高提取粘度减小!扩散系数增加!循环速度
加快!提取率不断上升!但当温度过高时!导致石油
醚挥发!溶剂量减少!致使提取率不但没有继续上升
反而略有降低&
$2&2$6时间对油脂提取率的影响6在温度 #9 b条
件下!分别考查 !!"!#!&%!&$ K 对油脂提取率的影
响!试验结果如图 $ 所示&
图 $6不同提取时间对油脂提取率的影响
JH45$6*VLTQP0VLgQRFTQH0G QHUL0G LgQRFTQH0G RFQH0
从图 $ 可以看出!在提取时间低于 # K 时!虫油
提取率随时间的增加而迅速升高!这是由于随着时
间的增加!虫粉内的油脂随着石油醚的沸腾而不断
被提取出来!进入溶剂!当时间超过 # K!油脂提取率
不再上升!反而略有下降!可能是由于时间过长导致
油脂部分挥发所致& 因此!最佳提取时间为 # K&
$2&276料液比对油脂提取率的影响6称取黄粉虫
幼虫粉末 7!"!A!&$!&9 4!分别加入 &9% U.石油醚!
在提取时间 # K%温度 #9 b条件下!考查不同料液比
对油脂提取率的影响!试验结果如图 7 所示&
从图 7 可以看出!随着虫粉加入量的增加!提取
率先升高后降低& 在提取液用量确定的情况下!溶
质用量的增加提高了溶剂中虫油的浓度!减小了虫
粉与溶剂接触界面上的浓度差!从而降低了传质速
率!在一定范围内提油率减小!因而提取率偏低& 在
料液比为 $p9% 时提取效果最佳&
"$&
6第 # 期 付6勇等’ 响应面法优化黄粉虫幼虫油脂提取工艺
图 76不同提取料液比对油脂提取率的影响
JH4576*VLTQP0VLgQRFTQH0G UFQLRHF1Q01H]3HS 0G
LgQRFTQH0G RFQH0
@>@?响应面法优化幼虫油脂提取工艺
$2$2&6油脂提取方案和试验水平 6 根据 D0g
DLGKG\LG 的中心组合试验设计原理!综合前面单因
素试验所得结果!可以确定提取温度%时间%料液比
是对油脂提取率影响比较显著的因素!在单因素试
验的基础上!采用 7 因素 7 水平的响应面分析方法!
试验因素与水平设计见表 &&
表 =?中心组合试验因素水平编码表
B-8C=?!"<&<.&+&.)"1+-%*-8.&)"10’&9&(0%-.
9"#$")*0&&J$&%*#&(0-.<&)*6("!!U#
因素 JFTQ0R
水平 .LWL1
C& % &
<& 温度 ,LU5fb #% #9 A%
<$ 时间 ,HULfK " # &%
<7 料液比 $2$2$6响应面分析方案及结果6对黄粉虫幼虫油
脂提取工艺进行响应面分析的具体试验方案见表
$& &9 个试验分为析因点和零点!试验号 & _&$ 是
析因试验!&7 _&9 是中心试验& 其中析因点为自变
量取值在 <&!<$!<7 所构成的三维定点!零点区域为
中心点!零点试验重复 7 次!以估计试验误差&
表 @?中心组合试验设计与结果
B-8C@?!&(0%-.9"#$")*0&&J$&%*#&(0-.
<&)*6(-(<*0)%&)/.0)
试验序号
+05
<& <$ <7
油脂提取率
*gQFTQH0G RFQH0fo
& C& C& % &A2!9
$ & C& % $!28!
7 C& & % $82%8
! & & % 7%2!&
9 C& % C& $&2%"
" & % C& $!2A9
8 C& % & $72!$
# & % & $A2%&
A % C& C& &92!$
&% % & C& $A2!A
&& % C& & $$279
&$ % & & $A2"&
&7 % % % $#29"
&! % % % $A27&
&9 % % % $#2#$
66所得数据经 ’-’ 进行回归分析的结果见表 7&
以幼虫油脂提取率为响应值!经回归拟合后!得到回
归方程’
Pe$#2#A9 " :$2$"7 "% <& :!27$# 7& <$ :
&2"#7 #$<7 C&29!& &# <
$
& C&2A7" 8" <
$
$ C$28!! &$
<$7 C%2!#9 $A!<&<$ :%2!$" !8&<&<7 C&28%$ A!<$<7!
式中!P为黄粉虫幼虫油脂提取率!o# <& 为提取温
度!b# <$ 为 提 取 时 间! K# <7 为 提 取 料 液
比!4fU.& 66
表 A?油脂提取参数数学回归分析结果!
B-8CA?H&)/.0)"1%&6%&))*"(-(-.4)*)"1&J0%-90*"(1-90"%)1"%.*$*<&J0%-90*"(
方差来源 ’03RTL 自由度 EJ 平方和 ’’ 均方 <’ ( MRB( 显著性 ’H4GHVHTFGTL
<& & !%2AA& &#" $ !%2AA& &#" $ $!2&& %2%%! ! ##
<$ & &!A2#8! %9# $ &!A2#8! %9# $ ##2&9 %2%%% $ ##
<7 & $$2"#$ %A7 9 $$2"#$ %A7 9 &727! %2%&! 8 #
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线性项 .HGLFR 7 $&729!8 77# 8&2&#$ !!" !&2#8 %2%%% " ##
二次项 O3FSRFQHT 7 !!27%$ &&A &!28"8 787 #2"A %2%&A A #
交互项 (R0PP?R0S3TQ 7 &72$"A 9#9 !2!$7 &A9 $2"% %2&"! "
失拟项 .FT\ 0VVHQ 7 #2$&! %%7 $287# %%& &A2%# %2%9% $
纯误差 M3RLLRR0R $ %2$#8 %"7 %2&!7 97$
总误差 ,0QF1LRR0R 9 #29%& %"" &28%% $&7
66" (# )为显著"%2%& h8"%2%9 $ !(##)为极显著 "8"%2%& $ & (# ) ULFGPQKLSHVLRLGTLHPPH4GHVHTFGQFQQKL%2%9 1LWL1! (##) ULFGPQKL
SHVLRLGTLHPPH4GHVHTFGQFQQKL%2%& 1LWL15
8$&
林 业 科 学 !" 卷6
66由表 7 可知!上述回归方程在描述各因子与响
应值之间的关系时!其因变量和全体自变量之间的
线性关系显著 "R$ e%2A"A "$!响应值 "油脂提取
率$的变化与提取温度%时间和料液比相关显著或
极显著& 响应值与 <&<&%<$<& 和 <7<& 相关不显著!与
<7%<$<$ 和<7<$ 相关显著# 与<&%<$ 和<7<7 相关极显
著& 说明该回归方程对试验拟合情况好!可以很好
地描述各因素与响应值之间的真实关系& 在一次项
和二次项中都有显著性因素!因此各试验因子对响
应值的影响不是简单的线性关系& 所以!可以利用
该回归方程确定最佳提取工艺条件&
响应面图形是响应值 P对各试验因子 <&!<$ 和
<7 所构成的三维空间曲面图!从响应面图上可清晰
地看出最佳参数及各参数之间的相互作用关系& 当
特征值为正值时的响应面分析图为山谷形曲面!可
以得到极小值# 当所有特征值为负值时则为山丘曲
面!有极大值存在# 当特征值有正有负时为马鞍形
曲面!无极值存在"’FXFG +-#A5! $%%!$& 根据回归方
程得出不同因子的响应面图及对应的等值线图见图
! _"& 由各图可较为直观地看出各因素对黄粉虫幼
虫油脂提取率的影响!曲线越陡峭!表明该因素对油
脂提取率的影响越大!响应值的变化亦愈大& 由等
值线图可以看出存在极值的条件应该在圆心处& 从
图 ! _" 可看出!提取时间对油脂提取率的影响最
大!温度的影响次之!料液比的影响最小& 66
图 !6Pe4"<& !<$ $响应曲面图及其等高线
JH45!6>LP?0GPLT3RWLS P3RVFTLVH43RLFGS HQPL]3F1jKLH4KQ
1HGL0VPe4"<& !<$ $
图 96Pe4"<& !<7 $响应曲面图及其等高线
JH4296>LP?0GPLT3RWLS P3RVFTLVH43RLFGS HQPL]3F1jKLH4KQ
1HGL0VPe4"<& !<7 $
图 "6Pe4"<$ !<7 $响应曲面图及其等高线
JH42"6>LP?0GPLT3RWLS P3RVFTLVH43RLFGS HQPL]3F1jKLH4KQ
1HGL0VPe4"<$ !<7 $
对 回 归 方 程 求 一 阶 偏 导 数! 解 得 <& e
%298" 78!!<$ e&2%7& 7%#!<7 e%2%7& 9A%!代入变换
公式即得提取温度 #82A b!提取时间 &%2& K!提取
料液比 $p9%!此条件下黄粉虫油脂提取率预测值
为 7&2#&o&
$2$276最佳条件的验证6将黄粉虫干粉以 $p9% 的
#$&
6第 # 期 付6勇等’ 响应面法优化黄粉虫幼虫油脂提取工艺
料液比在 #82A b的条件下提取 &%2& K!油脂提取率
为 7&29&o!为预测值的 AA2%"o& 可见该模型能很
好地反映出黄粉虫油脂的提取条件&
76结论与讨论
昆虫脂肪含量丰富!脂肪酸组成合理!完全可以
成为优质的食用油脂资源 "王仲礼!$%%7$!但其提
取技术是制约其深度加工利用的问题之一& 本研究
优化了黄粉虫油脂的提取工艺!单因素试验中所得
最佳提取温度%时间%料液比分别为 #9 b%# K 和 $p
9%!而对响应面回归方程求一阶偏导!并将所得的解
代入变换公式!得到的最佳理论提取温度%时间%料
液比分别为 #82A b%&%2& K 和 $p9%!与单因素的各
最佳条件有一定出入& 这是由于单因素分析中各因
素的设定是固定梯度差!只能表现出最佳提取条件
的趋势!不能直接反映最佳提取点!也不能体现各因
素之间的相互影响!而响应面分析不仅可以反映出
各因素之间的相互影响!还可以反映出连续变化趋
势以及各因素相互作用下的理论最佳提取条件&
选用不同的溶剂会对昆虫油脂提取率产生较大
影响!如不同沸程的石油醚因其成分和极性的差异
会导致提取率的变化!王文亮等"$%%#$分析了不同
溶剂对黄粉虫油脂提取率的影响!结果表明 "% _A%
b沸程的石油醚提取效果最佳!与本试验选取的溶
剂一致! 并通过正交试验 得到最佳 提 取 率 为
$"28#o!但与本研究最佳提取率 7&29&o尚有一定
的差距& 正交设计虽然可以考虑几种因素对试验的
影响!寻找最佳因素水平组合!但它不能在给出的整
个区域上找到各因素的最佳组合和响应值的最优
值& 而响应面分析法是一种试验次数少%周期短%回
归方程精度高%能研究几种因素间交互作用的回归
分析方法& 相比之下!响应面分析法求得的各参数
组合更加精确!可以大大降低生产实践过程中造成
的原料浪费&
本研究发现将粗提虫油久置后!虫油颜色不断
加深!状态变粘稠!甚至产生沉淀& 这是因为油脂及
油脂食品在储存过程容易被氧化!产生氢过氧化物&
氢过氧化物发生聚合反应生成有毒的聚合物!使油
脂黏度升高!外观变稠# 并发生分解反应生成小分
子的醛%酮%酸!使油脂烟点降低%色泽加深!产生哈
喇味!影响了油脂的食用和营养价值& 因此!虫油应
在低温%避光%隔绝氧气的条件下保存&
本文选用索氏提取法提取黄粉虫幼虫油脂!但
尚未对成虫及蛹体内的油脂进行研究!今后还需要
进一步研究黄粉虫各个发育阶段油脂含量及脂肪酸
组成!并探索新方法对油脂提取率的影响&
参 考 文 献
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黄6文!王芙蓉!刘6彬!等5$%%95黄粉甲幼虫抗菌物质的诱导及
其抗菌活性5昆虫学报!!#"&$ ’ 8 C&$5
李孟楼!李生梅!王6敦!等5$%%"5五种昆虫脂肪酸组成与含量分析5
昆虫知识!!7"$$ ’ $$" C$$#5
刘高强!魏美才!刘卫星5$%%#5从马尾松毛虫蛹中制备甲壳素和壳聚
糖5林业科学!!!"7$ ’ &%8 C&&$5
陆6婕!钟6雅!柳6林!等5$%%85家蝇蛆抗菌肽提取工艺研究5昆虫
学报!9%"$$ ’ &%" C&&$5
万本屹!董海洲!刘传富5$%%&5黄粉虫油脂精炼工艺研究5粮食与油
脂!"&%$ ’ 7% C7&5
王立新!王姗姗!戴四发!等5$%%A5黄粉虫不同生长阶段诱导抗菌
肽的效果分析5中国农学通报!$9"9$ ’ &% C&75
王6敦!胡景江!刘铭汤5$%%!5从臭蜣螂中提取甲壳素f壳聚糖的研
究5林业科学!!%"9$ ’ &#% C_
王文亮!孙爱东5$%%95黄粉虫食品研究开发现状及发展前景5中国食
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王文亮!孙守义!王守经!等5$%%85中国黄粉虫食品研究开发现状及
发展前景5世界农业!"A$ ’ 9% C9$5
王文亮!王守经!邓6鹏!等5$%%#5利用溶剂法对黄粉虫油脂提取工
艺的初探5食品工业科技!$A"&%$ ’ &"$ C&"!5
王小平!徐冠军!刘毅琳5&AA#5黄粉虫幼虫抗菌物质的抑菌作用研
究5华中农业大学学报!&8""$ ’ 97! C97"5
王仲礼5$%%75昆虫油脂功能性成分的开发5中国油脂!$# " " $ ’ 77
C7!5
吴玛莉!朱家颖!胡6萃!等5$%%#5蝶蛹金小蜂毒液蛋白不同提取分
离方法的比较5昆虫学报!9&"&&$ ’ &&!! C&&9%5
严善春!魏6婧!王6雷!等5$%%95肥须亚麻蝇和巨尾阿丽蝇的营养
价值5林业科学!!&""$ ’ &%9 C&%#5
LG[XUFQHTSL43UUHG4?R0TLPPV0RRHTLIRFG 0H13PHG4RLP?0GPLP3RVFTL
ULQK0S0104X5.=,jJ00S ’THLGTLFGS ,LTKG0104X! !&"&%$ ’ &#A$ C
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’FXFG ;! QKLSLQLRUHGFQH0G 0VVFH13RL?R0IFIH1HQXFGS HU?0RQFGTLULFP3RLP5
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