全 文 ：第 !" 卷 第 # 期
$ % & % 年 # 月
林 业 科 学
’()*+,)- ’)./-* ’)+)(-*
/012!"!+02#
’345!$ % & %
转基因与非转基因杂种山杨组培苗内源激素的比较!
闫绍鹏&6杨瑞华$6关录凡&6王秋玉&
"&2东北林业大学6哈尔滨 &>%%!%# $2黑龙江省农业科学院园艺分院6哈尔滨 &>%%"#$
摘6要!6以转基因杂种山杨无性系为材料!非转基因无性系为对照!采用间接酶联免疫吸附测定法"*.)’-$!测定
不同基因型和不同生根类型组培苗的植物内源激素")--!-?-和 W-$含量的变化!探究植物内源激素含量及激素
间相互作用对转基因杂种山杨无性系组培苗生根的影响% 结果表明& 不论是转基因还是非转基因山杨无性系不同
生根类型间在 )--和 -?-含量上均达到显著和极显著差异# 不同生根类型的杂种山杨!赤霉素 W-的含量始终处
于高值水平!比较稳定!保持在 !%% _>%% EF)F=&左右% 转基因组培苗内源脱落酸 -?-的含量较低!在 &>% EF)F=&
左右时!促进生根% 内源生长素 )--含量在 $%% EF)F=&以下时!有利于组培苗的生根% 非转基因植株在组培过程
中均可生根!但分为直接生根和愈伤组织生根 $ 种类型!直接生根类型的 7 种激素含量均高于愈伤组织生根类型%
低的 )--A-?-!高的 W-A-?-和 W-A)--比值是植株生根的重要因素%
关键词&6杂种山杨# 转基因# 植物内源激素# 生根
中图分类号! ’8&<2!7666文献标识码!-666文章编号!&%%& =8!<<#$%&%$%# =%%!% =%>
收稿日期& $%&% =%& =%># 修回日期&$%&% =%7 =$#%
基金项目& 国家科技部农业科技成果转化项目"$%%!王秋玉为通讯作者%
8+"AB-(-’#7)"*’,)N$-*’K*="3)*"&/E"(A"*)/"14(-*/3)*#.-*=
%"*V4(-*/3)*#.E;9(#=8/B)*4#//&)V+&$’&()=N$-*’$)’/
CLE ’DL043EF&6CLEFGHIDHL$6WHLE .HNLE&6MLEF;IHPH&
"&2G’()9"%,)+’(",)(#J143"(,4)#6@%(&41 &>%%!%# $2@’()4.;/);(%/>(%1.9! @"4/’10?4%10 7.%2"5#’*70(4.;/);(%/6.4"1.",6@%(&41 &>%%"#$
89/’(-.’&6)E SD34O3T3ESTSHRP! 0E3U10E30NSOLETF3EIUDPXOIR LT43E"<’D;/;,)("5;/% dUH1SHO3ZLTHT3R LTSD3JLS3OIL1TLER E0EYSOLETF3EIUU10E3LTSD3U0ESO015,D3U0ES3EST0N3ER0F3E0HT41LESD0OJ0E3T!
IEU1HRIEF)--! -?-LER W-! Z3O3J3LTHO3R XP*.)’-IE RIN3O3ESF3E0SP43TLER RIN3O3ESO00SIEFSP43T5,D34HO40T3
ZLTS0TSHRP3N3UST0NUDLEF3TIE 3ER0F3E0HT41LESD0OJ0E3T! LER SD3IOIES3OLUSI0E 0E O00SIEF0NDPXOIR LT43E RHOIEFSITTH3
UH1SHO35,D3O3TH1STTD0Z3R SDLSSD3O3ZLT3[SO3J31PTIFEINIULESVLOILSI0E IE )--LER -?-U0ES3ESTLJ0EFRIN3O3ESO00SIEF
SP43T0NSD3OLJ3ST! O3FLOR13TTSOLETF3EIU0OE0EYSOLETF3EIU41LEST5W-U0ES3ESNO0J RIN3O3ESO00SIEFOLJ3STZLTL1
DIFD3TSZISD LX0HS!%% =>%% EF)F=&5)E SOLETF3EIUOLJ3ST! -?-LER )--U0EU3ESOLSI0ETZ3O3O31LSIV31P10ZIE LX0HS&>%
LER $%% EF)F=& ! O3T43USIV31P! LSZDIUD SD3PZ3O3F00R N0O4O0J0SIEFSD3O00SIEF0NSD341LEST5+0EYSOLETF3EIU41LESTIE
RIN3O3ESO00SIEFSP43TL1U0H1R F3SSD3O00ST! XHSSD34DPS0D0OJ0E3U0ES3ESTIE RIO3USO00SIEFOLJ3STZ3O3F3E3OL1PDIFD3O
SDLE SD0T30NSD3UL1HTO00SIEFOLJ3ST5,D310Z)--A-?-LER DIFD W-A-?-LER W-A)--41LP3R LE IJ40OSLESO013IE SD3
41LESO00SIEF5
:); <"(=/&6DPXOIR LT43E "<’D;/;,)("5;/% d66植物激素是植物代谢反应的产物!同时又在各
个水平上调节植物的生命活动% 在植物不同发育阶
段!不同种类的内源激素含量呈规律性的变化!其效
应可决定植物个体发育的正常进行% 有关植物激素
对杨树"<’D;/;,$以及其他针阔叶树种的植株生长
发育以及生根的影响的报道很多!如细胞分裂素能
降低杨树根部对 +e=7 的摄取 "@1HQEI3ZThL")%/O!
$%%"$!以及通过调节远距离氮信号的表达!促进杂
种杨 "<’D;/;,)(4.9’.%(D% $ 抽发新枝 "(1IE3")%/O!
$%%"$# 赤霉素在树木形成阶段调节包括细胞伸长
在内的木质部早期分化!并且对杂种山杨 "<’D;/;,
)("5;/% d欧洲山杨"$的生
长起关键性的调节作用% 陈雪梅等 "&##!$发现山
杨"在与否和皮部内源激素平衡决定% 在白杨派
6第 # 期 闫绍鹏等& 转基因与非转基因杂种山杨组培苗内源激素的比较
"$";."$杨树的组织培养中增加一定浓度的细胞分
裂素和生长素可诱导不定芽的产生!当细胞分裂素
与生长素比值在一定限度内较大时!有利于不定芽的
分化"祁春芳等!$%%%$% 詹亚光等"$%%!#$%%"$使用
"Y?-和 $! !Y@诱导杂种山杨再生植株!并发现"Y?-
能有效地促进杂种山杨愈伤组织不定芽的发生%
’LTLJ0S0等"$%%$$研究指出 -?-和 W-含量的差异
导致了白桦">");/% D/%)#D9#/%$和银白杨"原生质体再生能力的不同% 采用木本植物培养基
"Z00RP41LESJ3RIHJ!Mfb$对大叶山杨 "<’D;/;,
2%3424%1% VLO55%.(’D9#/%$进行生根培养!加入一定
浓度的)?-和 "Y?-或+--和 "Y?-可以取得理想的
生根效果!生根率可达 #>j以上"陆斐等!$%%"$%
近年来!转基因技术在林木的应用越来越广泛!
特别是针对模式树种(((杨树的研究!主要有抗虫’
抗病’木质素调控’激素调控以及抗除草剂’诱导育
性’改变谷胱甘肽的代谢’材性改良’抗逆境基因工
程等等% 转基因技术的应用引起杨树多方面的变
化!如幼苗变矮# 改变赤霉素含量’根的生长和代谢
物形式!而代谢物的变化可作为促进根生长的一种
机制"?HT0V")%/O!$%%7$%
杂种 山 杨 是 是 欧 洲 山 杨 和 北 美 山 杨 ")("5;/’42",$的杂交种!东北林业大学于 $%%& 年从芬
兰引进几十个无性系!并通过微体繁殖和愈伤组织
再生等方法进行扩繁 "詹亚光等! $%%!# $%%> $%
$%%7 年!为加强杂种山杨的抗虫性!将蜘蛛杀虫肽
和 ?S毒蛋白融合基因成功地转入杂种山杨无性系
"*&%!#%$!得到转基因杂种山杨苗木 "李彩华!
$%%7$% 研究中发现与同一基因型的杂种山杨非转
基因组培苗相比!转基因苗生根困难!生根率低!而
且转基因植株一旦产生愈伤组织将不生根% 本研究
以转基因杂种山杨无性系为材料!采用 *.)’-方法
测定其内源激素 )--’-?-和 W-的含量!从植物细
胞代谢角度探究植物遗传转化对杂种山杨组培苗和
内源激素变化的影响!以及杂种山杨组培生根的生
理机制%
&6材料与方法
>D>?材料
原始材料来源于芬兰 !% 年生欧美山杨杂种无
性系*&%!#%% $%%& 年春采用微体繁殖法扩大繁殖%
$%%7 年利用根癌农杆菌介导法将蜘蛛杀虫肽和 ?S
毒蛋白融合基因转入该无性系!得到转基因植株%
试验材料为转基因杂种山杨无性系生根组培苗和组
培不生根培养物!以非转基因无性系直接生根组培
苗和愈伤组织生根组培苗为对照"表 &$%
表 >?杂种山杨无性系组培生根基本信息
4-9@>?4,)A-#*#*1"(A-’#"*"1,;9(#=-/B)*(-A)’/’#//&)V.&$’&()(""’#*3
无性系类型 GLJ3SSP43T 生根类型 G00SIEFSP43T
分株数量
+HJX3O0NOLJ3ST
生根所需时间
G00SIEFSIJ3AR
备注 +0S3T
转基因无性系分株 直接生根 @IO3USO00SIEF $% $% 皮部生根 G00STNO0JXLOh 0E SD3UHS
,OLETF3EIUOLJ3S 不生根 +0EYO00SIEF $% 只长愈伤组织不生根 (L1HTFO0ZIEFLER E0SO00SIEF
非转基因无性系分株 直接生根 @IO3USO00SIEF $% $% 不定根发生于皮部 G00STNO0JXLOh 0E SD3UHS
+0EYSOLETF3EIUOLJ3S 愈伤组织生根 (L1HTO00SIEF $% $% 不定根发生于愈伤组织 G00STNO0JUL1HT0E SD3UHS
66
>DF?方法
取组培苗整体植株提取内源激素% 植物激素的
提取采用冰浴玻璃研磨的方法!目的是最大限度地
减少样品的损失% 内源激素测定采用间接酶联免疫
吸附分析法 "3EQPJ3Y1IEh3R IJJHE0T0OX3ESLTTLP!
*.)’-$"何钟佩!&##7$% 植物激素 -?-!)--和 W-
测定试剂盒来自中国农业大学!采用 ,3ULE 酶联免
疫检测仪测定试样中各种激素含量!每个样品重复
! 次!取平均值% 计算采用回归法!用激素标样各浓
度"EF)J.=& $的自然对数与各浓度显色值的 .0FIS
值的回归方程代替 .0FIS曲线!建立回归方程!求得
样品激素的浓度%
新鲜样品中激素的含量用下式计算& 7S"G)
B$ ) B7 ) >$X"B& ) A$ % 式中! 7为激素含量
"EF)F=&$# B$ 表示提取样品后!上清液的总体积#
B& 表示进行真空浓缩干燥的上清液体积 "当提取
的上清液全部进行真空浓缩干燥时 B& 与 B$ 的体积
是相等的$# B7 表示真空浓缩后用样品稀释液定容
的体积# A表示样品的鲜质量# G表示样品中激素
的质量浓度 " EF)J.=& $# >表示样品的稀释倍数
"样品稀释液定容以后的稀释倍数$%
$6结果与分析
FD>?转基因与非转基因杂种山杨不同生根类型间
内源激素含量的变化
$2&2&67 种内源激素在转基因杂种山杨不同生根
类型无性系分株间的变化6在生根的转基因杂种山
杨无性系分株间!赤霉素 W-含量较高!一般在 !%%
&!
林 业 科 学 !" 卷6
EF)F=&以上# 生长素 )--和脱落酸 -?-的含量相
对较低!普遍不到 $%% EF)F=&! )--的含量略高于
-?-% 在不生根类型分株间!W-和 )--的含量总
体上都比较高!基本上都在 !%% EF)F=&左右!二者相
差不多!W-的含量略高于 )--# -?-相对于 )--’
W-来说含量少很多!大约在 $>% EF)F=&以上!但是
和生根类型比较!-?-的含量也明显增加"图 &$%
图 &6转基因杂种山杨不同生根类型无性系分株间
内源激素的比较
BIF5&6(0J4LOIT0E 0N)--! -?-LER W-U0ES3ESLJ0EFSD3
O00SIEFLER E0EYO00SIEFOLJ3ST0NSOLETF3EIUDPXOIR LT43E
在转基因杂种山杨无性系不同生根类型间!
-?-和)--的含量变化较大!高含量的-?-和)--
容易使杂种山杨组培苗长出愈伤组织而无法正常生
根!而低含量是促进生根的一个条件%
$2&2$67 种内源激素在非转基因杂种山杨不同生
根类型无性系分株间的变化6在非转基因杂种山杨
直接生根类型的无性系分株间!W-的含量保持在
较高的水平!与转基因生根类型一致# -?-的含量
比转基因生根类型要高!平均达到了 $>% EF)F=&左
右!其含量也超过了 )--#)--的含量与转基因生根
类型相差无几"图 $$!这说明 )--在不同处理的杂
种山杨无性系分株的生根过程中作用相同%
在愈伤组织生根类型的非转基因杂种山杨无性
系分株间!W-的含量变化不大!-?-的含量大约在
&"% EF)F=&左右!与直接生根类型比较株间变化很
大!下降很多#)--的含量虽然也有变化!但降幅没
有 -?-那么多!在 &>% EF)F=&左右%
结果说明&W-含量在不同生根类型非转基因
杂种山杨无性系分株间没有显著的差异!保持稳定#
)--和 -?-在非转基因杂种山杨不同生根类型无
性系分株间的含量差异显著!低含量 -?-有利于非
转基因杂种山杨的直接生根!而 -?-含量过低容易
图 $6非转基因杂种山杨不同生根类型无性系分株间
内源激素的比较
BIF5$6(0J4LOIT0E 0N)--! -?-LER W-U0ES3ESLJ0EFRIO3US
O00SIEFLER UL1HTO00SIEFOLJ3ST0NE0EYSOLETF3EIUDPXOIR LT43E
导致植株首先长出愈伤组织!然后才生根!延长了生
根时间%
FDF?转基因与非转基因杂种山杨不同生根类型间
内源激素含量的变异
从表 $ 看出!在转基因杂种山杨生根和不生根
类型间!)--和 -?-的含量差异极显著!而 W-的
含量差异不显著!变异幅度也不大% 在非转基因杂
种山杨直接生根和愈伤组织生根类型间!-?-的含
量差异极显著!)--的含量差异显著!W-的含量差
异依旧不显著% 由此可见!不论是转基因还是非转
基因杂种山杨无性系不同生根类型间在 )--和
-?-含量上差异均达到显著或极显著水平!这也说
明 -?-和 )--在调控杂种山杨组培苗生根过程中
起着重要作用%
由表 $ 还看出!不同生根类型的杂种山杨 W-
含量处于高值水平!保持在 !%% _>%% EF)F=&% 说明
W-含量在植株生长和生根过程中起着重要作用!
但可能不是杂种山杨组培苗生根的决定因素%
在转基因杂种山杨中!直接生根类型的 W-含
量略高于不生根类型!不生根类型的 )--和 -?-含
量显著高于直接生根类型!这也可能是转基因植株
只长愈伤组织而不生根的原因% 在非转基因不同生
根类型中!直接生根类型中 7 种激素水平均高于愈
伤组织生根类型"表 $$% 这也可能是植株直接生根
或愈伤组织生根的重要影响因素%
比较转基因植株和非转基因植株的 7 种内源激
素含量发现!$ 种无性系的直接生根类型的 W-含
量均略高于不生根"愈伤组织生根$类型!但不同类
$!
6第 # 期 闫绍鹏等& 转基因与非转基因杂种山杨组培苗内源激素的比较
型间差异不显著#转基因和非转基因植株的直接生
根类型的 )--含量没有明显差别!但转基因不生根
类型的 )--含量为 7#72&> EF)F=&!明显高于非转基
因植株愈伤组织生根类型"&>$2"8 EF)F=& $!而转基
因植 株 直 接 生 根 类 型 的 -?- 含 量 为 &>>2>&
EF)F=&!明显低于非转基因植株的直接生根类型
"$"#27> EF)F=&$!而不生根"愈伤组织生根$类型表
现相反的趋势% 这一结果也间接表明外源基因的导
入有可能会改变植株内源激素的水平!从而不同程
度影响了植株的生根情况%
表 F?转基因与非转基因杂种山杨不同生根类型间内源激素的方差分析!
4-9@F?2-(#-*.)-*-$;/#/1"(’,)."*’)*’"1)*="3)*"&/,"(A"*)/-A"*3 =#11)()*’(""’#*3 ’;B)/
基因型
GLJ3SSP43T
激素种类
90OJ0E3T
+
生根类型
G00SIEFSP43T
平均值
b3LE
标准差
’SLERLOR R3VILSI0E
变异幅度
/LOILSI0E OLEF3
转基因无性系
,OLETF3EIUOLJ3ST
非转基因无性系
+0EYSOLETF3EIUOLJ3ST
)-- 7&2#%>!!
-?- &>2$&>!!
W- %2""#ET
)-- >2!<&!
-?- $>28#>!!
W- 72&"&ET
直接生根 @IO3USO00SIEF &882"& !#2%< <728< _$<>2!%
不生根 +0EYO00SIEF 7#72&> &$$2<7 $7<2!8 _">"2!<
直接生根 @IO3USO00SIEF &>>2>& !7278 &%>28& _$>"2<<
不生根 +0EYO00SIEF $$#2!> "!2>8 &&>2#! _7782>&
直接生根 @IO3USO00SIEF >&$2"! &!%2#& $<#2&& _8不生根 +0EYO00SIEF !8#2$> &<$2%! $!82"% _#&$2>!
直接生根 @IO3USO00SIEF H&8 !!27< &$82$& _$<"2!#
愈伤组织生根 (L1HTO00SIEF &>$2"8 $$2<$ &&!2$% _&<#2<>
直接生根 @IO3USO00SIEF $"#27> >"2# $%!2### _78#2"#
愈伤组织生根 (L1HTO00SIEF &8$2#! !72$" &%>28& _$>>2<%
直接生根 @IO3USO00SIEF !#"2>& &%%2>7 7$$2"7 _"8&27>
愈伤组织生根 (L1HTO00SIEF !&!2"8 8>2!! 7&<2"< _>"72!#
66! !& 差异显著#!!& 差异极显著# ET& 差异不显著% !& ’IFEINIULESRIN3O3EU3# !!& *[SO3J31PTIFEINIULESRIN3O3EU3# ET& +0TIFEINIULES
RIN3O3EU35
FDC?不同生根类型杂种山杨 C 种内源激素相互作
用总体水平的比较
对转基因杂种山杨来说!生根类型 )--A-?-
的比值很低!低于不生根类型#生根类型 W-A-?-
和 W-A)--的比值都大于 $!远远高于不生根类型
"图 7$% 非转基因不同生根类型中的 7 个比值具有
相似的趋势!即愈伤组织生根类型高于直接生根类
型!愈伤组织生根类型和直接生根类型的 )--A-?-
较接近!在 %2> _& 之间!$ 种生根类型的 W-A-?-
与 W-A)--的比值均较高!都在 $ 左右"图 !$% 由
此可见!低的 )--A-?-!高的 W-A-?-和 W-A)--
比值是植株生根的重要因素%
76结论与讨论
脱落酸"-?-$是一种抑制激素!它对生长促进
剂起到拮抗作用% 有研究表明!一定水平的 -?-对
不定根’芽的分化可能是必需的% 但高含量内源
-?-易于愈伤组织分化"郭子彪等!&##8$% 本试验
的结果表明& 内源 -?-的含量对于杂种山杨生根
有很大影响!转基因组培苗 -?-含量在 &>% EF)F=&
时!有利于生根# 当超过 $%% EF)F=&!转基因组培苗
就会分化出愈伤组织!从而影响生根# 但是!-?-含
量过低时!对组培苗的生长同样不利!&%% EF)F=&左
右的 -?-会使得转基因组培苗出现玻璃化现象%
生长素")--$对植物细胞伸长’分裂等发育过
程起着重要作用!是植物体内促进生长的激素% 李
图 76转基因杂种山杨激素相互作用总体的比较
BIF576,D3IES3OLUSI0E 0NRIN3O3ESD0OJ0E3T
IE SOLETF3EIUDPXOIR LT43E
图 !6非转基因山杨激素相互作用总体的比较
BIF5!6,D3IES3OLUSI0E 0NRIN3O3ESD0OJ0E3TIE
E0EYSOLETF3EIULT43E
胜等"$%%>$研究表明& 在根系启动和根原基诱导
时!)--含量较低% 也就是说低含量的 )--有利于
根系的启动和根原基的诱导!有利于生根% 本试验
7!
林 业 科 学 !" 卷6
的结果也证明!内源 )--水平的高低对于不同转基
因处理的杂种山杨组培苗生根的影响不同% 但总的
来说 )--含量低时!有利于组培苗的生根# $ 种生
根类型的非转基因组培苗的 )--含量都很低!大约
在 $%% EF)F=&左右% 这充分说明内源 )--含量与愈
伤组织的形成密切相关"郭子彪等!&##8$% 本研究
表明& )--的含量过高或过低容易诱使杂种山杨组
培苗生根不正常% 当 )--达到 !%% EF)F=&的高含量
时!转基因组培苗无法生根!或长出愈伤组织!或产
生玻璃化现象% )--含量达到 &>% EF)F=&左右时!
容易使杂种山杨的非转基因组培苗长出愈伤组织%
赤霉素"W-$在植物组织培养过程中的主要功
能是促进生长!即促进茎尖分生组织的细胞分裂!增
强顶端生长优势!起到拔茎的效果% 在不同类型杂
种山杨无性系分株间!不论是转基因还是非转基因
苗!不论是生根还是不生根苗!W-含量一般都是在
较高的水平浮动!平均 >%% EF)F=&!这说明 W-的水
平在杂种山杨体内比较稳定%
比较不同生根类型的杂种山杨内源激素总体水
平可以看出!非转基因杂种山杨无性系直接生根类
型的 )--和 -?-的含量均比愈伤组织生根类型的
含量高% 而转基因杂种山杨正好相反!生根类型的
)--和 -?-的含量比不生根类型的低% 由此可见!
外源基因的遗传转化可以使杂种山杨无性系的内源
激素总体水平发生变化%
此外!内源激素间的相互作用对植物生长的调
节作用十分重要% 例如!)--促进植物生长!-?-
抑制植物生长!目前人们更关注植物体内促进生长
的激素与抑制生长的激素的相互作用!认为植物的
全部生长过程都受到这 $ 类激素比例的变化控制%
郑均宝等"&###$的研究表明杂交杨-<’D;/;,%/&% d
"养的嫩茎外植体 )--A-?-的比值较高!为 & _$!其
生根率高达 #%j以上% 本研究也计算了不同基因型
和生根类型的 7 种内源激素的比值!转基因杂种山
杨内源 )--A-?-的比值都大于 &!生根类型接近于
&!不生根类型 )--A-?-的比值大于生根类型#非
转基因直接生根和愈伤组织生根类型的 )--A-?-
的比值都小于 &!愈伤组织生根类型接近于 &% 因
此!本研究表明!)--A-?-比值越小生根能力越强!
越大生根能力越弱!甚至不生根!与前人的研究结果
不同!其原因还有待于进一步探讨%
参 考 文 献
陈雪梅! 高红兵!王沙生5&##!5三种杨树扦插生根期间内源激素水
平的比较研究5林业科学!7%"&$ && =85
郭子彪!盖钧镒5&##85内源激素 )--’-?-对大豆萌发子叶胚性愈
伤组织诱导及其分化的调控5大豆科学!&""7$ &&#! =&#<5
何钟佩5&##75农作物化学控制实验指导5北京& 北京农业大学出版
社!"% ="<5
李6胜! 武季玲! 李6唯!等5$%%>5初代和继代培养葡萄试管苗的
内源)--’mGT和-?-含量变化及其与生根的关系5植物生理学
通讯! !&"7$ &$<" =$<<5
李彩华5$%%75欧美山杨杂种转抗虫基因的研究5东北林业大学硕
士学位论文5
陆6斐!初6艳5$%%"5大叶山杨优良无性系组培育苗技术5林业科
技!7&""$ &$ =75
祁春芳! 郑智礼5$%%%5白杨派杨树组培技术研究5山西林业科技!
"!$ & $& =$75
詹亚光! 齐凤慧!高瑞馨!等5$%%"5欧美杂种山杨体细胞无性系变
异的分析5植物学通报!$7"&$ & !! =>&5
詹亚光!刁桂平!王秋玉!等5$%%>5叶腋增殖途径快速繁殖欧美杂
种山杨5东北林业大学学报!7$"$$ &8 =#5
詹亚光! 齐凤慧! 杨传平5$%%!5欧美杂种山杨愈伤组织再生系统
的建立5植物生理学通讯!!%"!$ &!78 =!!%5
郑均宝! 梁海永! 王进茂!等5&###5杨和苹果离体茎尖培养和愈伤
组织分化与内源 )--’-?-的关系5植物生理学通讯! $>" &$ &
<% =<"5
?HT0V/?! b3I1LE G! f3LOU3@M! ")%/O$%%75-USIVLSI0E SLFFIEF0NL
R0JIELESFIXX3O31IE ULSLX01ITJF3E3"V7$P’C42%,"$ NO0J 4041LO
SDLSO3FH1LS3TSO33TSLSHO35f1LESfDPTI01! &7$ "7$ &&$<7 =&$#&5
(1IE3b W! ,DLEFLV31H b! @0EFY)1l5$%%"5- 40TTIX13O0130N
UPS0hIEIE IE J3RILSIEF 10EFYRITSLEU3 EISO0F3E TIFEL1IEF IE SD3
4O0J0SI0E 0NTP134SIUXOLEUDIEFIE DPXOIR 4041LO5kf1LESfDPTI01!
&"7 ""$ &"@1HQEI3ZThLf!W3TT13O-!l04OIVL’! ")%/O$%%"5*[0F3E0HTTH441P0N
F1HSLJIE3LER LUSIV3UPS0hIEIE S0SD3O00STO3RHU3T+e=7 H4SLh3OLS3T
IE 4041LO5f1LES(31*EVIO0E! $#"8$ &&$)TOL31TT0E b! b313O0ZIUQ*! (D0E0b! ")%/O$%%!5(10EIEFLER
0V3O4O0RHUSI0E 0NFIXX3O31IE 7Y0[IRLT3IE DPXOIR LT43E SO33T5*N3UST
0E FIXX3O31IE D0J30TSLTITLER R3V3104J3ES5f1LESfDPTI01! &7>
"&$ &$$& =$7%5
)TOL31TT0E b! ’HERX3OF?! b0OISQ,5$%%>5,ITTH3YT43UINIU10UL1IQLSI0E
0NFIXX3O31IET LER 3[4O3TTI0E 0NFIXX3O31IEYXI0TPESD3SIU LER
TIFEL1IEFF3E3TIE Z00RYN0OJIEFSITTH3TIE LT43E5f1LESk! !! "7$ &
!#! =>%!2
’LTLJ0S09! eFISL’! MLhISLC! ")%/O$%%$5*ER0F3E0HT13V31T0N
LXTUITIULUIR LER FIXX3O31IETIE 13LN4O0S041LTSTU0J43S3ESN0O41LES
O3F3E3OLSI0E IE >");/% D/%)#D9#/% LER <’D;/;,%/&%Of1LESWO0ZSD
G3FH1LSI0E!7<"& =$%&5
!责任编辑6徐6红"
!!