全 文 ：第 源苑 卷 第 苑 期
圆 园 员 员 年 苑 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源苑袁晕燥郾 苑允怎造援 袁圆 园 员 员
解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿杀线活性物质的
分离与结构分析鄢
朱丽梅员袁圆 摇 吴小芹员 摇 胡飞杰猿 摇 徐摇 浩源
渊员郾 南京林业大学森林资源与环境学院摇 江苏省有害生物预防与控制重点实验室摇 南京 圆员园园猿苑曰
圆郾 金陵科技学院园艺学院摇 南京 圆员园园猿愿曰 猿郾 南京市产品质量监督检验院摇 南京 圆员园园员愿曰
源郾 南京工业大学摇 南京 圆员园园园怨冤
摘摇 要院摇 利用酸碱沉淀法分离提纯解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿 分泌的杀线活性物质袁获得具有杀线活性的水溶液袁通
过气质联用方法对其化合物的结构进行分析和鉴定袁从该杀线组合物中共鉴定出 猿 种化合物袁分别为 缘 原甲基 原
员 原苯基 原 远匀 原 员袁猿袁缘 原三嗪 原 圆 原硫酮尧圆袁圆 原 二甲基 原 晕 原 苯丙硫代酰胺和樟脑醛缩氨脲遥 对 猿 种化合物在
杂糟蚤云蚤灶凿藻则数据库中进行专利和文献检索袁未检索到上述化合物具有杀松材线虫活性的报道遥
关键词院摇 松材线虫曰 解淀粉芽孢杆菌曰 杀线活性物曰 结构分析
中图分类号院 杂苑远苑郾 猿 垣 圆摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员员冤园苑 原 园员猿猿 原 园缘
收稿日期院 圆园员园 原 园远 原 圆员曰 修回日期院 圆园员园 原 员员 原 园源遥
基金项目院 国家林业局野怨源愿冶项目渊圆园园猿 原 源 原 猿愿冤遥
鄢吴小芹为通迅作者遥
耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 葬灶凿 杂贼则怎糟贼怎则藻 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 晕藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 粤糟贼蚤增藻 杂怎遭泽贼葬灶糟藻泽
孕则燥凿怎糟藻凿 遭赠 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽 允运鄄允杂猿
在澡怎 蕴蚤皂藻蚤员袁圆 摇 宰怎 载蚤葬燥择蚤灶早员 摇 匀怎 云藻蚤躁蚤藻猿 摇 载怎 匀葬燥源
渊员郾 允蚤葬灶早泽怎 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 枣燥则 孕藻泽贼 孕则藻增藻灶贼蚤燥灶 葬灶凿 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 燥枣 陨灶增葬泽蚤增藻 杂责藻糟蚤藻泽摇 悦燥造造藻早藻 燥枣 云燥则藻泽贼泽 砸藻泽燥怎则糟藻泽 葬灶凿 耘灶增蚤则燥皂藻灶贼袁
晕葬灶躁蚤灶早 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园猿苑曰 圆郾 郧葬则凿藻灶蚤灶早 悦燥造造藻早藻 燥枣 允蚤灶造蚤灶早 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 栽藻糟澡灶燥造燥早赠摇 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园猿愿曰
猿郾 晕葬灶躁蚤灶早 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 杂怎责藻则增蚤泽蚤燥灶 驭 栽藻泽贼蚤灶早 燥灶 孕则燥凿怎糟贼 匝怎葬造蚤贼赠摇 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园员愿曰 源郾 晕葬灶躁蚤灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 栽藻糟澡灶燥造燥早赠摇 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园园怨冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽 允运鄄允杂猿袁 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 造藻葬枣 燥枣 贼澡藻 孕蚤灶怎泽 皂葬泽泽燥灶蚤葬灶葬 蚤灶 阅则援 杂怎灶 再葬贼鄄泽藻灶 謘 泽
皂葬怎泽燥造藻怎皂袁 蚤泽 葬 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 葬灶凿 澡葬泽 澡蚤早澡 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 贼燥 葬 灶藻皂葬贼燥凿藻渊月怎则泽葬责澡藻造藻灶糟澡怎泽 曾赠造燥责澡蚤造怎泽冤援 粤 憎葬贼藻则 泽燥造怎贼蚤燥灶
憎蚤贼澡 贼澡藻 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 葬灶凿 责怎则蚤枣蚤藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤怎皂 遭赠 葬糟蚤凿 葬灶凿 葬造噪葬造蚤 泽藻凿蚤皂藻灶贼葬贼蚤燥灶
皂藻贼澡燥凿袁 葬灶凿 贼澡藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 憎葬泽 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 早葬泽 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 葬灶凿 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则怎皂援 栽澡藻 则藻泽怎造贼 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻
灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 憎葬泽 糟燥皂责燥泽藻凿 燥枣 贼澡则藻藻 糟燥皂责燥怎灶凿泽 憎澡蚤糟澡 蚤灶糟造怎凿藻凿 匀藻曾葬澡赠凿则燥鄄缘鄄皂藻贼澡赠造鄄员鄄责澡藻灶赠造鄄员袁猿袁缘鄄
贼则蚤葬扎蚤灶藻鄄圆鄄贼澡蚤燥灶藻袁 圆袁圆鄄凿蚤皂藻贼澡赠造鄄晕鄄责澡藻灶赠造责则燥责葬灶藻贼澡蚤燥葬皂蚤凿藻 葬灶凿 杂藻皂蚤葬则遭葬扎蚤凿藻袁源鄄渊员袁苑袁苑鄄贼则蚤皂藻贼澡赠造遭蚤糟赠糟造燥咱圆郾 圆郾 员暂 澡藻责贼赠员鄄
圆鄄蚤凿藻灶燥冤鄄援 栽澡藻 贼澡则藻藻 糟燥皂责燥怎灶凿泽 澡葬增藻 灶燥贼 遭藻藻灶 则藻责燥则贼藻凿 贼燥 澡葬增藻 贼澡藻 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 遭藻枣燥则藻 遭葬泽藻凿 燥灶 葬 泽藻葬则糟澡 燥枣
蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责葬贼藻灶贼泽 燥枣 贼澡藻 贼澡则藻藻 糟澡藻皂蚤糟葬造 糟燥皂责燥怎灶凿泽 蚤灶 贼澡藻 杂糟蚤云蚤灶凿藻则援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 月怎则泽葬责澡藻造藻灶糟澡怎泽 曾赠造燥责澡蚤造怎泽曰 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽曰 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增藻 泽怎遭泽贼葬灶糟藻曰 泽贼则怎糟贼怎则藻 葬灶葬造赠泽蚤泽
摇 摇 在线虫的生防研究中袁第 员 代杀线生防制剂是
直接利用菌体的活菌剂袁由于土壤有不同程度的抑
菌作用袁导致这些杀线生防制剂在不同的土壤中施
用效果不稳定渊粤造蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园圆冤遥 为了克服这一难
题袁人们更加关注第 圆 代线虫生防产品即菌株次生
代谢产物的研究与开发袁其内容主要包括对菌株次
生代谢产物中杀线物质的分离尧提纯和杀线机制的研
究袁对已分离纯化的杀线物质结构进行化学修饰袁设
计合成新化合物为生物杀线剂的研制提供研究思路遥
解淀粉芽孢杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽冤允运鄄允杂猿 是
一株从马尾松渊孕蚤灶怎泽 皂葬泽泽燥灶蚤葬灶葬冤林中筛选的对松材
线虫渊月怎则泽葬责澡藻造藻灶糟澡怎泽 曾赠造燥责澡蚤造怎泽冤具有较高杀线活性
的细菌渊朱丽梅等袁 圆园园愿葬曰 圆园园愿遭曰 圆园园怨葬冤袁已有研
究表明该菌株菌体本身无杀线活性袁其具有杀线活
性的物质存在于培养滤液中袁是一种非蛋白质物质袁
在碱性条件下具有杀线活性袁对热具有较强的稳定
性袁石油醚尧氯仿尧乙酸乙酯等有机溶剂均不能将其
从培养液中提取渊朱丽梅等袁 圆园园怨遭冤曰 但该物质是
林 业 科 学 源苑 卷摇
否能应用于生产实践以及如何应用袁首先须了解其
结构遥 因此本文在已有研究的基础上袁利用酸碱沉
淀法对菌株 允运鄄允杂猿 的杀线粗提物分离提纯并通过
气质联用的方法对其杀线活性物质的结构进行
鉴定遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 供试线虫和细菌菌株的培养
供试松材线虫分离自江苏连云港发病黑松
渊孕蚤灶怎泽 贼澡怎灶遭藻则早蚤蚤冤袁保存于江苏省有害生物预防与
控制重点实验室渊南京林业大学冤袁线虫的培养及
线虫悬液的制备方法参见文献 渊朱丽梅等袁
圆园园愿葬冤遥
供试解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿 菌株分离自南京
紫金山马尾松松针袁保存于牛肉膏蛋白胨斜面培养
基上遥
允运鄄允杂猿 菌株接种液的制备院将 允运鄄允杂猿 菌株接种
于牛肉膏蛋白胨培养基的试管斜面中袁培养员园 澡后
再移接至新的斜面上袁重复此步骤 圆 耀 猿 次袁保证菌
株充分活化遥 将活化后的 允运鄄允杂猿 菌株接种到事先
配好的牛肉膏蛋白胨液体培养基中袁以员圆园 则窑皂蚤灶 原员
转速振荡培养 圆源 澡 使用袁接种前菌体的浓度调至
员郾 远 伊 员园愿窑皂蕴 原员遥
细菌培养液和滤液的制备参见文献渊朱丽梅
等袁 圆园园愿葬冤遥
员郾 圆摇 菌株 允运鄄允杂猿 杀线活性物质的分离
本试验采用酸碱沉淀法对其成分逐步分离纯
化遥 已有研究表明菌株 允运鄄允杂猿 所分泌的杀线活性
物质在碱性条件具有杀线活性渊朱丽梅等袁 圆园园愿遭冤袁
因此对每步骤分离的物质均将其 责匀 值调节至与培
养 员园 天的该细菌培养滤液的 责匀渊责匀 越 愿冤一致袁测
定其对松材线虫的杀线活性遥 首先将细菌培养滤液
渊责匀 越愿冤用 员 皂燥造窑蕴 原员浓度的盐酸调节 责匀 至酸性袁
部分碱性的物质与酸形成了不溶解的白色沉淀物袁
于 源 园园园 则窑皂蚤灶 原员条件下离心 缘 皂蚤灶袁将培养液分为白
色沉淀物淤和上清液于部分遥 将所获得的白色沉淀
物淤置于小烧杯中袁加水溶解后用 员 皂燥造窑蕴 原员浓度的
晕葬韵匀调节至 责匀 越 愿袁分别测定沉淀的溶解物和上
清液对松材线虫的毒杀活性遥
将上清液于用旋转蒸发仪在 远园 益下旋转蒸发袁
分别得到蒸出液榆和残余液虞遥 经测定袁蒸出液榆
的 责匀为 猿郾 怨远袁残余液虞的 责匀 为 员郾 远袁分别调节蒸
出液榆和残余液虞的 责匀至 愿袁测定杀线活性遥 剩余
残余液虞调节 责匀 至 愿 后用旋转蒸发仪在 远园 益下
旋转至干袁得蒸出液愚和残余液舆遥 残余液舆加蒸
馏水稀释至原体积后袁分别测定蒸出液愚和残余物
舆水溶液对松材杀虫的杀线活性袁以新鲜培养液滤
液 为 对 照袁 测 定 方 法 参 见 文 献 渊 朱 丽 梅
等袁 圆园园愿葬冤遥 摇 摇
员郾 猿摇 菌株 允运鄄允杂猿 杀线物质的气质联用分析
将 员郾 圆 中分离提取的物质袁经生测具有明显杀
线活性的提取物用安捷伦气相色谱 原质谱联用仪进
行杀线物质的分离和结构分析袁对照为新鲜培养液
按 员郾 圆 中操作所获的最终蒸出液遥
员郾 猿郾 员 摇 仪器 摇 安捷伦气相色谱 原 质谱联用仪
渊粤早蚤造藻灶贼袁远愿怨园鄄缘怨苑猿晕冤
员郾 猿郾 圆 摇 色谱条件 摇 色谱柱为 匀孕鄄缘酝杂 渊猿园 皂 伊
园郾 圆缘 皂皂 伊 园郾 圆缘 滋皂冤石英毛细管柱遥 接口温度院
圆愿园 益曰 离源温度院 圆猿园 益曰 四极杆温度院 员缘园 益遥
进样量员 滋蕴曰 流量 员郾 源 皂蕴窑杂 原员袁不分流进样曰 载气院
氦气遥 色谱柱升温程序院 苑园 益保持 圆 皂蚤灶袁然后以
圆缘 益窑皂蚤灶 原员程序升温至 员缘园 益袁以 猿 益窑皂蚤灶 原员升温
至圆园园 益袁再以 愿 益窑皂蚤灶 原员升温至 圆愿园 益遥 全扫描
离子检测遥 质谱数据库院 晕陨杂栽数据库遥
圆摇 结果分析
圆郾 员摇 菌株 允运鄄允杂猿 培养液分离提取物对松材线虫
杀线活性的测定
细菌 允运鄄允杂猿 培养液经酸碱沉淀分离后获得白
色沉淀物和上清液袁将白色沉淀物和上清液分别测
试对松材线虫的杀线活性袁结果表明上清液于调至
责匀 越愿 时对松材线虫有高的杀线活性袁活性级别为
野 垣 垣 垣 垣 冶袁而白色沉淀经溶解后测试无杀线活
性袁活性级别为野 原 冶遥 说明经过第 员 步分离后杀线
物质存在于上清液于中遥 将上清液于通过 远园 益减
压旋转蒸发分离为 圆 个组分蒸出液榆和残余液虞袁
通过生测发现袁蒸出液榆无杀线活性袁而残余液虞的
责匀被调节至 愿袁其杀线活性级别为野 垣 垣 垣 垣 冶袁残
余液虞再经 远园 益减压旋转蒸发分别获得蒸出液
愚和残余物舆袁经生测后发现蒸出液愚具有较强
的杀线活性袁活性级别为野 垣 垣 垣 垣 冶袁而残余液舆
经水溶解后无杀线活性渊表 员冤袁说明细菌 允运鄄允杂猿
培养液经逐步分离后袁杀线物质最终存在于蒸出
液愚中遥
圆郾 圆摇 菌株 允运鄄允杂猿 杀线物质的气质联用分析
允运鄄允杂猿 培养液蒸出液愚和对照新鲜培养液蒸
出液经安捷伦气相色谱 员 质谱仪进行分析后袁其总
离子图如图 员袁圆 所示袁与对照相比袁允运鄄允杂猿 培养液蒸
出液愚在 猿郾 员缘袁猿郾 源员袁猿郾 缘愿袁猿郾 愿猿袁源郾 愿源 和缘郾 员苑 皂蚤灶
等处均有物质出峰遥
源猿员
摇 第 苑 期 朱丽梅等院 解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿 杀线活性物质的分离与结构分析
表 员摇 菌株 允运鄄允杂猿 培养液分离提取物对松材线虫的杀线活性
栽葬遭援 员摇 栽澡藻 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 允运鄄允杂猿 糟怎造贼怎则藻 贼燥 月援 曾赠造燥责澡蚤造怎泽
编号 晕燥援 活性级别 粤糟贼蚤增蚤贼赠 早则葬凿藻圆源 澡 源愿 澡 苑圆 澡
白色沉淀物淤 宰澡蚤贼藻 责则藻糟蚤责蚤贼葬贼藻淤 原 原 原
上清液于责匀 越员郾 远 杂怎责藻则灶葬贼葬灶贼于责匀 越员郾 远 原 原 原
上清液于责匀调至 愿 杂怎责藻则灶葬贼葬灶贼于责匀 越愿 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣
蒸出液榆责匀 越猿郾 怨远 阅蚤泽贼蚤造造葬贼藻凿 造蚤择怎蚤凿榆责匀 越 猿郾 怨远 原 原 原
蒸出液榆责匀调至 愿 阅蚤泽贼蚤造造葬贼藻凿 造蚤择怎蚤凿榆责匀 越愿 原 原 原
残余液虞责匀 越员郾 远 砸藻泽蚤凿怎藻虞责匀 越员郾 远 原 原 原
残余液虞责匀调至 愿 砸藻泽蚤凿怎藻虞责匀 越愿 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣
蒸出液愚责匀 越愿 阅蚤泽贼蚤造造葬贼藻凿 造蚤择怎蚤凿愚责匀 越 愿 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣 垣
残余液舆责匀调至 愿 砸藻泽蚤凿怎藻舆责匀 越愿 原 原 原
新鲜培养滤液渊悦运冤云则藻泽澡 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤怎皂 枣蚤造贼则葬贼藻渊悦运冤 原 原 原
蒸馏水 责匀 越员园郾 员 阅蚤泽贼蚤造造藻凿 憎葬贼藻则 责匀 越 员园郾 员 原 原 原
图 员摇 新鲜培养液蒸出液的 郧悦鄄酝杂总离子图
云蚤早援 员摇 陨燥灶 糟怎则则藻灶贼 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬皂泽 燥枣 贼澡藻 灶藻憎 糟怎造贼怎则藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶
图 圆摇 允运鄄允杂猿 培养液杀线提取物的 郧悦鄄酝杂总离子图
云蚤早援 圆摇 陨燥灶 糟怎则则藻灶贼 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬皂泽 燥枣 贼澡藻 灶藻皂葬贼蚤糟蚤葬造 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 允运鄄允杂猿 糟怎造贼怎则藻
摇 摇 经解析与 晕陨杂栽标准图谱对照袁共鉴定出 猿种化合 物袁结果见下表 圆袁其质谱图和结构图如图 猿 耀缘所示遥
表 圆摇 菌株 允运鄄允杂猿 杀线物质的化学组成
栽葬遭援 圆摇 栽澡藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 燥枣 贼澡藻 灶藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 糟怎造贼怎则藻 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 允运鄄允杂猿
编号 晕燥援 保留时间 砸藻贼藻灶贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 辕 皂蚤灶 化合物名称 晕葬皂藻 燥枣 悦澡藻皂蚤糟葬造泽
员 猿郾 员缘 缘 原甲基 原 员 原 苯基 原 远匀 原 员袁猿袁缘 原 三嗪 原 圆 原 硫酮 匀藻曾葬澡赠凿则燥鄄缘鄄皂藻贼澡赠造鄄员鄄责澡藻灶赠造鄄员袁猿袁缘鄄贼则蚤葬扎蚤灶藻鄄圆鄄贼澡蚤燥灶藻
猿 猿郾 源员 圆袁圆 原二甲基 原 晕 原苯丙硫代酰胺 圆袁圆鄄凿蚤皂藻贼澡赠造鄄晕鄄责澡藻灶赠造责则燥责葬灶藻贼澡蚤燥葬皂蚤凿藻
源 猿郾 愿猿 樟脑醛缩氨脲 杂藻皂蚤葬则遭葬扎蚤凿藻袁源鄄渊员袁苑袁苑鄄贼则蚤皂藻贼澡赠造遭蚤糟赠糟造燥咱圆郾 圆郾 员暂澡藻责贼赠员鄄圆鄄蚤凿藻灶燥冤鄄
摇 摇 其中化合物 员 的保留时间为 猿郾 员缘 皂蚤灶袁经质谱
分析为 匀藻曾葬澡赠凿则燥鄄缘鄄皂藻贼澡赠造鄄员鄄责澡藻灶赠造鄄员袁猿袁缘鄄贼则蚤葬扎蚤灶藻鄄
圆鄄贼澡蚤燥灶藻袁化合物名称为 缘 原甲基 原 员 原苯基 原 远匀 原
员袁猿袁缘 原 三嗪 原 圆 原 硫酮袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 缘园怨苑愿鄄愿远鄄源曰
化合物 猿 的保留时间为 猿郾 源员 皂蚤灶袁峰结构解析为 圆袁
圆鄄凿蚤皂藻贼澡赠造鄄晕鄄责澡藻灶赠造责则燥责葬灶藻贼澡蚤燥葬皂蚤凿藻袁化合物名称为
缘猿员
林 业 科 学 源苑 卷摇
摇 摇
图 猿摇 化合物 员 结构图渊左冤和结构图渊右冤
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥早则葬皂泽 渊造藻枣贼冤 葬灶凿 糟澡藻皂蚤糟葬造 泽贼则怎糟贼怎则藻 渊则蚤早澡贼冤 燥枣 糟燥皂责燥怎灶凿 员
图 源摇 化合物 猿 质谱图渊左冤和结构图渊右冤
云蚤早援 源摇 栽澡藻 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥早则葬皂泽 渊造藻枣贼冤 葬灶凿 糟澡藻皂蚤糟葬造 泽贼则怎糟贼怎则藻 渊则蚤早澡贼冤 燥枣 糟燥皂责燥怎灶凿 猿
图 缘摇 化合物 源 质谱图渊左冤和结构图渊右冤
云蚤早援 缘摇 栽澡藻 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥早则葬皂泽 渊造藻枣贼冤 葬灶凿 糟澡藻皂蚤糟葬造 泽贼则怎糟贼怎则藻 渊则蚤早澡贼冤 燥枣 糟燥皂责燥怎灶凿 源
圆袁圆 原二甲基 原 晕 原苯丙硫代酰胺袁硫代酰胺类化合
物袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 缘圆远园鄄园园鄄源曰 化合物 源 的保留时间为
猿郾 愿猿 皂蚤灶袁峰经质谱分析为 杂藻皂蚤葬则遭葬扎蚤凿藻袁源鄄渊员袁苑袁苑鄄
贼则蚤皂藻贼澡赠造遭蚤糟赠糟造燥咱圆郾 圆郾 员暂 澡藻责贼赠员鄄圆鄄蚤凿藻灶燥冤鄄袁化合物名
称为樟脑醛缩氨脲袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 为 员园圆愿员鄄源员鄄员袁对
上述 猿 个化合物在 杂糟蚤云蚤灶凿藻则 数据库中检索相关的
专利和文献袁均没有杀松材线虫活性的报道遥
猿摇 结论与讨论
本研究通过酸碱沉淀法分离提纯了解淀粉芽孢
杆菌 允运鄄允杂猿 菌株的杀线粗提物袁获得了具有杀松材
线虫活性的水溶液袁通过安捷伦气相色谱 原质谱联
用仪分析袁经解析鉴定了 猿 个化合物袁猿 个化合物分
别为 缘 原甲基 原 员 原苯基 原 远匀 原 员袁猿袁缘 原三嗪 原 圆 原
硫酮袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 缘园怨苑愿鄄愿远鄄源曰 圆袁圆 原二甲基 原 晕 原
苯丙硫代酰胺袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 为 缘圆远园鄄园园鄄源 和樟脑醛
缩氨脲袁悦粤杂 灶怎皂遭藻则 为 员园圆愿员鄄源员鄄员遥 猿 个化合物分
别在 杂糟蚤云蚤灶凿藻则数据库中进行了专利和文献查新袁以
上化合物均没发现有杀松材线虫活性的报道遥
天然毒素的化学结构与杀线活性密切相关袁探
讨其结构与性能的关系袁可为开发高效生物农药提
供理论依据遥 越来越多的学者认识到袁研究杀线物
质的结构与该物质生物活性之间的关系不仅具有理
论意义袁而且对于寻找活性更强的天然化合物袁指导
远猿员
摇 第 苑 期 朱丽梅等院 解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿 杀线活性物质的分离与结构分析
合成高活性的新化合物袁以及通过对天然化合物进
行化学修饰袁从而提高其生物活性具有极大的实用
意义遥 已有关于杀线微生物代谢产物的研究袁应用
最成功的是链霉菌分泌的阿维菌素袁研究较多的是
杀线虫真菌代谢产物渊杂贼葬凿造藻则 藻贼 葬造援袁 员怨怨猿葬曰 员怨怨猿遭曰
员怨怨缘冤袁目前已初步研究过 缘园 多株杀线虫真菌的代
谢产物并从中获得了具有毒杀线虫的活性代谢产物
怨远 个渊丹阳等袁 圆园园源曰 董锦艳等袁 圆园园缘冤遥 虽然杀线
虫真菌的资源丰富袁已有许多研究基础并具有开发
应用的前景袁但尚未有关真菌毒素能够大规模生产
与应用的报道遥 近年来国内外也发现了多株具有杀
线活性的细菌 渊 粤造蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园圆曰 杂蚤凿凿蚤择怎蚤 藻贼 葬造援袁
圆园园远曰 在葬噪蚤 藻贼 葬造援袁 员怨怨员曰 匀怎葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园缘冤袁并对这
些菌株的杀线机制做了较为系统的研究遥 粤造蚤 等
渊圆园园圆冤筛选铜绿假单胞菌渊孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 葬藻则怎早蚤灶燥泽葬冤
泽贼则葬蚤灶鄄苑愿 对爪哇根结线虫渊酝藻造燥蚤凿燥早赠灶藻 躁葬增葬灶蚤糟葬冤二
龄幼虫有明显的杀线活性袁对该菌株的活性物质进
行了初步的分析袁发现该物质是热不稳定的袁对酸碱
敏感尧有极性并且相对分子质量小于 愿 园园园遥 但与杀
线真菌代谢产物的研究相比袁杀线细菌代谢物的研
究较少袁尤其在国内尚没见到这方面的详细的研究
报道遥 本研究首次报道了解淀粉芽孢杆菌 允运鄄允杂猿
菌株分泌的具有杀松材线虫活性的代谢产物以及化
学结构袁但目前对这些化合物在毒杀松材线虫中的
作用机制尚未进行深入的研究袁对于它们的杀线活
性是单个化合物的作用还是 猿 个化合物的共同作
用袁还需进一步研究遥 此外对于杀线活性物质产生
的遗传背景袁结构与杀线活性的关系袁杀线机制以及
杀线作用的稳定性袁持久性和针对性等复杂问题均
有待深入的研究遥
参 考 文 献
丹摇 阳袁 黄忠良袁魏孝义袁等援 圆园园源援 松材线虫的天然毒素研究进展援
热带亚热带植物学报袁员圆渊源冤院 猿愿员 原 猿愿苑援
董锦艳袁李摇 铷袁张克勤援 圆园园缘援 松材线虫生物防治研究进展援 植物
保护袁猿员渊缘冤院 怨 原 员缘援
朱丽梅袁吴小芹袁蒋摇 萍援 圆园园愿葬援 细菌 载杂鄄允杂对松材线虫杀线活性的
测定援 南京林业大学学报院 自然科学版袁猿圆渊员冤院 苑怨 原 愿圆援
朱丽梅袁吴小芹袁徐旭麟援 圆园园愿遭援 松材线虫拮抗细菌的筛选和鉴定援
南京林业大学学报院 自然科学版袁猿圆渊猿冤院 怨员 原 怨源援
朱丽梅袁吴小芹袁徐旭凌援 圆园园怨葬援 细菌 允运鄄允杂猿 对松树线虫的杀线活
性及菌种的分子鉴定援 南京林业大学学报院 自然科学版袁
猿猿渊远冤院 源怨 原 缘圆援
朱丽梅袁吴小芹袁陈江天袁等援 圆园园怨遭援 一株毒杀松材线虫的解淀粉芽
孢杆 菌 活 性 物 质 的 基 本 性 质援 中 国 生 物 防 治袁
圆缘渊源冤院 猿缘怨 原 猿远猿援
粤造蚤 晕 陨袁杂蚤凿凿蚤择怎蚤 陨 粤袁杂澡葬怎噪葬贼 杂 杂袁藻贼 葬造援 圆园园圆援 晕藻皂葬贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣
泽燥皂藻 泽贼则葬蚤灶泽 燥枣 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 泽责责援 杂燥蚤造 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁
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