全 文 ：第 wv卷 第 x期
u s s z年 x 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1wv o‘²1x
¤¼ou s s z
北高丛越桔芽器官离体培养与快繁体系的建立
赵建萍t 柏新富t 蒋小满t 张 萍t …¬Ž¨«∏¤u
kt1 鲁东大学生命科学学院 烟台 uywsux ~ u1≤¤±¶¬±² „ªµ¬¦∏¯·∏µ¤¯ ⁄¨ √¨ ²¯³°¨ ±··§q ¤±ª¯ ¼¨ o ∂u≠u‹{ o≤¤±¤§¤l
关键词 } 北高丛越桔 ~芽器官 ~离体培养 ~快繁
中图分类号 }≥zt{1wy ~±|wv1t 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kusszlsx p sttt p sx
收稿日期 }ussy p sv p ut ∀
Ραπιδ Προπαγατιον οφ Πλαντλετσφροµ Σπρουτ οφ ς αχχινιυµ χορψµβοσυµ ιν ςιτρο
«¤²¬¤±³¬±ªt …¤¬÷¬±©∏t ¬¤±ª÷¬¤²°¤±t «¤±ª°¬±ªt …¬Ž¨«∏¤u
kt1 Σχηοολοφ Λιφε Σχιενχεσo Λυδονγ Υνιϖερσιτψ Ψανται uywsux ~
u1 Χανσινο Αγριχυλτυραλ ∆εϖελοπµεντ Λτδ q ΛανγλεψoςuΨu Η{ o Χαναδαl
Αβστραχτ } ׫¨ µ¤³¬§³µ²³¤ª¤·¬²±²©³¯¤±·¯¨·¶²© ςαχχινιυµ χορψµβοσυµ ιν ϖιτρο º¤¶¶·∏§¬¨§¥¼∏¶¬±ª·«¨ ¶·¨°2¶¨ª°¨ ±·º¬·«¥∏§¶
¤¶·«¨ ¬¨³¯¤±·q׫¨ ²³·¬°¤¯ ¦∏¯·∏µ¨ ¦²±§¬·¬²±¶º¨ µ¨ ¶¨·¤¶©²¯ ²¯º¶}tl ©²µ·«¨ ¬±¬·¬¤¯ ¦∏¯·∏µ¨ o·«¨ ¬¨³¯¤±·¶º¨ µ¨ ¶·¨µ¬¯¬½¨ § º¬·«
¤¯¦²«²¯ o¶¤³±¤·¬²±²©¦µ¨¶²¯ ¤±§‹ª≤¯ u o¤±§·«¨ ±¦∏¯·∏µ¨§²± • ° °¨ §¬∏°¦²±·¤¬±¬±ª× v1s °ª#pt ¤±§v h ¶∏¦µ²¶¨ ~ul·«¨
°¨ §¬∏°©²µ¦¯∏°³¥∏§¬±§∏¦·¬²± º¤¶ • ° n × u1s °ª#pt n v h ¶∏ª¤µ~vl·«¨ °¨ §¬∏°©²µµ²¥∏¶·¶«²²·º¤¶ • ° n ×
s∗ t1s °ª#pt n v h ¶∏ª¤µ~wl ©²µ¤§√¨ ±·¬·¬²∏¶µ²²·¬±§∏¦·¬²± ©µ²° ¶«²²·¶o·«¨ °¨ §¬∏° º¤¶tΠu • ° ¬¯´∏¬§±∏·µ¬·¬²±¶
¦²±·¤¬±¬±ªŒ…„ t1s ∗ x1s °ª#pt ¤±§u h ¶∏ª¤µo¬± º«¬¦« ¬¨·«¨µ√¨ µ°¬¦∏¯¬·¨o©¬¯·¨µ³¤³¨µ²µ¶·¨µ¬¯¬½¨ §¦²·²± º¨ µ¨ ¤§§¨§o¤±§
¶«²²·¶º¨ µ¨ ¦∏¯·∏µ¨§∏±§¨µ¤³«²·²³¨µ¬²§²©tu «¬¯¯∏°¬±¤·¬²± ¤±§tu «§¤µ®±¨ ¶¶¤¯·¨µ±¤·¬√¨ ¼¯ ¤©·¨µtw §¤¼¶¬± §¤µ®±¨ ¶¶~xl·«¨
°¨ §¬∏°©²µ·µ¤±¶³¯¤±·¬±ªº¤¶·∏µ©¼2¶²¬¯ ¤±§°²¶¶¨¶kςΒς€ tΒtl q
Κεψ ωορδσ} ςαχχινιυµ χορψµβοσυµ ~¶³µ²∏·~¦∏¯·∏µ¨ ιν ϖιτρο ~µ¤³¬§³µ²³¤ª¤·¬²±
越桔为杜鹃花科k∞µ¬¦¤¦¨¤¨ l越桔属kςαχχινιυµl灌木类小浆果果树 ∀其果实为蓝色或红色 o酸甜适中 o具
有极高的营养价值和医疗保健作用 o特别是抗氧化能力为所有果品蔬菜之首 o对防止人体细胞衰老 o预防老
年性疾病k心脏病 !白内障 !癌症 !记忆力衰退等l具有特殊功效 o因而被国际粮农组织列为五大健康食品之一
k顾姻等 ousstl o被美国最有影响的健康杂志5°µ¨√¨ ±·¬²±6誉为0神奇果0k於虹等 oussvl o是近年来发展最为迅
速的集营养 !保健于一身的第 v代果树新品 ∀北高丛越桔k ςαχχινιυµ χορψµβοσυµl是越桔属中经济价值最高
的 t个种k顾姻等 ousstl o因其果实大 !品质佳 !口感好 o深受人们青睐 o已成为国际鲜果市场销售的主要品
种 ∀近年来鲁东大学生命科学学院将部分优质北高丛越桔引进国内 o但常规繁殖方法不能满足快速发展的
需要 ∀采用组织培养离体快繁越桔的研究已有报道 o但多数研究认为 }越桔试管生根较为困难 o移栽成活率
低k•²º¯ ¤±§ ετ αλqot||u ~⁄º¨ ¬®¤·ετ αλqot||{ ~王侠礼等 oussvl ~以叶片 !节间为外植体诱导不定芽存在变异
问题 ~而腋芽增殖快繁方法也仍然不够完善k • ²­¦¬¨¦« ετ αλqoussxl ∀作者于 usss ) ussx年对从加拿大引进
的北高丛越桔优良品种−晚蓝. !−蓝丰.带芽茎段的离体培养进行了系统研究 o成功地建立了高效快繁体系 o
可应用于工厂化育苗 ∀
1 材料与方法
t1t 材料 供试北高丛越桔品种−晚蓝. k−¤·¨¥¯∏¨ . l !−蓝丰. k− …¯ ∏¨¦µ²³. l o由加拿大 ≤¤±¶¬±²农业发展有限
公司提供 o栽培于鲁东大学生命科学学院苗圃中 ∀分别于春kw月 uu日l !夏ky月 vs日l !秋kts月 tw日lv个
季节选取长势旺盛的幼嫩枝条 o除去所有叶片 o切取除顶芽外的第 v ∗ ts节嫩茎作外植体 ∀
t1u 方法 tl外植体的灭菌 在超净工作台上将外植体置于 zs h乙醇中 t °¬±o再用 s1x h新洁尔灭消毒
ts °¬±o后放于 s1t h ‹ª≤¯ u 中分别处理 x !{ !tt °¬±o无菌水冲洗 x次 o最后将枝条切成长 s1x ∗ t1s ¦°带腋芽
茎段 ∀
ul初代培养 将已灭菌的外植体接种于启动培养基中 ∀启动培养以 • ° 为基本培养基 o添加 ×ks !
t1s !v1s !x1s °ª#ptl ∀培养 vs §后统计外植体的污染率 !成活率和出芽率 ∀
培养基中激素单位为 °ª#pt o均加琼脂 s1y h ∗ s1z h ~³‹ x1s ∗ x1u ~在 t1u ®ª#¦°pu !tut ε 饱和蒸汽压
力下灭菌 us °¬±~培养温度白天kux ? ul ε !夜间kus ? ul ε ~光照 tu «#§pt o光照强度 t xss ∗ u sss t¬∀
vl丛生芽诱导和增殖 初代培养 ys §o将新芽切割后转入不同继代培养基中 o每处理接种茎段 vs个 o培
养 ys §o统计月增殖倍数k每个茎段上丛生芽数Π每个茎段上原有腋芽数Π培养月数l以及每个茎段上的有效
苗k高 t1x ¦°以上且生长健壮的小苗l数 o以筛选适宜于芽增殖的培养条件 ∀
wl不定根的诱导 将 v ¦°左右长的无根苗接种到各种生根培养基中 o所有生根培养基中均加入 tΠu
• ° 培养液和 u h的食用白糖 o蛭石粒 !脱脂棉球 !滤纸团等均与培养液一起经 tut ε 灭菌 ∀培养 ws §后统
计生根率 !平均根长 !平均根数 ∀
xl移栽驯化 将已诱导生根并开瓶炼苗的−晚蓝. !−蓝丰.试管苗取出 o移栽至 v种基质中 }tl 草炭土 n
蛭石k体积比 tΒtl ~ul 草炭土 n苔藓k体积比 tΒtl ~vl 草炭土 n河沙k体积比 tΒtl ∀浇透 tΠu • ° 营养液 o并
保持温度 t{ ∗ ux ε o相对湿度 {s h ∀vs §调查成活率 ∀
2 结果与分析
u1t 无菌材料获得与外植体不定芽的分化 为了获得无菌培养物 o选择灭菌效果好 !对试材杀伤力尽可能
小的灭菌方法及处理时间尤为重要 ∀同时 o离体材料的分化还取决于培养基中激素的种类和浓度 ∀试验结
果k表 tl表明 }tl外植体经 s1t h ‹ª≤¯ u浸泡 x °¬±o杀菌效果不及 { °¬± !tt °¬±o但处理时间达 tt °¬±时 o部分
外植体变褐 o存活率反低于 { °¬±~ul外植体在不加任何激素的 • ° 培养基中 o接种前已抽出的小芽先伸展
后自行枯萎 !脱落 o不再有新芽萌发 ∀而添加 × v1s °ª#pt时新芽分化率最高 o达 {u h ∀
表 1 ΗγΧλ2 处理时间和 ΖΤ对初代培养的影响 ≠
Ταβ .1 Εφφεχτσ οφ Ηγ Χλ2 ανδ ΖΤ ον ινιτιαλ χυλτυρε οφ τηε εξπλαντσ
‹ª≤¯ u 处理时间
‹ª≤ u¯ ·µ¨¤·°¨ ±·
·¬° Π¨°¬±
×Π
k°ª#ptl
−晚 蓝. −¤·¨¥¯∏¨ . −蓝 丰. − …¯ ∏¨¦µ²³.
污染率
≤²±·¤°¬±¤·¬²±µ¤·¨Πh
存活率
≥∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨Πh
出芽率
≥ƒƒΠh
污染率
≤²±·¤°¬±¤·¬²±µ¤·¨Πh
存活率
≥∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨Πh
出芽率
≥ƒƒΠh
x s v{ qs xs qs s uy1s x{ qs s
x t ww qs xw qs yu q| ws1s ys qs ys qs
x v vs qs y{ qs zv qx vy1s zs qs y{ qy
x x wu qs x{ qs xt qz vu1s y{ qs xx q|
{ s tu qs {u qs s {1s {{ qs s
{ t t{ qs {w qs y| qt y1s |u qs yv1s
{ v y qs |s qs zx qy s tss qs {u1s
{ x tu qs {{ qs xu qv tu1s {{ qs xy1{
tt s u qs xw qs s w1s xu qs s
tt t s zs qs vz qt y1s xs qs vu1s
tt v w qs yy qs wx qx s xw qs x|1v
tt x ts qs xs qs vy qs s yu qs wx1u
≠ 污染率 € 污染外植体数 Π接种外植体数 ≤²±·¤°¬±¤·¬²±µ¤·¨€ ±∏°¥¨µ²©¦²±·¤°¬±¤·¨§ ¬¨³¯¤±·¶Π±∏°¥¨µ²©¬±²¦∏¯¤·¨§ ¬¨³¯¤±·¶ ~存活率 € 存活
外植体数 Π接种外植体数 ≥∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨ € ±∏°¥¨µ²©¶∏µ√¬√¤¯ ¬¨³¯¤±·¶Π±∏°¥¨µ²©¬±²¦∏¯¤·¨§ ¬¨³¯¤±·¶ ~出芽率 € 发生芽的外植体数 Π成活外植体数
≥ƒƒ k¶«²²·©²µ°¬±ª©µ¨ ∏´¨ ±¦¼l € ±∏°¥¨µ²©¶«²²·2©²µ°¬±ª ¬¨³¯¤±·¶Π±∏°¥¨µ²©¶∏µ√¬√¤¯ ¬¨³¯¤±·¶q
试验还显示离体材料的污染率 !存活率和出芽率还与取材时期有关 ∀w月下旬取材污染率低 o存活率
高 ∀这可能是因为 w月份烟台地区气温较低ktu ∗ us ε l o材料受杂菌污染较轻 o而植株生长旺盛 ~y月底气
温较高 o适合杂菌生长 o外植体污染率高 o存活率降低 ~ts月中旬 o植物体已近休眠状态 o此时获取的茎节外
植体培养后成芽率低 ∀综合以上试验得出 o在乙醇 !新洁尔灭 !‹ª≤¯ u 联用条件下 ow月下旬取材 !‹ª≤¯ u 处理 {
°¬± !× v1s °ª#pt o是适于北高丛越桔无菌材料获得的最佳条件 ∀
存活的外植体 ts §后节间开始膨大生长 ovs §后相继出现 t ∗ v个新芽k图版 ´ p t ∗ ul o切割后可用于
继代培养 ∀
u1u 丛生苗的诱导和增殖 将初代培养分化产生的不定芽切割后接入 ≥ !tΠu≥ ! ≥ !• ° w种培养基
上 o发现它们都能使不定芽进一步伸长和增殖 o但 • ° !tΠu≥ ! ≥的表现明显好于 ≥ oys §的不定芽增殖
倍数均高于 y o而 ≥仅为 v1tt o且在 ≥培养基中 vt1x h的试管苗逐渐出现黄化和褐化现象 ∀将初代培养
分化产生的不定芽转入 • ° 分别附加 v种细胞分裂素的培养基中 o对不定芽诱导及生长的效果k按优劣l依
次是 ×  u¬³  …„ ~在添加 ×和 u¬³的培养基中 ts §左右 o茎段从节部四周开始诱导出多个不定芽并逐
utt 林 业 科 学 wv卷
渐形成簇状丛生芽 o后直立生长 o但 ×的增殖系数是 u¬³的 t1z ∗ v倍 ∀而在添加 …„的培养基中 o茎节一周
后开始变粗 o由切口处逐渐产生愈伤组织后再分化出芽 o不定芽增殖系数低 o遗传稳定性差 ∀
×与 ‘„„配比的 • ° 对−晚蓝. 和−蓝丰. 茎节培养的结果显示 o‘„„浓度不宜大于 s1w °ª#pt o‘„„
浓度提高使茎节愈伤化严重 o形成的丛生芽团密集 !矮化而抑制了主茎伸长 o难以分离出正常小苗 ∀而分别
以蔗糖或食用白糖作为芽诱导培养基的碳源 o培养结果表明 o不同碳源对−晚蓝.和−蓝丰.茎节不定芽诱导和
健壮生长的作用无显著差异 ∀因此为降低成本完全可以选用食用白糖作为诱导培养基的碳源 ∀
在以上单因子试验基础上 o采用优选法对基本培养基 !× 和 ‘„„ 进行组配 o试验结果如表 u所示 o在
• ° n × u1s °ª#pt n ‘„„ s °ª#pt条件下 o所试两品种北高丛越桔不定芽月增殖倍数和有效苗数均达
到最高 o增加 ‘„„且随 ‘„„浓度的提高 o有效苗趋于矮化 o有效苗数递减 ∀
u1 v 继代与壮苗培养 将诱导所得丛生芽切割成 t ¦°左右茎段 o继续转接于 • ° n × u1s °ª#pt分化
培养基中 o可反复诱导丛生芽形成 ∀而分割后小于 t ¦°的簇状小芽 o则转入无激素或 ×浓度较低kt1s °ª#
ptl的 • ° 壮苗培养基中 o有利于芽苗更快地伸长和健壮生长 ∀
表 2 不同基本培养基 !ΖΤ和 ΝΑΑ对丛生芽诱导的影响
Ταβ .2 Εφφεχτσ οφ τηε βασιχ µεδια , ΖΤ ανδ ΝΑΑ ον ινδυχινγ χλυµ π σηοοτσ
培养基
 §¨¬∏°
×Π
k°ª#ptl
‘„„Π
k°ª#ptl
−晚 蓝. −¤·¨¥¯∏¨ . −蓝 丰. − …¯ ∏¨¦µ²³.
月增殖倍数
•¤·¬²²© °²±·«¯¼
°∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²±
有效苗数
‘∏°¥¨µ²© ©¨©¬¦¬¨±¦¼
³¯¤±·¯¨·¶
有效苗高
‹ ¬¨ª«·²© ©¨©¬¦¬¨±¦¼
³¯¤±·¯¨·¶Π¦°
月增殖倍数
•¤·¬²²© °²±·«¯¼
°∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²±
有效苗数
‘∏°¥¨µ²© ©¨©¬¦¬¨±¦¼
³¯¤±·¯¨·¶
有效苗高
‹ ¬¨ª«·²© ©¨©¬¦¬¨±¦¼
³¯¤±·¯¨·¶Π¦°
tΠu≥ t qs s {1t y1w w1x |1s z1| v1|
tΠu≥ u qs s1u z1{ x1| u1| ts1t y1x u1{
tΠu≥ w qs s1w w1| v1y t1{ y1x w1z u1s
 ≥ t qs s1u y1| x1t u1{ z1{ x1| u1x
 ≥ u qs s1w x1x w1s u1s |1s x1y t1|
 ≥ w qs s z1x x1x v1x ts1| {1v v1y
• ° t qs s1w w1u v1y u1u y1v w1{ u1t
• ° u qs s ts1y |1s w1u tu1{ |1{ v1{
• ° w qs s1u x1{ w1{ u1| ts1u z1x u1{
表 3 不同支持物和光照条件对−晚蓝.试管苗生根的影响 ≠
Ταβ .3 Εφφεχτσ οφ διφφερεντ συππορτσ ανδ λιγητ χονδιτιον ον ροοτινγ οφ
τυβε σηοοτσ οφ −Λατεβλυε.
支持物
≥∏³³²µ·
光照条件
¬ª«·
¦²±§¬·¬²±¶
接种数
‘∏°¥¨µ²©
¬±²¦∏¯¤·¨§¶«²²·¶
生根株数
‘∏°¥¨µ²©
µ²²·¬±ª³¯¤±·¯¨·¶
生根率
• ²²·¬±ª
µ¤·¬²Πh
琼脂 „ª¤µ ´ us w us1s
琼脂 „ª¤µ µ us v tx1s
蛭石粒 ∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨ ´ ut ty {s1s
蛭石粒 ∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨ µ us tx zt1w
滤纸团 ƒ¬¯·¨µ³¤³¨µ ´ t{ tx {v1v
滤纸团 ƒ¬¯·¨µ³¤³¨µ µ t{ tw zz1{
脱脂棉 „¥¶²µ¥¨ ±·¦²·²± ´ t{ tw zz1{
脱脂棉 „¥¶²µ¥¨ ±·¦²·²± µ t{ ts xx1y
苔藓 ²¶¶ ´ us x ux1s
苔藓 ²¶¶ µ uw v tu1x
≠ ´ }先进行 tw §全黑暗培养 o然后于 tu «间歇光照下培养 ∀tu « ¬¯ª«·¤±§tu «§¤µ®
³¨µ³¨µ¬²§¤©·¨µtw §§¤µ®q µ }始终于间歇光照下培养 ∀tu « ¬¯ª«·¤±§tu «§¤µ® ³¨µ³¨µ¬²§q
u1w 不定根的诱导 将试管苗新梢转入 tΠu • ° 附加不同质量浓度Œ…„ !‘„„的生根培养基中 ows §调查结
果显示 }不添加生长素 o试管苗生根率为 s ~添加 ‘„„浓度大于 s1x °ª#pt的培养基中 o植株矮小 o叶片黄化 o
基部愈伤化严重 o诱导产生的根质地差 !移栽时易断 ~附加 Œ…„ s1u °ª#pt o生根率不超过 x1y h o而 Œ…„浓度
增至 ts °ª#pt时 o生根率反呈下降趋势 ∀表明较适于北高丛越桔试管生根的生长素及浓度为 }Œ…„ s1x ∗
x1s °ª#pt和 ‘„„ s1u °ª#pt ~在该浓度范围内 o−晚蓝. !−蓝丰.的生根率也仅有 uu1s h和 xz1x h ∀
以蛭石粒 !脱脂棉球 !滤纸团 !苔藓 !琼脂k对照l分别作培养基支持物 o进行生根培养试验 o结果表明 o培
养基支持物对−晚蓝.试管苗诱导生根
具有重要影响 ∀由表 v可见 o除了用
苔藓作培养基支持物与对照无显著差
异外 o用蛭石粒 !脱脂棉球 !滤纸团作
培养基支持物 o−晚蓝. 试管苗生根率
超出对照 ws h ∗ yy h o经卡方独立性
检验 o对照k琼脂l与滤纸团 !蛭石粒 !
脱脂棉间的 ςu值分别为 uz1zw !ux1tz
和 ty1|{ o均大于 Α€ s1st时 ςu 临界
值 y1yw o说明存在极显著差异 ~而琼
脂与苔藓之间 oςu 值为 s1sw o蛭石粒 !
滤纸团 !脱脂棉相互间 ςu 值在 s1st
∗ s1t{ o均小于 Α€ s1sx时的临界值
v1{w o说明它们之间无显著差异 ∀表
v结果还显示 o试管苗新梢转接到生
vtt 第 x期 赵建萍等 }北高丛越桔芽器官离体培养与快繁体系的建立
根培养基后 o先进行 tw §黑暗培养 o然后转到间歇光照下培养 o有利于−晚蓝.试管苗生根 ∀
为了进一步探索生根培养的最佳培养基 o以 tΠu • ° 为营养液 o在暗培养 tw §后间歇光照培养下 o研究
了蛭石粒 !脱脂棉球 !滤纸团 v种支持物 os1x !t1s !u1s !x1s °ª#pt Œ…„浓度和 s1u °ª#pt ‘„„优化组合对
−晚蓝.和−蓝丰. 试管生根的影响k表 wl ∀结果表明 o蛭石粒 !脱脂棉 !滤纸团 v种支持物附加 Œ…„t1s或 x1s
°ª#pt ou个品种的生根率均高于 {v h o其中蛭石支持物 n Œ…„ t1s或 x1s °ª#pt的生根效果最好 ows §时
−晚蓝. !−蓝丰.试管生根率分别为 |y1z h和 |y1y h o且试管苗生长健壮 ∀表明蛭石支持物对北高丛越桔试
管苗生根具有促进作用 ∀
表 4 不同培养基支持物和 ΙΒΑ !ΝΑΑ对生根培养的影响
Ταβ .4 Εφφεχτσ οφ διφφερεντ συππορτσ ανδ ΙΒΑ ,ΝΑΑ ον ροοτινγ χυλτυρε
支持物
≥∏³³²µ·
Œ…„Π
k°ª#ptl
‘„„ Π
k°ª#ptl
−晚 蓝. −¤·¨¥¯∏¨ . −蓝 丰. − …¯ ∏¨¦µ²³.
生根率
•²²·¬±ª
µ¤·¬²Πh
平均根数
 ¤¨± ±∏°¥¨µ
²©µ²²·¶
平均根长
 ¤¨± ¯¨ ±ª·«
²©µ²²·¶Π¦°
生根率
•²²·¬±ª
µ¤·¬²Πh
平均根数
 ¤¨± ±∏°¥¨µ
²©µ²²·¶
平均根长
 ¤¨± ¯¨ ±ª·«
²©µ²²·¶Π¦°
蛭石粒 s1x s yw1w v t1| zx1s w u1x
∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨ t1s s zt1s v u1v |y1y y v1t
u1s s {s1s w u1u {v1v x u1z
x1s s |y1z w v1s {u1s x u1z
s s1u ws1s z s1| u{1y y t1u
滤纸团 s1x s wz1{ v t1{ zu1v x u1u
ƒ¬¯·¨µ³¤³¨µ t1s s yy1s w u1s |s1u y u1t
u1s s zw1s w u1v zy1y x u1y
x1s s {y1z x u1{ z{1| y u1{
s s1u vv1v x t1v xs1s x t1w
脱脂棉 s1x s uz1{ v t1x yy1z w u1z
„¥¶²µ¥¨ ±·¦²·²± t1s s ys1v v t1v {x1| x v1s
u1s s x{1{ w t1z zx1s x u1x
x1s s {v1v w u1x zs1s w u1v
s s1u uz1{ x t1s uu1u y s1{
u1 x 移栽驯化 完整植株在 v种基质苗床中 tx §后有新的不定根发生 o老叶生长 o新叶出现 o表明组培苗
已存活 ∀其中以草炭土 n苔藓k体积比为 tΒtl移栽成活率最高 o超过 |s h k表 xl ∀成活的试管苗 v ∗ w个月
后株高 us ¦°左右 o可移栽于大田中 ∀
表 5 移栽基质与存活率的关系
Ταβ .5 Τηε ρελατιονσηιπ βετωεεν συβστρατε ανδ συρϖιϖαλ ρατε
基质
≥∏¥¶·µ¤·¨
移栽株数
‘∏°¥¨µ²©
·µ¤±¶³¯¤±·¬±ª³¯¤±·¯¨·¶
存活株数
‘∏°¥¨µ²©
¶∏µ√¬√¤¯ ³¯¤±·¯¨·¶
存活率
≥∏µ√¬√¤¯
µ¤·¨Πh
草炭土 n蛭石 ×∏µ©¼2¶²¬¯ n
√¨ µ°¬¦∏¯¬·¨kςΒς€ tΒtl tus |v zz1x
草炭土 n苔藓 ×∏µ©¼2¶²¬¯ n
°²¶¶kςΒς€ tΒtl tuw ttu |s1v
草炭土 n河砂 ×∏µ©¼p¶²¬¯ n
¶¤±§kςΒς€ tΒtl tsy wz ww1v
3 结论与讨论
木本植物组织培养的困难之一是
建立无菌材料k陈正华 ot|{yl ∀在建
立北高丛越桔无菌培养物时 o以 w月
份取材 o乙醇 !新洁尔灭 !‹ª≤¯ u 联用 o
且 ‹ª≤¯ u 处理 { °¬±时 o污染率低 o存
活率和萌芽率均高 ∀
目前 o越桔器官分化中选用的培
养基有 • ° !  ≥ !tΠu≥ ! ≥ !≥ !
„±§¨µ¶²±等 o但多数研究认为 • ° 效果最好 o高盐浓度的 ≥不利于越桔不定芽分化k • ²¯©¨ ετ αλqot|{v ~刘
庆忠等 ousstl ∀本研究结果与 • ²¯©¨ 等kt|{vl的结论相符 o在 • ° 培养基中附加 × u1s °ª#pt o−晚蓝. 和
−蓝丰.茎节不定芽月增殖倍数均超过 ts o为工厂化快繁优质越桔种苗提供了保证 ∀
王侠礼等kussvl !•²º¯ ¤±§等kt||ul !⁄º ¬¨®¤·等kt||{l认为 }越桔试管生根慢 o且生根率低 ∀本文采用常
规琼脂培养基对−晚蓝. !−蓝丰.试管生根的研究结果也证明了这一点 ∀但发现 }改用脱脂棉 !滤纸团 !蛭石粒
作培养基支持物其试管生根率明显升高 o特别是在蛭石培养基中 ws §的生根率达 |y h ∀分析其原因主要
是 o以蛭石 !滤纸团 !脱脂棉为支持物配制的生根培养基间隙较大 o通透性好 o利于养分的运输和交换k刘福生
等 ousst ~赵建萍等 ot||{l ∀使用蛭石 !滤纸团 !脱脂棉配制生根培养基时 o须注意营养液要加适量 o在加营养
wtt 林 业 科 学 wv卷
液时 o以蛭石块 !滤纸团 !脱脂棉球吸透而没有多余液体为好 ∀
移栽试验表明 o采用草炭土 n苔藓k体积比为 tΒtl基质 o存活率高 ∀原因主要是这种基质疏松湿润 o持
水能力强且通气性好 o有机质含量较高 ∀而草炭土加入河砂的处理试管苗存活率最低 o说明较低的有机质含
量以及较差的保水能力和理化性状不利于越桔试管苗存活 !生长 ∀
参 考 文 献
陈正华 qt|{y q木本植物组织培养及其应用 q北京 }高等教育出版社 ouw p zw
顾 姻 o贺善安 qusst q蓝浆果与蔓越桔 q北京 }中国农业出版社 ot p uw
刘福生 o彭同江 o张宝述 qusst q膨胀蛭石的利用及其新进展 q非金属矿 ouwkwl }x p z
刘庆忠 o赵红军 o郑亚芹 o等 qusst q高灌蓝莓微体繁殖技术研究初报 q落叶果树 okxl }t p v
王侠礼 o钟士传 o郑亚芹 o等 qussv q美国高灌蓝莓的引进及微体快繁技术研究 q中国种业 oktul }ws p wt
於 虹 o王传永 o吴文龙 qussv q蓝浆果栽培与采后处理技术 q北京 }金盾出版社 ot p u
赵建萍 o毕可华 o王修强 o等 qt||{ q不同支持物对0艾西丝0南瓜试管苗生根影响的研究 q生物技术 o{kvl }uz p u|
⁄º ¬¨®¤· o¼µ¨±¨ °  qt||{ q „§√¨ ±·¬·¬²∏¶¶«²²·³µ²§∏¦·¬²±©µ²° ¯¨ ¤√ ¶¨²©¥¯∏¨ ¥¨µµ¼ ¦∏¯·∏µ¨§¬± √¬·µ²q ‹²µ·≥¦¬¨±¦¨ ouv }yu|
•²º¯ ¤±§o’ª§¨± ∞qt||u q˜¶¨ ²©¤¦¼·²®¬±¬±¦²±­∏ª¤·¨©²µ ©¨©¬¦¬¨±·¶«²²·µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²±©µ²° ¯¨ ¤©¶¨¦·¬²±²©«¬ª«¥¯∏¨ ¥¨µµ¼q‹²µ·≥¦¬¨±¦¨ ouzktsl }ttuz p
ttu|
• ²­¦¬¨¦«oŠµ½¨ ª²µ½ ≥ o⁄²µ²·¤ • qussx qƒ¬¨ §¯ ³¨µ©²µ°¤±¦¨ ²©«¬ª«¥∏¶« ¥¯∏¨ ¥¨µµ¬¨¶k ςαχχινιυµ ≅ χορψµβοσυµ ql ¦√ q‹ µ¨¥¨µ·³µ²³¤ª¤·¨§¥¼ ¦∏·¬±ª¶¤±§
·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ q≥¦¬¨±·¬¤ ‹²µ·¬¦∏¯·∏µ¤¨ otsy }tyu p ty|
• ²¯©¨ ⁄ ∞o∞¦® ° o ‹¬± ≤ qt|{v q∞√¤¯∏¤·¬²± ²©¶¨√ ±¨ ° §¨¬¤©²µ°¬¦µ²³µ²³¤ª¤·¬²± ²©«¬ª«¥∏¶«¥¯∏¨ ¥¨µµ¼q ‹²µ·≥¦¬¨±¦¨ ot{kyl }zsv p zsx
k责任编辑 徐 红l
xtt 第 x期 赵建萍等 }北高丛越桔芽器官离体培养与快繁体系的建立